1、環(huán)境化學(xué)物的一般毒性及其評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（laboratory animallaboratory animal）指經(jīng)人工培育，對其攜帶微生物實(shí)行控指經(jīng)人工培育，對其攜帶微生物實(shí)行控制，遺傳背景明確，來源清楚，可用于制，遺傳背景明確，來源清楚，可用于科學(xué)研究的動(dòng)物。科學(xué)研究的動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇第一節(jié) 化學(xué)物毒性評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇物種選擇物種選擇 選擇對外液化學(xué)物的毒性反應(yīng)及代謝特選擇對外液化學(xué)物的毒性反應(yīng)及代謝特點(diǎn)與人類接近的物種；點(diǎn)與人類接近的物種；選擇自然壽命不太長的物種；選擇自然壽命不太長的物種；選擇易于飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)操作的物種；選擇易于飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)

2、操作的物種；選擇經(jīng)濟(jì)并易于獲得的物種。選擇經(jīng)濟(jì)并易于獲得的物種。 近交系動(dòng)物近交系動(dòng)物 連續(xù)連續(xù)2020代以上兄妹交配或親子交配培育代以上兄妹交配或親子交配培育突變系動(dòng)物突變系動(dòng)物 突變的基因可世代相傳并保持遺傳基因特性突變的基因可世代相傳并保持遺傳基因特性雜交群動(dòng)物雜交群動(dòng)物 兩個(gè)不同近交系之間有目的進(jìn)行交配，所產(chǎn)生的第兩個(gè)不同近交系之間有目的進(jìn)行交配，所產(chǎn)生的第一代動(dòng)物，一代動(dòng)物， 亦稱雜交一代動(dòng)物。亦稱雜交一代動(dòng)物。封閉群動(dòng)物封閉群動(dòng)物 5 5年以上不從外部引進(jìn)新血緣，僅由同一品系的動(dòng)年以上不從外部引進(jìn)新血緣，僅由同一品系的動(dòng)物在固定場所保存繁殖的動(dòng)物群物在固定場所保存繁殖的動(dòng)物群 實(shí)驗(yàn)

3、動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇品系選擇品系選擇無菌動(dòng)物無菌動(dòng)物 體內(nèi)外均無任何微生物和寄生蟲體內(nèi)外均無任何微生物和寄生蟲無特定病原體動(dòng)物（無特定病原體動(dòng)物（SPFSPF）體內(nèi)無特定微生物和寄生蟲存在）體內(nèi)無特定微生物和寄生蟲存在的動(dòng)物的動(dòng)物( (無傳染病無傳染病) )。飼養(yǎng)于封閉的系統(tǒng)。飼養(yǎng)于封閉的系統(tǒng)。清潔動(dòng)物清潔動(dòng)物 與與SPFSPF的不同：抗體檢查常有腦脊髓炎病毒、鼠的不同：抗體檢查常有腦脊髓炎病毒、鼠肝炎病毒等抗體滴度，但不應(yīng)有臨床癥狀、病理改變及自肝炎病毒等抗體滴度，但不應(yīng)有臨床癥狀、病理改變及自然死亡。飼養(yǎng)在半屏蔽系統(tǒng)。然死亡。飼養(yǎng)在半屏蔽系統(tǒng)。微生物控制的選擇微生物控制的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的

4、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇個(gè)體選擇個(gè)體選擇 1 1 年齡年齡2 2 性別性別 3 3 生理狀態(tài)生理狀態(tài) 4 4 健康狀況健康狀況 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇 品品 系系周齡周齡 WistarWistar SD SD雌性雌性雄性雄性雌性雌性雄性雄性 3 35454565650505252 4 4919197978686101101 5 5134134134134130130150150 6 6166166187187172172206206 7 7209209233233210210262262 8 8214214297297240240318318 9 92322323253252582583653

5、651010246246370370272272399399大鼠體重與周齡的關(guān)系大鼠體重與周齡的關(guān)系 小鼠體重與周齡的關(guān)系小鼠體重與周齡的關(guān)系 品品 系系 周齡周齡 昆明昆明 BALB/cBALB/c C57BL/6 C57BL/6 615 615 雌性雌性 雄性雄性 雌性雌性 雄性雄性 雌性雌性 雄性雄性 雌性雌性 雄性雄性 0 01.951.95 2.10 2.10 1.40 1.40 1.46 1.46 1.40 1.40 1.44 1.44 1.58 1.58 1.58 1.58 1 15.545.54 5.82 5.82 3.35 3.35 3.50 3.50 3.42 3.42 3

6、.50 3.50 4.64 4.64 4.64 4.64 2 27.907.90 8.35 8.35 5.50 5.50 5.60 5.60 5.55 5.55 5.60 5.60 7.96 7.96 7.96 7.96 3 313.5513.55 14.80 14.80 7.32 7.32 7.40 7.40 6.40 6.40 6.90 6.90 9.83 9.83 9.83 9.83 4 421.3521.35 22.60 22.6011.6011.6012.4512.4512.2012.2012.5712.5715.7515.7519.0019.00 5 527.9027.90 33.

7、25 33.2514.7514.7516.1016.1016.9016.9018.1018.1020.7520.7522.5822.58 6 632.8032.80 39.25 39.2515.6015.6017.4017.4018.4018.4020.5020.5021.8821.8825.9625.96 7 734.7034.70 39.90 39.9016.1016.1018.6518.6519.0019.0021.6021.6023.1223.1227.9627.96 8 834.8034.80 40.05 40.0518.1618.1620.2520.2520.2520.2522.4

8、022.4024.1624.1628.8328.83LD50同理可得LC5、 LC10、第三節(jié)第三節(jié) 亞慢性和慢性毒性試驗(yàn)亞慢性和慢性毒性試驗(yàn)一、蓄積試驗(yàn)及其方法：一、蓄積試驗(yàn)及其方法：（一）蓄積作用：（一）蓄積作用：某些物質(zhì)以較小劑量反復(fù)作用于機(jī)體，可使機(jī)體對該物質(zhì)的反應(yīng)性增強(qiáng)，即一次染毒不引起明顯中毒反應(yīng)或死亡的劑量，經(jīng)分次重復(fù)染毒后，可引起明顯中毒或死亡，此種現(xiàn)象稱為蓄積作用(accumulation)。可分兩種： 物質(zhì)蓄積物質(zhì)蓄積：毒物在體內(nèi)的排出量小于進(jìn)入量，以致毒物在體內(nèi)的貯留量增多為物質(zhì)蓄積； 功能蓄積功能蓄積：毒物進(jìn)入機(jī)體后，并未發(fā)現(xiàn)在體內(nèi)明顯貯留，但可引起機(jī)體功能改變的逐漸累

9、積，導(dǎo)致對該毒物的反應(yīng)性增強(qiáng)。 1固定劑量法固定劑量法 ：固定每天染毒劑量為1/201/5 LD50，連續(xù)染毒，直至實(shí)驗(yàn)動(dòng)物半數(shù)死亡。如果染毒劑量累計(jì)已達(dá)5個(gè)LD50 動(dòng)物死亡仍末達(dá)半數(shù)，實(shí)驗(yàn)均可告結(jié)束，計(jì)算蓄積系數(shù)，作出評(píng)價(jià)。 2遞增劑量法遞增劑量法 ：先測定LD50（1），然后對另一組動(dòng)物每天染毒，以4天為一期，開始給予0.1LD50。以后每期按1.5倍遞增劑量，直至動(dòng)物半數(shù)死亡，或?qū)嶒?yàn)已達(dá)28天，可結(jié)束實(shí)驗(yàn)，計(jì)算系數(shù)。 3. 二十天試驗(yàn)法二十天試驗(yàn)法 ：選用大鼠或小鼠每個(gè)劑量組雌雄各10只，以1/2、l/5、1/10、1/20 LD50分別對每組進(jìn)行染毒，每日1次，共20天。如l/20L

10、D50組動(dòng)物有死亡，且有劑量反應(yīng)關(guān)系，則有較強(qiáng)蓄積作用；如1/20 LD50組無死亡，則為弱蓄積。4、劑量選擇與分組、劑量選擇與分組 劑量：劑量：180I50LD50，對于在體內(nèi)不產(chǎn)生蓄積作用而排泄又快的物質(zhì)可適當(dāng)加大劑量，反之則可減少劑量。 設(shè)34個(gè)實(shí)驗(yàn)組和1個(gè)對照組。 實(shí)驗(yàn)組要求：實(shí)驗(yàn)組要求：在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí) 最低劑量組最低劑量組不產(chǎn)生可觀察到的毒性反應(yīng)； 最高劑量組最高劑量組能引起明顯毒性反應(yīng)，但不引起死亡； 中間劑量組中間劑量組產(chǎn)生輕微毒性反應(yīng)。三、慢性毒性作用及其試驗(yàn)方法三、慢性毒性作用及其試驗(yàn)方法1、目的：、目的：評(píng)價(jià)化學(xué)物在長期小劑量作用的條件下對機(jī)體產(chǎn)生的損害及其特點(diǎn)確定閾劑量和最

11、大無作用劑量。2、試驗(yàn)方法：、試驗(yàn)方法：（1） 動(dòng)物選擇、染毒方法、觀察指標(biāo)等與亞慢性毒性試驗(yàn)相似；（2）染毒期限：1-2年或終身染毒，也有人提出6月。（3）劑量分組： 3個(gè)染毒組和一個(gè)對照組。 高劑量組：1/51/2亞慢性試驗(yàn)閾值； 中間劑量：1/501/10； 低劑量組：1/100。環(huán)境流行病學(xué)除了上述一般內(nèi)容，還有它本身的特點(diǎn)。 (1)它不僅研究疾病的分布規(guī)律，而且更經(jīng)常地研究疾病前的狀態(tài)，即包括無異常健康)、微弱的功能改變、疾病的前期(亞臨床狀態(tài))等各種健康狀況，揭示環(huán)境污染或某些微量元素的健康效應(yīng)。 (2)環(huán)境流行病學(xué)研究的暴露因素主要是理化因素。已知暴露因素，研究其對健康的影響；環(huán)

12、境毒理學(xué)工作者所進(jìn)行的大量工作就屬于這種。例如金屬冶煉廠鉛污染大氣對居民健康影響，磷肥廠氟污染大氣對居民健康影響的調(diào)查等。出現(xiàn)健康異常，追究引起異常的暴露因素，這屬于探討病因的研究。例如，近年來我國學(xué)者對于鼻咽癌、食道癌病因的研究，對克山病、大骨節(jié)病病因的研究，均屬于此種類型。日本的水誤病和痛痛病的病因是重金屬污染造成的公害病領(lǐng)域里的研究成果，影響深遠(yuǎn)。 (3) 環(huán)境流行病學(xué)研究的最終日的是為消除污染、改造環(huán)境、保護(hù)居民健康服務(wù)。 (4)直接以人群為研究對象，研究結(jié)果最具有說服力。暴露水平是估算人體接觸劑量的依據(jù)，因此要求測量結(jié)果精確、可靠、有代表性。暴露測量可分為兩類：環(huán)境測量和生物測量。 1環(huán)境測量 通常采用對暴露的環(huán)境因素進(jìn)行抽樣測量的方法，估計(jì)個(gè)人暴露量。要考慮到所有可能攝入選徑