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文檔簡介
1、第九章核酸的生物合成一、知識要點在細胞分裂過程中通過 DNA的復制把遺傳信息由親代傳遞給子代,在子代的個體發育過程中遺傳信息由 DNA傳遞到RNA,最后翻譯成特異的蛋白質;在 RNA病毒中RNA具 有自我復制的能力,并同時作為mRNA,指導病毒蛋白質的生物合成; 在致癌RNA病毒中, RNA還以逆轉錄的方式將遺傳信息傳遞給DNA分子。這種遺傳信息的流向稱為中心法那么。復制是指以原來 DNA分子為模板,合成出相同 DNA分子的過程;轉錄是在 DNA 或 RNA 分子上合成出與其核苷酸順序相對應的RNA 或DNA 的過程;翻譯是在以 rRNA和蛋白質組成的核糖核蛋白體上,以mRNA為模板,根據每三
2、個相鄰核苷酸決定一種氨基酸的三聯體密碼規那么, 由tRNA運送氨基酸,合成出具有特定氨基酸順序的蛋白質肽鏈的過 程。一DNA的生物合成在DNA復制時,親代 DNA的雙螺旋先行解旋和分開,然后以每條鏈為模板,按照堿 基配對原那么,在這兩條鏈上各形成一條互補鏈,這樣從親代DNA的分子可以精確地復制成2個子代DNA分子。每個子代 DNA分子中,有一條鏈是從親代 DNA來的,另一條那么是新 形成的,這叫做半保存復制。通過14n和15n標記大腸桿菌實驗證實了半保存復制。1. 復制的起始點與方向DNA分子復制時,在親代分子一個特定區域內雙鏈翻開,隨之以兩股鏈為模板復制生 成兩個子代DNA雙鏈分子。開始時復
3、制起始點呈現一叉形或Y形,稱之為復制叉。DNA復制要從DNA分子的特定部位開始,此特定部位稱為復制起始點origin of replication ,可以用ori表示。在原核生物中復制起始點常位于染色體的一個特定部位,即只有一個起始 點。真核生物的染色體是在幾個特定部位上進行DNA復制的,有幾個復制起始點的。酵母基因組與真核生物基因組相同,具有多個復制起始點。復制的方向可以有三種不同的機制。其一是從兩個起始點開始,各以相反的單一方向 生長出一條新鏈,形成兩個復制叉。其二是從一個起始點開始,以同一方向生長出兩條鏈, 形成一個復制叉。其三是從一個起始點開始,沿兩個相反的方向各生長出兩條鏈,形成兩個
4、復制叉。2. DNA聚合反響有關的酶及相關蛋白因子DNA的合成是以四種三磷酸脫氧核糖核苷為底物的聚合反響,該過程除了需要酶的催 化之外,還需要適量的DNA為模板,RNA 或DNA 為引物和鎂離子的參與。催化這個反響的酶也有多種:DNA聚合酶、RNA引物合成酶即引發酶、DNA連接酶、拓撲異構 酶、解螺旋酶及多種蛋白質因子參與。3. DNA的復制過程DNA的復制按一定的規律進行,雙螺旋的DNA是邊解開邊合成新鏈的。復制從特定位點開始,可以單向或雙向進行,但是以雙向復制為主。由于DNA雙鏈的合成延伸均為 5 ' t 3 '的方向,因此復制是以半不連續的方式進行,即其中一條鏈相對地連續
5、合成,稱之為 領頭鏈,另一條鏈的合成是不連續的,稱為隨后鏈。在DNA復制叉上進行的根本活動包括雙鏈的解開;RNA引物的合成;DNA鏈的延長;切除 RNA引物,填補缺口,連接相鄰的 DNA片段。二逆向轉錄在逆轉錄酶作用下,以 RNA為模板,按照RNA中的核苷酸順序合成 DNA,這與通常 轉錄過程中遺傳信息流從 DNA到RNA的方向相反,故稱為逆向轉錄。逆轉錄酶需要以RNA 或DNA 為模板,以四種 dNTP為原料,要求短鏈 RNA 或DNA 作為引物,此外還 需要適當濃度的二價陽離子Mg2+和Mn2+,沿5'宀3'方向合成 DNA,形成RNA-DNA 雜交分子或DNA雙鏈分子。逆
6、轉錄酶是一種多功能酶, 它除了具有以 RNA為模板的DNA 聚合酶和以DNA為模板的DNA聚合酶活性外還兼有 RNaseH、DNA內切酶、DNA拓撲異 構酶、DNA解鏈酶和tRNA結合的活性。幾乎所有真核生物的 mRNA分子的3 '末端都有一段多聚腺苷酸。當參加寡聚dT作引物時,mRNA就可以成為逆轉錄酶的模板,在體外合成與其互補的DNA,稱為cDNA。三DNA突變DNA突變 是指DNA的堿基順序發生突然而永久性地變化,從而影響DNA的復制,并使DNA的轉錄和翻譯也跟著改變,表現出異常的遺傳特征。DNA的突變可以有幾種形式:1一個或幾個堿基對被置換;2插入一個或幾個堿基對;3一個或多個
7、堿基對缺 失。置換和插入的變化是可逆的,缺失那么是不可逆的。最常見的突變形式是堿基對的置換。 嘌呤堿之間或嘧啶堿之間的置換稱為轉換,嘌呤和嘧啶之間的置換稱為顛換。突變有自發突變和誘發突變。在 DNA的合成中,自發突變的機率很低,大約每109個堿基對發生一次突變;各種RNA腫瘤病毒具有很高的自發突變頻率。誘發突變可以由物理因素或化學因素引 起,物理因素如電離輻射和紫外光等均可以誘發突變。化學因素的誘變,如脫氨劑和烷化試劑均可誘發突變。亞硝酸為強脫氨劑,可使腺嘌呤轉變為次黃嘌呤,鳥嘌呤轉變為黃嘌呤, 胞嘧啶轉變為尿嘧啶,而導致堿基配對錯誤。烷化劑如硫酸二甲酯DMS 可使鳥嘌呤的N7位氮原子甲基化,
8、使之成為帶一個正電荷的季銨基團,減弱N9位上的N-糖苷鍵,至使脫氧核糖苷鍵不穩定,發生水解而喪失嘌呤堿,以后可被其它堿基取代,或引起DNA的鏈斷裂。四DNA損傷與修復某些物理化學因子,如紫外線、電離輻射和化學誘變劑等,都能引起生物突變和致死。 因為它們均能作用于 DNA,造成其結構和功能的破壞。但細胞內具有一系列起修復作用的 酶系統,可以除去 DNA上的損傷,恢復 DNA的正常雙螺旋結構。目前已經知道有四種修 復系統:光復活,切除修復,重組修復和誘導修復。后三種機制不需要光照,因此又稱為暗 修復。1 光復活光復活的機制是可見光最有效波長為400nm左右激活了光復活酶,它能分解由于紫外線照射而形
9、成的嘧啶二聚體。光復活作用是一種高度專一的修復方式。2.切除修復又稱為復制前修復。所謂切除修復,即是在一系列酶的作用下,將 局部切除掉,并以完整的那一條鏈為模板,合成出切去的局部,然后使 的過程。這是比擬普遍的一種修復機制,它對多種損傷均能起修復作用。主要有:特異的核酸內切酶、外切酶、聚合酶和連接酶。DNA分子中受損傷 DNA恢復正常結構 參與切除修復的酶3.重組修復遺傳信息有缺損的子代 DNA分子可通過遺傳重組而加以彌補, 即從完整的母鏈上將相 應核苷酸序列片段移至子鏈缺口處, 然后用再合成的序列來補上母鏈的空缺。 此過程稱為重 組修復,因為發生在復制之后,又稱為復制后修復。參與重組修復的酶
10、系統包括與重組有關的主要酶類以及修復合成的酶類。重組基因recA編碼的蛋白質,具有交換 DNA鏈的活力。rec A蛋白被認為在 DNA重組和重組修復中均 起著關鍵的作用。rec B和rec C基因分別編碼核酸外切酶 V的兩個亞基,該酶亦為重組和 重組修復所必需。修復合成時需要 DNA聚合酶和連接酶。4. 誘導修復許多能造成DNA損傷或抑制復制的處理均能引起一系列復雜的誘導效應,稱為應急反應SOS response。SOS反響包括誘導出現的 DNA損傷修復效應、誘變效應、細胞分裂的 抑制以及溶原性細菌釋放噬菌體等等。五RNA勺生物合成以DNA的一條鏈為模板在 RNA聚合酶催化下,以四種核糖核苷磷
11、酸為底物按照堿基 配對原那么,形成 3'宀5 '磷酸二酯鍵,合成一條與 DNA鏈的一定區段互補的 RNA鏈的過 程稱為轉錄。RNA的轉錄起始于DNA模板的一個特定位點, 并在另一位點處終止。 在生物 體內,DNA的二條鏈中僅有一條鏈可作為轉錄的模板,這稱為轉錄的不對稱性。用作模板 的鏈稱為反義鏈,另一條鏈稱為有義鏈,因為有義鏈的脫氧核苷酸序列正好與轉錄出的RNA的核苷酸序列相同只是 T與U的區別,所以也稱編碼鏈。但各個基因的有義鏈不一定位于同一條DNA鏈。RNA的合成沿5'宀3'方向進行(DNA模板鏈方向為3'宀5') , 5' 未端為核
12、糖核苷三磷酸,即5 '位保存PPP。在真核生物細胞里,轉錄是在細胞核內進行的。 合成的RNA包括mRNA、RNA和tRNA 的前體。rRNA的合成發生在核仁內, 而合成mRNA和tRNA的酶那么定位在核質中。 另外葉 綠體和線粒體也進行轉錄。原核細胞中轉錄酶類存在于細胞液中。1. RNA聚合酶原核細胞大腸桿菌的 RNA聚合酶研究的較深入。 這個酶的全酶由5種亞基(a 2 3 3 ' 3 3 )組成,還含有2個Zn原子。在RNA合成起始之后,S因子便與全酶別離。不含 S 因子的酶仍有催化活性, 稱為核心酶。3亞基具有與啟動子結合的功能,3亞基催化效率很低,而且可以利用別的 DNA
13、的任何部位作模板合成 RNA。參加3因子后,那么具有了選擇起 始部位的作用,3因子可能與核心酶結合,改變其構象,從而使它能特異地識別DNA模板鏈上的起始信號。真核細胞的細胞核內有 RNA聚合酶I、II和III,通常由46種亞基組成,并含有Zn2+。 RNA聚合酶I存在于核仁中,主要催化 rRNA前體的轉錄。RNA聚合酶H和川存在于核質 中,分別催化 mRNA前體和小分子量 RNA的轉錄。此外線粒體和葉綠體也含有RNA聚合酶,其特性類似原核細胞的RNA聚合酶。2. RNA的轉錄過程RNA轉錄過程為起始位點的識別、起始、延伸、終止。起始位點的識別:RNA聚合酶先與DNA模板上的特殊啟動子部位結合,
14、(T因子起著識別DNA分子上的起始信號的作用。在b亞基作用下幫助全酶迅速找到啟動子,并與之結合生成較松弛的封閉型啟動子復合物。這時酶與DNA外部結合,識別部位大約在啟動子的-35位點處。接著是 DNA構象改變活化,得到開放型的啟動子復合物,此時酶與啟動子緊密結 合,在-10位點處解開DNA雙鏈,識別其中的模板鏈。由于該部位富含A-T堿基對,故有利于DNA解鏈。開放型復合物一旦形成,DNA就繼續解鏈,酶移動到起始位點。3起始:在起始位點的全酶結合第一個核苷三磷酸。第一個核苷三磷酸常是GTP或ATP。形成的啟動子、全酶和核苷三磷酸復合物稱為三元起始復合物,第一個核苷酸摻入的 位置稱為轉錄起始點。這
15、時 b亞基被釋放脫離核心酶。4. 延伸:從起始到延伸的轉變過程,包括b因子由締合向解離的轉變。DNA分子和酶分子發生構象的變化,核心酶與DNA的結合松弛,核心酶可沿模板移動,并按模板序列選擇下一個核苷酸,將核苷三磷酸加到生長的RNA鏈的3' -OH端,催化形成磷酸二酯鍵。轉錄延伸方向是沿 DNA模板鏈的3 't 5'方向按堿基酸對原那么生成 5 't 3 '的RNA產物。 RNA鏈延伸時,RNA聚合酶繼續解開一段 DNA雙鏈,長度約17個堿基對,使模板鏈暴露 出來。新合成的RNA鏈與模板形成 RNA-DNA的雜交區,當新生的 RNA鏈離開模板DNA 后,
16、兩條DNA鏈那么重新形成雙股螺旋結構。4 .終止 在DNA分子上有終止轉錄的特殊堿基順序稱為終止子(terminators ),它具有使RNA聚合酶停止合成 RNA和釋放RNA鏈的作用。這些終止信號有的能被RNA聚合酶自身識別,而有的那么需要有 p因子的幫助。p因子是一個四聚體蛋白質,它能與 RNA聚 合酶結合但不是酶的組分。它的作用是阻RNA聚合酶向前移動,于是轉錄終止,并釋放出已轉錄完成的RNA鏈。對于不依賴于p因子的終止子序列的分析,發現有兩個明顯的特征:即在DNA上有一個1520個核苷酸的二重對稱區,位于 RNA鏈結束之前,形成富含 G-C 的發夾結構。接著有一串大約6個A的堿基序列它
17、們轉錄的 RNA鏈的末端為一連串的 U。寡聚U可能提供信號使 RNA聚合酶脫離模板。在真核細胞內,RNA的合成要比原核細胞中的復雜得多。(六) 轉錄后加工在轉錄中新合成的 RNA往往是較大的前體分子,需要經過進一步的加工修飾,才轉變 為具有生物學活性的、成熟的 RNA分子,這一過程稱為轉錄后加工。主要包括剪接、剪切 和化學修飾。1. mRNA的加工在原核生物中轉錄翻譯相隨進行,多基因的mRNA生成后,絕大部分直接作為模板去翻譯各個基因所編碼的蛋白質,不再需要加工。但真核生物里轉錄和翻譯的時間和空間都不相同,mRNA的合成是在細胞核內,而蛋白質的翻譯是在胞質中進行,而且許多真核生物的基因是不連續
18、的。不連續基因中的插入序列,稱為內含子;被內含子隔開的基因序列稱為外顯子。一個基因的外顯子和內含子都轉錄在一條很大的原初轉錄本RNA分子中,故稱為核內不均一 RNA hnRNA 。它們首先降解為分子較小的 RNA,再經其 它修飾轉化為 mRNA。真核細胞mRNA的加工包括:1hnRNA被剪接,除去由內含子轉 錄來的序列,將外顯子的轉錄序列連接起來。2在3'末端連接上一段約有 20200個腺苷酸的多聚腺苷酸poly A 的“尾巴結構。不同 mRNA的長度有很大差異。3在5' 末端連接上一個“帽子結構m7GpppmNP。4在內部少數腺苷酸的腺嘌呤6位氨基發生甲基化m6A.2. tR
19、NA的加工 原核生物的tRNA基因的轉錄單元大多數是多基因的。不但相同或不同的tRNA的幾個基因可轉錄在一條 RNA中,有的tRNA還與rRNA組成轉錄單元,因此 tRNA前體的加工過程包括剪切、剪接,在3'-末端添加CCAoh、以及核苷酸修飾轉化為成熟的tRNA。tRNA中含有許多稀有堿基,所有這些堿基均是在轉錄后由四種常見堿基經修飾酶催化,發生脫氨、甲基化、羥基化等化學修飾而生成的。3. rRNA的加工 原核細胞首先生成的是 30S前體rRNA ,經核糖核酸酶作用, 逐步裂 解為16S、23S和5S的rRNA,其裂解過程可歸納如下:30S原核生物16S rRNA和23S rRNA含
20、有較多的甲基化修飾成分, 特別是2-甲基核糖。一般5S rRNA中無修飾成分。在真核細胞中rRNA的轉錄后加工與原核細胞類似, 但更為復雜。rRNA 在核仁中合成,生成一個更大 3545S前體rRNA。前體分裂而轉變為 28S、18S和5.8S的 rRNA分子。真核生物5S rRNA前體是由獨立于上述三種 rRNA之外的基因轉錄的。 真核生 物rRNA中與含有較多的甲基化成分。有關RNA剪接、剪切機制的研究不僅發現了RNA分子本身具有催化功能,這種具有剪接功能的RNA催化劑命名為核酶。目前已發現的具有催化功能的RNA有磷酸二酯酶核糖核酸酶、磷酸單酯酶、核苷酸轉移酶、磷酸轉移酶、 RNA限制性內
21、切酶、tRNA 5 '端成熟酶、a -1,4-葡聚糖分支酶和肽基轉移酶等。目前研究說明核酶催化 rRNA > tRNA、mRNA的剪接機理是不相同的。RNA內含子有四種類型,即I型自我拼接內含子、H型自我拼接內含子、核mRNA內含子和核tRNA內含子。七RNA的復制大多數生物的遺傳信息貯藏的DNA中,遺傳信息按中心法那么由 DNA轉錄成RNA ,再由RNA翻譯成蛋白質的。對 RNA病毒的研究說明,某些 RNA病毒是以RNA作模板復制 出病毒RNA分子。Q3噬菌體RNA的復制可分為兩個階段:1 當Q3噬菌體侵染大腸桿菌細胞后,其 單鏈RNA充當mRNA,禾U用宿主細胞中的核糖體合成
22、噬菌體外殼蛋白質和復制酶B亞基;2當復制酶的B亞基和宿主細胞原有的 a、丫、3亞基自動裝配成 RNA復制酶以后, 就進行RNA復制。以侵染的噬菌體 RNA作模板,通過 RNA復制酶合成互補的 RNA鏈。 常把具有mRNA功能的鏈稱為正鏈,與它互補的鏈稱為負鏈。在噬菌體特異的復制酶裝配 好后不久酶就吸附到正鏈 RNA的3'末端,以它為模板合成出負鏈,至合成結束,然后負 鏈從正鏈模板上釋放出來。 同一個酶又吸附到負鏈 RNA的3'末端,合成出病毒正鏈 RNA , 正鏈RNA與外殼蛋白裝配成噬菌體顆粒,所以正鏈和負鏈的合成方向都是由5 't 3'。八基因工程的操作技術
23、1. 目的基因體外操作DNA的主要步驟之一是提取載體 DNA和所需要的外源目的基因。在細胞中 DNA并非以游離態分子存在,而是和 RNA及蛋白質結合在一起形成復合體。DNA純化的根本步驟是:1從破壞的細胞壁和膜里釋放出可溶性的DNA ; 2通過變性或蛋白質分解,使DNA和蛋白質的復合體解離;3將DNA從其它大分子中別離出來;4 DNA濃度和純度的光學測定。2. 載體外源DNA片段目的基因要進 入受體細胞,必須有一個適當的運載工具將帶入細胞 內,并載著外源 DNA 一起進行復制與表達,這種運載工具稱為載體。載體必須具備以下條件:1在受體細胞中,載體可以獨立地進行復制。所以載體本 身必須是一個復制
24、單位,稱復制子 replicon,具有復制起點。而且插入外源DNA后不會影響載體本身復制的能力。易于鑒定、篩選。也就是說,容易將帶有外源DNA的重組體與不帶外源DNA的載體區別開來。3易于引入受體細胞。常用的載體主要有以下幾類:細菌和酵母的質粒,入噬菌體和M13以及病毒。3連接外源DNA與載體DNA之間可以通過多種方式相連接,主要有以下幾種1粘性末端連接;2平頭末端連接;3接頭連接等。4. 轉化任何外源DNA重組到載體上,然后轉入受體細胞中復制繁殖,這一過程稱為DNA的克隆。外源DNA進入受體細胞并使它獲得新遺傳特性的過程稱為轉化。轉化作用是將外源DNA引入細胞的過程。5篩選由于細胞轉化的頻率
25、較低,所以從大量的宿主細胞中篩選出帶有重組體的細胞并不是很容易的,當前,在實驗室中,常用的篩選手段有以下幾種:1插入失活;2菌 落原位雜交;3免疫學方法此外,對重組體轉化的鑒定還可以采用表現型的鑒定;對重 組質粒純化并重新轉化;限制性酶切圖譜的繪制;重組質粒上的基因定位等更深入的方法。二、習題一名詞解釋1 .半保存復制 semiconservative replication 2. 不對稱轉錄 asymmetric trancription 3. 逆轉錄reverse transcription4. 岡崎片段Okazaki fragment5. 復制叉replication fork 6. 領
26、頭鏈leading strand7. 隨后鏈lagging strand8. 有意義鏈sense stranc9. 光復活photoreactivation 10. 重組修復recomb in atio n repair11. 內含子intron12. 外顯子exon13. 基因載體genonic vector14. 質粒plasmid二填空題1. DNA復制是定點雙向進行的,股的合成是,并且合成方向和復制叉移動方向相同; 股的合成是 的,合成方向與復制叉移動的方向相反。每個岡崎片段是借助于連在它的末端上的一小段而合成的;所有岡崎片段鏈的增長都是按方向進行。2. DNA連接酶催化的連接反響需要
27、能量,大腸桿菌由供能,動物細胞由供能。3. 大腸桿菌 RNA聚合酶全酶由組成;核心酶的組成是。參與識別起始信號的是因子。4. 基因有兩條鏈,作為模板指導轉錄的那條鏈稱鏈。5. 以RNA為模板合成DNA稱 ,由酶催化。6. DNA或UpGpCpA分別經0.3NKOHR、Nase和牛胰RNasel處理所得結果:DNA: 0.3NKOH :; RNaseT1: ; RNase I: ;UpGpCpA : 0.3NKOH : ; RNase: ; RNase I : 。7. 基因突變形式分為: , , 和四類。&亞硝酸是一個非常有效的誘變劑,因為它可直接作用于DNA,使堿基中 基氧化成基,造成
28、堿基對的。9. 所有岡崎片段的延伸都是按 方向進行的。10. 前導鏈的合成是 的,其合成方向與復制叉移動方向 ;隨后鏈的合成是的,其合成方向與復制叉移動方向 。11. 引物酶與轉錄中的RNA聚合酶之間的差異在于它對 不敏感,并可以作為底物。12. DNA聚合酶I的催化功能有 、和。13. DNA盤旋酶又叫 ,它的功能是 。14. 細菌的環狀DNA通常在一個 開始復制,而真核生物染色體中的線形DNA可以在起始復制。15. 大腸桿菌 DNA聚合酶川的 活性使之具有 功能,極大地提高了 DNA復制的保真度。16. 大腸桿菌中已發現 種DNA聚合酶,其中 負責DNA復制,負責DNA損傷修復。17. D
29、NA切除修復需要的酶有 、和。18. 在DNA復制中,可防止單鏈模板重新締合和核酸酶的攻擊。19. DNA合成時,先由引物酶合成 ,再由在其3'端合成DNA鏈,然后由切除引物并填補空隙,最后由 連接成完整的鏈。20. 原核細胞中各種 RNA是催化生成的,而真核細胞核基因的轉錄分別由 種RNA聚合酶催化,其中rRNA基因由轉錄,hnRNA基因由轉錄,各類小分子量RAN那么是的產物。21. 一個轉錄單位一般應包括 序列、序列和順序。22. 真核細胞中編碼蛋白質的基因多為 。編碼的序列還保存在成熟mRNA中的是,編碼的序列在前體分子轉錄后加工中被切除的是 。在基因中 被分隔,而在成熟的 mR
30、NA序列被拼接起來。23. 染色質中的蛋白和蛋白對轉錄均有調節作用,其中 的調節作用具有組織特異性。(三) 選擇題1. DNA按半保存方式復制。如果一個完全放射標記的雙鏈DNA分子,放在不含有放射標記物的溶液中,進行兩輪復制,所產生的四個DNA分子的放射活性將會怎樣:A .半數分子沒有放射性B .所有分子均有放射性C. 半數分子的兩條鏈均有放射性D .一個分子的兩條鏈均有放射性E.四個分子均無放射性2. 參加DNA復制的酶類包括:(1) DNA聚合酶川;(2)解鏈酶;(3) DNA聚合酶I; ( 4) RNA聚合酶(引物酶);(5) DNA連接酶。其作用順序是:A. (4)、(3)、(1)、(
31、2)、( 5)B. (2)、(3)、(4)、(1)、(5)C. (4)、(2)、(1)、( 5)、( 3)D . (4)、(2)、(1)、( 3)、( 5)E. (2)、(4)、(1)、( 3)、( 5)15143. 如果 N標記的大腸桿菌轉入N培養基中生長了三代, 其各種狀況的DNA分子比例應 是以下哪一項:15純N1514N N,亠14純NDNA雜種DNADNAA.1/81/86/8B.1/807/8C.01/87/8D.02/86/8E.04/84/84.以下關于DNA復制特點的表達哪一項錯誤的:A . RNA與DNA鏈共價相連B .新生DNA鏈沿5 3 '方向合成C. DNA鏈
32、的合成是不連續的D .復制總是定點雙向進行的E. DNA在一條母鏈上沿 5'宀3'方向合成,而在另一條母鏈上那么沿3 5'方向合成5. DNA復制時,5' TpApGpAp 3'序列產生的互補結構是以下哪一種:A . 5' TpCpTpAp 3'B . 5' ApTpCpTp 3'C. 5' UpCpUpAp 3'D. 5' GpCpGpAp 3'E. 3' TpCpTpAp 5 '6. 以下關于 DNA聚合酶I的表達哪一項為哪一項正確的:A .它起DNA修復酶的作用但不參加
33、 DNA復制過程B .它催化dNTP聚合時需要模板和引物C.在DNA復制時把岡崎片段連接成完整的隨從鏈D .它催化產生的岡崎片段與RNA引物鏈相連E.有些細菌突變體其正常生長不需要它7. 以下關于真核細胞 DNA聚合酶活性的表達哪一項為哪一項正確的:A .它僅有一種B它不具有核酸酶活性C.它的底物是二磷酸脫氧核苷D它不需要引物E.它按3 '-5'方向合成新生鏈&從正在進行 DNA復制的細胞別離出的短鏈核酸一一岡崎片段,具有以下哪項特性:A .它們是雙鏈的B .它們是一組短的單鏈 DNA片段C.它們是DNA RNA雜化雙鏈D .它們被核酸酶活性切除E.它們產生于親代 DNA鏈的糖-磷酸骨架的缺口處9. 切除修復可以糾正以下哪一項引起的DNA損傷:A .堿基缺失B.堿基插入C.堿基甲基化D .胸腺嘧啶二聚體形成E.堿基烷基化10. 大腸桿菌DNA連接酶需要以下哪一種輔助因子?A . FAD作為電子受體B. NADP +作為磷酸供體C. NAD +形成活性腺苷酰酶D . NAD +作為電子受體E.以上都不是11. 以下關于 RNA和DNA聚合酶的表達哪一項為哪一項正確的:A . RNA聚合酶用二磷酸核苷合成多核苷酸鏈B. RNA聚合酶需要引物,并在延長鏈的5'端加接堿基C. DNA聚合酶可在鏈的兩端加接核苷酸D. DNA僅能以RNA為模板合成DNAE
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