1、胸腺瘤組織中cmyc基因的表達(dá)及其意義         08-05-05 17:09:00     作者：黃壯士    編輯：studa20【摘要】  目的 研究cmyc基因在胸腺瘤組織中的表達(dá)， 探討cmyc基因與胸腺瘤的發(fā)生發(fā)展、 惡性程度的關(guān)系。 方法 應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法， 檢測(cè)cmyc在41例胸腺瘤和18例非腫瘤胸腺組織中的表達(dá)， 結(jié)合胸腺瘤WHO分型、 Masaoka分期， 研究cmyc基因在胸腺瘤各分型、 分期

2、中的表達(dá)情況。結(jié)果 cmyc在胸腺瘤中的陽(yáng)性表達(dá)率為63.4%，在非腫瘤胸腺組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為16.7%，兩者間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(<0.01)。cmyc在良性胸腺瘤（A/AB型）和惡性胸腺瘤（B1B3型）中的表達(dá)分別為30.0%和74.2%，兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(<0.05)。cmyc在非侵襲性胸腺瘤（期）與侵襲性胸腺瘤（期）中的表達(dá)分別為33.3%和75.9%，兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(<0.05)。結(jié)論 cmyc與胸腺瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)；與胸腺瘤的惡性程度、侵襲性有關(guān)。 【關(guān)鍵詞】  胸腺瘤 cmyc WHO分型 Masaoka分期0  引言  &

3、#160; 胸腺瘤是常見(jiàn)的前縱隔腫瘤1。隨著病程的進(jìn)展，其有局部外侵、復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等生物學(xué)特性，故臨床上一般認(rèn)為胸腺瘤屬于低度惡性或具有潛在惡性傾向的腫瘤2。由于單純從細(xì)胞學(xué)形態(tài)上很難區(qū)分胸腺瘤的良惡性，所以目前尚缺乏對(duì)胸腺瘤惡性程度判斷的客觀指標(biāo)。    近年來(lái)，利用基因分子生物技術(shù)對(duì)癌基因進(jìn)行研究已成為腫瘤研究的熱點(diǎn)。cmyc是一種對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有調(diào)節(jié)作用的基因，其在多種腫瘤組織中有表達(dá)3，但在人胸腺瘤組織中的表達(dá)情況未見(jiàn)報(bào)道。本研究擬對(duì)此進(jìn)行探討。1  資料與方法11  標(biāo)本    選自鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院20

4、00年1月2004年4月胸腺瘤切除標(biāo)本41例。患者男23例，女18例，年齡1878歲，平均42.3歲。23例合并有重癥肌無(wú)力（MG），按Masaoka分期標(biāo)準(zhǔn)4: 非侵襲性胸腺瘤（期）12例， 侵襲性胸腺瘤29例（其中期15例， 期11例， 期3例）。按照WHO分型57：良性或低度惡性胸腺瘤10例（其中A型3例，AB型7例），惡性胸腺瘤31例（B1型15例，B2型6例，B3型10例，C型0例）。取同期18例非胸腺疾病開(kāi)胸切除的胸腺組織（先、后天性心臟病等，以下稱非腫瘤胸腺組織）作為對(duì)照組，兩組一般情況無(wú)差異。全部標(biāo)本經(jīng)10%中性福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋組織塊。制成4m厚的連續(xù)切片張，張供免

5、疫組化染色，1張供HE染色復(fù)核診斷。1.2  試驗(yàn)方法    鼠抗人cmyc單克隆抗體為福州邁新公司提供。應(yīng)用免疫組織化學(xué)鏈酶素親生物蛋白過(guò)氧化物酶(SP)法檢測(cè)cmyc的表達(dá)。免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，用PBS代替一抗做陰性對(duì)照。1.3  結(jié)果判斷    細(xì)胞核或胞漿呈棕黃色或黃色者為陽(yáng)性細(xì)胞。在400倍視野下任意選擇5個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞無(wú)陽(yáng)性反應(yīng)或陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<1%為(-)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>1%為(+)。用已知陽(yáng)性片作陽(yáng)性對(duì)照，用PBS液代替一抗作陰性對(duì)照。1.4

6、0; 統(tǒng)計(jì)方法    采用四格表2檢驗(yàn)。以=0.05作為校驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。2  結(jié)果2.1  cmyc基因在胸腺瘤和非腫瘤胸腺組織中表達(dá)的比較    cmyc基因在18例非腫瘤胸腺組織中陽(yáng)性表達(dá)率為16.7%(3/18)，在41例胸腺瘤中陽(yáng)性率為63.4%(26/41)。兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(2=10.937，=0.001<0.01），見(jiàn)表1。表1  cmyc在非瘤胸腺組織和胸腺瘤中的表達(dá)（略）2.2  cmyc基因在不同惡性程度胸腺瘤中的表達(dá)    在10例良性或低度惡

7、性（A/AB型）胸腺瘤中有30.0%（3/10）病例cmyc表達(dá)陽(yáng)性，在31例惡性（B1B3型）胸腺瘤中有74.2%(23/31)表達(dá)陽(yáng)性，兩者間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(2=4.603，=0.032<0.05），見(jiàn)表2。表2  cmyc表達(dá)與胸腺瘤WHO分型的關(guān)系（略）2.3  cmyc基因在侵襲性與非侵襲性胸腺瘤中的表達(dá)    cmyc在Masaoka期、期、期和期的表達(dá)分別為33.3%(4/12)、60.0%(9/15)、90.9%(10/11) 和100%(3/3)呈明顯的遞增趨勢(shì)。12例非侵襲性（期）胸腺瘤有33.3%（4/12）病例cmy

8、c表達(dá)陽(yáng)性，29例侵襲性（期）胸腺瘤有75.9% (22/29) cmyc表達(dá)為陽(yáng)性，兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(2=4.911，=0.027<0.05），見(jiàn)表3。表3  cmyc表達(dá)與胸腺瘤Masaoka分期的關(guān)系（略）2.4  cmyc基因表達(dá)與胸腺瘤是否合并MG的關(guān)系  cmyc在23例合并重癥肌無(wú)力的胸腺瘤中有52.2% (12/23)表達(dá)陽(yáng)性，18例不合并重癥肌無(wú)力的病例中77.8%(14/18) 表達(dá)為陽(yáng)性，兩者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(2=2.853， >0.05），見(jiàn)表4。表4  cmyc基因表達(dá)與胸腺瘤是否合并MG的關(guān)系（略）3  討論

9、    胸腺組織學(xué)復(fù)雜的結(jié)構(gòu)和細(xì)胞的多樣化，二十世紀(jì)末以前胸腺瘤曾有過(guò)多種組織學(xué)分類方法8，但都和預(yù)后沒(méi)有很好的相關(guān)性。近年來(lái)，隨著“胸腺瘤來(lái)源于胸腺上皮細(xì)胞屬于胸腺上皮性腫瘤(Thymic Epithelial Tumors， TETs)” 這一觀點(diǎn)被越來(lái)越多的人接受，按照胸腺瘤組織中上皮細(xì)胞形態(tài)分類的WHO組織學(xué)分類法（1999年）5 也被廣泛采用。越來(lái)越多的研究6,7顯示該分類法與預(yù)后有較好的相關(guān)性，如A/AB型胸腺瘤很少侵及其他器官，復(fù)發(fā)率也很低，B/C型則多復(fù)發(fā)甚至轉(zhuǎn)移，故認(rèn)為A/AB型胸腺瘤屬良性或頂多為低度惡性的胸腺瘤，B型胸腺瘤為惡性胸腺瘤，C型為高度惡性的胸腺癌。由于長(zhǎng)期沒(méi)有準(zhǔn)確的胸腺瘤預(yù)后判斷標(biāo)準(zhǔn)，臨床工作中醫(yī)生們往往采用臨床分期方法來(lái)判斷病人的預(yù)后。關(guān)于胸腺瘤的分期方法也很多4,9,10，但目前最常用的是Masaoka分期4。Masaoka  期胸腺瘤不侵及周圍器官，手術(shù)切除率高，預(yù)后好，復(fù)發(fā)率僅有5，期胸腺瘤為侵襲性胸腺瘤，切除率低、預(yù)后較差11。本研究通過(guò)檢測(cè)胸腺瘤組織中cmyc的表達(dá)，結(jié)合上述分類和分期，了解其與胸腺瘤侵襲性和惡性程度的關(guān)系。    cmyc基因最早發(fā)現(xiàn)于禽類骨髓瘤病毒MC29