1、縮寫： ATCC，美國模式菌種保藏所；CAMHB，調節過陽離子的Mueller-Hinton肉湯；FDA，美國食品和藥品管理局；MHA， Mueller-Hinton瓊脂；MIC，最低抑菌濃度；MRS，耐甲氧西林葡萄球菌；MRSA，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌；MOD-SA，修飾的金黃色葡萄球菌；PBP，青霉素結合蛋白；PCR，聚合酶鏈反應；QC，質量控制；VRSA，耐萬古霉素金黃色葡萄球菌；vanA，萬古霉素耐藥基因。BHI，腦心浸液；AST，抗菌藥物敏感性試驗； ATCC，美國模式菌種保藏所；BSC，生物安全柜； BSL-2，二級生物安全水平；BSL-3，三級生物安全水平；CAMHB，調節過陽

2、離子的 MuellerHinton肉湯；CDC，疾病預防控制中心；CFU，菌落形成單位；LHB，溶解馬血； MHA， Mueller-Hinton瓊脂； MIC，最低抑菌濃度；QC，質量控制。抑菌圈直徑和MIC解釋標準銅綠假單胞菌抑菌圈直徑和MIC解釋標準試驗條件培養基: 紙片擴散法：MHA肉湯稀釋法：CAMHB瓊脂稀釋法： MHA接種物: 生長法或直接菌落懸液法，相當于 0.5麥氏標準孵育: 35± 2 °C；空氣環境紙片擴散法：16 -18 h稀釋法：16 - 20 h (1)對于紙片擴散法，直徑150mm平板最大放置12只，直徑100mm平板放置5只進行試驗(見M02

3、第9.2節)。測量抑菌圈直徑（用肉眼判讀），包括紙片直徑。保持平板在反射光照明的、非反射黑的背景上方幾英寸，肉眼觀察無明顯生長的地區作為抑菌圈邊緣。在抑菌圈邊緣借助放大鏡才能觀察到的微小菌落生長可忽略不計。(2)用紙片擴散法和稀釋法能可靠地測定分離于囊性纖維化病人的銅綠假單胞菌的敏感性，但在作為敏感結果報告前，應將孵育時間延長至24小時。(3)所有抗菌藥物在延長治療期間可致銅綠假單胞菌發生耐藥。因此，初次分離的敏感菌株在開始治療后34不動桿菌屬抑菌圈直徑和MIC解釋標準試驗條件培養基：紙片擴散法： MHA肉湯稀釋法： CAMHB瓊脂稀釋法： MHA接種物：生長法或直接菌落懸液法，相當于0.5麥

4、氏標準孵 育： 35±2°C；空氣環境；20-24h，所有方法由于培養基中可能存在拮抗劑，甲氧芐啶和磺胺類藥物抑菌圈內可允許出現菌株輕微生長；因此，在測量抑菌圈直徑時可忽視輕微生長（20%或較少的菌苔）而測量較明顯抑制的邊緣。（2）對四環素敏感的菌株被認為對多西環素和米諾環素也敏感。然而，某些對四環素中介或耐藥的菌株可以對多西環素或米諾環素或二者敏感。洋蔥伯克霍爾德菌抑菌圈直徑和MIC解釋標準試驗條件培養基：紙片擴散法： MHA肉湯稀釋法：CAMHB瓊脂稀釋法： MHA接種物：生長法或直接菌落懸液法，相當于0.5麥氏標準孵 育： 35±2°C；空氣環境；

5、所有方法，20-24h嗜麥芽窄食單胞菌抑菌圈直徑和MIC解釋標準試驗條件培養基：紙片擴散法： MHA肉湯稀釋法： CAMHB瓊脂稀釋法： MHA接種物：生長法或直接菌落懸液法，相當于0.5麥氏標準孵 育： 35±2°C；空氣環境，所有方法，20-24 h由于培養基中可能存在拮抗劑，甲氧芐啶和磺胺類藥物抑菌圈內可允許出現菌株輕微生長；因此，在測量抑菌圈直徑時可忽視輕微生長（20%或較少的菌苔）而測量較明顯抑制的邊緣。氯霉素：分離于泌尿道菌株不常規報告。其他非- 腸桿菌科細菌MIC解釋標準(mg/mL)葡萄球菌屬抑菌圈直徑和MIC解釋標準試驗條件培養基：紙片擴散法：MHA肉湯稀

6、釋法：CAMHB； CAMHB+2% NaCl用于苯唑西林、甲氧西林和奈夫西林； CAMHB補充 50 µg/mL鈣用于達托霉素瓊脂稀釋法：MHA； MHA+2% NaCl用于苯唑西林、甲氧西林和奈夫西林；瓊脂稀釋測試達托霉素還未被批準接種物：直接菌落懸液法，相當于 0.5麥氏標準孵 育： 35±2°C；空氣環境紙片擴散法：16-18 h； 24 h (凝固酶陰性葡萄球菌與頭孢西丁)稀釋法： 16-20 h所有方法：苯唑西林、甲氧西林、奈夫西林和萬古霉素需24h試驗溫度超過35°C可能檢測不出MRS(1)對于紙片擴散法，直徑150mm平板最大放置12只紙

7、片，直徑100mm平板放置5只進行試驗(見M02第9.2節)。測量抑菌環直徑(用肉眼判讀)，包括紙片直徑。保持平板在反射光照明的、非反射黑的背景上方幾英寸，除外利奈唑胺、苯唑西林、萬古霉素應用透射光閱讀（平板正對光源）。肉眼觀察無明顯生長的地區作為抑菌圈邊緣。在抑菌圈邊緣借助放大鏡才能觀察到的微小菌落生長可忽略不計。由于培養基中可能存在拮抗劑，甲氧芐啶和磺胺類藥物抑菌環內可允許出現菌株輕微生長；因此，在測量抑菌環直徑時可忽視輕微生長（20%或較少的菌苔）而測量較明顯抑制的邊緣。在抑菌環內任何可辨別的菌落生長提示苯唑西林、利奈唑胺或萬古霉素耐藥。(2)過去，將對青霉素酶穩定的青霉素類(見術語表

8、I)耐藥稱為“ 耐甲氧西林” 或“ 耐苯唑西林” ， MRSAs是指表達mecA或具有另一種甲氧西林耐藥機制，如青霉素結合蛋白與苯唑西林的親和力改變 (修飾的金黃色葡萄球菌MOD-SA菌株)的金黃色葡萄球菌。(3)對于耐苯唑西林金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌 (MRS)， 被認為對其它b- 內酰胺類藥物，即，青霉素類、b- 內酰胺/b- 內酰胺酶抑制劑復合物，頭孢類(新的“ 具有抗-MRSA活性的頭孢菌素” 例外)和碳青霉烯類等是耐藥。這是因為大多數文獻報道了MRS(4)在大部分葡萄球菌中，苯唑西林耐藥是由mecA基因介導，此基因編碼青霉素結合蛋白2a (PBP 2a,也稱為PBP2

9、9;)。測試分離菌株mecA或PBP 2a陽性應報告苯唑西林耐藥。通過苯唑西林MIC、頭孢西丁MIC或頭孢西丁紙片法測試分離菌株為耐藥，應報告苯唑西林耐藥。非mecA介導的耐藥機制較罕見，包括新的mecA同系物mecC 1 。具有mecC菌株的頭孢西丁和/或苯唑西林MICs典型地落在耐藥范圍；通過直接檢測mecA或PBP 2a不能檢測出mecC介導的藥。(5)由于對常規用于治療急性、無并發癥的泌尿道感染的抗菌藥物(如，呋喃妥因、甲氧芐啶±磺胺甲惡唑或一種氟喹諾酮)在尿液中可達到濃度的治療反應是敏感的，因此，不建議對尿液中分離的腐生葡萄球菌進行常規試驗。(6)對于某些細菌/抗菌藥物組合

10、，尚不存在或罕見耐藥菌株，因此，除了“ 敏感” 以外沒有標明任何其他藥敏類型。如果菌株的結果提示“ 非敏感” ，應確證菌株鑒定和抗菌藥物敏感性試驗結果。 (見附錄 A)。(7)- 內酰胺酶、苯唑西林耐藥性、使用頭孢西丁檢測mecA-介導的苯唑西林耐藥性、萬古霉素敏感性減低、誘導型克林霉素耐藥和高水平莫匹羅星耐藥(僅金黃色葡萄球菌)等篩選試驗，金黃色葡萄球菌查閱表2C補充表1和2，凝固酶陰性葡萄球菌查閱表2C補充表3。另外，使用頭孢西丁預報mecA介導的苯唑西林耐藥性的進一步解釋參見M07-A9第12青霉素酶不穩定青霉素類(8)青霉素敏感葡萄球菌也對葡萄球菌感染有臨床療效的其他- 內酰胺類藥物敏

11、感。青霉素耐藥葡萄球菌對青霉素酶不穩定青霉素耐藥，包括氨芐西林、阿莫西林、阿洛西林、羧芐西林、美洛西林、哌拉西林和替卡西林。(9)青霉素可被用于測試葡萄球菌對所有青霉素酶不穩定青霉素類的敏感性。青霉素耐藥葡萄球菌產生b- 內酰胺酶。當青霉素對葡萄球菌分離株MICs 0.12 µg/mL或抑菌圈直徑 29 mm，在報告青霉素結果為敏感前，應對葡萄球菌執行- 內酰胺酶試驗。罕見葡萄球菌含b- 內酰胺酶基因而b- 內酰胺酶試驗結果為陰性。因此，對需青霉素治療的嚴重感染，從相同患者隨后分離的所有菌株，實驗室應測定青霉素MIC和執行誘導- 內酰胺酶試驗。也可考慮用PCR測試分離菌株bla Zb

12、- 內酰胺酶基因。見表2C后的表2C補充表1和 3(10)苯唑西林耐藥葡萄球菌應報告對青霉素耐藥或不報告。青霉素酶穩定青霉素類(11)苯唑西林(或頭孢西丁)結果可應用于其他青霉素酶穩定青霉素類 (鄰氯西林、雙氯西林、氟氯西林、甲氧西林和萘夫西林)。 具有確切臨床療效的抗菌藥物，考慮感染部位和適當的劑量，苯唑西林 (頭孢西丁)敏感葡萄球菌可考慮對下列抗菌藥物也敏感：b·- 內酰胺/b- 內酰胺酶抑制劑復合物 (阿莫西林- 克拉維酸、氨芐西林- 舒巴坦、哌拉西林- 他唑巴坦、替卡西林- 克拉維酸)；· 口服頭孢烯類 (頭孢克羅、頭孢地尼、頭孢泊肟、頭孢丙烯、頭孢呋辛、氯碳頭孢)

13、；· 注射用頭孢烯類包括I、 II、 III和 IV代頭孢菌素(頭孢孟多、頭孢唑啉、頭孢吡肟、頭孢美唑、頭孢尼西、頭孢哌酮、頭孢噻肟、頭孢替坦、頭孢唑肟、頭孢曲松、頭孢呋辛、頭孢噻吩、頭孢洛林、拉氧頭孢)；和碳青霉烯 (多利培南、厄他培南、亞胺培南、美羅培南)。除了新的具有抗MRSA活性的頭孢菌素外，耐苯唑西林葡萄球菌對目前所有b- 內酰胺類藥物耐藥。因此，對各種b- 內酰胺類抗菌藥物敏感或耐藥結果，可以通過只檢測青霉素和頭孢西丁或苯唑西林而推測得到。除不建議常規測試其他b- 內酰胺類藥物，具有抗-MRSA活性藥物除外。見注釋 (4)。苯唑西林用于金黃色葡萄球菌和路登葡萄球菌(12)

14、苯唑西林紙片試驗不可靠，當使用頭孢西丁作為替代試驗報告苯唑西林紙片試驗結果時見頭孢西丁和注釋(13)。(13)頭孢西丁可被用作苯唑西林的替代品；r 根據頭孢西丁結果來報告苯唑西林敏感或耐藥。(14)如果用頭孢西丁和苯唑西林測試金黃色葡萄球菌或路登葡萄球菌，二種藥物中有任一結果為耐藥，則應報告受試菌株對苯唑西林耐藥。苯唑西林用于除路登葡萄球菌外的凝固酶陰性葡萄球菌（CoNS）(15)對于某些 CoNS，由于某些非表皮葡萄球菌苯唑西林MIC為0.52g/ml，而缺乏mecA基因，因此，苯唑西林MIC解釋標準可能高估了耐藥性。除表皮葡萄球菌外，對于苯唑西林MIC為0.52g/mlCoNS引起的嚴重感

15、染，適合于測試分離菌株mecA基因或PBP2a或頭孢西丁紙片擴散法敏感性。.萬古霉素用于金黃色葡萄球菌。(18)測定所有葡萄球菌分離株對萬古霉素敏感性應執行MIC試驗。紙片擴散法既不能區別萬古霉素敏感與中介金黃色葡萄球菌，也不能區分萬古霉素敏感、中介和耐藥凝固酶陰性葡萄球菌，對所有分離菌株給出相似大小抑菌圈。(19)除了下述情況外，葡萄球菌紙片擴散法抑菌圈直徑大小與萬古霉素MIC不存在相關性。30µg萬古霉素紙片試驗可檢測含vanA基因的萬古霉素耐藥金黃色葡萄球菌 (VRSA)。上述菌株在紙片周圍表現無抑菌圈 (直徑 = 6 mm)。應確證無抑菌圈分離菌的鑒定結果。對未測定萬古霉素M

16、IC，而萬古霉素抑菌圈直徑 7 mm葡萄球菌分離株，不能報告其對萬古霉素敏感。(20)檢測到萬古霉素 MIC³ 8mg/mL的任何金黃色葡萄球菌，應送到參考實驗室。見附錄A。(VRSA)耐萬古霉素金黃色葡萄球菌(21)檢測到萬古霉素 MIC³ 32mg/mL的任何凝固酶陰性葡萄球菌，應送到參考實驗室。(23)分離于呼吸道的菌株不報告達托霉素結果。(24)對試驗敏感的葡萄球菌，可使用氨基糖苷類與試驗敏感的具有活性的其他藥物一起進行聯合。大環內酯類(25)對泌尿道分離的菌株不常規報告。四環素類(26)對四環素敏感的菌株被認為對多西環素和米諾環素也敏感。然而，某些對四環素中介或耐

17、藥菌株可對多西環素、米諾環素或二者敏感。氟喹諾酮類(27)用喹諾酮類治療葡萄球菌引起的感染，在延長治療期間，葡萄球菌敏感株可發展為耐藥株。因此，起初敏感菌株在開始治療后34天內可發展為耐藥株。應對重復分離菌株進行敏試驗。(29)誘導型克林霉素耐藥性可用D-抑菌圈紙片擴散試驗和使用單一孔含紅霉素和克林霉素的肉湯稀釋法進行檢測。當前建議見表2C補充表 2和 3，以及 M02-A11第12節和M07-A9第13節總建議。(30)磺胺異噁唑可代表當前使用的任何磺胺藥制劑。(31)Rx: 利福平不能單獨用于抗菌治療。a. 檢測金黃色葡萄球菌是否產生- 內酰胺酶，青霉素紙片擴散法抑菌圈- 邊緣試驗比nit

18、rocefin-試驗敏感。假如實驗室只使用一種檢驗- 內酰胺酶試驗，則推薦青霉素抑菌圈- 邊緣試驗。然而，某些實驗室可選擇先執行nitrocefin-試驗，如果此試驗陽性，報告- 內酰胺酶結果陽性 (或青霉素耐藥)。假如nitrocefin試驗是陰性，且必須用青霉素治療的情況下(如，心內膜炎)，在報告青霉素為敏感前，應執行青霉素抑菌圈- 邊緣試驗。b.3個實驗室共研究測試了 168株臨床分離的路登葡萄球菌，結果表明使用CLSI參考肉湯微量稀釋法（MIC法）和紙片擴散法測試為耐藥菌株均產生- 內酰胺酶，并且所有菌株是誘導nitrocefin試驗- 內酰胺酶陽性。青霉素紙片擴散法抑菌圈- 邊緣試驗

19、相比誘導 nitrocefin試驗要差些，因此，不用于路登葡萄球菌- 內酰胺酶的檢測。假如實驗室使用的是一種非 CLSI推薦的參考方法，并且不確定這種方法是否能可靠檢出路登葡萄球菌對青霉素耐藥性，則在報告分離菌株為青霉素敏感前，實驗室應執行誘導nitrocefin腸球菌屬抑菌圈直徑和MIC解釋標準試驗條件培養基：紙片擴散法：MHA肉湯稀釋法：CAMHB； CAMHB補充50µg/mL鈣用于達托霉素瓊脂稀釋法：MHA；瓊脂稀釋法用于達托霉素不未被認可接種物：生長法或直接菌落懸液法，相當于0.5麥氏標準孵 育： 35±2°C；空氣環境紙片擴散法：16-18 h稀釋法：

20、16-20 h所有方法：測試萬古霉素需24 h(1)紙片擴散法，直徑150-mm平板最大放置12只紙片，直徑100-mm平板放置5只紙片(見M02第9.2節)。測量抑菌圈直徑 (用肉眼判讀)，包括紙片直徑。保持平板在反射光照明、非反射黑的背景上方幾英寸，但萬古霉素需用透射光閱讀（平板正對光源），肉眼觀察無明顯可見生長的地區作為抑菌圈邊緣。在抑菌圈邊緣借助放大鏡才能觀察到的微小菌落生長可忽略不計。在抑菌圈內任何可辨別的菌落生長提示萬古霉素耐藥。(2)警告：對于腸球菌屬，頭孢菌素、氨基糖苷類 (除外高水平耐藥篩選)、克林霉素和復方新諾明可以在體外顯示活性但臨床上治療無效，因此，對于分離菌株這些藥物

21、不應報告為敏感。(3)應用高水平的氨基糖苷類（慶大霉素和鏈霉素）篩選試驗，能夠預測氨芐西林、青霉素或萬古霉素與一種氨基糖苷類抗生素之間的協同效應。其它的氨基糖苷類不需進行測試，因為它們對腸球菌的活性并不優于慶大霉素和鏈霉素。(4)對于某些微生物/抗菌藥物組合，尚不存在或罕見耐藥株，因此，除了“ 敏感” 以外沒有標明任何其他類型。如果菌株的結果提示“ 非敏感” ，應確證菌株鑒定和抗菌藥物敏感性試驗結果 (見附錄 A)。(5) 氨芐西林是氨芐西林和阿莫西林的代表藥。氨芐西林的結果可用于預報不產- 內酰胺酶的腸球菌對阿莫西林/克拉維酸、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦敏感性。假如菌株被

22、確認為糞腸球菌，氨芐西林敏感性能用于預報對亞胺培南的敏感性。(6)對青霉素敏感非產- 內酰胺酶腸球菌可預報其對氨芐西林、阿莫西林、氨芐西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林和哌拉西林/他唑巴坦敏感。然而，對氨芐西林敏感腸球菌不能推定其對青霉素敏感。假如需要青霉素結果，必須對青霉素進行試驗。(7)Rx:對嚴重的腸球菌感染，如心內膜炎，需要氨芐西林、青霉素或萬古霉素（敏感株）加一種氨基糖苷類藥物進行聯合治療，除非證明其對慶大霉素和鏈霉素高水平耐藥，上述藥物聯合對腸球菌可起到協同殺菌效果。(8)在腸球菌中，因產b- 內酰胺酶導致的對青霉素或氨芐西林耐藥較少報道。用常規紙片法或稀釋法不能可靠檢測出

23、因產b- 內酰胺酶而致青霉素或氨芐西林耐藥，但可使用直接的頭孢硝噻吩b- 內酰胺酶試驗進行檢測。由于罕見b- 內酰胺酶陽性腸球菌，常規不需要做此試驗，但可用于選擇性病例。b- 內酰胺酶試驗陽性預報菌株對青霉素、氨基和脲基青霉素耐藥 (見術語表I)。萬古霉素(9) 當測試腸球菌對萬古霉素敏感性時，為準確檢測耐藥性，應將平板孵育24h。使用透射光檢測抑菌圈；在抑菌圈內出現霧狀或任何生長表示耐藥。具中介抑菌圈菌株應根據CLSI文件M07-A9描述進行MIC試驗。對萬古霉素MICs 8-16mg/mL菌株，執行生化試驗來鑒別表2D后的表2D補充表1中“ 萬古霉素耐藥” 欄下列出的菌種。(10)分離于呼

24、吸道的菌株不報告達托霉素結果。紅霉素(11) 分離于泌尿道菌株不常規報告。四環素類(12)對四環素敏感菌株也被認為對多西環素和米諾環素敏感，但是，對四環素中介或耐藥的某些株可以對多西環素或米諾環素或二者敏感。(14)Rx:利福平不能單獨用于抗菌治療。.磷霉素(15)僅用于泌尿道分離的糞腸球菌。(16)認可的MIC試驗方法是瓊脂稀釋法。瓊脂培養基中應補充25g/ml 6-磷酸葡萄糖。不能使用肉湯稀釋法。(17) 200-mg 磷霉素紙片中含50mg 6-磷酸葡萄糖。流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌抑菌圈直徑和MIC解釋標準試驗條件培養基：紙片擴散法：嗜血桿菌試驗培養基 (HTM)肉湯稀釋法：HTM肉

25、湯接種物：直接菌落懸液法：相當于0.5麥氏標準，從孵育過液(20-24h更適宜)巧克力平板上挑取菌落進行制備 見注釋(2)孵 育： 35±2°C紙片擴散法： 5% CO2； 16-18 h肉湯稀釋法：空氣環境；20-24 h(1)此表中使用的嗜血桿菌僅包括流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌。其他嗜血桿菌試驗和報告建議見CLSI文件M45。(2) 0.5 McFarland菌懸液近似14×10 8 CFU/mL。由于高接種物濃度可致某些- 內酰胺類藥物出現假耐藥結果，尤其試驗產- 內酰胺酶流感嗜血桿菌，建議使用者仔細練習制備菌懸液。(3)對于紙擴散法，直徑150-mm平板

26、最大放置9只紙片，直徑100-mm平板放置4只紙片進行試驗。測量抑菌圈直徑 (用肉眼判讀)，包括紙片直徑。保持平板在反射光照明、非反射黑的背景上方幾英寸。肉眼觀察無明顯可見生長的地區作為抑菌環邊緣。在抑菌環邊緣借助放大鏡才能觀察到的微小菌落生長可忽略不計。由于培養基中可能存在拮抗劑，甲氧芐啶和磺胺類藥物抑菌環內可允許出現菌株輕微生長；因此，在測量抑菌環直徑時可忽視輕微生長（20%或較少的菌苔）而測量較明顯抑制的邊緣。(4)從CSF中分離的流感嗜血桿菌，常規只測試氨芐西林、一種三代頭孢菌素、氯霉素和美羅培南的藥敏結果并適當報告。(5)阿莫西林/克拉維酸、阿奇霉素、克拉霉素、頭孢克羅、頭孢丙烯、氯

27、碳頭孢、頭孢地尼、頭孢克肟、頭孢泊肟、頭孢呋辛和泰利霉素均是口服藥物，可用于嗜血桿菌引起的呼吸道感染的經驗治療。這些抗菌藥物的藥敏試驗結果對個體患者的管理用處不大，但是，適用于對嗜血桿菌屬耐藥性監測及流行病學調查。(6) HTM制備：首先把50 mg氯化血紅素粉溶解在100 mL 0.01 mol/L NaOH溶液中，加熱攪拌至完全溶解，制成新鮮的氯化血紅素原液。再將 30 mL氯化血紅素原液加到 1 L含 5 g酵母粉的 Mueller-Hinton瓊脂 (MHA)中，高壓滅菌并冷卻后，無菌手續加入3 mL NAD原液 (50 mg NAD溶解在 10 mL蒸餾水中，過濾除菌)。(7)對于某

28、些微生物/抗菌藥物組合，尚不存在或罕見耐藥株，因此，除了“敏感”以外沒有標明任何其他類型。如果菌株的結果提示“ 非敏感” ，應再確證微生物鑒定和抗菌藥物敏感性試驗結果。(8)氨芐西林敏感性試驗結果可用于預報阿莫西林的活性。大部分耐氨芐西林和阿莫西林的流感嗜血桿菌可產生TEM-型b- 內酰胺酶。大多數情況下，直接b- 內酰胺酶試驗可以快速檢測對氨芐西林和阿莫西林的耐藥性。(9)BLNAR流感嗜血桿菌罕見，這類菌應當被認為對阿莫西林/克拉維酸、氨芐西林/舒巴坦、頭孢克羅、頭孢孟多、頭孢他美、頭孢尼西、頭孢丙烯、頭孢呋辛、氯碳頭孢和哌拉西林/他唑巴坦耐藥，即使某些BLNAR菌株對上述藥物在體外顯示為

29、敏感。四環素類(12)對四環素敏感的菌株也被認為對多西環素和米諾環素敏感。氯霉素(13)從泌尿道分離菌株不常規報告。(14)利福平僅適用于接觸者預防。此解釋標準不適用于流感嗜血桿菌侵襲性疾病患者的治療。淋病奈瑟菌抑菌圈直徑和 MIC解釋標準試驗條件培養基：紙片擴散法：GC瓊脂基礎1%特定的生長添加劑。 (紙片擴散法不需要使用無半胱氨酸的生長添加劑)。瓊脂稀釋法：GC瓊脂基礎1%特定的生長添加劑。 (瓊脂稀釋法測碳青霉烯類和克拉維酸時需要使用無半胱氨酸的生長添加劑。含半胱氨酸的生長添加劑對稀釋法測定其他藥物結果影響不顯著)。接種物：直接菌落懸液法，在 MHB或0.9%磷酸緩沖鹽水（pH 7.0）

30、中，使用巧克力瓊脂平板5% CO 2 環境孵育過夜(20-24h)生長的菌落制備，濁度相當于 0.5麥氏標準。孵育：36±1°C (不超過37°C)； 5% CO2 ；所有方法，20-24h(1)對于紙片擴散法，直徑150-mm平板最大放置9只紙片，直徑100-mm平板放置4只紙片進行試驗。對某些藥物，如, 喹諾酮類或頭孢菌素類，每只平板只能放置23只紙片進行測試。測量抑菌圈直徑（用肉眼判讀），包括紙片直徑。保持平板在反射光照明、非反射黑的背景上方幾英寸，肉眼觀察無明顯可見生長的地區作為抑菌環邊緣。在抑菌環邊緣借助放大鏡才能觀察到的微小菌落生長可忽略不計。(2)用

31、體外試驗呈現產生“ 中介” 結果的頭孢美唑、頭孢替坦、頭孢西丁和大觀霉素治療淋病瑟奈菌感染的臨床療效是未知的。(3)紙片擴散法測試淋病瑟奈菌，某種抗菌藥物試驗結果是“ 中介” ，提示或是技術問題，需要重復試驗，或者是在處理具有上述抑菌圈的菌株時缺乏臨床經驗。對于頭孢美唑、頭孢替坦、頭孢西丁和大觀霉素以外的藥物產生“ 中介” 的菌株，已有文獻報道其臨床治愈率(85%-95%)低于敏感菌株治愈率(>95%)。(4)推薦的測試淋病奈瑟菌的培養基是含1%特定的生長添加劑的GC瓊脂。此添加劑(1升水中加入1.1g L-半胱氨酸、0.03g鹽酸鳥嘌呤、3mg鹽酸硫胺、13mg對氨基苯甲酸(PABA)

32、、 0.01g維生素B12、 0.1g輔羧酶、0.25gNAD、 1.0g腺嘌呤、10g L-谷氨酰胺、100g葡萄糖和0.02g硝酸鐵)是在GC瓊脂高壓滅菌后加入。(5)對于某些微生物/抗菌藥物組合，尚不存在或罕見耐藥株，因此，除了“ 敏感” 以外沒有標明任何其他類型。如果菌株的結果提示“ 非敏感” ，應確證菌株鑒定和抗菌藥物敏感性試驗結果 (見附錄A)。(6)- 內酰胺酶陽性可預報分離菌株對青霉素、氨芐西林和阿莫西林耐藥。(7)- 內酰胺酶試驗可檢測淋病奈瑟菌對青霉素的一種耐藥機制，也可以提供流行病學信息。染色體介導的耐藥僅可通過紙片擴散法或瓊脂稀釋MIC法檢測出來。(8)淋病奈瑟菌對10

33、單位的青霉素紙片抑菌圈直徑19mm，很可能是產生- 內酰胺酶的菌株。但由于- 內酰胺酶試驗可快速、準確檢出這種質粒介導的青霉素耐藥性，所以優于其它敏感性試驗方法。(10)淋病奈瑟菌對30mg 四環素紙片抑菌圈直徑£19mm，常提示這是一株質粒介導的四環素耐藥的淋病奈瑟菌(TRNG)。此菌株的耐藥性應用稀釋試驗(MIC³ 16mg/mL)來確證。肺炎鏈球菌抑菌圈直徑和 MIC解釋標準試驗條件培養基：紙片擴散法：含5%綿羊血MHA肉湯稀釋法：含 LHB (2.5- 5% v/v) CAMHB(見 M07-A9 LHB制備說明)瓊脂稀釋法：含綿羊血(5% v/v)MHA；藥敏試驗

34、分委會近期未對瓊脂稀釋法進行研究和評估。接種物：直接菌落懸液法，相當于0.5麥氏標準，使用綿羊血平板上過夜 (18-20h)生長菌落制備。孵育：35 ± 2°C紙片擴散法： 5% CO2； 20-24 h稀釋法：空氣環境；20-24 h(瓊脂稀釋法需要放CO 2 環境)(1)對于紙片擴散法，直徑150-mm平板最大放置9只紙片，直徑100-mm平板放置4只紙片進行試驗。測量抑菌圈直徑 (用肉眼判讀)，包括紙片直徑。肉眼觀察無明顯可見生長的地區作為抑菌環邊緣。不測量溶血抑制圈。移去平板蓋反射光照明瓊脂平板，從平板表面上方測量抑菌環直徑。在抑菌環邊緣借助放大鏡才能觀察到的微小菌

35、落生長可忽略不計。由于培養基中可能存在拮抗劑，甲氧芐啶和磺胺類藥物抑菌環內可允許出現菌株輕微生長；因此，在測量抑菌環直徑時可忽視輕微生長（20%或較少的菌苔）而測量較明顯抑制的邊緣。(2)阿莫西林、氨芐西林、頭孢吡肟、頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢呋辛、厄他培南、亞胺培南和美羅培南可用于肺炎鏈球菌引起感染的治療；然而，對這些藥物紙片擴散法敏感試驗檢測結果不可靠。最好用MIC方法測定這些藥物的體外活性。(3)從腦脊液中分離的肺炎鏈球菌應當使用可靠的MIC方法(如CLSI M07-A9文件所描述)測試青霉素、頭孢噻肟或頭孢曲松、美羅培南，并常規報告。對萬古霉素的敏感性可使用MIC或紙片法來測定。(4)對

36、于某些微生物/抗菌藥物組合，尚不存在或罕見耐藥株，因此，除了“ 敏感” 以外沒有標明任何其他類型。如果菌株的結果提示“ 非敏感” ，應確證菌株鑒定和抗菌藥物敏感性試驗結果(見附錄A)。青霉素類(5)對于非腦膜炎分離株, 青霉素MIC0.06mg/mL (或苯唑西林抑菌圈直徑20 mm)能預報對下列- 內酰胺類藥物的敏感性：氨芐西林(口服或注射)、氨芐西林- 舒巴坦、阿莫西林、阿莫西林- 克拉維酸、頭孢克羅、頭孢地尼、頭孢托侖、頭孢吡肟、頭孢噻肟、頭孢泊肟、頭孢丙烯、頭孢洛林、頭孢唑肟、頭孢曲松、頭孢呋辛、多利培南、厄他培南、亞胺培南、氯碳頭孢、美羅培南和青霉素 (口服或注射)。(6)苯唑西林抑

37、菌圈直徑³ 20 mm肺炎鏈球菌對青霉素是敏感的(MIC£ 0.06mg/mL)。苯唑西林抑菌圈直徑 19 mm分離株，應測定青霉素和頭孢噻肟或頭孢曲松或美羅培南MICs。由于抑菌圈直徑 19 mm可發生在青霉素耐藥、中介或某些敏感菌株中。苯唑西林抑菌圈直徑 19 mm分離株，未測定青霉素MIC，則不報告青霉素耐藥。青霉素注射劑(非腦膜炎) (7) Rx: 青霉素MICs 2 µg/mL肺炎鏈球菌引起的非腦膜炎感染的治療，腎功能正常成年人每4h靜脈給藥至少200萬單位(每天1200萬單位)。 MIC為4µg/mL中介株，每天需1800-2400萬單位青霉

38、素劑量。(8) CSF外分離的所有菌株，應按腦膜炎和非腦膜炎解釋標準報告結果。青霉素注射劑(腦膜炎) (9) Rx: 使用青霉素治療腦膜炎，需用最大劑量靜脈給藥進行治療(如，腎功能正常成年人每4h靜脈給藥至少300萬單位)。(15)Rx: 使用頭孢噻肟和頭孢曲松治療腦膜炎需用最大劑量。大環內酯類(18)測試紅霉素可以預報菌株對阿奇霉素、克拉霉素和地紅霉素的敏感和耐藥性。(19)從泌尿道分離的菌株不常規報告。四環素類(20)對四環素敏感菌株被認為對多西環素和米諾環素也敏感。(21)對左氧氟沙星敏感肺炎鏈球菌分離株可預報其對吉米沙星和莫西沙星敏感。然而，對吉米沙星和莫西沙星敏感肺炎鏈球菌不能推定其

39、對左氧氟沙星敏感。- 溶血鏈球菌抑菌圈直徑和MIC解釋標準試驗條件培養基：紙片擴散法：含5%綿羊血MHA肉湯稀釋法：含 LHB (2.5% to 5% v/v)CAMHB； CAMHB需補充 50 µg/mL鈣用于達托霉素 (見 M07-A9 LHB制備說明)瓊脂稀釋法：含綿羊血(5% v/v) MHA； 藥敏試驗分委會近期未對瓊脂稀釋法進行研究和評估。接種物：直接菌落懸液法，相當于0.5麥氏標準，使用綿羊血平板上過夜 (18- 20h)生長菌落制備。孵育： 35±2°C;紙片擴散法： 5% CO 2； 20-24 h稀釋法：空氣環境； 20-24 h (瓊脂稀釋

40、法需放CO 2 環境)(1)對于紙片擴散法，直徑150-mm平板最大放置9只紙片，直徑100-mm平板放置4只紙片進行試驗。測量抑菌圈直徑 (用肉眼判讀)，包括紙片直徑。肉眼觀察無明顯可見生長的地區作為抑菌圈邊緣。不測量溶血抑制圈。移去平板蓋反射光照明瓊脂平板，從平板表面上方測量抑菌圈直徑。在抑菌圈邊緣需借助放大鏡才能觀察到的微小菌落生長可忽略不計。(2)本表中，- 溶血群包括具有A (化膿鏈球菌)、 C或 G群抗原形成較大菌落的化膿性鏈球菌及具有B群(無乳鏈球菌)抗原的菌株。具有A、 C、 F或G群抗原（咽峽炎鏈球菌，以前稱為“ 米勒鏈球菌” ）形成較小菌落- 溶血的菌株被分到草綠色鏈球菌中

41、。應使用草綠色鏈球菌解釋標準 (見表2H-2)。(3)青霉素和氨芐西林可用于治療- 溶血鏈球菌感染的選擇用藥。由于在- 溶血鏈球菌中非敏感株(即，青霉素MICs0.12和氨芐西林MICs>0.25g/ml)極其罕見，在化膿鏈球菌中還未見報道, 因此，FDA批準用于治療- 溶血鏈球菌感染的青霉素和其他- 內酰胺類藥物，在臨床常規工作中不需要進行敏感性試 驗。假如試驗時發現任何非敏感- 溶血鏈球菌菌株應重新鑒定和試驗，如果確證為非敏感株，應送交公共衛生實驗室（進一步說明見附錄A）。(4)- 溶血鏈球菌的解釋標準是基于各菌種的群體分布、抗菌藥物的藥代動力學、以前出版的文獻以及分會某些委員的臨床

42、經驗基礎上提議的。對許多藥物還沒有系統地收集到臨床數據用于折點的評估。(5)對于某些微生物/抗菌藥物組合，尚不存在或罕見耐藥株，因此，除了“ 敏感” 以外沒有標明任何其他類型。如果菌株的結果提示“ 非敏感” ，應確證菌株鑒定和抗菌藥物敏感性試驗結果(見附錄A)。青霉素類(6)對下列菌群，青霉素敏感的菌株可認為對下列抗菌藥物也敏感，當這些藥物用于其批準的指征時，不需要再測試這些藥物。- 溶血鏈球菌 (A、 B、 C、 G群): 氨芐西林、阿莫西林、阿莫西林/克拉維酸、氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑啉、頭孢吡肟、頭孢拉定、頭孢噻吩、頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢唑肟、亞胺培南、厄他培南和美羅培南。此外，僅對

43、A群鏈球菌還包括：頭孢克羅、頭孢地尼、頭孢丙烯、頭孢布烯、頭孢呋辛、頭孢泊肟和頭孢匹林。(8)分離于呼吸道菌株不報告達托霉素結果。大環內酯類(9)測試紅霉素可以預報菌株對阿奇霉素和地紅霉素的敏感和耐藥性。(10)從泌尿道分離的菌株不常規報告。(11)Rx: 分娩期婦女預防B群鏈球菌感染用藥，推薦用青霉素或氨芐西林。低危險性青霉素過敏的婦女推薦用頭孢唑啉，而高危險青霉素過敏者，建議使用克林霉素。青霉素、氨芐西林和頭孢唑啉敏感的B群鏈球菌，可對克林霉素和/或紅霉素耐藥。因此，當從青霉素嚴重過敏（高危過敏）的妊娠婦女分離到B群鏈球菌時，應對紅霉素和克林霉素 (包括誘導型克林霉素耐藥)進行試驗, 并僅

44、報告克林霉素結果。四環素類(12)對四環素敏感的菌株被認為對多西環素和米諾環素也敏感。(13)誘導型克林霉素耐藥可通過使用D-抑菌圈紙片擴散法和肉湯微量稀釋試驗來檢測。草綠色溶血鏈球菌抑菌圈直徑和MIC解釋標準試驗條件培養基：紙片擴散法：含5%綿羊血MHA肉湯稀釋法：含 LHB (2.5% to 5% v/v)CAMHB； CAMHB需補充50 µg/mL鈣用于達托霉素 (見M07-A9 LHB制備說明)瓊脂稀釋法：含綿羊血(5% v/v)MHA； 藥敏試驗分委會近期未對瓊脂稀釋法進行研究和評估。接種物：直接菌落懸液法，相當于 0.5麥氏標準，使用綿羊血平板上過夜 (18- 20h)

45、生長菌落制備。孵育： 35±2°C;紙片擴散法：5% CO 2； 20-24 h稀釋法：空氣環境；20 -24 h (瓊脂稀釋法需放CO 2 環境)(1)對紙片擴散法，測量抑菌圈直徑 (用肉眼判讀)，包括紙片直徑。肉眼觀察無明顯可見生長的地區作為抑菌圈邊緣。不測量溶血抑制圈。移去平板蓋反射光照明瓊脂平板，從平板表面上方測量抑菌圈直徑。在抑菌圈邊緣需借助放大鏡才能觀察到的微小菌落生長可忽略不計。(2)草綠色鏈球菌包括下列五個群，每群中含有幾個菌種：變異鏈球菌群、唾液鏈球菌群、牛鏈球菌群、 咽峽炎鏈球菌群 (以前的" 米勒鏈球菌"群)和緩癥鏈球菌群。咽峽炎鏈

46、球菌群包括具有A、 C、 F和 G抗原形成小菌落的- 溶血鏈球菌。每群中所包括菌種的詳細信息，請參見最近的臨床微生物學文獻。(3)非肺炎鏈球菌的其他鏈球菌的解釋標準是基于各菌種的群體分布、抗菌藥物的藥代動力學、以前出版的文獻以及分會某些委員的臨床經驗基礎上提議的。對許多藥物還缺乏系統的臨床數據用于評估其折點。(4)對于某些微生物/抗菌藥物組合，尚不存在或罕見耐藥株，因此，除了“ 敏感” 以外沒有標明任何其他類型。如果菌株的結果提示“ 非敏感” ，應確證菌株鑒定和抗菌藥物敏感性試驗結果(見附錄A)。(5)分離于正 常 無菌部位的草綠溶血鏈球菌(如，CSF、血液和骨髓)應使用MIC法測試青霉素的敏

47、感性。(6)Rx:青霉素或氨芐西林中介菌株，需與一種氨基糖苷類藥物聯合進行治療，起殺菌作用。大環內酯類(8)測試紅霉素可以預報菌株對阿奇霉素、克拉霉素和地紅霉素的敏感和耐藥性。(9)從泌尿道分離的菌株不常規報告。四環素類(10)對四環素敏感菌株被認為對多西環素和米諾環素也敏感。腦膜炎奈瑟菌抑菌圈直徑和MIC解釋標準試驗條件培養基：紙片擴散法：含5%綿羊血 MHA肉湯微量稀釋法：補充LHB (2.5% to 5% v/v) (見 M07-A9 LHB制備)的CAMHB瓊脂稀釋法：補充綿羊血 (5% v/v)的MHA接種物：直接菌落懸液法，從巧克力瓊脂上挑取35°C孵育20-24 h菌落

48、制備；5% CO2 ；相當于0.5麥氏標準。綿羊血平板上生長的菌落可用于接種物的制備。然而，從綿羊血平板制備0.5麥氏標準菌懸液，實際含量大約低于50% CFU/mL。在制備最終稀釋濃度接種板條前，應按要求進行菌落計數孵 育： 35±2°C； 5% CO2； 20-24h。(1)警告：應在生物安全柜（BSC）中執行所有腦膜炎奈瑟菌對抗菌藥物敏感性試驗。在BSC外制作腦膜炎奈瑟菌菌懸液罹患腦膜炎球菌疾病風險增高。實驗室獲得性腦膜炎球菌疾病有50%致死率。暴露于含腦膜炎奈瑟菌液滴或氣溶膠是實驗室獲得性感染最可能的風險因素。當對腦膜炎奈瑟菌分離株執行微生物學程序時(包括AST)，要求操作人員嚴防液滴或氣溶膠。(2)假如無BSC，應盡量減少對這種分離菌處理