1、不同時點分別結扎左、右頸總動脈建立大鼠血管性癡呆模型    None but a wise man can employ leisure well.                      作者：黃新武 李華 秦大蓮 陳美娟 張紅 章卓【摘要】  目的 改良大鼠血管性

2、癡呆（VD）雙側頸總動脈永久性結扎模型，提高模型動物存活率。方法 采取間隔3 d分2次結扎雙側頸總動脈建立VD模型，觀察大鼠的成活率，及術后4 w和8 w學習記憶能力變化。結果 改良模型組動物存活率（96.0%）明顯高于傳統模型。術后4 w和8 w，該模型組大鼠學習記憶能力障礙明顯，顯著低于假手術對照組()。結論 間斷永久性結扎雙側頸總動脈法是建造大鼠VD模型的理想方法。 Everybody's business is nobody's business.  【關鍵詞】 

3、; 動物模型；血管性癡呆；Morris水迷宮；大鼠永久性結扎雙側頸總動脈模型是血管性癡呆（VD）研究中常用的模型之一1，該模型較好地模擬了人類因動脈粥樣硬化、動脈管腔狹窄等因素導致的VD。而且，永久性結扎雙側頸總動脈導致VD的老年大鼠在術后2個月學習記憶能力仍無恢復趨勢，這有利于藥物療效的動態觀察，是VD研究的常用模型。傳統方法因雙側頸總動脈同時永久性結扎，對動物創傷大，死亡率高，導致實驗成本升高，標本獲取困難，實驗周期延長。本文擬對傳統方法進行改良，探討不同時點分別結扎左、右頸總動脈建立VD模型的成功率。1  材料與方法1.1  動物及儀器&

4、#160;God defend me from my friends; form my enemy I can defend myself.  健康雄性SD大鼠80只， 24月齡以上老年大鼠，體重（320±20）g，由瀘州醫學院實驗動物科提供，為1級合格動物，動物合格證號：2401115。      MT200 Morris水迷宮視頻分析系統，成都泰盟科技有限公司生產(醫藥學/臨床醫學論文 )。I know no such thing as genius, it is nothing but labour

5、 and diligence.  1.2  實驗方法 Joy put heart into a man.  大鼠隨機分為假手術對照組（30只）、模型組（50只）。具體實驗方法如下：模型組，大鼠術前12 h禁食，自由飲水。用1戊巴比妥鈉（3 ml/kg）腹腔注射麻醉大鼠，將大鼠仰臥位固定于鼠臺，頸部皮膚剪毛備皮，碘伏酒精常規消毒。切口位于頸正中線左側旁開0.5 cm處，長約1 cm。鈍性分離皮下組織后，于切口正下方的斜方肌與氣管夾角處可見左側頸總動脈搏動。分離出左側頸總動脈后，以4號絲線雙重結扎。術中動作輕

6、柔，避免鉗夾和過分牽拉迷走神經，注意無菌原則。行間斷縫合。術后3 d每天以碘酒消毒傷口及周圍皮膚。術后第4天，于頸正中線右側旁開0.5 cm處切開，分離并雙重結扎右側頸總動脈，其余操作同前。假手術對照組：雙側頸總動脈不結扎，余同模型組。1.3  指標測定 術后觀察大鼠一般情況及成活率，于術后4 w及8 w分別檢測學習記憶成績。使用Morris水迷宮對大鼠進行學習記憶能力的測定2。Morris水迷宮實驗分為兩部分： 定位航行實驗：用于測量大鼠對水迷宮學習和記憶的獲取能力。實驗歷時6 d，第1天讓大鼠自由游泳

7、2 min；從第2天起，每天分上、下午兩段，每段訓練4次。訓練時隨機選擇一個入水點，將大鼠面向池壁放入水中， 系統自動記錄大鼠尋找并爬上平臺時所需時間(逃避潛伏期)及運動軌跡，每次訓練間隔為60 s。如果大鼠在120 s內未找到平臺，須將其引至平臺，這時潛伏期計為120 s。空間搜索實驗：在第6天最后一次訓練后撤除水下平臺，在同一入水點將大鼠面向池壁放入水中，系統自動記錄其在120 s內跨過原平臺相應位置的次數及運動軌跡。1.4  統計學分析 Quality is better than quantity

8、.  計量資料以x±s表示，使用SPSS13.0軟件進行單因素方差分析。Nature is the glass reflecting truth.  2  結  果    模型組術后死亡2只，其余全部存活，存活率96.0%，一般情況良好。術后4 w和8 w，與對照組比較，模型組大鼠逃避潛伏期均明顯延長，在120 s內穿越平臺的次數明顯減少（P<0.05）。模型組在4 w和8 w之間比較差異無統計學意義。見表1、表2、表3。表1&#

9、160; 4 w大鼠在不同時間平均逃避潛伏期的比較(略)表2  8 w大鼠在不同時間平均逃避潛伏期的比較(略)表3  空間搜索實驗120 s通過平臺次數(略)Throw away the apple because of the core.  3  討  論Answer a fool according to his folly.      VD是由一系列腦血管因素導致腦組織損害引起的癡呆綜合征。患者表現為記憶及認知

10、等功能障礙綜合征，不僅嚴重損害患者的健康，影響患者的生命質量，也給家庭和社會帶來沉重的負擔。在我國11個城市流行病學調查結果發現，60歲以上人群中VD的患病率為324/10萬人口，老年性癡呆（AD）為238/10萬人口，VD占各類癡呆的第一位。VD患者的平均生存時間為41個月，5年內死亡率達60以上3。并且隨著人類社會的老齡化，VD已是國內外醫學界研究的重要課題，由于對本病的發病機制尚不十分明確，亦缺少治療本病的特效藥物，因此建立理想的VD動物模型對于探明VD的病因、病理過程以及尋找和篩選防治藥物具有重要意義。    永久性結扎雙側頸總動脈建立VD模型是

11、VD研究中常用的模型之一。有文獻報道報道，該模型動物死亡率極高，存活率僅為12.5%4，本實驗組在以往實驗中采用該模型5發現的動物存活率也極低，實驗成本加大，周期較長，給研究帶來很多困難。而間斷永久性結扎雙側頸總動脈改良模型大鼠恢復蘇醒快，死亡率低，動物存活率高達96.0%。蘇醒后對其進食和活動的影響也較小。通過Morris水迷宮檢測，模型組大鼠逃避潛伏期明顯延長，在規定時間內穿越平臺的次數明顯減少，空間記憶障礙明顯，成功建造了大鼠癡呆模型，并且分別在術后4及8 w檢測學習記憶能力無明顯變化，說明模型穩定。其優點有：間斷永久性結扎雙側頸總動脈改良模型采取頸正中線旁切口，利于分離頸總動

12、脈，減少了對迷走神經的牽拉和損傷；分次結扎，有利于腦部血流重新分配，腦部血供重新建立，機體逐漸代償適應；這種模型更接近臨床上常見的腦部慢性缺血的病理過程。因此認為，采取間斷永久性結扎雙側頸總動脈可以成功建立VD模型，且較傳統雙側頸總動脈同時永久性結扎建立VD模型更理想。【參考文獻】  1 蔡 晶，杜 建.血管性癡呆動物模型的制作方法及其評價J.中醫藥學刊，2002；20(5):617.2 Vorhees CV，Williams MT.Morris water maze：procedures for assessing spatial and related forms of learning and memoryJ.Nature Protocols，2006；1(2)：848.3 Bomebroke M,Breteler NM.Epidemiology of nonAD dementiasJ.Clin Neur