1、單元滾動檢測(十)生物技術實踐(時間:60分鐘分值:100分)測控導航表知識點題號及難易度1.果酒和果醋的制作1,2(中),3(中),212.微生物的實驗室培養4,5(中),6,223.土壤中分解尿素的細菌的分離與計數7,8(中),9,23(中)4.菊花的組織培養10,11,12(中)5.果膠酶在果汁生產中的應用13,14,15,24(中)6.血紅蛋白的提取和分離16(中),17,187.胡蘿卜素的提取19,20一、選擇題:本題共20小題,每小題3分,共60分。1.(2013成都高新區檢測)對制葡萄酒和葡萄醋發酵條件的控制中,下列敘述錯誤的是(B)A.葡萄汁裝入發酵瓶時,要留有1/3的空間B.

2、用清水沖洗葡萄除去污物,應反復多次沖洗C.制葡萄酒的過程中,除在適宜的條件下,時間應控制在1012 d左右D.制葡萄醋的溫度要比制葡萄酒的溫度高些,但時間一般控制在78 d左右解析:酵母菌進行發酵產生酒精時會釋放CO2,因此發酵瓶要留有1/3的空間;釀制葡萄酒的酵母菌菌種來源于葡萄皮上的酵母菌,因而不能反復沖洗葡萄;制葡萄酒的時間一般為1012 d左右,制葡萄醋的溫度要比制葡萄酒的溫度高些,但時間一般控制在78 d左右。2.(2013南充檢測) 在“果醋制作過程”中,獲得較多的醋酸菌菌種的最簡便方法是(A)A.從變酸的葡萄酒表面獲得菌膜,再培養、分離B.不必人為加入菌種,在葡萄等水果表面本身就

3、存在大量醋酸菌C.從泡菜壇蓋邊沿的水槽中的表面獲得菌膜,再培養、分離D.從土壤中分離提取解析:變酸的葡萄酒表面菌膜中含大量醋酸菌,通過培養、分離可以較易獲得較多的醋酸菌菌種。3.用葡萄制作果酒和果醋是一個連續的過程,下列有關敘述中,錯誤的是(A)A.制作果酒和果醋的連續過程中要保持溫度恒定B.制作葡萄酒的過程中,要定時擰松瓶蓋放出CO2C.葡萄酒的自然發酵中,起主要作用的是野生型酵母菌D.變酸的酒表面常有一層由醋酸菌大量繁殖而形成的菌膜解析:果酒制作時,酒精發酵一般將溫度控制在1825 ,在無氧條件下;而果醋制作將溫度控制在3035 條件下,適時充氣。4.(2014樂山檢測)下列有關微生物的培

4、養或純化的敘述,錯誤的是(C)A.微生物在培養前要先對培養基進行滅菌處理再接種B.培養液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途徑C.分離自養型微生物的方法是用以纖維素作為唯一碳源的培養基D.分離純化微生物的常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法解析:微生物在培養前要先對培養基進行滅菌處理再接種,以免造成雜菌污染;酵母菌是兼性厭氧菌,因此培養液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途徑;分離纖維素分解菌的方法是用以纖維素作為唯一碳源的培養基;分離純化微生物的常用方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。5.分離純化大腸桿菌最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。下列有關這兩種方法的敘述錯誤的是(B)A

5、.均將大腸桿菌接種在固體培養基的表面B.獲得的每個菌落均是由一個細菌繁殖而來的子細胞群C.都應在火焰附近進行操作,以防止雜菌污染D.稀釋分散菌種的原理不同,均能達到分離純化大腸桿菌的目的解析:本題考查平板劃線法和稀釋涂布平板法。用稀釋涂布平板法時,如果稀釋得當,在平板表面(或瓊脂培養基上)就可出現分散的單個菌落,這個菌落可能是由一個細菌細胞繁殖形成的。6.為了保持菌種的純凈,需要進行菌種的保藏,下列有關敘述不正確的是(D)A.對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時保藏的方法B.臨時保藏的菌種一般是接種到試管的固體斜面培養基上C.臨時保藏的菌種容易被污染或產生變異D.對于需要長期保存的菌種,可以采用低

6、溫-4 保藏的方法解析:對于需要長期保存的菌種,可采用甘油管藏法,即在3 mL甘油瓶中加入1 mL甘油后滅菌,將1 mL菌液轉移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在-20 的冷凍箱中保存。7.(2014廣東深圳調研)某學者欲研究被石油污染過的土壤中細菌數量,并從中篩選出能分解石油的細菌。下列操作錯誤的是(A)A.利用平板劃線法對細菌進行計數B.用以石油為唯一碳源的培養基篩選C.采用稀釋涂布平板法分離菌種D.稱取和稀釋土壤樣品時應在火焰旁解析:分離細菌常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法,但平板劃線法不能對細菌進行計數;篩選能分解石油的細菌,要以石油作為培養基中唯一的碳源;篩選細菌的整個操作過程

7、都需要在無菌條件下進行,所以應在火焰旁進行。8.下列說法錯誤的是(C)A.因為土壤中各類微生物的數量不同,所以為獲得不同類型的微生物,要按不同的稀釋倍數進行分離B.測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數量,選用的稀釋范圍不同C.只有得到了3個或3個以上菌落數目在30300的平板,才說明稀釋操作比較成功,并能夠進行菌落的計數D.牛肉膏蛋白胨培養基的菌落數明顯大于選擇培養基的菌落數目,說明選擇培養基已篩選出一些菌落解析:樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落數目,土壤中各類微生物數量不同,含量最多的是細菌,其次是放線菌,最少的是真菌,所以為獲得不同類型的微生物,要按不同稀釋倍數進行分離

8、;在同一稀釋度下只要得到兩個或兩個以上的菌落數目在30300的平板,就說明稀釋操作比較成功,并能夠進行菌落的計數;驗證選擇培養基是否具有選擇作用,需設立牛肉膏蛋白胨培養基作為對照,若后者上的菌落數明顯大于前者,說明前者具有篩選作用。9.(2014樂山質檢)可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是(A)A.以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑B.以尿素為唯一氮源的培養基中加入二苯胺試劑C.以尿素為唯一氮源的培養基中加入剛果紅試劑D.以尿素為唯一氮源的培養基中加入雙縮脲試劑解析:尿素在尿素分解菌的作用下分解產生氨,氨會使培養基的堿性增強,pH升高,酚紅指示劑變紅。10.在菊花的組織培養操作完成34天后

9、,觀察同一溫室中的外植體,發現有的瓶內外植體正常生長,有的瓶內外植體死亡,你認為外植體死亡的原因不可能是(A)A.培養條件,比如光照、溫度等不適宜B.接種時外植體未消毒C.接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體D.將外植體倒插入培養基中解析:同一溫室的培養條件都是一樣的。11.(2014資陽質檢)植物組織培養依據的原理、培養過程的順序及誘導的植物激素分別是(B)細胞的全能性離體植物器官、組織或細胞根、芽生長素和細胞分裂素生長素和乙烯愈傷組織再分化脫分化植物體A.、B.、C.、D.、解析:植物組織培養依據的原理為植物細胞的全能性;培養過程的順序是離體植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織,再分化形成

10、根、芽等進而形成新的植物體,誘導的植物激素是生長素和細胞分裂素。12.分別將未分化細胞群培養在植物激素X和植物激素Y 濃度比不同的培養基中,未分化細胞群的變化情況如圖所示。據圖分析下列敘述正確的是(D)A.植物激素X是生長素B.植物激素Y可誘導芽的生成C.實驗用的材料未分化細胞群可來自不同種植物D.激素X和Y濃度比為1時細胞不能分化解析:據圖可知,當激素X和Y 濃度比為1時,未分化細胞群形成愈傷組織,不能分化,D正確;當激素X 和Y 濃度比大于1時,細胞群分化出芽,故激素X 是細胞分裂素,A 錯誤;當激素X和Y 濃度比小于1時,細胞群分化出根,即激素Y誘導根的形成,B錯誤。為保證單一變量,實驗

11、材料應來自同種植物,C錯誤。13.(2013綿陽質檢)下列說法不正確的是(B)A.酸堿度和溫度是通過影響酶的活性來影響果汁產量的B.酶的數量越多,果汁產量越多C.酶的活性能夠影響果汁的產量D.蘋果泥的數量也能夠影響果汁的產量解析:酸堿度和溫度可以影響酶的活性,酶的活性能夠影響果汁產量,在一定程度下,酶的數量和果汁產量是正相關,但酶量達到一定量后酶的數量增多,果汁的產量不一定增多。一般酶的催化反應時間越長、蘋果泥的數量越多,得到的果汁越多。14.某同學為探究溫度對果膠酶活性的影響,在不同溫度下,將等量的果膠酶加入到等量的蘋果泥中,在反應同樣時間后,再將反應液過濾同樣時間,用量筒測定濾出蘋果汁的體

12、積。下列曲線圖能正確反映實驗結果的是(B)解析:果膠酶在0 時活性較低,但也能催化蘋果泥形成果汁,果汁量不為0。隨著溫度升高果膠酶的活性升高,果汁量增加。當超過最適溫度時,果膠酶活性降低,形成果汁量減少,正確的曲線應是B。15.(2013瀘州質檢)下列關于果膠酶作用的敘述,錯誤的是(C)A.分解水果細胞壁中的果膠,從而瓦解細胞壁B.可將果膠分解成半乳糖醛酸,使果汁變清C.分解水果細胞壁中的纖維素和果膠D.可使果汁榨取變得容易,提高出汁率解析:果膠酶可將果膠分解為半乳糖醛酸,從而使果汁榨取的時候比較容易,并使果汁變清。要分解纖維素,需要纖維素酶。16.(2014達州質檢)生物產品的分離、純化是現

13、代生物技術中一種常見的技術。下列關于物質提取、純化原理的敘述中,不正確的是(B)A.采用凝膠色譜法分離果膠酶的原理是蛋白質分子的相對分子質量不同,在色譜柱中的移動速度不同B.使用透析法可以去除樣品中相對分子質量較大的雜質C.電泳法是利用樣品中各種分子帶電性質和數量以及樣品分子大小不同,產生的遷移速度不同而實現樣品中各種分子的分離D.離心法分離蛋白質的依據是不同大小的分子離心時沉降速度不同解析:本題考查有關物質提取、純化的原理。透析法的原理是小分子能夠通過半透膜,利用透析法可以去除樣品中相對分子質量較小的雜質。17.紅細胞中含有大量血紅蛋白,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗來提

14、取和分離血紅蛋白。下列對血紅蛋白提取和分離的敘述,錯誤的是(B)A.血紅蛋白提取和分離一般按照樣品處理粗分離純化純度鑒定的順序進行B.純化過程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來配制凝膠懸浮液C.粗分離時透析的目的是去除相對分子質量較小的雜質D.可用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定解析:蛋白質的提取和分離一般分為四步:樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。提取和分離血紅蛋白時,首先通過洗滌紅細胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作收集到血紅蛋白溶液,即樣品處理;再通過透析法除去相對分子質量較小的雜質,即樣品的粗分離;然后通過凝膠色譜法將相對分子質量較大的雜蛋白除去,即樣品純化,純化過程中凝膠應用蒸餾水充分溶脹

15、后,配制成凝膠懸浮液,而不是用生理鹽水;最后用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。18.將經處理破裂后的紅細胞混合液以2 000 r/min 的速度離心10 min后,離心管中的溶液分為四層,從上到下的順序依次是(D)A.血紅蛋白、甲苯層、脂溶性物質層、沉淀層B.甲苯層、沉淀層、血紅蛋白、脂溶性物質層C.脂溶性物質層、血紅蛋白、甲苯層、沉淀層D.甲苯層、脂溶性物質層、血紅蛋白、沉淀層解析:混合液經離心后,按密度大小排列,在離心管中從上到下的順序依次是:第1層為無色透明的甲苯層;第2層為白色薄層固體,是脂溶性物質的沉淀層;第3層為紅色透明液體,這是血紅蛋白的水溶液;第4層為暗紅色沉淀物,主要是

16、紅細胞破碎物沉淀。19.(2013吉林長春二調)下列對胡蘿卜素提取過程的分析正確的是(B)A.在把新鮮的胡蘿卜切成米粒大小的顆粒置于烘箱中烘干時,溫度越高、干燥時間越長,烘干效果越好B.在萃取過程中,在瓶中安裝冷凝回流裝置是為了防止加熱時有機溶劑揮發C.在濃縮干燥前,沒有必要進行過濾D.將濾液用蒸餾裝置進行蒸餾,要收集蒸發出去的液體,蒸發出去的是胡蘿卜素,留下的是有機溶液解析:在烘干胡蘿卜顆粒時要控制好溫度和時間,溫度太高、干燥時間太長,會導致胡蘿卜素分解;在濃縮干燥前,要將萃取液進行過濾,除去不溶物;將濾液用蒸餾裝置進行蒸餾,蒸發掉有機溶劑,留下濃縮的胡蘿卜素液;在萃取過程中,在瓶中安裝冷凝

17、回流裝置是為了防止加熱時有機溶劑揮發。20.下列有關胡蘿卜素的敘述,錯誤的是(A)A.胡蘿卜素的化學性質穩定,溶于水,不溶于乙醇B.胡蘿卜是提取天然胡蘿卜素的原料C.微生物的發酵生產是工業提取胡蘿卜素的方法之一D.提取后,干燥過程中,時間不能太長,溫度不能太高解析:胡蘿卜素為橘黃色結晶粉末,不溶于水,微溶于乙醇。胡蘿卜素在弱堿條件下比較穩定,在酸中不穩定,在光照和含氧條件下也不穩定。二、非選擇題:本大題 共4小題,共40分。21.(2014開封檢測)(10分)葡萄發酵可產生果酒、果醋,請利用相關的知識回答以下問題:(1)如下圖表示果酒和果醋制作過程中的物質變化,過程需要等適宜條件。 

18、(2)將葡萄榨成汁后分別裝入相應的發酵瓶中,在溫度等適宜的條件下進行發酵,如下圖所示。發酵過程中,每隔一段時間均需排氣一次。據圖分析,操作錯誤的是,發酵結束后,檢驗乙發酵過程中產物的方法是  。(3)如下圖是采用純化酵母菌培養的兩種接種方法接種后培養的效果圖。判斷圖A所用接種方法的依據是,圖B的接種方法是。 (4)自己在家中制作的果醋很容易腐敗,而市售的果醋瓶上寫著“105 高溫瞬時、不含任何防腐劑,最長保質期為一年”,其中的奧秘是。 (5)在下圖中用曲線表示正常果酒發酵階段酵母菌種群個體數量的變化情況。解析:(1)過程為制作果醋階段,醋酸菌為好氧性細菌,生長的最

19、適溫度為3035 。(2)酵母菌無氧呼吸過程中會產生酒精和CO2,因此排氣管不能插到液面下;在酸性條件下,重鉻酸鉀與酒精反應呈現灰綠色,用于檢驗酒精。(3)根據菌落的分布情況可以判斷圖A為稀釋涂布平板法,圖B為平板劃線法。(4)105 的瞬時高溫可殺死果醋中的微生物,從而避免果醋腐敗變質。(5)在有氧環境中酵母菌可以快速增殖,在無氧環境中幾乎不增殖。答案:(1)氧氣、3035 (2)甲、丙在酸性條件下,重鉻酸鉀與酒精反應呈現灰綠色(3)稀釋涂布平板法形成的菌落分布較均勻平板劃線法(4)高溫殺死微生物(5)(如圖,若密封培養后期曲線有下降趨勢也可)22.(2013·新課標全國理綜)(1

20、0分)臨床使用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。回答下列問題:(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用法或法將樣本接種于固體培養基表面,經過選擇培養、鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當稀釋,用法接種于固體培養基表面,在37 培養箱中培養24 h,使其均勻生長,布滿平板。 (3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養一段時間后,含A的濾紙片周圍出現透明圈,說明該致病菌對抗生素A;含B的濾紙片周圍沒有出

21、現透明圈,說明該致病菌對抗生素B;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的。 (4)根據上述實驗結果,為達到抗菌目的,最好應選用抗生素。 解析:(1)分離菌落常用稀釋涂布平板法或劃線法。(2)取該單菌落適當稀釋,用涂布法接種于固體培養基表面,適宜溫度培養。(3)含抗生素的濾紙片周圍出現透明圈,說明對該致病菌對該抗生素有敏感性,周圍沒有透明圈的說明對該抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越強。(4)實驗結果抗生素A對該致病菌的作用最好。答案:(1)劃線 稀釋涂布

22、(或涂布) (2)涂布 (3)敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A弱 耐藥菌 (4)A23.(2013·四川理綜)(10分)普通酵母菌利用淀粉的能力很弱,有人將地衣芽孢桿菌的淀粉酶基因轉入酵母菌中,經篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種(過程如圖甲所示)。(1)圖甲中,過程需要的酶有。為達到篩選目的,平板內的固體培養基應以作為唯一碳源。、過程需重復幾次,目的是 。 (2)某同學嘗試過程的操作,其中一個平板經培養后的菌落分布如圖乙所示。該同學的接種方法是;推測該同學接種時可能的操作失誤是 。 (3)以淀粉為原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發酵,接種菌的發酵罐需要

23、先排氣,其原因是 。 (4)用凝膠色譜法分離淀粉酶時,在色譜柱中移動速度較慢的蛋白質,相對分子質量較。 解析:本題考查選修中相關知識,包括基因工程、微生物的培養和發酵、蛋白質的提取和分離等。(1)步驟為將目的基因與運載體連接,需要先用同一種限制性核酸內切酶分別切割質粒和目的基因,露出相同的黏性末端,然后再用DNA連接酶連接為重組質粒;而在以淀粉為唯一碳源的培養基中,其他微生物難以利用淀粉而被抑制,從而篩選高效利用淀粉的工程酵母菌;重復篩選多次可以提高目的菌的純度。(2)圖中平板培養后的結果,形成了多個菌落,因此為稀釋涂布平板法,但是菌落分布不均勻,集中分布在一定區域,說明涂

24、布不均勻。(3)由于工程酵母菌能夠更高效的利用淀粉,因此在以淀粉為原料的培養條件下,可以更快地進行增殖和發酵,酒精發酵產生的二氧化碳較多,所以需要先排氣。(4)凝膠色譜法分離的原理是相對分子質量較大的蛋白質分子不能進入凝膠顆粒內部,只能分布在顆粒之間,通過的路程較短,移動速度較快;相對分子質量較小的蛋白質分子比較容易進入凝膠內的通道,通過的路程較長,移動速度較慢。因此,移動速度較慢的蛋白質,相對分子質量較小。答案:(1)限制性核酸內切酶、DNA連接酶淀粉進一步篩選純化獲得分解淀粉能力強的酵母菌(2)稀釋涂布平板法涂布不均勻 (3)工程酵母工程酵母菌分解淀粉產生葡萄糖的能力強,導致酒精發酵產生CO2的速率更快(4)小24.(2013四川成都二診)(10分)果膠酶主要用于果膠的分解,在果汁的生產等方面被廣泛應用。(1)霉菌發酵生產的果膠酶是食品加工業中使用量最大的酶制劑。某科研小組為了篩選出果膠酶的高產菌株,進行了相關實驗。第一步:取樣。如果你是該小組的成員,你最好從果園中的中去取樣分離產果膠酶的菌株。