1、關于腫瘤藥理實驗方法第一頁，共59頁幻燈片 初代培養物開始第一次傳代培養后的細胞，即稱之為細胞系（Cell LineCell Line）。 從一個經過生物學鑒定的細胞系用單細胞分離培養培養或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群，稱細胞株（Cell strainCell strain）。 與的概念第二頁，共59頁幻燈片腫瘤細胞體外實驗方法腫瘤細胞體外實驗方法 （動物的，人的動物的，人的）動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法 （移植性、誘發性、自發性移植性、誘發性、自發性） 腫瘤轉移的動物實驗模型腫瘤轉移的動物實驗模型 腫瘤免疫藥理研究方法腫瘤免疫藥理研究方法腫瘤藥理學基本的實驗方法腫瘤藥

2、理學基本的實驗方法第三頁，共59頁幻燈片體內實驗體內實驗 In vivo 腫瘤藥理學實驗方法腫瘤藥理學實驗方法(In Vitro) 第四頁，共59頁幻燈片腫瘤藥理學體內實驗方法腫瘤藥理學體內實驗方法 整體動物實驗法是評價一個藥物是否有效的最主要的方法，即使在體外有一個很好的療 效，最終也一定要在體內進行觀察。因此，用整體動物實驗方法來觀察藥物的作用顯得很重要。 研究藥物的體內抗腫瘤作用，就必須建立各種腫瘤的動物模型，模型越接近于人體其意義越大。第五頁，共59頁幻燈片 動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法實實 驗驗 動動 物物 的的 選選 擇擇移植性移植性動物腫瘤模型動物腫瘤模型誘發性誘發性

3、動物腫瘤模型動物腫瘤模型自發性自發性動物腫瘤模型動物腫瘤模型第六頁，共59頁幻燈片 不同種類的動物對致癌物質的敏感性不同，其癌自發率也不同。常用于自發、誘發或移植的動物有： 小鼠、裸 鼠、金黃地鼠、大鼠 豚鼠、兩棲類動物如蛙、鳥類。 其它許多家畜如豬馬牛羊犬貓家兔等都可發生各種腫瘤。動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法動動 物物 的的 選選 擇擇第七頁，共59頁幻燈片小 鼠 小鼠腫瘤自發率高，其自發性腫瘤無論是從組織發生、臨床過程以及組織形態學上都與人類的腫瘤接近。所以小鼠目前廣泛用于癌、肉瘤、白血病以及其它惡性腫瘤的研究。進行抗腫瘤藥物篩選，小鼠自發性腫瘤自發性腫瘤模型模型優于移植性腫瘤

4、模型模型。動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法動物的選擇動物的選擇第八頁，共59頁幻燈片裸 鼠 裸鼠是一種獨特的純系動物，全身無毛，先天性無胸腺，T淋巴細胞缺乏，細胞免疫功能缺乏，對異體移植幾乎無免疫排斥反應，可接受異系、異種腫瘤腫瘤移植等，有“活試管 ”之稱。 自 從 1969 年Rygaard 、Povlesev 二氏將人類腫瘤異種移植于裸鼠首次獲得成功后，它在腫瘤研究中已被廣泛利用。 目前移植于裸鼠較為成功的人類腫瘤有：結腸癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、宮頸癌、白血病等。動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法動物的選擇動物的選擇第九頁，共59頁幻燈片 裸小鼠的費用昂貴，飼養時對實驗室的

5、條件要求高，小鼠不易大量繁殖。因而一般不用于藥物的初篩選研究。由于先天性免疫缺乏，因而在一般情況下也不用于免疫藥物的研究。 裸鼠的缺點裸鼠的缺點動物的選擇動物的選擇第十頁，共59頁幻燈片C57BL/6小鼠 小鼠類的一種，黑毛，體型小，性情較溫順，易于飼養管理，對藥物敏感性好，為研究Lewis肺癌所選小鼠。費用適中，飼養條件不太高，易大量繁殖，因而一般可用于藥物的體內初篩選研究。（LewisLewis肺癌為C57BL/6小鼠來源的腫瘤） 動物的選擇動物的選擇第十一頁，共59頁幻燈片大鼠 大鼠也廣泛用于腫瘤研究。與小鼠相比，大鼠的體型較大，供給的組織較多，便于進行手術等實驗操作。大鼠的肝臟對致癌物

6、質很敏感，可用二乙基亞硝胺，二甲基偶氮苯（DAB）復制大鼠肝癌動物模型，還可用甲基芐基亞硝胺誘發大鼠食管癌動物模型。 大鼠的自發性癌變的發生率較低。動物的選擇動物的選擇第十二頁，共59頁幻燈片金黃地鼠：金黃地鼠：金黃地鼠是腫瘤學實驗研究中最常用的動物，她廣泛用于研究腫瘤的增殖、致癌、抗癌、腫瘤轉移、康癌藥物的篩選等。豚鼠：豚鼠：曾被認為是很少發生腫瘤的動物，近年發現豚鼠也可發生自發性腫瘤，例如支氣管乳頭腺瘤、白血病等。兩棲類動物：兩棲類動物：蛙類無毛，光滑的皮膚與人類接近，可為皮膚癌的研究提供實驗模型。鳥類：鳥類：雞和其它鳥類對腫瘤病毒的研究具有極高的實用價值尤其是對于造血系統和間葉組織腫瘤病

7、毒株具有易感性。魚類：魚類：魚類也可發生不少自發腫瘤，它們對化學致癌物十分敏感，例如用黃曲霉素、二乙基亞硝胺等可誘發魚類肝臟腫瘤和腎母細胞瘤。其它：其它：許多家畜如馬牛羊豬犬貓家兔馬牛羊豬犬貓家兔等都可發生各種腫瘤。動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法動物的選擇動物的選擇第十三頁，共59頁幻燈片 動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法實實 驗驗 動動 物物 的的 選選 擇擇移植性動物腫瘤模型移植性動物腫瘤模型自發性動物腫瘤模型自發性動物腫瘤模型誘發性動物腫瘤模型誘發性動物腫瘤模型第十四頁，共59頁幻燈片動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法移植性動物腫瘤模型移植性動物腫瘤模型人體腫瘤動

8、物體內移植模型的建立人體腫瘤動物體內移植模型的建立實體瘤動物體內移植模型的建立實體瘤動物體內移植模型的建立 非實體瘤動物體內移植模型的建立非實體瘤動物體內移植模型的建立 第十五頁，共59頁幻燈片移移 植植 性性 動動 物物 腫腫 瘤瘤 模模 型型人體腫瘤動物體內移植模型的建立人體腫瘤動物體內移植模型的建立 用人的腫瘤細胞通過移植的方法移植到適合的動物宿主體內，建立一個移植宿主的體內模型，通過該模型對實驗藥物進行藥理藥效學觀察。 人體腫瘤動物體內移植可觀察癌細胞對藥物的敏感性試驗，藥物對癌細胞的逆轉作用，藥物對癌細胞的增殖抑制作用和誘導癌細胞的凋亡等作用。第十六頁，共59頁幻燈片移移 植植 性性

9、 動動 物物 腫腫 瘤瘤 模模 型型人體腫瘤動物體內移植模型的建立人體腫瘤動物體內移植模型的建立 動物要求腫瘤細胞來源腫瘤細胞凍存與復蘇腫瘤腫瘤細胞體內接種第十七頁，共59頁幻燈片人體腫瘤動物體內移植模型的建立人體腫瘤動物體內移植模型的建立 由于人和動物不同種，存在移植排斥反應，故要用免疫缺陷動物免疫缺陷動物，如裸鼠。 裸小鼠裸小鼠是一種獨特的純系動物，全身無毛，先天性T細胞缺乏，對異種腫瘤移植幾乎無免疫排斥反應，可接受人類腫瘤移植。 裸大鼠裸大鼠無胸腺，缺少T細胞，故能成功地移植異種皮膚和異種腫瘤，包括小鼠腫瘤及人腫瘤。 動物要求第十八頁，共59頁幻燈片小白鼠小白鼠裸鼠裸鼠第十九頁，共59頁

10、幻燈片人體腫瘤動物體內移植模型的建立人體腫瘤動物體內移植模型的建立 人體腫瘤細胞的來源大致可分為兩類，一類是人的癌細胞株，可從細胞庫或其他實驗室得到；另一類是源于人體腫瘤組織塊的癌細胞，主要從臨床腫瘤患者體內獲得。為了使腫瘤細胞能得到長期使用和保持不同代的腫瘤組織的本來特性，防止退化或變異，對腫瘤細胞的冷凍保存是很必要的。一般情況下，液氮凍存1-2年后，細胞存活率可達80%-90。 涉及細胞凍存與復蘇技術 。腫瘤細胞的來源第二十頁，共59頁幻燈片1.消化洗滌 將對數增殖期的細胞或腹水瘤細胞經消化脫壁后，用培養液洗滌l次。2.凍存細胞 配制含有保護劑 (10%15的DMSO，甘油等)的培養液作為

11、細胞凍存液。以腫瘤細胞在細胞凍存液中的密度為ll07/ml左右懸浮細胞。將細胞懸液加入到2ml塑料凍存管內。密封后注明標記。將凍存管放入4或30低溫冰箱內2h后，移入液氮罐內長期保存。3.凍存細胞的復蘇 將凍存腫瘤細胞的凍存管從液氮罐內取出，立即置于37-40 溫水中，使凍存細胞在l min內全部融化，1000r/min離心l0min，棄去上清液，用新鮮培養液稀釋到所需細胞數，再進行培養。慢凍快融原則 人體腫瘤動物體內移植模型的建立人體腫瘤動物體內移植模型的建立凍存與復蘇方法第二十一頁，共59頁幻燈片1.1.體外培養擴增體外培養擴增 無菌條件下，將復蘇的腫瘤細胞體外培養、擴增。2.2.制備細胞

12、懸液制備細胞懸液 在對數生長期，用 0.05胰蛋白酶和0.02乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid, EDTA）消化12 min，傾出消化液，加入無血清1640液洗滌，離心，計數，用無血清1640液或無菌生理鹽水配成濃度為1107/ ml的細胞懸液。3.3.接種腫瘤細胞接種腫瘤細胞 在無菌環境中，消毒皮膚，用lml注射器抽吸取0.2ml細胞懸液（約含2106個腫瘤細胞），接種接種在裸鼠裸鼠右前肢根部（腋窩）皮下。約1周左右局部就長出花生米粒大小瘤塊 。4.4.飼養、觀察飼養、觀察 在無菌環境中飼養、觀察，觀察瘤塊生長情況，定期測量瘤體的直徑，最后剝瘤

13、稱重，計算抑制率。 接種步驟人體腫瘤動物體內移植模型的建立第二十二頁，共59頁幻燈片動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法移植性動物腫瘤模型移植性動物腫瘤模型人體腫瘤動物體內移植模型的建立人體腫瘤動物體內移植模型的建立實體瘤動物體內移植模型的建立實體瘤動物體內移植模型的建立 非實體瘤動物體內移植模型的建立非實體瘤動物體內移植模型的建立 第二十三頁，共59頁幻燈片移植性動物腫瘤模型實體瘤動物體內移植模型的建立小塊瘤體接種法腫瘤細胞懸液接種法培養細胞動物體內移植法瘤體測量方法 接種方法主要特點 第二十四頁，共59頁幻燈片實體瘤動物體內移植模型的主要特點1.一群動物同時接種等量同種癌細胞，腫瘤生

14、長速度比較一致，個體差異較小；2.接種的成活率高，接近100%；3.對宿主的影響較相似，易于客觀判斷療效；4.可在同種或同品系動物中連續移植，長期保 留，供試驗用；5.試驗周期一般較短，試驗條件易于控制。 實體瘤動物模型主要用來篩選抗腫瘤藥物。第二十五頁，共59頁幻燈片移植性動物腫瘤模型實體瘤動物體內移植模型的建立小塊瘤體接種法腫瘤細胞懸液接種法培養細胞動物體內移植法瘤體測量方法 接種方法主要特點 第二十六頁，共59頁幻燈片小塊瘤體接種法 從動物剝離取出腫瘤后，剔除非腫瘤組織和壞死組織，選取生長良好而無變性壞死、呈淡紅色 (黑色素瘤則呈黑色或黑紫色)、魚肉狀的瘤組織，切成2mm2mm2mm的小

15、塊，在所選宿主動物的腋下剪開一個小口，用無鉤眼科鑷子夾取小塊，送入切口內皮。 如何保證切成的小塊是2mm2mm2mm？ 為什么接種在腋下，因為腋下部皮膚松弛，能使腫瘤生長得較大，可延長宿主動物的壽命。實體瘤動物體內移植模型的接種方法第二十七頁，共59頁幻燈片腫瘤細胞懸液接種法 將選取的腫瘤組織放入玻璃勻漿器中，用無菌生理鹽水研磨后，經濾網過濾成單個的細胞懸液，用臺盼藍染色法計數活細胞數，每個接種點皮下注射0.2ml(含1l06-1l07個細胞)，每只動物可選用一個或多個接種點，通常接種于腋下部皮下。 在無菌條件下操作。實體瘤動物體內移植模型的接種方法第二十八頁，共59頁幻燈片1.1.研磨方向及

16、轉速 制備腫瘤細胞懸液時，在人工研磨時必須使研磨桿向同一方向轉動，不可反向交替研磨，防止磨破腫瘤細胞；如果采用電動研磨，一定要控制好轉速，以免破壞完整的腫瘤細胞。2.2.細胞數 細胞數多少適中，如果瘤細胞數過多，接種后瘤體生長過快，不便于藥物作用的觀察；瘤細胞數過少，會導致接種失敗，接種部位不能形成腫瘤。接種失敗后再在原動物體內重新接種也難成功，必須重新更換動物。（為什么？）腫瘤細胞懸液接種注意事項 第二十九頁，共59頁幻燈片 將培養至快要融合的單層細胞(對數生長期)用0.25%的胰蛋白酶消化脫壁以后，經用PBS或生理鹽水以1000r/min經l0min離心洗滌2次后，洗掉細胞中胰蛋白酶和培養

17、液中血清等成分，用臺盼籃染色法計數活細胞數，用生理鹽水將腫瘤細胞稀釋成1l06-1l07/ml，每個接種點皮下注射0.2ml細胞。培養細胞動物體內移植法實體瘤動物體內移植模型的接種方法第三十頁，共59頁幻燈片移植性動物腫瘤模型實體瘤動物體內移植模型的建立小塊瘤體接種法腫瘤細胞懸液接種法培養細胞動物體內移植法瘤體測量方法 接種方法主要特點 第三十一頁，共59頁幻燈片實體瘤動物體內移植模型實體瘤瘤體測量方法 測量實體瘤生長的方法有多種，主要包括測定腫瘤的質量、體積或直徑等。第三十二頁，共59頁幻燈片瘤體測量方法 通常于停藥之后次日處死動物，立即剝離取出瘤塊，剔除其他組織后稱重。若對照組小鼠腫瘤平均

18、小于1g或20%小鼠的瘤重小于400mg，表示腫瘤生長不良。在治療期間給藥組小鼠死亡率大于20%或平均體重下降 (自身對照)超過15%者，表示藥物毒性反應，應適當減量重復試驗。 比較試驗組與對照組瘤重的差異，按下列公式計算腫瘤抑制率。腫瘤抑制率 對照組瘤重重對照組瘤重給藥組瘤100%100% 稱量腫瘤的質量 當中藥組的瘤重抑制率大于30%，需重復試驗，連續數次療效穩定，并經統計學處理有顯著性差異時，則評定此藥有一定療效。第三十三頁，共59頁幻燈片 瘤體的直徑與腫瘤的大小及質量成正比。測量瘤體的直徑不需要處死動物，可用來動態觀察瘤體的變化。 方法：用游標千分卡尺測量腫瘤的相互垂直的直徑，取它們的

19、平均值即為平均直徑。MD3CBA100% MD為腫瘤平均直徑；A、B、C為實體腫瘤3個相互垂直的直徑，一般用毫米為單位。由于測量的厚度包括皮膚在內，故瘤體越小，產生的誤差也就越大。注意由同一實驗者測量。瘤體測量方法 測量腫瘤的直徑 第三十四頁，共59頁幻燈片動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法移植性動物腫瘤模型移植性動物腫瘤模型人體腫瘤動物體內移植模型的建立人體腫瘤動物體內移植模型的建立實體瘤動物體內移植模型的建立實體瘤動物體內移植模型的建立 非實體瘤動物體內移植模型的建立非實體瘤動物體內移植模型的建立 第三十五頁，共59頁幻燈片非實體瘤動物模型的建立非實體瘤動物模型的建立 小鼠：6 67

20、 7周齡，體重181822g22g，組間平均體重相差不宜超過1g1g，健康，純種、雜種或雜交第一代，同一種性別，一般用雌性動物接種。接種方法：取出小鼠接種第5 57d7d的腹水，用生理鹽水將細胞濃度稀釋為1 1l06-1-1l0l07/mlml，每只小鼠腹腔注射0.2ml0.2ml細胞懸液即可。腹水瘤傳代：腹水瘤的傳代方法與移植接種方法一樣，需注意的是動物的年齡與體重年齡與體重對腹水會產生影響，也是導致數據離散的主要原因。腹水瘤移植接種方法腹水瘤移植接種方法第三十六頁，共59頁幻燈片給藥方法：常用皮下注射、給藥方法：常用皮下注射、腹壁皮下注射腹壁皮下注射或灌胃。或灌胃。 不宜腹腔注射。不宜腹腔

21、注射。 給藥方案：一般每天給藥給藥方案：一般每天給藥l l次，療程次，療程7 710d10d，亦可每天給藥數，亦可每天給藥數 次，或間歇給藥。次，或間歇給藥。 給藥劑量：如有給藥劑量：如有LDLD5050資料可供參考時，一般每日可用資料可供參考時，一般每日可用1/31/3 1/5 LD1/5 LD5050的劑量。的劑量。動動 物物 數：實驗組一般為數：實驗組一般為6 61010只，對照組數目可根據試驗組只，對照組數目可根據試驗組 多少決定，亦可參考下列公式。多少決定，亦可參考下列公式。 對照組鼠數實驗組鼠數對照組鼠數實驗組鼠數操作時間：接種操作時間應盡可能短，操作時間：接種操作時間應盡可能短，

22、不應超過半小時不應超過半小時。炎熱。炎熱 季節應注意降溫，可在瘤源周圍置以冰塊。季節應注意降溫，可在瘤源周圍置以冰塊。其其 它：它： 嚴格無菌操作，瘤源污染常導致整批實驗失敗。嚴格無菌操作，瘤源污染常導致整批實驗失敗。 實驗記錄應盡可能詳細。實驗記錄應盡可能詳細。可參考1978年全國抗癌研究協會制定的抗腫瘤藥物體內篩選規程。組數腹水瘤移植實驗注意事項腹水瘤移植實驗注意事項第三十七頁，共59頁幻燈片 腹水瘤的測量方法是對小鼠進行每天1次的體重稱量，一般在療程結束后次日稱體重，逐日記錄。然后進行自身對照或用空白對照，觀察比較體重變化。非實體瘤動物模型的建立非實體瘤動物模型的建立 腹水瘤測量方法腹水

23、瘤測量方法 對照組通常在23周內死亡，若治療期間對照組動物死亡20%或其20%存活時間長于4周以上，實驗均應作廢。治療組觀察時間一般為50d左右，按下列公式計算生命延長率：生命延長率 100%對對照照組組平平均均天天數數對對照照組組平平均均存存活活天天數數治治療療組組平平均均存存活活天天數數第三十八頁，共59頁幻燈片非腹腔給藥時生命延長率50%，腹腔給藥時生命延長率75%，則認為有苗頭，連續3次療效穩定，則評價此藥有一定療效。非實體瘤動物模型的建立非實體瘤動物模型的建立 療效判斷標準第三十九頁，共59頁幻燈片動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法移植性動物腫瘤模型移植性動物腫瘤模型人體腫瘤動

24、物體內移植模型的建立人體腫瘤動物體內移植模型的建立實體瘤動物體內移植模型的建立實體瘤動物體內移植模型的建立 非實體瘤動物體內移植模型的建立非實體瘤動物體內移植模型的建立 第四十頁，共59頁幻燈片 動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法實實 驗驗 動動 物物 的的 選選 擇擇移植性動物腫瘤模型移植性動物腫瘤模型誘發性動物腫瘤模型誘發性動物腫瘤模型自發性動物腫瘤模型自發性動物腫瘤模型第四十一頁，共59頁幻燈片動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法誘發性動物腫瘤模型誘發性動物腫瘤模型 腫瘤的發生，與一系列致癌因子有關。用化學、物理、生物性致癌因子在動物機體誘發出各種類型的腫瘤，均稱為誘發性腫瘤。

25、 誘癌動物模型的建立，可用來驗證可疑致癌因素的致癌作用，進一步可用來觀察藥物對致癌因因子的作用，從而用來評價藥物的抗癌作用。第四十二頁，共59頁幻燈片 動物腫瘤動物腫瘤體內實驗方法體內實驗方法誘發性動物腫瘤模型誘發性動物腫瘤模型 能夠誘發腫瘤的因素很多，在實驗中常用的誘癌劑對各種動物及其不同器官，不同部位會產生不同的反應，同種誘癌劑對同種動物的皮膚、食管、肝、肺、乳腺的部位會產生不同的反應，動物因種群的不同，對致癌因子會產生出不同的反應，也能誘發出不同的腫瘤。 因此，建立一個誘癌的動物模型能否成功，與誘癌劑，動物的種類、種群密切相關。 通常，在建立誘癌動物模型時，要考慮如下三條因素。第四十三頁

26、，共59頁幻燈片 動物腫瘤動物腫瘤體內實驗方法體內實驗方法誘發性動物腫瘤模型誘發性動物腫瘤模型 1.動物對致癌物質的敏感性 不同誘癌劑，對不同動物品系的敏感性不同。用環芳烴類誘發皮膚癌多選用小鼠；用不對稱亞硝胺 (如甲基芐基亞硝胺，甲基苯基亞硝胺) 誘發食管癌多選用大鼠；用二乙基亞硝胺、4-二甲基氨基偶氮苯 (DAB)誘發肝癌 則多用大鼠。2.動物對致癌物劑量的反應性 一般 選用誘發期短，誘發率高，成活率高的劑量。3.動物對飼養條件的反應性 某些營養物質會影響誘癌劑的作用，如飼料內的維生素B2會影響奶油黃（DAB）誘發肝癌；高脂飼料對誘發皮膚及肝癌有增強作用 。 第四十四頁，共59頁幻燈片 動

27、物腫瘤動物腫瘤體內實驗方法體內實驗方法誘發性動物腫瘤模型常用方法誘發性動物腫瘤模型常用方法一、整體實驗1.涂抹法誘發皮膚癌 小鼠局部脫毛2.經口給藥胃癌誘發腫瘤模型 將致癌物放入飲水中，或灌胃給藥二、體外實驗 選已獲得無限增殖力，但保持著接觸抑制的細胞，同源動物體內接種無致瘤性，即尚未發生惡性轉化 。待細胞生長進入指數增生期時，向培養瓶中加入致癌劑。 第四十五頁，共59頁幻燈片 動物腫瘤動物腫瘤體內實驗方法體內實驗方法誘發實驗動物腫瘤模型誘發實驗動物腫瘤模型注注 意意 事事 項項 凡是誘導動物發生腫瘤的物質，均能誘發人體腫瘤或對人體有毒害性，因此，進行該類實驗時，須注意如下事項： 1.保持動物

28、飼養室內空氣流通。 2.在通風櫥內給被試動物用藥。 3.實驗者要采取隔離防范措施。 如戴口罩，手套，防護服等，實驗結束要清洗手和裸露的部位。第四十六頁，共59頁幻燈片 動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法實實 驗驗 動動 物物 的的 選選 擇擇移植性動物腫瘤模型移植性動物腫瘤模型誘發性動物腫瘤模型誘發性動物腫瘤模型自發性動物腫瘤模型自發性動物腫瘤模型第四十七頁，共59頁幻燈片 動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法自發性動物腫瘤模型自發性動物腫瘤模型 實驗動物種群不經過有意識的人工實驗處置而自然發生的一類腫瘤稱之為自發性自發性腫瘤。 與誘發性腫瘤相比，自發性自發性腫瘤與人類所患腫瘤更為相

29、，有利于將動物實驗結果推用到人。第四十八頁，共59頁幻燈片 動物腫瘤動物腫瘤體內實驗方法體內實驗方法自發性動物腫瘤模型自發性動物腫瘤模型 培育自發性自發性腫瘤發生率高發生率高的小鼠。 AKR小鼠 出生后一年半內90%以上的AKR小鼠會患白血病，該腫瘤可用強的松和長春新堿治療而緩解，其對藥物的治療反應類似兒童急性淋巴性白血病。可作為研究人體白血病和淋巴瘤的模型。（自發腫瘤多數為病毒性 ，AKR白血病小鼠出生時即帶有致癌的RNA病毒。） BALB/C小鼠 BALB/C雌鼠可自發乳癌，這是當前新藥研究中自發瘤模型應用最多的小鼠。它們于出生后大約10個半月左右可摸到腫瘤，自發瘤可高達70%，生存大約2

30、035天死亡。 方法：繁殖BALB/C小鼠(雌)，在摸到腫瘤瘤塊后分組給藥，用小鼠生存時間延長率來評價藥物的療效。 第四十九頁，共59頁幻燈片 動物腫瘤動物腫瘤體內實驗方法體內實驗方法自發性動物腫瘤模型自發性動物腫瘤模型 自發性自發性腫瘤雖然具有與人類所患腫瘤更為相似 的優點，但是不可能在短時間內獲得大量腫瘤學材料； 腫瘤的發生情況可能參差不齊；觀察時間較長，實驗耗費較大。故一般很少用于藥物篩選。但在腫瘤生長的漫長時間里可以觀察、發現原來沒有發現的環境的或其它的致癌因素對腫瘤形成的影響，進行腫瘤發病學研究。 第五十頁，共59頁幻燈片 動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法實實 驗驗 動動 物物 的的 選選 擇擇移植性動物腫瘤模型移植性動物腫瘤模型自發性動物腫瘤模型自發性動物腫瘤模型誘發性動物腫瘤模型誘發性動物腫瘤模型第五十一頁，共59頁幻燈片腫瘤細胞體外實驗方法腫瘤細胞體外實驗方法 （動物的，人的動物的，人的）動物腫瘤體內實驗方法動物腫瘤體內實驗方法 移植性、誘發性移植性、誘發性（也可在體外誘發也可在體外誘發）、自發性、自發性 腫瘤轉移的動物實驗模型腫瘤轉移的動物實驗模型 腫瘤免疫藥理研究方法腫瘤