1、門脈高壓性胃病動物模型復制及發病機理研究【摘要】目的復制大鼠門脈高壓性胃病(PHG)動物模型并研究其發病機理。 方法Wistar大鼠硫代乙酰胺(TAA)腹腔注射每日1次維持，雙色素造影法直接觀察大鼠病程中胃壁動靜脈短路(A-V shunt)開放情況并作定量計數。 結果大鼠第8周肝硬變形成。單位面積胃壁A-V shunt 計數較正常輕度增加(P0.05)，第12周增加達顯著性意義(P0.01)，16周最高峰。A-V shunt與門脈壓上升呈正相關(r=0.910,P0.01)。 結論肝硬變門脈高壓病程中，胃壁A-V shunt 異常開放致粘膜有效血量不足是并發PHG重要原因。大鼠TAA用藥16周

2、適宜作為PHG模型。【關鍵詞】門脈高壓性胃病實驗模型發病機理 Experimental model and pathogenesis of portal hypertensive gastropathyGuan Honggen, Chen Yiren, Qian Haixing, et al. Department of General Surgery, First Affiliated Hospital, Suzhou Medical College, Suzhou 215006【Abstract】ObjectiveTo investigate pathogenesis and establ

3、ish an experimental model of portal hypertensive gastropathy (PHG). MethodThioacetamide (TAA) were intraperitoneally injected into Wistar rats once a day. In the pathological process, arterio-venous shunts (A-V shunt) of gastric wall in the rats were observed by dual dye injection quantitatively. Re

4、sultA-V shunt number was increased slightly at 8th week(P0.05) when cirrhosis occurred, increased significantly at 12th week (P0.01), and reached the peak at 16th week. FPP was elevated with the increase of A-V shunts. A-V shunts were positively correlated with the elevation of portal pressure (r=0.

5、910, P0.01). ConclusionDuring the process of portal hypertension, abnormal opening of A-V shunts in gastric wall resulted in the decrease of gastric mucosal effective blood content, which might be the pathogenesis of PHG. The rats induced by TAA for 16 weeks may be used as experimental model of PHG.

6、【Key words】Portal hypertensive gastropathyExperimental modelPathogenesis我們用雙色素造影法對硫代乙酰胺(TAA)誘發大鼠肝硬變并繼續維持用藥病程中，胃壁動靜脈短路(A-V shunt)開放的動態變化進行形態定量計數研究，以A-V shunt異常開放作鑒定指標建立PHG模型，探討門脈高壓性胃病(PHG)發病機理。材料與方法1. 動物處理Wistar雄性大鼠，體重160180g(核工業總公司實驗動物中心提供)。TAA蒸餾水配制成3%溶液，大鼠腹腔注射60 mg/kg(2 ml/kg)每日1次維持，于0、8、10、12、14、1

7、6、18周每次隨機取8只用于研究，總數56只。2. 實驗操作大鼠戊巴比妥鈉(30mg/kg)腹腔注射麻醉，正中切口入腹，直接穿刺測自由門脈壓力(free portal presse, FPP)換算成kPa單位記錄。壓迫止血后靠近肝門結扎門靜脈、結扎腎動脈水平上方主動脈，從胸主動脈、門靜脈分別插管，動靜脈注入藍色、靜脈端注入紅色明膠溶液11.5ml。操作要點是動靜脈兩端接微量注射器，等速緩慢推注，3ml/分鐘，明膠均勻進入組織。游離食管下端、十二脂腸、大小網膜及全胃，將其取出，胃腔內用10%福爾馬林充盈固定24時，按文獻1方法制作透明標本。取胃體、竇部胃壁各10mm2一塊展開，解剖鏡附裝測微器觀

8、察A-V shunt并計數。肝臟送常規病檢。附表胃壁A-V shunt(個/cm2)項目0周8周(肝硬變)10周12周14周16周18周胃底10.122.1411.442.3212.952.91*25.163.41*35.265.13*42.155.14*42.014.09胃竇8.312.918.762.949.012.969.103.019.153.119.153.169.143.01 注：*與正常組比較P0.01，每組均為8例。 3. 統計學方法t檢驗及相關回歸分析。結果1. 肝病理及FPP肝組織第8周大量纖維增生，假小葉形成。符合肝硬變病理特征。第16、18周肝纖維化更趨成熟，假小葉更完

9、整。FPP正常組0.90.13kPa，第8周升高至1.600.30kPa(P0.01)，隨用藥時間延長FPP進一步升高，16周達2.410.22kPa，是正常的2.5倍。第18周與16周比較略低，為2.400.31kPa。2. A-V shunt計數紅、藍兩種顏色的明膠溶液注入胃壁血管制作的透明標本在放大10倍解剖鏡下觀察，藍色細動脈與棕紅色細靜脈都呈廣泛樹枝狀分布，可以看到末梢直徑為57m的毛細血管像，并發現有的血管為1015m，管內紅藍交匯向兩側追蹤一側為細動脈，另一側為細靜脈，即判定A-V shunt。通過測微器行A-V shunt計數，觀察倍數經換算得出結果。胃竇部各組呈輕度增加趨勢，

10、但無統計意義。胃體部各組隨病程漸進性增加，到第12周有顯著性意義(P0.01)，第16周最高42.155.14個/cm2，為正常4.2倍。第18周略下降(見表)。FPP與A-V shunt計數相關性分析y=1.684+0.510x,r=0.91(P0.01)。討論1. PHG機理正常時，支配胃的動脈穿過漿膜層、肌層，在粘膜下層形成豐富縱狀結構，再分出許多細動脈穿越粘膜肌層達粘膜表面形成毛細血管網。毛細血管再匯成小靜脈下降至粘膜肌層后集成較大靜脈，穿過粘膜下層最終達到胃壁外靜脈回流至門靜脈。胃壁在粘膜下層存在大量性動靜脈短路即A-V shunt。在胃功能期呈閉鎖狀，以供粘膜足夠血流；當處于間歇期

11、間，A-V shunt適度開放，粘膜血流減少，門脈高壓時由于門靜脈壓力高于胃靜脈壓力，使胃靜脈回流障礙，因而胃微循環發生改變。本實驗在國內首次用雙色素造影法1直接觀察大鼠肝硬變門脈高壓病程中胃壁A-V shunt開放情況，結果發現隨肝硬變加重，FPP升高，胃壁單位面積內A-V shunt密度漸進性增加，并與FPP上升呈正相關(r=0.910,P0.01)。機制是FPP上升，毛細血管靜脈壓增加，處于鎖閉狀態的A-V shunt被動開放。另外，“液遞物質(humoral factors)”如胰高血糖素、前列腺環素、一氧化氮等在門脈高壓時含量增加使胃小血管擴張亦是可能原因。導致結果是(1) 動脈血直

12、接灌入靜脈，經毛細管與組織交換的有效血容量不足，粘膜處于缺氧狀態，對損傷易感性增加；(2) 動脈血流入靜脈，再加原有回流障礙使胃充血、郁血；(3) 粘膜層及粘膜下層小靜脈及毛細血管擴張滲透性增加使粘膜間質水腫。因此，胃壁A-V shunt異常開放是肝硬變門脈高壓病程中并發PHG最直接、最基本的原因。2. PHG實驗模型對門脈高壓癥病理生理的認識大多源于動物模型2。目前國內此類的四氯化碳法及TAA法僅僅是肝硬變而已，并不一定合并PHG。本實驗TAA用藥第8周雖肝硬變形成，但胃A-V shunt并未大量開放(P0.05)即是例證。因A-V shunt異常開放是PHG最根本原因，故在本實驗TAA誘發肝硬變門脈高壓病程的第16周，A-V shunt達最高峰時，適宜作為PHG實驗模型。缺點是時間長，待進一步研究。作者單位： 215006蘇州醫學院