1、2. 比擬速測卡法和酶抑制率的異同。答：共同點：兩種方法的原理、緩沖提取溶液pH直、測定中的干擾物質和排除方法根本一樣。不同點：速測卡法檢出限：在使用速測卡法檢出蔬菜樣品為農藥陽性時，即可視為有機磷或氨基甲酸酯類的 農藥已超標。在有條件的單位，可用氣相色譜儀或質譜儀對陽性試樣進展進一步的實驗；酶抑制率法的 選擇：在氣相色譜分析儀還未問世時，對有機磷類農藥的檢測即采取了酶抑制率法，只是由于當時酶的 純度不夠高、靈敏度較低、酶試劑保存期短、與方法不能區分出具體的農藥而被氣相色譜法所取代。而 今用其作為快速分析如此恰到好處。只是現在酶試劑的質量還應進一步提高，有效保存期應設法延長。因此，在實驗前，必

2、需測試酶的活性，達到要求后才能往下進展。相比之下，速測卡法操作簡單、使用 方便，常溫下試藥的有效期可達一年；酶抑制率法操作要煩瑣些，夏天時，試藥需要冷藏運輸，但以數 字形式讀取數據，較為直觀。3. 簡述各種農藥殘留的快速檢測方法在實踐中的應用答：1當樣品類型為蔬菜時，在市場，車站，鄉鎮等地現場檢測：當檢測靈敏度要求低時，用速測卡 法檢測，當檢測靈敏度要求高時，用速測卡法進展初檢檢，然后用酶抑制法進展復檢；采集樣品帶回實 驗室檢測就直接采用酶抑制法。(2)樣品類型為茶葉，肉等，直接采用酶抑制法。由此可看出，速測卡法快速篩選，方法精度低，檢測速度快；酶抑制快速篩選并提供總量抑制率指標，方法精度比速

3、測卡高，檢測速度較慢。4. 影響速測卡法和酶抑制率法測定農藥殘留準確性的因素有哪些？如何減少其影響？答：1酶劑失去活性或生理活性下降。實驗前需判斷酶品是否過了有效期，確保它的活性，并控制酶的反響條件適合反響的溫度，PH和貯存條件。2樣品放置的時間。樣品放置的時間應與空白對照卡放置時間一致才有可比性，樣品加液后的放置延長時間應以空白對照卡用手指捏3min時可變藍來確定。3樣品測定方法不適宜。酶抑制率法測定農藥殘留時，葉綠素含量高的蔬菜，或者蔬菜中含有較多可 使酶失活的成分，如韭菜，辣椒，蔥，姜等，應整株浸提，且浸提時間不能太久。4實驗者操作因素。實驗步驟出錯，或者不恰當地使用農藥殘留速測儀和分光

4、光度計，都會影響最后結果的準確性。實驗者 應該秉著認真，細心的態度，減少人為帶來的主觀因素對實驗結果的影響。5實驗室的衛生環境條件。速測卡很是敏感，如果實驗者，實驗用具沾有微量農藥，或周邊環境噴灑濃藥等，都會造成假陽性的產 生。所以實驗前，應該認真檢查是否存在這些狀況。包括鹽酸克倫特羅1. 影響酶聯免疫吸附法檢測蝦中氯霉素含量準確性的因素可能有哪些？答：1溫度。溫度影響酶的活性，在一定溫度X圍內，隨著溫度上升，酶活性上升。各試劑如氯霉素標準溶液，濃縮萃取稀釋液，酶標記物，底物溶液等以與微量測試孔條應置于室溫下，回溫30min。 2洗滌不充分。剩余酶標記抗原會影響底物與酶作用顯色的結果，使得最終

5、的反響顯色比正常顯色淡。(3)溫育時間。溫育時置于暗處，溫育時間不夠，隨意取出會使得NaSi過氧化物酶遇光易分解，使得反響不充分進展，影響最后的結果。4其他微孔的污染。加樣品或試劑時槍頭接觸微孔，或微孔間不同濃度樣液的污染，另外加樣時濺出微孔外，造成樣品量的減少。5酶劑過了保存有效期，生理活性下降，或者貯存條件不當，導致失活，使得底物不能被酶催化顯色。6樣品制備過程操作不當。 60鳩上的誤差都是由樣品前處理導致的，而 ELISA法測定蝦中氯霉素含量是不僅是定性而且是定量的實驗，稱取量和試 劑用量都要求準確，如洗滌是否徹底，操作步驟應盡可能準確，規X。2. 實驗中，為什么樣品中氯霉素含量與顯色呈

6、反比？答：氯霉素與酶標抗原競爭與抗體結合，氯霉素含量越多，與抗體相結合的數量就越多，而酶標抗原與 抗體結合的數量如此變少，殘留的酶標抗原就會被洗滌掉，酶催化底物顯色就少。說明樣品中氯霉素含 量與顯色呈反比。3. 計算結果時，本試驗樣品的稀釋倍數是多少？為什么？答：取6g的蝦肉，參加6ml乙酸乙酯提取，然后再從中取出 2ml，其量即是：6g/6ml *2ml=2g。又參加原 倍萃取稀釋液，即有公式 2g/0.5ml=4倍。4. 如果洗滌不徹底會給實驗結果造成怎樣的影響？為什么？答：洗滌不徹底就會殘留多余的酶標記物，加底物后，催化底物多，顯色深，吸光度值大，得到的結果 氯霉素的含量偏少，造成實驗結

7、果的不準確，偏差大。從而無法根據顏色的深淺進展定性和定量分析。6.簡述肉制品中鹽酸克倫特羅的主要檢測方法答：1)GS/MS法：固體樣品剪碎，用高氯酸溶液勻漿。假如為液體試樣，如此參加高氯酸溶液，進展超 聲加熱提取，用異丙醇 +乙酸乙酯40+60萃取，有機相濃縮，經弱陽離子交換柱進展別離，用乙 醇+濃氨水98+2溶液洗脫，洗脫液濃縮，經N,O-雙三甲級硅烷三氟乙酰胺衍生后于氣質聯用儀上進展測定，以美托洛爾為內標，進展定量；2)ELISA 法：微孔板包被有針對克倫特羅IgG的抗抗體；參加克倫特羅抗體，經過溫育和洗滌后；參加酶標記物、標準或樣品溶液，克倫特羅與酶標記物競爭與抗體結合；沒有連接的克倫特

8、羅酶標記物在被洗滌除去；參加酶底物和發色劑并且溫育，結合的酶標記物將無色的發色劑為藍色的產物， 參加反響終止液使顏色有藍轉變為黃色。在450nm處比色測定。三.魚體中組胺含量的分光光度法檢測1. 影響組胺含量測定準確性的因素有哪些？答:偶氮試劑是否臨配先用；正戊醇提取三氯乙酸溶液中組胺時的PH；鹽酸提取時溶液的 PH；組胺與偶氮試劑反響時，溶液是否為弱堿性；組胺與偶氮試劑反映的顯色時間2. 組胺與偶氮試劑的反響中，酸堿度控制不當會給實驗結果造成怎樣的影響？答:組胺與偶氮試劑反響必須在弱堿條件下進展，且反響時間嚴格控制10mi n.假如酸堿度控制不當，過酸時局部組胺與酸反響，組胺減少，如此與偶氮

9、試劑反響后導致結果偏低；過堿時，偶氮試劑的量會減少， 也會導致結果偏低。只有在弱堿條件下，組胺與偶氮試劑方可完整反響，才會有準確的結果。四飲料中食用合成著色劑的測定1. 提取別離食用合成著色劑的根本原理是什么？答:酸性條件下，用聚酰胺粉或脫脂羊毛進展吸附，然后用乙醇一氨溶液分次洗滌，收集洗滌液，濃縮定 容即可測定。2. 樣品前處理過程中吸附色素除了聚酰胺粉還有哪些材料可用？答:脫脂羊毛3. 薄層色譜法別離檢測合成著色劑的根本原理是什么？答:水溶性酸性合成著色劑在酸性條件下被聚酰胺吸附，而在堿性條件下解吸再利用薄層色譜法進展別離 后，于標準系列比擬其 Rf值定性和用分光光度計定量。4影響薄層色譜分光光度法檢測食用合成著色劑含量的因素主要有哪些？如何降低其影響？答:樣品前處理：選用適宜的預處理方法進展樣品前處理，排除干擾物，提高檢測靈敏度和準確度；展開劑的選擇：根據樣品的極性大小選擇相應的極性匹配的展開劑，以便著色劑的展開；吸附著色劑 是否完全：用聚酰胺粉吸附必須保證吸附完全；著色劑解吸是否完全：所用乙醇一氨解吸時應以顏色 為準判斷是否完全解吸；： PH值：注意調節PH，以保證在酸性條件下吸附，堿性條件下解吸。5. 食用合成著色劑混合物的別離方法除了薄層色譜法外還有哪些？試簡述其根本原理？答:高效液相色譜 HPLC :被測食品中合成著色劑用聚酰胺吸附法或者液一液分