1、醫院消毒滅菌效果監測標準操作規程醫院消毒是預防醫院內感染的重要措施之一，消毒效果的監測是評價其消毒設備運轉是否正常、消毒藥劑是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否達標的唯一手段。為規范消毒效果監測，特制定醫院消毒滅菌效果監測的標準操作規程。一、空氣消毒效果的監測1、監測頻次：每季進行。2、采樣 采樣時間：空氣消毒后4小時內、手術操作前。 平板暴露法：暴露前先檢查平板是否污染，是否有氣泡及霉點。將普通營養瓊脂平板（直徑為 9cm）放在室內各采樣點處，采樣高度為距地面 1.5m，采樣時將平板蓋打開，斜扣放于平板旁，暴露5min，在放置、收取平皿時，手不能在暴露平皿的正上方移動。布點方法：室內面積

2、30m2，設內、中、外對角線上的3點，內、外點布點部位距墻1M處；室內面積30m2，設 4 角及中央共 5 點，4 角的布點部位距墻壁 1m 處。圖1 室內面積30m2布點圖 圖2 室內面積30m2的布點圖3、注意事項 采樣前，關好門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min 進行采樣。 平板擺放如取一條對角線，避免離門近的一條。 工作人員不要靠近自動門，以免影響監測結果。4、結果判定非潔凈手術部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產房、導管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監護病房、血液病病區空氣中的細菌菌落總數cfu15min·直徑9cm平皿。兒科病房、母嬰同室、婦產科檢查室、人流

3、室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細菌菌落總數4cfu/5min·直徑9cm平皿。二、手、物體表面消毒效果監測1、監測重點科室：手術室、產房、導管室、層流潔凈病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重癥監護病房、新生兒室、母嬰室、血液透析病房、燒傷病房、感染疾病科、口腔科、消毒供應中心等。2、 監測頻次 重點科室物表每月監測，工作人員手每季度監測。 有醫院感染流行，懷疑與手衛生或醫院環境衛生學因素有關時，應及時進行監測。3、手消毒效果的監測 采樣時間：在接觸患者、進行診療活動前采樣。 采樣方法：

4、被檢人五指并攏，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子在雙手指屈面從指根到指端往返涂擦 2 次（一只手涂擦面積約 30cm2），并隨之轉動采樣棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投入10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內，立即送檢。結果判定衛生手消毒10cfu/ cm2外科手消毒5 cfu/ cm2一般醫護人員手不得檢出大腸桿菌、金黃色葡萄球菌；類、類區域工作人員手不得檢出銅綠假單胞菌；母嬰同室、新生兒室及兒科病房工作人員手不得檢出沙門氏菌，溶血性鏈球菌。注意事項：若消毒因子為化學消毒劑，采樣液中應加入相應中和劑。醇類與酚類消毒劑，不需要加中和劑；含氯消毒劑、含碘消毒劑、過氧化物消毒劑，需加

5、入0.1硫代硫酸鈉；洗必泰、季銨鹽類消毒劑，需加入3（W/V）吐溫80和0.3卵磷脂；醛類消毒劑，需加入0.3甘氨酸；含有表面活性劑的各種復方消毒劑，需加入3（W/V）吐溫。洗手后不要接觸未消毒的物品。用消毒巾擦干，或控干手上的水分。4、物體表面消毒效果的監測 物體表面的采樣：用 5cm×5cm 的標準滅菌規格板，放在被檢物體表面，采樣面積100 cm2，連續采樣 4 個，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子 1 支，在規格板內橫豎往返均勻涂擦各 5 次，并隨之轉動棉拭子，剪去手接觸部位后，將棉拭子投入10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內。門把手等不規則物體表面用棉拭子直接涂擦采

6、樣。 注意事項被采樣本表面積100cm2取全部表面；被采樣本表面積100cm2，取100cm2。不規則物體表面的采樣，盡量準確估算實際面積。小型物體表面的結果計算，用cfu/件表示，（國家現無評價標準，可估計面積計算菌落總數，參照一般物表的標準進行評價）。若消毒因子為化學消毒劑，采樣液中應加入相應中和劑。結果判定潔凈手術部、其他潔凈場所，非潔凈手術部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產房、導管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監護病房、血液病病區等；物體表面細菌菌落總數5cfu/ cm2。兒科病房、母嬰同室、婦產科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應中心、血液透析中心（室

7、）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房等；物體表面細菌菌落總數10cfu/ cm2。三、滅菌物品的監測1、滅菌物品不做常規監測，如懷疑醫院感染與滅菌物品有關時，可按下列方法進行監測。2、采樣： 采樣時間：在滅菌處理后，存放有效期內采樣。 采樣方法：用無菌操作打開器械包（敷料包），用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復涂抹手術鉗、鑷子等醫療器械（手術敷料），將棉拭子投入 10ml 無菌洗脫液中，將采樣液混勻。結果判定:陽性對照在 24h 內應有菌生長，陰性對照在培養期間應無菌生長，如需-厭氧菌及霉菌培養管內均為澄清或雖顯混濁但經證明并非有菌生長，判為滅菌合格；如需-厭氧菌及霉菌培養管中任

8、何1管顯混濁并證實有菌生長，應重新取樣，分別同法復試 2 次，除陽性對照外，其他各管均不得有菌生長，否則判為滅菌不合格。注意事項：送檢時間不得超過 6h，若樣品保存于 04，則不得超過24h。滅菌物品采樣，應嚴格遵守無菌操作，避免微生物污染。無菌檢驗應該在潔凈度為100級單向流空氣區域內進行采樣，對單向流向空氣區域及工作臺面，必須進行潔凈度驗證。3、 結果判定：無菌生長四、內鏡消毒、滅菌效果的監測1、監測時間 消毒后內鏡：每季度進行。 滅菌后內鏡：每月進行（經壓力蒸汽滅菌、環氧乙烷滅菌、低溫等離子體滅菌的內鏡可不做日常監測）。2、采樣 采樣時間：在消毒滅菌后、使用前進行采樣。 采樣方法：軟式內

9、鏡內腔面：用20ml無菌注射器抽取10ml含相應中和劑的緩沖液，從內鏡活檢口注入，用15ml無菌試管從活檢出口收集。3、結果判定：細菌總數< 20cfu/件（致病菌不得檢出）。五、消毒、滅菌劑的監測1、監測時間 化學監測：根據消毒、滅菌劑的性能設定監測時間，如含氯消毒劑、過氧乙酸等易揮發產品每日監測； 戊二醛監測每周不少于一次。 生物監測：消毒劑每季度一次；滅菌劑每月一次。3、使用中消毒液染菌量測定 監測樣品：碘伏、安爾碘、戊二醛等。 采樣方法： 涂抹法：用無菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入9.0ml含有相應中和劑的采樣管內混勻。 傾注法及中和劑選擇參考手消毒效果監測。 結果判定：使用中

10、滅菌用消毒液：無菌生長；使用中皮膚黏膜消毒液染菌量：10cfu/ml，其他使用中消毒液染菌量100cfu/ml。六、紫外線燈管輻照度值的測定 1、監測時間 日常監測：包括燈管應用時間、累計照射時間和使用人簽名。 強度監測：每半年一次。 2、檢測方法： 紫外線輻照計測定法： 將紫外線輻照計探頭置于被檢紫外線燈下垂直距離 1m 的中央處，開啟紫外線燈 5min 后，待儀表穩定后，所示數據即為該紫外線燈管的輻照度值。 紫外線強度照射指示卡監測法：開啟紫外線燈5min后，將指示卡置紫外燈下垂直距離1m處，有圖案一面朝上，照射1min（紫外線照射后，圖案正中光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色），觀察指

11、示卡色塊的顏色，將其與標準色塊比較，讀出照射強度。3、注意事項： 紫外燈管開啟后穩定5分鐘后，讀測試數值。 紫外線輻照計必須在計量部門檢定的有效期內使用（要求一年校準一次）。 輻照計探頭放于燈管中央部位，儀器探頭與拉桿保持垂直。 紫外線強度變化與燈管質量、電壓、燈管光潔度等有關。 紫外線指示卡照射強度以當時判斷為準，隨保存時間延長色塊顏色會變淡。4、結果判定：普通 30w 直管型紫外線燈，新燈輻照強度 90W/cm2為合格；使用中紫外線燈輻照強度70W/cm2 為合格；30W 高強度紫外線新燈的輻照強度180W/cm2為合格。七、壓力蒸汽滅菌效果監測1、監測頻次 物理監測：每鍋進行，并詳細記錄

12、：滅菌壓力、溫度（波動范圍在+3內）、時間、鍋號、鍋次、滅菌操作者簽名等項。 化學監測：每包進行外用化學指示物監測，高度危險性物品包內應放置包內化學指示物。 生物監測：每周進行，對新滅菌器使用前或擬采用新包裝容器、擺放方式、排氣方式及特殊滅菌工藝，都必須進行生物監測，合格后才能采用。滅菌植入型器械應每批次進行生物監測。 B-D試驗：預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器，每日進行一次B-D試驗。 可選擇具有代表性的PCD進行消毒滅菌效果監測。2、化學監測法： 化學指示卡：高危險性物品包內應放置化學指示卡，置于最難滅菌的部位； 化學指示膠帶：將化學指示膠帶粘貼于每一待滅菌物品包外，如果透過包裝材料可直接

13、觀察包內化學指示卡顏色變化，則包外不必貼化學指示膠帶； B-D試紙：預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器，每天滅菌前進行； 結果判定：通過觀察化學指示物顏色變化，判斷是否達到滅菌合格要求。3.生物監測法 指示菌株： 耐熱的嗜熱脂肪桿菌芽孢（ATCC7953）制備的壓力蒸汽滅菌生物指示劑。 檢測方法: 將1支生物指示劑管，置于標準試驗包中心部位。下排氣壓力蒸汽滅菌器的監測：在下排氣壓力蒸汽滅菌器滅菌柜室內，排氣口上方放置一個標準試驗包(由 3 件平紋長袖手術衣，4 塊小手術巾，2 塊中手術巾，1 塊大毛巾，30 塊 10cm×10cm 8 層紗布敷料包裹成 25cm×30cm

14、15;30cm 大小)；預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器的監測：預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器滅菌柜室內，排氣口上方放置一個標準測試包（由16條41cm×66cm全棉手術巾制成，將每條手術巾的長邊先折成3層，短邊折成2層然后疊放，制成23cm×23cm×15cm大小的測試包）；小型壓力蒸汽滅菌器應選擇常用的有代表性的滅菌包作為生物測試包，包內放置1支生物指示管，且滅菌器處于滿載狀態；快速壓力蒸汽滅菌器應直接將1支生物指示管置于空載的滅菌器內；經一個滅菌周期后，取出指示劑管，夾破管內安瓿，放于56培養箱中，同時放1支未滅菌的指示管，夾破管內安瓿，做陽性對照；培養48h

15、，觀察結果。 結果報告：每個指示劑管的溴甲酚紫蛋白胨水培養基都不變色，判定為滅菌合格；若由紫色變為黃色時，則滅菌過程不合格。八、血液透析系統的監測1、監測頻次 對入、出透析器的透析液：每月監測一次。 疑有透析液污染或有嚴重感染病例時：應及時進行監測，并增加采樣點，如原水口、軟化水出口、反滲水出口、透析液配液口等。 檢查結果超標，必須復查。2、樣品采集 對使用中的透析機入口液和出口液進行抽查采樣。 單一透析系統：采樣點為透析液入口及出口，消毒后用無菌試管接原液5ml即可。 4、 結果判定：入口200 cfu/ ml出口2000 cfu/ ml九、潔凈手術室空氣監測 1、潔凈手術室空氣沉降菌濃度的

16、測定： 采樣前的準備工作采樣前手術室與人員的準備：凈化機組開機時間滿 30分鐘后方可采樣；采樣者必須穿著無菌工作服，采樣人員不超過2人。采樣培養皿的準備：用于測定的培養皿必需進行空白對照試驗；培養皿測點數根據手術室的面積與級別而定 ；采樣點可布置在地面上或不高于地面0.8米的任意高度上。 采樣過程中的控制：采樣應在手術室處于清潔、靜止、密閉的狀態下進行；培養皿放置妥當后人員迅速離開；采樣過程中禁止人員進入，手術室門保持關閉狀態；采樣時間嚴格按照30分鐘執行。 采樣點的布置：送風口集中布置的手術間，應對手術區和周邊區分別檢測，當送風口分散布置時，全室統一檢測，但不應布置在送風口正下方。布點方法見

17、表9. 沉降菌采樣布點方法參考 (空態或靜態)等級空氣潔凈程度等級布點方法最少點數最少皿數布點示意正常值：個/30min·90皿手術區100級均勻布點5130.2周邊區1000級每邊內兩點850.4手術區1000級雙對角線350.75周邊區10000級長邊內2點短邊內1點631.5手術區10000級單對角線332周邊區100000每邊內1點434300000級面積30m2避開送風口正下方425面積30 m222 采樣注意事項布點時應從房間的里面開始，依次向外布放。收取平板時順序由外向里依次收取。空白對照：每次采樣設2次空白對照，第一次用于檢測培養皿（不打開平皿），第二次每室或每區用一個平皿模擬操作過程（打開平皿，立刻合上），同其它平皿一起送培養。兩次空白對照結果都必須為陰性。 靜態采樣可放置在固定設備如手術床上。空氣潔凈級別相同的房間，應每個凈化級別至少監測一間房間的空氣凈化狀況。結果判定：細菌最大平均濃度不超過（如上表）各潔凈度等級的正常值；未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為合格。必要時進行空氣浮游菌監測。2、回風口空氣動態平板法細菌菌落總數采樣 動態平板法采樣應