1、對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物的分析第一節 對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類藥物的結構與性質本類藥物的母體結構一、對氨基苯甲酸酯類藥物的基本結構一、對氨基苯甲酸酯類藥物的基本結構COOR2NR1HH2NCOOCH2CH2N(C2H5)2 HCl鹽酸普魯卡因COOC2H5H2N苯佐卡因苯佐卡因COOCH2CH2N(C2H5)2CH3(CH2)3NHHCl鹽酸丁卡因鹽酸丁卡因鹽酸氯普魯卡因H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2 HClClCONHCH2CH2N(C2H5)2H2NHCl鹽酸普魯卡因胺鹽酸普魯卡因胺酰苯胺類藥物酰苯胺類藥物(苯胺的酰基衍生物苯胺的酰基衍生物)的的基本結構基本結構NH C

2、R2OR1R3R4HONHCOCH3NHCOCH3C2H5O非那西丁（對乙酰氨基苯乙醚非那西丁（對乙酰氨基苯乙醚,解熱鎮痛藥解熱鎮痛藥）對乙酰氨基酚（撲熱息痛）對乙酰氨基酚（撲熱息痛）NHCOCH2N(C2H5)2CH3CH3HCl鹽酸利多卡因鹽酸利多卡因NHCONC4H9CH3CH3HCl鹽酸布比卡因鹽酸布比卡因HClNHCONCH3CH3C3H7鹽鹽酸酸利利多多卡卡因因 鹽酸羅派卡因鹽酸羅派卡因(S)-N-(2,6-二甲基苯基)-1-正丙基哌啶-2-甲酰胺鹽酸鹽一水合物。一、結構與性質一、結構與性質 （一） 具有芳伯氨基或潛在的芳伯氨基，可用重氮化偶合反應鑒別或亞硝酸鈉滴定法測定含量，可與

3、芳醛發生縮合反應，易氧化變色。如酰氨基鄰位存在甲基，空間位阻難于水解，較穩定。 （三）具脂烴胺側鏈，弱堿性，可與生物堿沉淀試劑發生沉淀反應進行鑒別或非水堿量法測定含量。 水溶液無法直接滴定，需用非水滴定。（四）游離堿難溶于水，易溶于有機溶劑，其鹽可溶于水。 （二） 酯鍵或酰胺鍵易水解 （五） 鹽酸利多卡因（布比卡因，羅哌卡因）分子結構酰胺基氮可在水溶液中與銅離子或鈷離子絡合，生成有色配位化合物沉淀，沉淀可溶于氯仿顯色。（六） UV （七） IR 二、鑒別試驗 （一）重氮化偶合反應 芳香第一胺類鑒別反應 ArNH2HClNaNO2重氮鹽橙黃猩紅色萘酚OH-鹽酸普魯卡因 直接：鹽酸普魯卡因、鹽酸氯

4、普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺 間接：對乙酰氨基酚對乙酰氨基酚鹽酸普魯卡因鹽酸普魯卡因 ChP（2010）鑒別鑒別 （1）本品顯芳香第一胺類的鑒別）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應（附錄反應（附錄） 取供試品約取供試品約50mg，加稀鹽酸，加稀鹽酸1m1，必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數滴，滴加堿性亞硝酸鈉溶液數滴，滴加堿性-萘酚試液數滴，視供試品不同，生成由橙萘酚試液數滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。黃到猩紅色沉淀。 對乙酰氨基酚對乙酰氨基酚 ChP（2005）鑒別鑒別 （2）取本品約）取本品約0.1

5、g，加稀鹽酸，加稀鹽酸5m1，置水浴中加熱，置水浴中加熱40分鐘，放冷；分鐘，放冷；取取0.5m1，滴加亞硝酸鈉試液，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖滴，搖勻，用水勻，用水3ml稀釋后，加堿性稀釋后，加堿性-萘酚試萘酚試液液2m1，振搖，即顯紅色。，振搖，即顯紅色。 對氨基酚對乙酰氨基酚、HCl（乳白色）鹽酸丁卡因H2NaNO鹽酸丁卡因不具有芳伯氨基，分子結鹽酸丁卡因不具有芳伯氨基，分子結構中的芳香仲胺在酸性溶液中與亞硝構中的芳香仲胺在酸性溶液中與亞硝酸鈉反應，生成白色沉淀，與具有芳酸鈉反應，生成白色沉淀，與具有芳伯氨基的同類藥物區別。伯氨基的同類藥物區別。 （二）與金屬離子反應（二）與金屬離子反應

6、1. 與銅和鈷離子反應與銅和鈷離子反應 黃色藍紫色硫酸銅鹽酸利多卡因氯仿碳酸鈉 亮綠色細小鹽酸利多卡因H2CoCl苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普魯卡因和鹽酸丁卡因等苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普魯卡因和鹽酸丁卡因等不發生此反應。不發生此反應。棕黑色）暗棕色羥肟酸鐵（紫紅色羥肟酸鹽酸普魯卡因胺322FeClOH 黃色）（鹽酸利多卡因、3HNO23NOHg紅色或橙黃色）（對氨基苯甲酸酯類、3HNO23NOHg與汞離子的反應與汞離子的反應 2羥肟酸鐵鹽反應羥肟酸鐵鹽反應 （三）水解產物的反應 1. 鹽酸普魯卡因鹽酸普魯卡因 ChP（2010）鑒別鑒別 （2）取本品約）取本品約0.1g，加水，加水

7、2ml溶解溶解后，加后，加10氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液1ml，即生成白，即生成白色沉淀；加熱，變為油狀物；繼續加熱，色沉淀；加熱，變為油狀物；繼續加熱，產生的蒸氣，能使濕潤的紅色石蕊試紙變產生的蒸氣，能使濕潤的紅色石蕊試紙變為藍色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽為藍色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。酸酸化，即析出白色沉淀。 ）對氨基苯甲酸（白色對氨基苯甲酸鈉紙變蘭色）（使濕潤的紅色石蕊試二乙氨基乙醇對氨基苯甲酸鈉油狀物普魯卡因鹽酸普魯卡因HCl NaOH2. 苯佐卡因苯佐卡因 ChP（2010）鑒別鑒別 （2）取本品約）取本品約0.1g，加氫氧化鈉，加氫氧化鈉試液試液5m1

8、，煮沸，即有乙醇生成；加碘試，煮沸，即有乙醇生成；加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發生碘仿液，加熱，即生成黃色沉淀，并發生碘仿的臭氣。的臭氣。 ）（碘仿臭氣，黃色乙醇乙醇苯佐卡因32CHINaOHINaOH （四）制備衍生物測熔點（四）制備衍生物測熔點1三硝基苯酚衍生物三硝基苯酚衍生物 鹽酸利多卡因鹽酸利多卡因 ChP（2010）鑒別鑒別 取本品取本品0.2g，加水，加水20ml溶解。溶解。（1）取溶液）取溶液10ml，加三硝基苯酚試液，加三硝基苯酚試液10ml，即生成沉淀；濾過，沉淀用水洗滌，即生成沉淀；濾過，沉淀用水洗滌后，干燥，依法測定（附錄后，干燥，依法測定（附錄C），熔點），熔點為

9、為228232，熔融時同時分解。，熔融時同時分解。2. 硫氰酸鹽衍生物硫氰酸鹽衍生物 鹽酸丁卡因鹽酸丁卡因 ChP（2010）鑒別鑒別 （1）取本品約）取本品約0.1g，加，加5%醋酸鈉醋酸鈉溶液溶液10ml溶解后，加溶解后，加25%硫氰酸銨溶液硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結晶；濾過，結晶用水，即析出白色結晶；濾過，結晶用水洗滌，在洗滌，在80干燥，依法測定（附錄干燥，依法測定（附錄C），熔點約為），熔點約為131。 鹽酸布比卡因、鹽酸普魯卡因胺鹽酸布比卡因、鹽酸普魯卡因胺 ChP（2010）鑒別鑒別 （2）取本品，精密稱定，按干燥）取本品，精密稱定，按干燥品計算，加品計算，加0.01mol

10、/L鹽酸溶液制成每鹽酸溶液制成每1ml中含中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附錄的溶液，照分光光度法（附錄A）測定，在）測定，在263nm與與271nm的波長處有的波長處有最大吸收；其吸收度分別為最大吸收；其吸收度分別為0.530.58與與0.430.48。（五）（五）UV （六）（六）IR 鹽酸布比卡因鹽酸布比卡因 ChP（2005）鑒別鑒別 （3）本品的紅外光吸收圖譜與對）本品的紅外光吸收圖譜與對照的圖譜（光譜集照的圖譜（光譜集324圖）一致。圖）一致。一一. 鹽酸普魯卡因注射液中鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸對氨基苯甲酸的檢查的檢查 檢查方法檢查方法 HPLC 雜質對照品法雜質對照

11、品法 雜質來源雜質來源 水解產生水解產生 第三節、特殊雜質與檢查第三節、特殊雜質與檢查供試液供試液:鹽酸普魯卡因鹽酸普魯卡因0.2mg/ ml對照品對照品:對氨基苯甲酸對氨基苯甲酸1 g/ml溶液。溶液。固定相：固定相：C18流動相：流動相：0.1%庚烷磺酸鈉的庚烷磺酸鈉的0.05M KH2PO4（pH 3.0）-甲醇（甲醇（68:32）檢測波長：檢測波長：279 nm二二. 鹽酸氯普魯卡因注射液中有關物質和光解產物鹽酸氯普魯卡因注射液中有關物質和光解產物的檢查的檢查雜質：雜質：4-氨基氨基-2-氯苯甲酸氯苯甲酸來源：生產、貯藏來源：生產、貯藏 【雜質檢查雜質檢查】 USP30-NF25: H

12、PLC-MS 分析 色譜條件：色譜條件：Zobax SB-C18，流動相：，流動相：0.5%乙酸水溶液乙酸水溶液-0.5%乙酸乙腈溶液乙酸乙腈溶液(87:13), 流速流速1 ml/min， 檢測波長：檢測波長：254 nm 質譜條件質譜條件: ESI(+), 質量掃描范圍質量掃描范圍: 80600, 噴霧電壓噴霧電壓4000V,等等m/z:253,鹽酸羥普魯卡因鹽酸羥普魯卡因M+1+ ，鹽酸氯普魯卡因光水解產物，鹽酸氯普魯卡因光水解產物m/z:172,M+1+ 4-氨基氨基-2-氯苯甲酸準分子離子峰氯苯甲酸準分子離子峰（一）亞硝酸鈉滴定法（一）亞硝酸鈉滴定法 1. 原理原理 具芳伯氨基的藥物

13、具芳伯氨基的藥物Cl-+22+2+ArNH2 NaNO2 HCl ArNN NaCl H2O四、含量測定四、含量測定 ChP(2010年年):苯佐卡因苯佐卡因, ,鹽酸普魯卡因及其注射液鹽酸普魯卡因及其注射液, ,鹽酸鹽酸普魯卡因胺片劑及其注射液普魯卡因胺片劑及其注射液 具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測定。具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對乙酰氨基酚、醋氨苯酚等）經水解，芳香族硝乙酰氨基酚、醋氨苯酚等）經水解，芳香族硝基化合物（如無味氯霉素）經還原，也可用本基化合物（如無味氯霉素）經還原，也可用本法測定。法測

14、定。 NHCOR + H2ONH2 + RCOOHH+NO2 + 6HNH2 + 2H2O2. 主要測定條件主要測定條件（1）加入適量）加入適量KBr加速反應加速反應 NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O 重氮化反應的機理為：重氮化反應的機理為： NN+Cl-快N N OH快NNOH慢NO+Cl-NH2OHNOBr HBr HNO22OHNOCl HClHNO22（1）K1（2）K2 K1 300 K2 加入加入KBr，可增大溶液中，可增大溶液中NO+亞硝酰離子亞硝酰離子的濃度，加快重氮化反應速度的濃度，加快重氮化反應速度（2 2）酸的種類及其濃度）酸的種類及其

15、濃度在不同酸中重氮化反應的速度為：在不同酸中重氮化反應的速度為：HBrHCl H2SO4 HNO3鹽酸鹽酸 1:2.56； 加入鹽酸：加入鹽酸： 重氮化反應速度加快；重氮化反應速度加快； 重氮鹽在酸性溶液中穩定；重氮鹽在酸性溶液中穩定； 防止生成防止生成偶氮氨基偶氮氨基化合物，而影化合物，而影響測定結果響測定結果NN+Cl- + H2NNN NH + HCl（3）室溫條件下滴定）室溫條件下滴定 1030（4）滴定速度：先快后慢）滴定速度：先快后慢 滴定管尖端插入液面下滴定管尖端插入液面下2/3處，滴處，滴定液一次大部分放下，近終點時方定液一次大部分放下，近終點時方改為慢速滴定改為慢速滴定 3.

16、 指示終點的方法指示終點的方法（1）永停滴定法）永停滴定法 ChP（2005）、）、BP永停滴定法（附錄永停滴定法（附錄A）調節調節R1使加于電極上的電壓約為使加于電極上的電壓約為50mV。取供試。取供試品適量，精密稱定，加水品適量，精密稱定，加水40ml與鹽酸溶液與鹽酸溶液（12）15ml，攪拌使溶解，再加溴化鉀，攪拌使溶解，再加溴化鉀2g，插入鉑插入鉑鉑電極后，將滴定管的鉑電極后，將滴定管的尖端插入尖端插入液面液面下約下約2/3處，用亞硝酸鈉滴定液（處，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L或或0.05mol/L）迅速滴定，至近終點時，將滴定管）迅速滴定，至近終點時，將滴定管的的尖端提出液面尖

17、端提出液面，用少量水淋洗尖端，繼續緩，用少量水淋洗尖端，繼續緩緩滴定，至電流計指針突然偏轉，并不再回復，緩滴定，至電流計指針突然偏轉，并不再回復，即為滴定終點。即為滴定終點。亞硝酸鈉永停滴定法原理亞硝酸鈉永停滴定法原理 終點前：無可逆電對，無電流產生，電終點前：無可逆電對，無電流產生，電流計流計指針指針停止在停止在“0”位位 終點后：過量終點后：過量NaNO2 陽極陽極：NO+H2OHNO2+H+eHNO2+H+e陰極：陰極：NO+H2O電路有電流通過，電流計電路有電流通過，電流計指針指針突然偏轉并不再回突然偏轉并不再回“0”（2）電位法）電位法 （3）外指示劑法）外指示劑法 KI淀粉糊劑或試

18、紙淀粉糊劑或試紙2NaNO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O （4）內指示劑法）內指示劑法 中性紅中性紅 不可逆指示劑不可逆指示劑4. 測定方法測定方法 鹽酸普魯卡因鹽酸普魯卡因 ChP（2005） 取本品約取本品約0.6g，精密稱定，照永停，精密稱定，照永停滴定法（附錄滴定法（附錄A），在），在1525，用亞硝酸鈉滴定液（用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。）滴定。每每1ml亞硝酸鈉滴定液（亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當于相當于27.28mg的的C13H20N2O2HCl（二）非水溶液滴定法（二）非水溶液滴定法脂烴胺側鏈，具弱堿性脂烴胺側鏈，具弱堿

19、性. .鹽酸丁卡因鹽酸丁卡因, ,鹽酸利鹽酸利多卡因，鹽酸布比卡因側鏈上的叔胺氮具有弱堿性，多卡因，鹽酸布比卡因側鏈上的叔胺氮具有弱堿性，均可采用非水溶液滴定法測定含量。均可采用非水溶液滴定法測定含量。 HAClOBHHClOABH44原理原理:溶劑溶劑: :醋酸或冰醋酸或酸酐醋酸或冰醋酸或酸酐標準溶液標準溶液: HClO: HClO4 4指示劑指示劑: :結晶紫（或萘酚苯）結晶紫（或萘酚苯）結晶紫：紫色（堿式色）結晶紫：紫色（堿式色）終點終點: :藍色或綠色（黃綠色）藍色或綠色（黃綠色）加入醋酸汞加入醋酸汞 作用作用: :除去氫鹵酸的干擾除去氫鹵酸的干擾 藍色、綠色、黃綠色、黃色（酸式色）p

20、H滴定鹽酸丁卡因時，加入適量醋酐。因醋酐解滴定鹽酸丁卡因時，加入適量醋酐。因醋酐解離生成的離生成的醋酐合乙酰氧離子醋酐合乙酰氧離子比醋酸合質子的酸比醋酸合質子的酸性還強，有利于丁卡因堿性的增強，使滴定突性還強，有利于丁卡因堿性的增強，使滴定突躍敏銳。躍敏銳。 2(CH2(CH3 3CO)CO)2 2 O(CHO(CH3 3CO)CO)3 3O O+ +十十CHCH3 3COOCOO【鹽酸利多卡因的測定鹽酸利多卡因的測定】 取本品取本品0.2g，精密稱定，加冰醋酸溶解后，精密稱定，加冰醋酸溶解后，加醋酸汞加醋酸汞 5ml與結晶紫指示劑與結晶紫指示劑1滴，用滴，用HClO4滴定液（滴定液（0.1m

21、ol/L)滴至溶液顯綠色，將滴定滴至溶液顯綠色，將滴定的結果用空白試驗校正。每的結果用空白試驗校正。每1ml HClO4滴定滴定液（液（0.1mol/L)相當于相當于27.08mg 的的C14H22N2O.HCl 鹽酸利多卡因非水溶液滴定法反應過程如下：鹽酸利多卡因非水溶液滴定法反應過程如下： （三）紫外分光光度法（三）紫外分光光度法 對乙酰氨基酚在對乙酰氨基酚在0.4氫氧化鈉溶液中，于氫氧化鈉溶液中，于257nm波長處有最大吸收，其紫外吸收光譜特波長處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測定。征，可用于其原料及其制劑的含量測定。 對乙酰氨基酚對乙酰氨基酚 ChP（200

22、5） 取本品約取本品約40mg，精密稱定，置，精密稱定，置25ml量瓶中，量瓶中，加加0.4氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液5.0ml溶解后，加水至刻溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取度，搖勻，精密量取5m1，置，置100ml量瓶中，加量瓶中，加0.4氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液10m1，加水至刻度，搖勻，加水至刻度，搖勻，在在257nm的波長處測定吸收度，按的波長處測定吸收度，按C8H9NO2的的吸收系數吸收系數 為為715 計算，即得。計算，即得。%11cmE原料藥原料藥 吸收系數法吸收系數法 USP（25） 對照法對照法 x1%1cmA=E100 xcx1%1cmD(%)=100%WAD=100%E100Wxc 含量（四）高效液相色譜法（四）高效液相色譜法對乙酰氨基酚泡騰片對乙酰氨基酚泡騰片: 色譜條件色譜條件: 柱柱C18, 流動相流動相:甲醇甲醇-水水 (pH 4.5磷酸緩沖液磷酸緩沖液);檢測波長檢測波長:254取取10片片劑片片劑,稱取其質量稱取其質量 流動相溶解定容至流動相溶解定容至50 m