1、細胞培養室管理規章制度細胞培養室是進行各種細胞培養的凈化級實驗室， 所有進入實驗室的人員都必須遵守實驗室 有關的規章制度，接受實驗室管理人員的管理。第一章 總則第一條 細胞培養室主要由團隊內相關科研人員使用，原則上不對外開放，其他人員如確實 需使用細胞室必須預先征得實驗室負責人和細胞室負責人同意。第二條 進出細胞室實驗需要嚴格登記。如有不符合實驗室工作和生物安全要求的，實驗室 負責人和細胞室工作人員有權責令整改。第三條 使用人員需參加專門的細胞培養室使用規范培訓并通過考核后，方可獲準進入細胞 培養室進行實驗。嚴禁未經許可擅自進入細胞培養室或使用相關設備。第四條 細胞培養室正常使用過程中，人員進

2、出應通過緩沖間和風淋間；進出實驗室的器械 和樣品需通過傳遞窗， 嚴禁隨身帶入。 實驗用品應盡量一次帶入， 嚴禁將與實驗無關的物品 帶入實驗室， 在細胞培養室內不得進行微生物等其它易污染物的培養， 禁止從事任何高危生 化實驗。第五條 實驗人員應愛護實驗室各類儀器，按照規則使用并保持設備清潔。實驗中的昂貴設 備，未經許可不得擅自開關。 精密儀器需經專門培訓后方能操作未經許可不得改變設備儀器 的預設參數。 設備儀器出現故障或發生事故， 應及時向實驗室負責人報告， 安排專業人員進 行檢修。第二章 條例第一條 常規操作1. 穿著專用實驗服。實驗人員必須在細胞室緩沖間內更換細胞室專用實驗服，嚴禁不穿實 驗

3、服或直接穿著普通實驗室實驗服進入細胞室。2. 穿著專用拖鞋。在準備間換下自己的鞋子，盡量避免在緩沖間走動、停留。3. 細胞室最多可 6 個人同時使用。4. 實驗過程中嚴禁喧嘩，閑聊，反復進出培養室。第二條 培養箱使用規則1. 從培養箱取放物品前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開門時間和減少開門次 數。注： 培養箱中的空氣是經過過濾的潔凈空氣。 長時間敞開或頻繁開關培養箱， 容易造 成污染。2. 從培養箱拿取細胞時輕拿輕放，動作迅速，隨手關緊培養箱門。未經允許，禁止翻看、 移動他人細胞或樣品，如有特殊需要的，請聯系實驗室負責人協調。3. 培養瓶皿放入培養箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發

4、后再放入，以免培養箱word 文檔 可自由復制編輯 內滯留過多乙醇蒸氣。4. 培養箱內細胞培養的放置需整潔有序， 方便查找， 同時應盡量提高培養箱的使用效率， 負責老師可視實驗情況啟用或停止空培養箱的使用，節約資源。5. 普通培養中的細胞，若非實驗特殊需要，每瓶 / 板細胞每天只需要觀察生長狀態一次，2 人以上共用的細胞，可約好時間一起觀察。注：頻繁將細胞拿出觀察， 容易給培養箱造成污染， 同時也會影響細胞生長條件的恒定。6. 原代細胞需放置在原代培養專用培養箱培養，不得放置于其他培養箱，如一段時間內無 原代細胞實驗，負責人可協調安排培養箱供其他細胞培養使用。7. 實驗人員應經常注意檢查培養箱

5、溫度、 CO2 氣體量是否相符設定值。 密切注意培養箱內的 增濕盤，定期更換無菌水并進行消毒。密切注意培養箱內情況，如出現霉變、菌斑、支原體 和衣原體感染或其他明顯染菌跡象，應立即通知管理員及其它使用者。第三條 顯微鏡使用規則1. 倒置相差顯微鏡使用前，用酒精棉從中間至周圍擦拭載物臺。2. 離開細胞室時或較長時間不需使用時，及時關上電源，延長燈泡壽命。盡量避免頻繁 開關顯微鏡電源。3. 一次細胞實驗使用完畢后，在顯微鏡使用記錄本上登記。4. 熒光顯微鏡屬于貴重儀器需遵循貴重儀器預約使用規程。第四條 超凈臺相關操作規則1. 超凈臺使用遵循預約原則。在細胞室入口處預約，細胞室內填寫使用登記。 a：

6、無預約者若有必要在他人預約時段內使用，需先征得預約者的同意，否則應無條件讓出 工作臺，以免耽誤他人實驗。b：使用記號筆在預約表格上提前預約下一周的使用時間，請注意周六周日是指上周的周末。c：預約內容請包括：時間范圍，姓名，如特殊實驗請寫明。2. 超凈臺使用前用紫外燈照射 15 分鐘滅菌，使用前、后需用酒精棉球擦拭工作區消毒， 所有物品放入超凈臺內使用前均應消毒， 超凈臺內嚴禁堆放過多物品影響風路平衡， 不同超 凈臺內物品嚴禁頻繁交換使用。3. 點燃酒精燈前需檢查瓶中酒精是否足夠，液面應占瓶高 1/3-2/3 。注： 消毒用 75%的酒精，酒精燈用 95%以上的酒精，向噴壺或燈內添加酒精時請留意

7、。4. 超凈臺中應擺放廢液杯， 用于暫時存放廢棄物， 實驗結束后將杯內加入 NaOH溶液處理 片刻，廢液垃圾倒入水池并同時用水沖釋，固體垃圾倒入生物樣品專用垃圾桶中注： 廢液缸應及時處理，嚴禁長時間放置，以免留有大量培養液滋生細菌。5. 細胞實驗后任何含有細胞培養污物的培養瓶，離心管，移液管等必須及時帶出細胞房。第五條 器具的清洗規則1. 可回收的移液管、離心管、培養瓶皿等，放入裝有清水的塑料桶中浸泡，桶內需有足word 文檔 可自由復制編輯 量的清水以沒過浸泡物品。注： 可回收器皿必要時先初步涮洗后再放入桶內， 尤其是培養瓶或血清管中有大量高 營養的液體殘留時， 容易使桶內的清水長菌。 保證

8、浸泡的瓶、 管內完全被清水充滿，而不是 在裝有大量空氣的情況下被壓倒桶底。2. 清水沖洗后及時放入酸缸浸泡， 應由使用者本人及時清洗晾干備用， 操作時請注意帶橡 膠手套，小心操作。注： 禁止長時間浸泡于清水中，此時細菌可能已在桶中生長并釋放內毒素。細菌內毒 素很難通過常規濕熱滅菌步驟去除干凈， 即使干烤也不能保證其完全失活。 內毒素對細胞生 長及多種實驗均有較大影響。洗滌程序： 清水沖十次以上去除重金屬殘留， 然后沖去離子水 5 次，再用超純水 5 次，倒置 于烘箱中晾干。并及時包扎滅菌。第六條 冰箱、試劑等相關操作規則1. 從冰箱取放物品動作要迅速，關門時要檢查門是否關好。按類別存放試劑。嚴

9、禁長時 間敞開冰箱門。2. 各人存放于冰箱內的培養液、生化試劑、樣品要注明姓名、配制日期、樣品名稱，特 殊試劑需獲得細胞室管理人員同意后方能放置。不得使用他人的培養液或其他生化試劑。3. 分裝好的血清長時間保存于 -80 ，使用前放于 4預解凍。原則上解凍好的血清應全 部配成含血清的培養基備用，若有剩余，則暫存于4并盡快使用。盡量不要使用他人開過的血清，以免交叉污染。4. 細胞室內的冰箱空間有限，盡量僅放置使用頻率較高的試劑。請勿將一些閑置試劑，污 染試劑長期放置在細胞室。5. 工作人員會定期對冰箱進行清理，發現無標記，過期試劑等違規物品將全部清除出去， 并且查找試劑配置人給予警告。第七條 進

10、入細胞室物品控制1. 所有進入細胞室的物品需經過傳遞窗，盡量經過紫外照射，酒精表面消毒。2. 嚴禁將可能含有污染物或病原菌的實驗物品帶入細胞室。3. 細胞室內僅放置少量實驗必須耗材即可，不得整箱搬入，出現潔凈室內物品堆積狀況。4. 細胞室內儲物柜的物品放置由相關管理人員安排，并做標記。 第八條 細胞室清潔守則1. 每周值日生時間從周六開始，至下周五結束。2. 日常維護：注意培養箱顯示正常，顯微鏡，冰箱，超凈臺的正常使用與維護。細胞室內 以及門口生物樣品專用垃圾桶的及時清理。3. 每周大清潔：每周五下午五點用新潔爾滅打掃細胞室。 清潔順序：擦超凈臺（用酒精棉球）；用新潔爾滅擦桌面，培養箱，超凈臺

11、以及冰箱外壁，word 文檔 可自由復制編輯 及桌上的儀器，細胞室墻面，傳遞窗，風淋室；給水浴鍋加水或換水，細胞室衣柜和拖鞋擺 放整齊，拖地，紫外消毒細胞室 30 分鐘。注：若上周值日生及時給培養箱內水槽加足水， 根據經驗未來一周內培養箱不會干水， 但值 日生仍應經常檢查，以便及時發現異常情況。切記給培養箱加滅菌水。4. 在沒有出現問題的情況下， 每 2 個月清潔一次培養箱： 先將培養箱中的物品取出暫存于 超凈臺內， 對于比較敏感的細胞可以暫存于另一個培養箱； 將培養箱內的不銹鋼板取出， 包 括 4 塊橫板和左右 2 塊立著的架子， 用酒精棉球清潔鋼板和培養箱內壁； 啟動培養箱自消程 序。第九

12、條 人員培訓1. 由將要做細胞實驗的人員提出申請，填寫細胞培養室使用申請表。2. 細胞室負責老師視申請人數酌情安排培訓時間，培訓內容包括安全培訓、理論知識與實 踐操作培訓。3. 培訓考核合格后由導師、培訓老師、細胞室負責人簽字確認授予其細胞室使用權限。4. 培訓不合格者重新參加培訓。第十條 制度的實施與處罰1. 細胞室負責人以及管理人員密切關注細胞室的使用情況，發現違反規章操作者首先給予 提醒，但須做記錄。2. 對于一周內違反 3 次以內者予以警告， 3-5 次者給予停止細胞室使用權限 2 周，超過 5 次者停用其對細胞室使用權限，需重新參加培訓后才能再次使用。第三章 附則 本規章制度從公布之

13、日起開始執行，由生物醫學工程團隊實驗室管理委員會負責解釋及更 正。本實驗室追求不斷地進步， 各位老師及使用人員若有良好的建議可與細胞室負責人或實 驗室管理委員會成員溝通，我們會及時協調，旨在為團隊提供和諧，高效的實驗條件。生物醫學工程實驗室管理委員會二零一一年十二月二十一日訂word 文檔 可自由復制編輯細胞培養室使用申請表編號：申請人：性別：職務：教師 / 學生職稱/ 年級：導師：聯系電話：Email ：實驗原代培養 傳代培養 正常體細胞培養腫瘤細胞培養 干細胞培養內容克隆培養 細胞毒性實驗 細胞融合 細胞轉染 其他使用年月 日 出入每天一次每天兩次時間年 月 日頻率一周兩次一周三次培訓 需要申請年 月 日 安排 不需要培訓年 月 日時間申請本人承諾：將嚴格遵守細胞培養室管理規章制度，服從管理；如有違反，人簽愿接受相關處罰。字簽名：年 月 日導師意見（請對學生能否申請培訓予以確認）（請承諾對學生使用細胞房過程中的規范操作予以督促）及培訓后簽字：簽字：確認年月日年 月 日培訓（請對學生能否達到規范使用細胞室予以評價）老師意見簽字：年 月 日細胞（如同意使用，請填寫對使用者的要求與責