1、第十六章臨床電泳分析儀器一、名詞解釋1 .電泳：EP,是指帶電荷的溶質(zhì)或粒子在電場(chǎng)中向著與其本身所帶電荷相反的 電極移動(dòng)的現(xiàn)象。2 .蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)：當(dāng)溶液的酸堿度處于某一特定 PH值時(shí)，它將帶有相同數(shù)量 的正、負(fù)電荷（即凈電荷為零），蛋白質(zhì)分子在電場(chǎng)中不會(huì)移動(dòng)，故此特定的PH值被稱為該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)（pI）。3 .遷移率：帶電粒子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的移動(dòng)速度，常用以來表示。4 .毛細(xì)管電泳技術(shù)：又稱高效毛細(xì)管電泳或毛細(xì)管分離法，是一類以毛細(xì)管為 分離通道、以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力，根據(jù)樣品中各組分之間遷移速度（淌度） 和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離的一類液相分離技術(shù)。5 .電滲：電場(chǎng)中液體對(duì)于固體

2、支持物的相對(duì)移動(dòng)。6 .吸附作用：即介質(zhì)對(duì)樣品的滯留作用。它導(dǎo)致了樣品的拖尾現(xiàn)象而降低了分 辨率。二、選擇題【A型題】在五個(gè)選項(xiàng)中選出一個(gè)最佳答案。1 .瑞典科學(xué)家A.Tiselius首先利用U形管建立移界電泳法的時(shí)間是（C）A.1920 年B.1930 年C.1937 年D.1940 年E.1948 年2 .下列有關(guān)電泳時(shí)溶液的離子強(qiáng)度的描述中，錯(cuò)誤的是（B）A.溶液的離子強(qiáng)度對(duì)帶電粒子的泳動(dòng)有影響B(tài).離子強(qiáng)度越高，電泳速度越快C.離子強(qiáng)度太低，緩沖液的電流下降D.離子強(qiáng)度太低，擴(kuò)散現(xiàn)象嚴(yán)重，使分辨力明顯降低E.離子強(qiáng)度太高，嚴(yán)重時(shí)可使瓊脂板斷裂而導(dǎo)致電泳中斷3 .電泳時(shí)PH值、顆粒所帶的電

3、荷和電泳速度的關(guān)系，下列描述中正確的是（E）A. PH值離等電點(diǎn)越遠(yuǎn)，顆粒所帶的電荷越多，電泳速度也越慢B. PH值離等電點(diǎn)越近，顆粒所帶的電荷越多，電泳速度也越快C. PH值離等電點(diǎn)越遠(yuǎn)，顆粒所帶的電荷越少，電泳速度也越快D. PH值離等電點(diǎn)越近，顆粒所帶的電荷越少，電泳速度也越快E. PH值離等電點(diǎn)越遠(yuǎn)，顆粒所帶的電荷越多，電泳速度也越快4 . 一般來說，顆粒帶凈電荷量、直徑和泳動(dòng)速度的關(guān)系是（A）A.顆粒所帶凈電荷量越大或其直徑越小，在電場(chǎng)中的泳動(dòng)速度就越快B.顆粒所帶凈電荷量越小或其直徑越小，在電場(chǎng)中的泳動(dòng)速度就越快C.顆粒所帶凈電荷量越大或其直徑越大，在電場(chǎng)中的泳動(dòng)速度就越快D.顆粒

4、所帶凈電荷量越大或其直徑越小，在電場(chǎng)中的泳動(dòng)速度就越慢E.顆粒所帶凈電荷量越小或其直徑越大，在電場(chǎng)中的泳動(dòng)速度就越快5 .電泳時(shí)對(duì)支持物的一般要求除不溶于溶液、結(jié)構(gòu)均一而穩(wěn)定外，還應(yīng)具備（B）A.導(dǎo)電、不帶電荷、沒有電滲、熱傳導(dǎo)度小B.不導(dǎo)電、不帶電荷、沒有電滲、熱傳導(dǎo)度大C.不導(dǎo)電、帶電荷、有電滲、熱傳導(dǎo)度大D.導(dǎo)電、不帶電荷、有電滲、熱傳導(dǎo)度大E.導(dǎo)電、帶電荷、有電滲、熱傳導(dǎo)度小6 .醋酸纖維素薄膜電泳的特點(diǎn)是（C）A.分離速度慢、電泳時(shí)間短、樣品用量少B.C.D.E.分離速度快、分離速度快、分離速度快、分離速度慢、電泳時(shí)間長(zhǎng)、樣品用量少 電泳時(shí)間短、樣品用量少 電泳時(shí)間短、樣品用量多 電

5、泳時(shí)間長(zhǎng)、樣品用量少7.20世紀(jì)60年代中期問世的等電聚焦電泳，是一種（D）A.分離組分與電解質(zhì)一起向前移動(dòng)的同時(shí)進(jìn)行分離的電泳技術(shù)B.能夠連續(xù)地在一塊膠上分離數(shù)千種蛋白質(zhì)的電泳技術(shù)C.利用凝膠物質(zhì)作支持物進(jìn)行的電泳技術(shù)D.利用有PH值梯度的介質(zhì)，分離等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)的電泳技術(shù)E.用濾紙作為支持載體的電泳技術(shù)8 .雙向凝膠電泳（二維電泳），最多可以分辨出的斑點(diǎn)數(shù)量是（E） A.5001000B.10002000C.20004000D.40005000E.500010 0009 .下述對(duì)免疫電泳優(yōu)點(diǎn)的描述中，錯(cuò)誤的是（E）A.加快了沉淀反應(yīng)的速度B.是將某些蛋白組分根據(jù)其帶電荷的不同而分開，再

6、與抗體起反應(yīng)C.本法微量化程度高D.多樣化程度高E.應(yīng)用范圍小1.穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀屬于中壓電泳儀。其輸出電壓、電流的調(diào)節(jié)范圍為（D）A.輸出電壓的調(diào)節(jié)范圍是0100V,輸出電流為050mAB.輸出電壓的調(diào)節(jié)范圍是0200V,輸出電流為060mAC.輸出電壓的調(diào)節(jié)范圍是0300V,輸出電流為080mAD.輸出電壓的調(diào)節(jié)范圍是0600V,輸出電流為0100mAE.輸出電壓的調(diào)節(jié)范圍是0800V,輸出電流為0200mA2.雙向電泳樣品經(jīng)過電荷與質(zhì)量?jī)纱畏蛛x后（E）A.可得到分子的分子量，分離的結(jié)果是帶B.可得到分子的等電點(diǎn)，分離的結(jié)果是點(diǎn)C.可得到分子的等電點(diǎn)，分離的結(jié)果是帶D.可得到分子的等電點(diǎn)、分

7、子量，分離的結(jié)果是帶E.可得到分子的等電點(diǎn)、分子量，分離的結(jié)果是點(diǎn)3 .傳統(tǒng)的單向電泳方法最多只能分析的蛋白質(zhì)種數(shù)是（B）A.50B.100C.150D.200E.2504 .毛細(xì)管等電聚焦電泳具有極高的分辨率，通常可以分離等電點(diǎn)差異小于（A）的兩種蛋白質(zhì)A.0.01PH 單位B.0.05PH 單位C.0.10PH 單位D.0.15PH 單位E.0.20PHW：5 .毛細(xì)管電泳時(shí)進(jìn)樣體積在nl級(jí)，樣品濃度可低于的數(shù)量是（C）A.10-2mol/LB.10-3mol/LC.104mol/LD.10-5mol/LE.106mol/L6.毛細(xì)管電泳的特點(diǎn)是（E）A.容易自動(dòng)化，操作繁雜，環(huán)境污染小B

8、.容易自動(dòng)化，操作簡(jiǎn)便，環(huán)境污染大C.容易自動(dòng)化，操作繁雜，環(huán)境污染大D.不易自動(dòng)化，操作簡(jiǎn)便，環(huán)境污染小E.容易自動(dòng)化，操作簡(jiǎn)便，環(huán)境污染小7 .毛細(xì)管等速電泳常用于分離（A）A.小離子、小分子、肽類及蛋白質(zhì)8 .大離子、小分子、肽類及蛋白質(zhì)C.小離子、大分子、肽類及蛋白質(zhì)D.小離子、中分子、肽類及蛋白質(zhì)E.大離子、中分子、肽類及蛋白質(zhì)8.理想的毛細(xì)管柱除應(yīng)具有一定的柔性、易于彎曲，還應(yīng)是（D）A.化學(xué)和電惰性的、紫外光可以透過、耐用又便宜8 .化學(xué)和電惰性的、紅外光可以透過、耐用又便宜C.化學(xué)和電惰性的、可見光可以透過、耐用又便宜D.化學(xué)和電惰性的、紫外和可見光可以透過、耐用又便宜E.化學(xué)

9、和電惰性的、紫外和紅外光可以透過、耐用又便宜9 .目前所使用的毛細(xì)管柱內(nèi)徑是（C） |A.525umB.1535umC.2575umD.3080umE.50100um10 .毛細(xì)管電泳紫外檢測(cè)器質(zhì)量檢測(cè)極限為（B）A.10-1O10-12B.1O-1310-16C.1O1410-17D.1C1510-18E.1C-1610-1911 .毛細(xì)管電泳紫外檢測(cè)器濃度檢測(cè)極限為（C）A.1C-110-3B.1CT210-6C.1C-510-8D.1Cr710-9E.1C-1010-1212 .缺鐵性貧血時(shí)刻由于轉(zhuǎn)鐵蛋白的升高而呈現(xiàn)增高的區(qū)帶是（D）A.白蛋白B.兇球蛋白C. 如球蛋白D. B球蛋白E.

10、 丫球蛋白13.血清蛋白電泳圖譜能輔助進(jìn)行某些疾病的診斷及鑒別診斷。下述區(qū)帶中急性 炎癥時(shí)加深的是（B）A.白蛋白B. a1、 o2C.必BD. B、丫E. ai14 .應(yīng)用電泳技術(shù)進(jìn)行患者血液中Hb的類型及貧血類型的臨床診斷，其增高能表 現(xiàn)“伊輕型地中海貧血”的重要特征的血紅蛋白是（C）A. HbC B. HbD C. HbA D. HbE E. HbS15 .同工酶電泳時(shí)，肝癌患者可見（E）明顯升高。 A. LDHB. LDH2C. LDH3D. LDH4 E. LDH516 .下述有關(guān)毛細(xì)管區(qū)帶電泳的敘述中，不正確的是（B） A.也稱為毛細(xì)管自由溶液區(qū)帶電泳B.是毛細(xì)管電泳中使用最少的一

11、種技術(shù)C.根據(jù)組分的遷移時(shí)間進(jìn)行定性D.根據(jù)電泳峰的峰面積或峰高進(jìn)行定量分析E.它適用于小離子、小分子、肽類、蛋白質(zhì)的分離17 .下述對(duì)毛細(xì)管凝膠電泳原理的敘述中，不正確的是（C）A.是將板上的凝膠移到毛細(xì)管中作支持物的電泳B.凝膠具有多孔性C.能根據(jù)待測(cè)組分的離子強(qiáng)度不同而進(jìn)行分離 D.起類似分子篩的作用E.適用于分離、測(cè)定肽類、蛋白質(zhì)、DNA類物質(zhì)【X型題】每題的備選答案中有兩個(gè)或者兩個(gè)以上正確答案。1 .影響電泳的外界因素包括（ABCE A.電場(chǎng)強(qiáng)度B.溶液的PH值C.溶液的離子強(qiáng)度D.帶電性質(zhì) E.吸附作用2 .國(guó)內(nèi)外的電泳儀都趨向于控制的參數(shù)有（ABCD A.電壓B.電流C.功率D.

12、時(shí)間E.體積3 .電泳的輔助設(shè)備有（ABCDA.恒溫循環(huán)冷卻裝置B.伏時(shí)積分器C.凝膠烘干器D.分析檢測(cè)裝置E.電泳槽4 .聚丙烯酰胺凝膠電泳適合于（AB。A.蛋白質(zhì)的定性定量B.測(cè)定蛋白質(zhì)亞基的分子量C.核酸的定性、定量D. LDH同工酶的檢測(cè)E. CK同工酶的檢測(cè)5 .等電聚焦電泳法在電極之間形成的PH梯度是（ACEA.穩(wěn)定的B.間斷的C.連續(xù)的D.瞬間的E.線性的6 .等速電泳的特點(diǎn)有（ABQA.所有譜帶以同一速度移動(dòng)B.區(qū)帶銳化C.區(qū)帶濃縮D.區(qū)帶稀釋E.區(qū)帶圓化7 .蛋白質(zhì)的電泳遷移率與下述因素中有關(guān)的是（ACBA.所帶的凈電荷8 .重量C.顆粒直徑D.質(zhì)/荷比E.形狀8 .免疫電泳

13、可以用來研究（ABCDA.抗原和抗體的相對(duì)應(yīng)性B.測(cè)定樣品的各成分以及它們的電泳遷移率C.確定復(fù)合物中含有某種蛋白質(zhì)D.鑒定抗原或抗體的純度E.抗原和抗體分子量的大小9 .毛細(xì)管電泳技術(shù)實(shí)現(xiàn)分離的原理是（ABCDA.以毛細(xì)管為分離通道B.以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力C.樣品中各組分之間的遷移速度D.樣品中各組分之間在分配行為上的差異E.樣品所帶電荷10 .毛細(xì)管電泳的特點(diǎn)是（ABCEA.高靈敏度、高分辨率B.高速度C.樣品少D.易自動(dòng)化、操作復(fù)雜E.應(yīng)用范圍廣11 .下列對(duì)毛細(xì)管凝膠電泳描述中，正確的是（ABCDA.是將板上的凝膠移到毛細(xì)管中作支持物進(jìn)行的電泳B.凝膠具有多孔性，起類似分子篩的作用C

14、.能根據(jù)待測(cè)組分的荷質(zhì)比和分子體積的不同而進(jìn)行分離D.在人類基因組計(jì)劃中起重要作用E.是唯一的分離組分與電解質(zhì)一起向前移動(dòng)并同時(shí)進(jìn)行分離的電泳方法12 .下列對(duì)毛細(xì)管等速電泳的描述中，正確的是（BCDEA.目前應(yīng)用很多B.緩沖系統(tǒng)由前后兩種不同濃度的電解質(zhì)組成C.被分離組分在前導(dǎo)電解質(zhì)與尾隨電解質(zhì)之間的空隙中發(fā)生分離D.是唯一的分離組分與電解質(zhì)一起向前移動(dòng)并同時(shí)進(jìn)行分離的電泳方法E.常用于分離小離子、小分子、肽類及蛋白質(zhì)13 .毛細(xì)管電泳儀的主要結(jié)構(gòu)有（ABCDEA.高壓源B.毛細(xì)管柱C.檢測(cè)器D.緩沖液槽E.記錄裝置14 .全自動(dòng)熒光/可見光雙系統(tǒng)電泳儀的最大優(yōu)點(diǎn)是（ABCEA.熒光系統(tǒng)全自

15、動(dòng)B.靈敏度高C.準(zhǔn)確度高D.采用低壓、低溫系統(tǒng)E.速度非常快15 .為提高毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜的選擇性和分離度，進(jìn)行優(yōu)化的手段有（ABCDA.選擇膠束的種類和濃度B.改變緩沖液的種類C.改變組分、PHD.改變離子強(qiáng)度E.改變電場(chǎng)強(qiáng)度16.聚四氟乙烯材料做成的毛細(xì)管柱的主要缺點(diǎn)是（ABCEA.很難得到內(nèi)徑均勻的管子B.對(duì)樣品有吸附作用C.熱傳導(dǎo)性差D.電滲強(qiáng)E.有變性現(xiàn)象17 .對(duì)全自動(dòng)醋纖膜電泳儀描述正確的是（ABCDA.自動(dòng)化程度高B.靈敏度低C.只需將樣品、試劑、電泳片放好，人員可離機(jī)完成實(shí)驗(yàn)并得到結(jié)果D.無法分析尿蛋白、腦脊液蛋白E.同工酶分析靈敏度高18 .下列對(duì)醋酸纖維素薄膜電泳描述

16、中，正確的是（BCDEA.薄膜對(duì)蛋白質(zhì)樣品吸附性大B.幾乎能完全抵消紙電泳中出現(xiàn)的“拖尾”C.分離速度快、電泳時(shí)間短D.樣品用量少E.特別適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測(cè)19 .自動(dòng)化電泳儀每天使用完后，需要嚴(yán)格的維護(hù)保養(yǎng)，其維護(hù)保養(yǎng)程序?yàn)椋ˋBCEA.每日維護(hù)B.每周維護(hù)C.每月維護(hù)D.每年維護(hù)E.按需進(jìn)行的維護(hù)20 .電泳對(duì)支持物的一般要求為（ABDBA.不溶于溶液，不導(dǎo)電B.吸收液量多而穩(wěn)定C.不帶電荷，有電滲D.不吸附蛋白質(zhì)等其他電泳物質(zhì)，熱傳導(dǎo)度大E.結(jié)構(gòu)均一而穩(wěn)定，分離后的成分易析出三、簡(jiǎn)答題1 .簡(jiǎn)述電泳、電泳技術(shù)的概念。電泳是指帶電荷的溶質(zhì)或粒子在電場(chǎng)中向著與其本身所帶電荷相

17、反的電極移動(dòng)的 現(xiàn)象。利用電泳現(xiàn)象將多組分物質(zhì)分離、分析的技術(shù)叫做電泳技術(shù)。2 .簡(jiǎn)述電泳的基本原理。物質(zhì)分子在正常情況下一般不帶電，但是在一定的物理作用或化學(xué)反應(yīng)條件下，某些物質(zhì)分子會(huì)成為帶電的離子（或粒子），不同的物質(zhì)，由于其帶電性質(zhì)、顆粒形狀和大小不同，因而在一定的電 場(chǎng)中它們的移動(dòng)方向和移動(dòng)速度也不同，因此 可使它們分離。3 .影響電泳的外界因素有哪些？（1）電場(chǎng)強(qiáng)度；（2）溶液的PH值；（3）溶液的離子強(qiáng)度；（4）電滲作用；（5）粒子的遷移率；（6）吸附作用。4 .溶液的PH值對(duì)電泳速度有何影響？溶液的pH值決定了帶電質(zhì)點(diǎn)的解離程度，也決定了物質(zhì)所帶電荷的多少。 對(duì)蛋白質(zhì)、氨基酸 等

18、兩性電解質(zhì)而言，pH離等電點(diǎn)越遠(yuǎn)，顆粒所帶的電荷越 多，電泳速度也越快。反之，則越慢。5 .何謂蛋白質(zhì)白等電點(diǎn)（pI） ?當(dāng)溶液的酸堿度處于某一特定 PH值時(shí)，它將帶有相同數(shù)量的正、負(fù)電荷（即凈 電荷為零），蛋白質(zhì)分子在電場(chǎng)中不會(huì)移動(dòng)，故此特定的 PH值被稱為該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)（pI）06 .什么是粒子的遷移率？遷移率與哪些因素有關(guān)？遷移率為帶電粒子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的移動(dòng)速度，常用以來表示。主要與顆粒直徑、形狀以及所帶凈電荷量等有關(guān)。7 .常用的電泳分析方法有哪些？臨床常用的電泳分析方法主要有醋酸纖維素薄膜電泳、凝膠電泳、等電聚焦電泳、 雙向電泳和毛細(xì)管電泳等。8 .通常所說的電泳設(shè)備可分為哪些

19、？通常所說的電泳設(shè)備可分為主要設(shè)備（分離系統(tǒng)）和輔助設(shè)備（檢測(cè)系統(tǒng)）。主要 設(shè)備指電泳儀電源、電泳槽。輔助設(shè)備指恒溫循環(huán)冷卻裝置、伏時(shí)積分器、凝膠烘 干器等，有的還有分析檢測(cè)裝置。9 .電泳設(shè)備對(duì)支持物一般有何要求？一般要求支持物不溶于溶液，不導(dǎo)電，吸收液量多而穩(wěn)定，不帶電荷，沒有電滲， 不吸附蛋白質(zhì)等其他電泳物質(zhì)，熱傳導(dǎo)度大，結(jié)構(gòu)均一而穩(wěn)定，分離后的成分易 析出等。10 .醋酸纖維素薄膜電泳的特點(diǎn)是什么？分離速度快、電泳時(shí)間短、樣品用量少，特別適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測(cè)。11 .簡(jiǎn)述聚丙烯酰胺凝膠電泳的應(yīng)用范圍。可用于蛋白質(zhì)、核酸等分子大小不同的物質(zhì)的分離、 定性和定量分析；還可結(jié)合

20、 去垢劑十二烷基硫酸鈉，測(cè)定蛋白質(zhì)亞基的相對(duì)分子質(zhì)量。12 .簡(jiǎn)述等電聚焦電泳法的原理特點(diǎn)。原理：不同的蛋白質(zhì)等電點(diǎn)不同，如果分子處于pH和等電點(diǎn)一致的溶液 中，則泳動(dòng)就停止進(jìn) 行。如果溶液內(nèi)的pH是位置的函數(shù)，或者說有一個(gè)pH的 位置梯度，那么在一個(gè)穩(wěn)定連續(xù)的線性 pH梯度的溶液（兩性載體電解質(zhì)） 中進(jìn)行分離，每一種被分離的兩性物質(zhì)都移向與它的等電點(diǎn)相一致的pH位置，在那里不再移動(dòng)（稱為聚焦）。由于在這點(diǎn)凈電荷（正負(fù)抵消）為零，因 而又稱等電聚焦。特點(diǎn)：使用兩性載體電解質(zhì)，在電極之間形成穩(wěn)定的、連續(xù)的、線性的 pH梯 度。由于“聚焦 效應(yīng)”，即使很小的樣品也能獲得清晰的、鮮明的區(qū)帶界面 電泳

21、速度快。分辨率高。加入樣品的位置可任意選擇。可用于測(cè)定蛋白質(zhì)類物質(zhì)的等電點(diǎn)。適用于中、大分子量（如蛋白質(zhì)、肽類、同工酶等）生物組分的分離分析。13 .簡(jiǎn)述等速電泳的工作原理。等速電泳采用兩種不同濃度的電解質(zhì)，一種為前導(dǎo)電解質(zhì)，充滿整個(gè)毛細(xì)管柱； 另一種為尾隨電解質(zhì)，置于一端的電泳槽中。前導(dǎo)電解質(zhì)的遷移率高于任何樣品 組分，尾隨電解質(zhì)則低于任何樣品組分，被分離的組分按其不同的遷移率夾在中 間，在強(qiáng)電場(chǎng)的作用下，各被分離組分在前導(dǎo)電解質(zhì)與尾隨電解質(zhì)之間的空隙中 移動(dòng)，實(shí)現(xiàn)分離。14 .等速電泳的特點(diǎn)是什么？特點(diǎn)：一是所有譜帶以同一速度移動(dòng)，二是區(qū)帶銳化，在平衡狀態(tài)下，如果有離 子改變速度擴(kuò)散進(jìn)入相

22、鄰區(qū)帶，界面清晰，能顯示很高的分離能力。三是區(qū)帶濃 縮，即組分區(qū)帶的濃度由前導(dǎo)緩沖液 決定，一旦前導(dǎo)緩沖液濃度確定，各區(qū)帶內(nèi) 離子的濃度亦即為定值。15 .簡(jiǎn)述雙向凝膠電泳（二維電泳）的工作原理。第一維采用等電聚集（isoelectric focusing, IEF ）電泳。當(dāng)把蛋白質(zhì) 加人到含有pH梯度的載體時(shí)，如果蛋白質(zhì)所在位置的pH值與其等電點(diǎn)不同， 則該蛋白質(zhì)會(huì)帶一定量的正電荷或負(fù)電荷，在外加強(qiáng)電場(chǎng)的作用下，蛋白分子就會(huì)分別向正極或負(fù)極泳動(dòng)，直到 pH值與其等電點(diǎn)相等的位置，蛋白 質(zhì) 不再泳動(dòng)，而濃縮成狹窄的區(qū)帶。第二維采用了十二烷基硫酸鈉一聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE蛋白質(zhì)的

23、電泳遷移率取決于各 種蛋白質(zhì)所帶的靜電荷、分子量的大小以及形狀的 不同。SDS-PAGE是按蛋白質(zhì)分子量的大小使其在垂 直方向進(jìn)行分離。蛋白質(zhì) 樣品經(jīng)過雙向凝膠電泳兩次分離后，其結(jié)果不再是條帶狀，而是呈現(xiàn)為斑點(diǎn)狀。16 .免疫電泳的優(yōu)點(diǎn)是什么？該方法的研究目的是什么？該技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：一是加快了沉淀反應(yīng)的速度，二是將某些蛋白組分跟據(jù)其帶電荷的不同而將其分開，再與抗體起反應(yīng)，從而使本法更為微量化，多樣化，使其應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大。 該方法可以用來研究：抗原和抗體的相對(duì)應(yīng)性；測(cè)定樣品 的各成分以及它們的電泳遷移率；根據(jù)蛋白質(zhì)的電泳遷移率，免疫特性及其它 特性，可以確定該復(fù)合物中含有某種蛋白質(zhì)；鑒定抗原或抗體

24、的純度。17 .簡(jiǎn)述毛細(xì)管電泳的基本工作原理和特點(diǎn)。毛細(xì)管電泳基本工作原理： 毛細(xì)管電泳技術(shù)又稱高效毛細(xì)管電泳 （HPCE）或毛細(xì) 管分離法。溶液中的帶電粒子以高壓電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力， 沿毛細(xì)管通道，以不同速度向 與其所帶電荷相反的電極方向遷 移，并依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上 的差異而實(shí)現(xiàn)分離。毛細(xì)管電泳的特點(diǎn)：高靈敏度，高速度，高分辨率，樣品少， 成本低，易自動(dòng)化，應(yīng)用范圍廣。18 .毛細(xì)管電泳分離模式有哪些？（1）毛細(xì)管區(qū)帶電泳（毛細(xì)管自由溶液區(qū)帶電泳）；（2）毛細(xì)管凝膠電泳；（3）毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜（微團(tuán)電動(dòng)毛細(xì)管層析）；（4）毛細(xì)管等電聚焦電泳；（5）毛細(xì)管等速電泳；（6）毛細(xì)管電

25、色譜；（7）毛細(xì)管電泳芯片。19 .簡(jiǎn)述毛細(xì)管等速電泳的工作原理。同等電聚焦電泳一樣，等速電泳在毛細(xì)管中的電滲流為零，緩沖系統(tǒng)由前后兩種不同濃度的電解質(zhì)組成。毛細(xì)管內(nèi)首先導(dǎo)入具有比被分離各組分高電泳淌度的前導(dǎo)電解質(zhì)，然后進(jìn)樣，隨后再導(dǎo)入 比各分離組份低電泳淌度的尾隨電解質(zhì)， 在強(qiáng)電場(chǎng)的作用下，各被分離組分在前導(dǎo)電解質(zhì)與尾隨電解質(zhì)之間的空隙中發(fā)生分離。20 .簡(jiǎn)述毛細(xì)管區(qū)帶電泳的應(yīng)用范圍。毛細(xì)管區(qū)帶電泳（CZE）適用于小離子、小分子、肽類、蛋白質(zhì)的分離，在一定限度內(nèi)適合于DNA勺分離。應(yīng)用CZBJ可分離人血清中氨甲喋吟（MTX及其代謝產(chǎn)物7 -羥基氨甲喋吟（7 - OH- MTX21 .簡(jiǎn)述毛細(xì)管電泳儀的基本結(jié)構(gòu)。高壓源、毛細(xì)管柱、檢測(cè)器、緩沖液槽、記錄裝置。22 .理想的毛細(xì)管柱條件是什么？理想的毛細(xì)管應(yīng)是化學(xué)和電惰性的， 紫外和可見光可以透過，易于彎曲，有一定 的柔性，耐用且價(jià)低。23 .對(duì)各種檢測(cè)器檢測(cè)方法進(jìn)行比較。檢測(cè)方法質(zhì)量檢測(cè)極限（mol）濃度檢測(cè)極限（mol/L）備注紫外10-1610-1310-810-5用得最多，通用性強(qiáng)，掃描迅速靈敏，火兒10-1710-15但樣品通常需衍生激發(fā)誘導(dǎo)熒光10-2010-1510161014及其靈敏，但樣品通常需衍生，費(fèi)用安培10-19101810-1110-10高用的多，靈敏，檢測(cè)簡(jiǎn)單，