1、鄭州牧專動物醫藥鄭州牧專動物醫藥系微生物教研室系微生物教研室第七章第七章 微生物的分類命名及鑒定微生物的分類命名及鑒定 。（四）（四） 細菌的命名細菌的命名 （二）動物病毒分類的依據（二）動物病毒分類的依據（一）動物病毒分類的發展（一）動物病毒分類的發展 （一）細菌的分離鑒定的一般程序（一）細菌的分離鑒定的一般程序細菌分離鑒定的一般程序細菌分離鑒定的一般程序（二）細菌的分離與鑒定（二）細菌的分離與鑒定1、病料的采集、病料的采集 2 2、染色鏡檢、染色鏡檢3、分離培養及培養特性檢查、分離培養及培養特性檢查4、生化特性檢查、生化特性檢查 各種細菌所具有的酶系統各不相同，對營養物質的利用能力各異，因

2、而在代謝過程中所產生的合成或分解產物也不同。應用生物化學方法檢測細菌的代謝產物，有助于細菌種、屬鑒定。這種利用生化方法來鑒別細菌的試驗，統稱為細菌的生化試驗或生化反應，是識別細菌的重要方法之一。應用生物化學的方法來檢測這些物質的存在與否，有助于細菌的鑒別診斷。5、細菌血清型鑒定及血清學試驗、細菌血清型鑒定及血清學試驗 6、動物實驗檢查法和毒力測定、動物實驗檢查法和毒力測定 7、分子生物學技術在細菌鑒定中的應用、分子生物學技術在細菌鑒定中的應用 （一）病毒分離鑒定的一般程序（一）病毒分離鑒定的一般程序 （3）保存與運送保存與運送 病毒對外界因素特別是熱很敏感。因此，必須將病料放在滅菌的保存液中（

3、一般用50甘油磷酸鹽緩沖液），液體病料可加適量的抗生素以防污染。盛有病料的器皿應封口，再放入冰瓶內（內放冰塊和食鹽或干冰和酒精），在此低溫條件下保存和送檢病料。 （4）防止病料污染防止病料污染采集病料時，必須無菌操作。為防止液體病料被污染，有的可在其中加入適量的青霉素和鏈霉素或其他抗生素，如慶大霉素；若防止霉菌污染，還可加制霉菌素、二性霉素B等。供抗體檢測的血清可加入防腐劑。 （1）動物接種）動物接種（2）雞（禽）胚培養）雞（禽）胚培養 卵黃囊胚體羊膜囊絨毛尿囊腔氣室A A 絨毛尿囊膜接種絨毛尿囊膜接種 主要用于痘病毒和皰疹病毒的分離、增殖。因它們在雞胚絨毛尿囊膜上形成主要用于痘病毒和皰疹病毒

4、的分離、增殖。因它們在雞胚絨毛尿囊膜上形成痘斑或病斑。一般用痘斑或病斑。一般用10-1210-12日齡的雞胚。日齡的雞胚。B B 尿囊腔接種尿囊腔接種 C C 卵黃囊接種卵黃囊接種 D D 羊膜腔接種羊膜腔接種 羊膜腔接種 （3）組織培養）組織培養 組織培養是分離培養病毒及進行病毒實驗研究簡便而有效的工具和手段。組織培養是分離培養病毒及進行病毒實驗研究簡便而有效的工具和手段。近年來近年來,許多新的動物病毒就是通過組織培養方法而發現的許多新的動物病毒就是通過組織培養方法而發現的,組織培養也用于生產組織培養也用于生產病毒抗原及制備病毒疫苗。病毒抗原及制備病毒疫苗。 組織塊培養組織塊培養 就是將動物

5、組織切成小塊在固定或懸浮狀態下培養。是最早的組織培養方法。就是將動物組織切成小塊在固定或懸浮狀態下培養。是最早的組織培養方法。 器官培養器官培養 取器官薄片（如一小段器官或一小塊鼻粘摸）進行培養，如某些呼吸道病毒就取器官薄片（如一小段器官或一小塊鼻粘摸）進行培養，如某些呼吸道病毒就是應用器官培養才分離出來的。是應用器官培養才分離出來的。（4）細胞培養）細胞培養 （1）形態學檢查-電鏡技術（2 2）檢查包涵體）檢查包涵體（3）生物學特性鑒定生物學特性鑒定（4）病毒理化特性的測定）病毒理化特性的測定（5）病毒的血清學鑒定）病毒的血清學鑒定病毒的血清學鑒定病毒的血清學鑒定中和試驗中和試驗補體結合試驗補體結合試驗血凝抑制試驗血凝抑制試驗瓊脂擴散試驗等瓊脂擴散試驗等免疫熒光抗體技術免疫熒光抗體技術酶聯免疫吸附試驗（酶聯免疫吸附試驗（ELISA）金標抗體技術金標抗體技術 應用熒光抗體技術、免疫組化染色技術應用熒光抗體技術、免疫組化染色技術 應用金標