1、SEROZYME系統測定血清FT3、FT4及其臨床評價         10-08-20 16:08:00     作者：于海濤    編輯：studa090420【摘要】  目的  用SEROZYME系統檢測血清FT3、FT4并進行臨床與實驗室考核。方法  將本系統與放射免疫法(RIA)進行對比研究。  結果  健康人(n=68)血清F

2、T3、FT4水平( +SD)分別為4.1±1.1pmol/L、14.1±3.2pmoL/L。甲減組FT4水平下降(P<0.01)；FT3水平與正常對照組無顯著差異(P>0.05)；初診甲亢組 FT3、FT4(P均<0.01)水平升高；糖尿病組FT3水平下降(0.05>P>0.01)，FT4水平與正常對照組無顯著差異(P>0.05)；其它各疾病組兩項指標與正常對照組均無顯著差異(P均>0.05)；與RIA對比檢測血清FT3、FT4兩法符合率分別達81.5、74.8；重復性：批內與批間變異系數(CV)FT3分別為2.

3、85.6、6.89.0，FT4分別為1.23.4、4.67.0；最少檢量：FT3為0.9pmolL，FT4為0.1pmol/L；真實性及診斷價值：FT3與FT4聯合對甲亢、甲減診斷的靈敏度分別為92.2、90.6。特異性分別為97.1、97.1，總有效率均為95；陽性預示值分別為95.9、91.7；陰性預示值分別為97.1、95.7。結論  本檢測系統對甲狀腺功能的診斷靈敏、特異、可靠，與RIA技術相當，或有更多優點。 【關鍵詞】  磁分離酶聯免疫測定法MAIA   游離3，5，3-三碘甲狀腺氨酸(FT3) 

4、60; 游離四碘甲狀腺氨酸(FT4)。         血清游離3，5，3-三碘甲狀腺氨酸(FT3)、游離四碘甲狀腺氨酸(FT4)是甲狀腺疾病診斷與療效評定的重要指標。在國內，一般采用放射免疫法(RIA)檢測，其優點是敏感可靠，缺點為試劑受同位素半衰期的限制，有效期短，放射性輻射對人體有傷害，在試劑的管理和處理上存在諸多的麻煩。磁分離酶聯免疫測定系統(SEROZYME)檢測血清FT3、FT4，是一種超微量的非放射性物質標記的免疫化學定量分析技術，我們對其進行了臨床考核，現將結果報告如下。  &#

5、160;      1  對象與方法         1.1研究對象         本院門診及住院病人163例(其中臨床確診甲減32例、初診甲亢51例、隨診甲亢26例、治愈甲亢6例、甲狀腺瘤14例、甲狀腺腫5例、心腦血管疾病22例、糖尿病7例)，年齡1475歲，男性61例，女性102例；正常對照組68例，年齡1578歲，男性35例，女性33例。  

6、;       1.2方法         (1)血樣本采集：研究對象靜脈采血，分離血清，-20貯存，一周內完成檢測。         (2)測定方法：         1)SEROZYME系統：由FT3、FT4試劑及SEROZYME-I型磁酶免內分泌定量測定儀組成；北京倍愛康生物技術有限

7、公司提供。采用熒光素標記抗FT3、FT4單克隆抗體，用堿性磷酸酶標記FT3、FT4，并與樣本中的FT3、FT4競爭結合熒光素標記的抗FT3、FT4克隆抗體，繼而用抗熒光素抗體偶聯的磁分離劑與熒光素標單克隆抗體結合，經洗滌后，加單磷酸酚酞底物作用，最后加NaOH終止酶反應，用SEROZYME-I型磁酶免內分泌定量測定儀同時測定三波長(492nm550nm630nm)下的吸光度，儀器內微機軟件自動擬合標準曲線，計算并打印出樣本的測定結果。         2)對照方法：FT3、FT4放免藥盒，由中科院上海核技術開發公司

8、提供，按說明書操作，測定儀器為中國科學院上海原子核研究所日環儀器廠生產的SN-682放射免疫計數器。正常參考值：FT3為2.811.2pmolL，FT4為9.527.4pmol/L。         2  結果         2.1病人及正常人血清(MAIA)法FT3及FT4結果         (1)健康人血清FT3及FT4水平：68

9、例健康人血清FT3水平算術平均值為4.1pmoL/L，標準差為1.1pmol/L，中值為4.1 pmol/L，血清FT4水平算術平均值為14.1pmoI/L，標準差為3.2 pmol/L，中值為13.4 pmol/L。         注：與正常對照組比較，“*”，差異非常顯著，P<0.01；“*”，差異顯著,0.01<P<0.05。         (2)病人血清FT3及FT4水平：與正

10、常對照組比較，初診甲亢組FT3及FT4水平升高，差異非常顯著(t分別為9.0 654、4.7 191、P<0.01)，糖尿病組FT3水平下降，差異顯著(t=2.7 357，0.0l<P005)：甲減組FT4水平降低，差異非常顯著(t=5.9 96，P<0.01)；其余均無顯著差異。      10-08-20 16:08:00     作者：于海濤    編輯：studa090420   

11、    (3)正常參考值：本組測定68例正常人，FT3、FT4正常參考值(x-±2SD)范圍分別為1.96.3pmoVL、7.920.5pmolL與SERONO公司的結果(FT3：1.866.43pmolL，FT4：9.322.1pmolL)基本一致。         2.2與放射免疫法(RIA)結果的比較         對151份病人血清標本同時用MAIA及RIA兩種方法檢測血清FT

12、3、FT4，兩法符合率分別為81.5、74.8。結果不一致的樣本，其值多數處在正常值上下限交界處；個別樣本的兩法得值差距甚大，可能系方法本身或其它原因；1份脂質血樣(甲減患者之樣本)FT3、FT4用MAIA法分別為24、1.6pmolL，而RIA法卻分別高達42、118.8pmolL，明顯地脂質干擾了 RIA法測定，而MAIA法未受影響。         2.3 MAIA法FT3、FT4試劑在甲亢和甲減診斷中的可靠性、真實性及臨床價值      

13、   (I)重復性：對藥盒所附的質控血清進行了重復性測定，FT3變異系數(CV)：批內為2.85.6，批間為6.89.0；FT4變異系數(CV)，批內為1.23.4，批間為4.67.0。          (2)最少檢測量(靈敏度)：以0標準光密度均值(x-)減去2個標準差(2SD)計，FT3為0.9pmol/L，FT4為0.1pmoL/L。         (3)真實性及診斷價值。  

14、       3  討論         對SEROZYME系統檢測血清颶、FT3、FT4，并進行臨床與實驗室考核。結果表明其對甲亢、甲減的診斷有較高的靈敏度與特異性；與RIA對比檢測結果表明，兩法有較好的一致性。MAIA法FT3、FT4試劑靈敏度可分別達0.9pmolfL、0.1pmolL，與放射免疫法相當。         本檢測系統，采用了F

15、T3、FT4堿性磷酸酶標記物及抗FT3、FT4單克隆抗體的熒光素標記物，特別是單克隆抗體的引入，極大地提高了測定的特異性；磁性分離技術的應用，簡化了操作，縮短了流程，省卻了低溫離心等儀器設備；單磷酸酚酞作為酶底物，呈色穩定，對人體無害、無環境污染，無公害，MAIA法FT3、FT4試劑有效期長，可達46個月，適合標本量不大的實驗室，特別是基層醫院。SEROZYME-I型磁酶聯免疫定量測定儀設置人機對話程序，具有在三波長下(492nm/550nm/630nm)同時測定樣本吸光度值，可自動排除比色皿的干擾，進行峰值與非峰值波長自動切換組合檢測、拓寬量程、標準曲線的擬合及檢樣的數據處理和結果的打印等功能，儀器性能較穩定，故SEROZYME系統是一種理想的、可替代RIA的、用于激素等微量物質定量和定性分析的免疫化學技術。 參 考 文 獻 1馮根寶，胡蘭萍，王曉春，等直接法血清游離T3、游離T4測定和臨床應用天津醫藥，1992，(20)：277. 2CalddweU G，Kellett H A，Gow S M，et alA new st