1、MS培 ，養基（ PH=5.8 ）大量元素（*10母液I）KN03NH4NO3KH2PO4MgSO4.7H2OCaCI2.2H20微量元素(*100母液n)KIH3BO3Mn SO4.4H2OZn SO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2OCaCI2鐵鹽(*100母液川)19g16.5g1.7g3.7g4.4g83g620mg2.23g860mg25mg2.5mg2.5mgNa2EDTA（乙二胺四乙酸鈉）3.73gFeSO4.7H2O2.78g有機成分（*100母液W）肌醇10g甘氨酸200mg鹽酸硫胺素VB110mg鹽酸吡哆醇VB650mg鹽酸 VB5 或 VPP50m

2、g各激素母液配方（0.1mg/ml）TDZ（脫葉靈）：用0.1mol/LNaOH溶解0.01g脫葉靈，定容至NAA（萘乙酸）：用乙醇溶解6-BA（ 6-芐氨基嘌呤）：用0.1mol/LHCI溶解0.1g6-BA粉末定容至 濃鹽酸 120mol/L-0.1mol/L（1ml 濃鹽酸稀釋至 120ml）1L母液中加7g瓊脂，30g蔗糖100ml100ml(AA:400ml):MS + TDZ0.2mg/L + NAA0.1mg/L +800ul400ul瓊脂（10 瓶）(AB:400ml):MS + TDZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L +1.6ml800ul(AC:300ml):MS

3、+ TDZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L（10 瓶）1.2ml600ul果膠酶酶解液的配置查資料：（1） CPW 溶液：KH2PO327.2mg/LKNO3101mg/LCaCl2.2H2O1.48g/LMgSO4.7H2O246mg/LKI0.16mg/L瓊脂（10 瓶）CuSO4.5H2O0.025mg/L預處理液：600mmol/L甘露醇，用 CPW溶液配制3）酶解液：0.5%果膠酶，3mmol/LMES,用洗滌液配制（4）洗滌液：含500mmol/L甘露醇的CPW溶液，原生質體懸浮液，含620mmol/L蔗糖的CPW溶液按100ml來配：KH2PO32.72mgKNO310.

4、1mgCaCI2.2H2O0.148gMgSO4.7H2O24.6mgKI0.016mgCuSO4.5H2O 甘露醇：10.92gMES: 0.059g 果膠酶：0.5g0.0025mg實際實驗數據：(1) CPW 溶液(按 500ml)KH2PO30.014gKNO30.051gCaCl2.2H2O0.739gMgSO4.7H2O0.126gKI14.5mg稀釋取液CuSO4.5H2O253mg稀釋取液（在后面的酶解液配制中該兩種藥品質量懷疑添加錯誤） 酶解液的配制（取 100mlCPW溶液加入）甘露醇：10.921gTris: 5.241gMES: 0.0572g果膠酶：0.522g植物材

5、料均取之于原留愈傷組織，在AC的10瓶液體培養基中每瓶加入1ml酶解液(AD:1L):MS + TDZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L +瓊脂（30瓶）母液I: 100ml母液n :5ml1L溶液母液川:200ul蔗糖：30g,母液W :5ml瓊脂粉：7gTDZ:4mllNAA:2ml(AE:2L):MS + TDZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L + 瓊脂(60 瓶)母液I: 100ml1L溶液（2份）母液川:200ul 蔗糖：30g TDZ:4ml母液n :5ml 母液W :5ml瓊脂粉：7gNAA:2ml300ml溶液(AF:):MS + TDZ0.4mg/L + NAA

6、0.2mg/L母液n :1.5ml 母液W :1.5ml 6-BA:1.6ml NAA:600ul配大量元素母液I母 液I: 30ml 母液川:60ul 蔗糖：9gTDZ:1.2ml1L :KNO3NH4NO3KH2PO4MgSO4.7H2OCaCI2.2H20600ml溶液母液I: 60ml 母液川:120ul 蔗糖：18g6-BA TDZ19g16.5g1.7g3.7g4.4g母液n :3ml母液W :3mlNAAJV按如下正交表添加激素:TDZNAA6-BA0.1(5ul)0.2(10ul)0.2(10ul)0.5(25ul)0.5(25ul)1.0(50ul)1.0(50ul)0.2(

7、10ul)0.2(10ul)0.5(25ul)0.5(25ul)1.0(50ul)1.0(50ul)0.2(10ul)0.4(20ul)0.2(10ul)1.0(50ul)0.5(25ul)0.2(10ul)1.0(50ul)0.5(25ul)0.4(20ul)0.2(10ul)0.5(25ul)觀察7.13日所做的12瓶正交液體實驗結果如下:褐變溶液褐色有沉淀無生長d褐變溶液褐色，較澄清有沉淀無生長漸褐變溶液黃褐色沉淀較多無生長未褐變溶液黃色有沉淀無生長d褐變溶液褐色有沉淀無生長，死亡未褐變溶液黃色有沉淀有新的生長現象褐變溶液褐色有沉淀有新的生長現象褐變溶液褐色有沉淀無生長未褐變溶液黃色有沉

8、淀，較多有新的生長現象未褐變溶液黃色有沉淀有新的生長現象其中，溶液較為澄清的是：；愈傷組織生長最好的是(AG:500ml ) MS + TDZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L+AC500ml溶液母液I: 50ml 母液川:100ul母液V: 1.25mlTDZ:2ml母液n :2.5ml母液W :2.5ml 蔗糖：15gNAA:1ml現發現母液v不該加，母液v的藥品包含在母液n里面所配制的10瓶液體轉接7.13日的10瓶正交液體，此次的液體培養基中有白色小顆粒上午：(AH:500ml ) MS + TDZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L+AC 母液I: 50ml母液n :2.5

9、ml母液川:100ul母液W :2.5ml500ml溶液 冷 母液V (已感染)：1.25ml 蔗糖：15gTDZ:2mlNAA:1ml觀察7.16日所轉的10瓶液體實驗結果如下：未褐變溶液黃色無沉淀無生長褐變溶液黃色無細胞沉淀無生長漸褐變溶液黃色有細胞沉淀無生長漸褐變溶液黃色有細胞沉淀無生長d未褐變溶液黃色無細胞沉淀無生長未褐變溶液黃色無細胞沉淀無生長未褐變溶液黃色無細胞沉淀無生長漸褐變溶液黃褐色無細胞沉淀無生長未褐變溶液黃色無細胞沉淀無生長未褐變溶液黃色有細胞沉淀無生長備注：7月16日培養基中所加的母液V已變質， 18日觀察的組織均無明顯的生長現象。下午：（Al:300ml）:MS + T

10、DZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L+AC母液I: 30ml母液n :1.5ml母液川:60ul母液W :1.5ml300ml溶液蔗糖：9gTDZ:1.2mlNAA:600ul(AJ:500ml ) MS + TDZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L+AC母液I: 50ml母液n :2.5ml母液川:100ul母液W :2.5ml500ml溶液瓊脂：3.5g母液V: 1.25ml(不該加)蔗糖：15gTDZ:2mlNAA:1ml植物材料為盆栽植物外植體500ml溶液母液I: 50ml 母液川:100ul母液V: 1.25ml(AK:500ml ) MS + TDZ0.4mg/L

11、+ NAA0.2mg/L+AC母液n :2.5ml母液W :2.5ml（不該加）蔗糖：15g激素添加情況如下:NAA6-BATDZa1 a51.0（50ul）0.2（10ul）0.2（10ul）B1-b50.5（25ul）0.5（ul）添加PVP（500ml培養液中加入 125mlPVP,100ml水中溶解 0.5-1gPVP,46 C,水浴 5min）上午：（AL:300ml）:MS + TDZ0.2mg/L + NAA1.0mg/L+6-BA0.2mg/l+AC（300ul）（60ul）母液n :1.5ml母液W :1.5ml母液V: 0.75ml （不該加）（60ul）1廠母液I: 30

12、ml 母液川:60ul 300ml溶液 冷蔗糖：9g瓊脂：2.1g此次共配制10瓶液體（B1-B10 ）接種材料為外植體上午：（AM:450ml ） MS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+AC（15ul/ 瓶）（15ul/ 瓶）450ml溶液母液I: 45ml母液川:90ul母液V: 1.125ml母液n :2.25ml母液W :2.25ml（不該加）蔗糖：15g瓊脂:3.15g此次共配制15瓶液體（C1-C15）接種材料為外植體2014.7.23上午轉接7月20日的液體培養基母液I: 50ml母液 n :2.5ml500ml溶液母液川:100ul母液V: 1.25ml （不

13、該加）母液W :2.5ml蔗糖：15gPVP0.7%120ml激素水平:a1-a5 共 5 瓶b1-b5共5瓶MS + TDZ0.2mg/L + NAA1.0mg/L+6-BA0.2mg/l+AC（10ul/ 瓶） （50ul/瓶）（10ul/瓶）MS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+AC（25ul/ 瓶）（25ul/ 瓶）觀察7.20日所接的10瓶液體情況如下:7.20-b1未褐化溶液黃褐色有細胞沉淀有新生組織形成7.20-b2 （材料先 前多次轉接）褐變溶液黃褐色無細胞沉淀已死亡7.20-b3未褐變溶液黃褐色有細胞沉淀有生長現象7.20-b4 （材料先 前多次轉接）褐變溶

14、液黃褐色無細胞沉淀已死亡7.20-b5 （材料先前多次轉接）漸褐變溶液黃褐色無細胞沉淀無生長現象7.20-a1 （材料先 前多次轉接）褐變溶液淡黃色無細胞沉淀已死亡7.20-a2未褐變溶液黃褐色有細胞沉淀有生長現象7.20-a3未褐變溶液黃褐色有細胞沉淀有生長現象7.20-a4 （先前多次轉接材料）已褐變溶液黃色無細胞沉淀無生長7.20-a5未褐變溶液黃褐色有細胞沉淀有生長現象上午接種外植體于固體培養基上，激素水平如下:D1-D5:MS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+2,4-D 0.2mg/L+AC（25ul/ 瓶）（25ul/瓶）（10ul/ 瓶）D6-D10:MS+ T

15、DZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L（25ul/ 瓶）（25ul/ 瓶）（25ul/ 瓶）母液I: 30ml母液n :1.5ml母液川:60ul母液W :1.5ml300ml溶液冷 蔗糖：9g母液V: 0.75ml （不該加）瓊脂：2.1g此次共配制10瓶液體接種材料為外植體7月23日下午配固體培養基 600ml:MS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+AC（15ul/瓶）（15ul/ 瓶）600ml溶液母液I: 60ml 母液川:120ul母液 V :1.5ml瓊脂：4.2g母液n :3ml母液W :3ml蔗糖：18gpvp0.5%120ml接

16、種材料為外植體植株，共20瓶（E1-E20 ）下午配固體培養基1L,接種外植體植株:母液I: 100ml 母液川:200ul 1L溶液（2份）蔗糖：30gpvp0.7%250ml激素水平設置如下：母液n :5ml母液W :5ml瓊脂粉：7g誤加入3滴2,4-DMS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+AC（15ul/ 瓶）（15ul/ 瓶）共10瓶，接種23日的剩下10瓶外植體根（E21-E30）MS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+AC （15ul/ 瓶）（15ul/ 瓶）（15ul/ 瓶）MS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5

17、mg/L+2,4-D0.5mg/L+AC （15ul/ 瓶）（15ul/ 瓶）（15ul/ 瓶）MS+ NAA0.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+AC（15ul/ 瓶）（15ul/ 瓶）MS+ TDZ0.2mg/L + NAA1.0mg/L+6-BA0.2mg/L+AC（6ul/ 瓶）（30ul/ 瓶）（6ul/瓶）MS+ 6-BA0.5mg/L+ NAA0.5mg/L+2,4-D0.2mg/L+AC（15ul/ 瓶）（15ul/ 瓶）（6ul/ 瓶）共 3 瓶（a1-a3）共 3 瓶（b1-b3）共 3 瓶（c1-c3）共 4 瓶（d1-d4）共 3 瓶（e1-e3）MS+ TDZ0.

18、5mg/L + NAA1.0mg/L+AC（15ul/瓶）（30ul/ 瓶）共 4 瓶（f1-f4 ）上午配固體培養基1L,設置2種激素水平擴增愈傷組織，如下：MS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+AC（2.5ml）（2.5ml）母液I: 50ml母液n :2.5ml500ml溶液母液川：100ul母液W :2.5ml（A1-A15）母液 V: 1.25ml （不該加）蔗糖：15gj PVP0.7%120mlMS+ TDZ0.2mg/L + NAA1.0mg/L+6-BA0.2mg/L+AC（1ml）（5ml）500ml溶液（B1-B15）母液I: 50ml 母液川:100u

19、l 母液V: 1.25ml PVP0.7%120ml（1ml）母液 n :2.5ml母液W :2.5ml（不該加）蔗糖：15g2014.7.29液體培養基800ml:800ml溶液激素水平如下母液I: 80ml母液n :4ml母液川:160ul母液W :4ml母液V: 2ml （不該加）蔗糖：24gPVP0.7%180mlMS + NAA0.2mg/L+6-BA3.0mg/l+AC（10ul/ 瓶）（150ul/ 瓶）AA1-AA5MS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+AC（25ul/ 瓶）（25ul/ 瓶）AB1-AB5MS+ TDZ0.5mg/L + NAA1.0mg/L

20、+6-BA0.2mg/L+AC（25ul/ 瓶）（50ul/ 瓶）（10ul/ 瓶）AC1-AC5MS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+6-BA3.0mg/L+AC（25ul/ 瓶）（25ul/ 瓶）（150ul/ 瓶）AD1固體培養基600ml:600ml溶液激素水平如下母液I: 60ml 母液川:120ul 母液V: 1.5ml PVP0.7%120ml母液n :3ml（不該加）母液W瓊脂:3ml蔗糖:4.2g18gBA1-BA4BB1-BB4BC1-BC4MS + NAA0.2mg/L+6-BA3.0mg/l+AC（6ul/瓶）（90ul/ 瓶）MS+ TDZ0.5mg

21、/L + NAA0.5mg/L+AC（15ul/ 瓶）（15ul/ 瓶）MS+ TDZ0.5mg/L + NAA1.0mg/L+6-BA0.2mg/L+AC （15ul/ 瓶）（30ul/ 瓶）（6ul/ 瓶）MS+ 2,4-D1.0mg/L + NAA1.0mg/L+6-BA0.6mg/L+AC(18ul/ 瓶)BD1-BD4BE1-BE4(30ul/ 瓶)(30ul/ 瓶)MS+ TDZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L+AC(12ul/ 瓶)(6ul/ 瓶)觀察7.20日和7.23日的懸浮培養情況并將其懸浮材料轉接于7.29日所配固體培養基上7.29日所配液體培養基接種材料取培養箱

22、中先前接種的愈傷組織。上午配液體培養基激素濃度水平：< 母液I: 100ml母液川：200ul母液V: 2.5mlpvp0.2%200ml母液n :5ml母液W(不該加)(1.2g-200ml):5ml蔗糖：30g觀察液體懸浮情況:7.20-b1漸褐變材料黃褐色有細胞沉淀有芽生長，芽脫落現象7.20-b3未褐變材料黃綠色有細胞沉淀有葉生長現象7.20-a2漸褐變材料黃褐色有細胞沉淀有小芽生長現象7.20-a3未褐變材料黃綠色細胞沉淀較少有小芽生長現象7.20-a5未褐變材料黃色細胞沉淀較多有小芽生長現象7.23-a1未褐變材料黃綠色有細胞沉淀無明顯生長現象7.23-a2輕微褐變材料黃綠色

23、細胞沉淀較少無明顯生長現象7.23-a3未褐變材料黃色有細胞沉淀無明顯生長現象7.23-a4 （先前多次 轉接材料）已褐變材料褐變有細胞沉淀無明顯生長現象已死亡7.23-a5未褐變材料黃綠色有細胞沉淀無明顯生長現象7.23-b1未褐變材料黃綠色有細胞沉淀有小幼苗和芽生長現象7.23-b2未褐變材料黃綠色有細胞沉淀有小苗生長現象7.23-b3未褐變材料黃綠色細胞沉淀較少無明顯生長現象7.23-b4未褐變材料黃綠色有細胞沉淀無明顯生長現象7.23-a5未褐變材料黃綠色有細胞沉淀無明顯生長現象(A1-A10)(B1-B10)共十瓶共十瓶0.014g0.051g0.739g0.126g14.5mg應稀

24、釋取液253mg應稀釋取液MS + NAA0.2mg/L+6-BA3.0mg/l+AC (100ul )(1500ul )MS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+AC(250ul )(250ul )下午配0.5%的果膠酶酶解液 ：(1) CPW 溶液(按 500ml) KH2PO3KNO3CaCI2.2H2OMgSO4.7H2OKICuSO4.5H2O（酶解液配制中該兩種藥品質量懷疑未稀釋而添加錯誤）酶解液的配制（取 100mlCPW溶液加入）甘露醇：10.921gTris: 5.241gMES: 0.0572g 果膠酶：0.522g9.1日配與8.31日相同的液體培養基，但未

25、加pvp9.2日轉接8.31日的懸浮材料與9.1日所配的液體培養基中，且每瓶液體培養基中加入0.5ml酶解液。9.2日觀察8.31的懸浮培養情況如下:8.31-A1未褐變材料黃褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象未死亡8.31-A2未褐變材料黃褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象 未死亡8.31-A3未褐變材料黃褐色細胞沉淀較多無明顯生長現象 未死亡8.31-A4 （材料為之前多次轉接材料）褐變材料深褐色細胞沉淀較少無明顯生長現象 未死亡8.31-A5 （材料為之前多次轉接材料）褐變材料深褐色細胞沉淀較多無明顯生長現象 未死亡8.31-A6部分褐變1材料黃褐色無細胞沉淀有小芽生長現象8.31-A7未褐變材

26、料黃褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象 未死亡8.31-A8未褐變材料黃褐色 葉子邊緣有 黃化現象有細胞沉淀無明顯生長現象 未死亡8.31-A9未褐變材料黃褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象未死亡8.31-A10 （材料為之前多次轉接材 料）褐變材料深褐色細胞沉淀較多無明顯生長現象 未死亡8.31-B1未褐變材料黃褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象未死亡8.31-B2植株染菌8.31-B3未褐變材料黃褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象未死亡8.31-B4 （材料為之前多次轉接材料）褐變材料深褐色細胞沉淀較少無明顯生長現象 未死亡8.31-B5未褐變材料黃褐色細胞沉淀較多無明顯生長現象未死亡8.31-B6褐變材

27、料深褐色細胞沉淀較多無明顯生長現象 未死亡8.31-B7未褐變材料黃褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象未死亡8.31-B8未褐變材料黃褐色細胞沉淀較多無明顯生長現象未死亡8.31-B9 （材料為之前多次轉接材料）褐變材料深褐色細胞沉淀較多無明顯生長現象 未死亡8.31-B10未褐變材料黃褐色無細胞沉淀無明顯生長現象上午配制與8.31日相同的液體培養基1L于下午轉接:母液I: 100ml母液n :5ml母液川:200ul母液W :5ml上午配液體培養基1L 母液V: 2.5ml (不該加)蔗糖：30gpvp0.2%200ml (1.2g-200ml )且每瓶液體培養基中加入0.5ml酶解液。激素濃度

28、水平：MS + NAA0.2mg/L+6-BA3.0mg/l+AC(100ul )(1500ul )(A1-A10)共十瓶MS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.5mg/L+AC(250ul )(250ul )(B1-B10)共十瓶9.5日所觀察液體懸浮培養情況:9.1-A1未褐變材料黃綠色少量細胞沉淀無明顯生長現 象未死亡9.1-A2未褐變材料黃褐色液體白色懸濁染菌死亡9.1-A3未褐變材料黃褐色液體白色懸濁染菌死亡9.1-A4未褐變材料黃綠色少量細胞沉淀無明顯生長現 象未死亡9.1-A5未褐變材料黃綠色少量細胞沉淀無明顯生長現 象未死亡9.1-A6未褐變材料黃綠色少量細胞沉淀無明顯生長

29、現 象未死亡9.1-A7未褐變材料黃色少量細胞沉淀無明顯生長現 象未死亡9.1-A8未褐變材料黃綠色有細胞沉淀無明顯生長現象 未死亡9.1-A9未褐變材料黃綠色少量細胞沉淀有生長現象9.1-A10未褐變材料淺黃褐色細胞沉淀較多有生長現象9.1-B1褐變材料綠色少量細胞沉淀無明顯生長現 象未死亡9.1-B2褐變材料褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象未死亡9.1-B3未褐變材料綠色少量細胞沉淀無明顯生長現象未死亡9.1-B4未褐變材料黃色細胞沉淀較少無明顯生長現象 未死亡9.1-B5已染菌9.1-B6褐變材料深褐色細胞沉淀較多無明顯生長現象 未死亡9.1-B7未褐變材料綠色少量細胞沉淀有生長現象9.1

30、-B8未褐變材料淺黃色細胞沉淀較多無明顯生長現 象未死亡9.1-B9未褐變材料黃綠色細胞沉淀較多無明顯生長現象 未死亡9.1-B10褐變染菌死亡配制與9.5日相同的液體培養基 1L于11日轉接：母液I: 100ml母液n :5ml母液川:200ul母液W :5ml上午配液體培養基1L 母液V: 2.5ml (不該加)蔗糖：30gpvp0.2%250ml (1.2g-200ml )且每瓶液體培養基中加入 0.5ml 酶解液。激素濃度水平：MS + NAA0.2mg/L+6-BA3.0mg/l+AC(60ul )(900ul )(A1-A6)共6瓶MS+ TDZ0.5mg/L +NAA0.5mg/

31、L+AC(175ul )(175ul )(B1-B7)共7瓶MS + TDZ0.4mg/L +NAA0.2mg/L +AC(140ul )(70ul )(C1-C7 )共 7觀察記錄之前轉接的液體懸浮情況，并轉接材料:9.1-A1褐變材料偏褐色少量細胞沉淀無明顯生長現 象未死亡9.1-A4褐變材料黃褐色染菌無明顯生長現 象未死亡9.1-A5未褐變材料黃綠色少量細胞沉淀無明顯生長現 象未死亡9.1-A6未褐變材料黃綠色染菌無明顯生長現象未死亡9.1-A7未褐變材料黃綠色少量細胞沉淀無明顯生長現 象未死亡9.1-A8褐變材料褐綠色染菌無明顯生長現象， 未死亡9.1-A9褐變材料褐色少量細胞沉淀無明

32、顯生長現象， 未死亡9.1-A10未褐變材料淺黃色細胞沉淀較多無明顯生長現象，未死亡9.1-B1褐變材料黑褐色少量細胞沉淀無明顯生長現 象未死亡9.5-B2褐變材料褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象未死亡9.1-B4未褐變材料黃色細胞沉淀較少， 染菌無明顯生長現象 未死亡9.1-B6褐變材料褐色細胞沉淀較少無明顯生長現象 未死亡9.1-B7未褐變材料黃綠色少量細胞沉淀無明顯生長現象 未死亡9.5-B7未褐變材料黃色少量細胞沉淀無明顯生長現象 未死亡9.1-B8褐變材料黃綠色細胞沉淀較多無明顯生長現 象 未死亡9.5-B8褐變材料褐色細胞沉淀較多，染 菌無明顯生長現 象 未死亡9.1-B9褐變材料褐

33、色細胞沉淀較多，染 菌無明顯生長現象 未死亡配固體培養基:MS + TDZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L +AC4ml 2mlA1-A31配固體培養基母液I:100ml母液n :5ml母液川:200ul母液W:5ml母液V:2.5ml（不該加）蔗糖:30gpvp0.2%200ml(1.2g-200ml)瓊脂：7gMS + NAA0.2mg/L+6-BA3.0mg/l+AC60ul配固體培養基300ml *900ul母液I: 30ml母液川:60ul母液V: 0.75ml母液n :1.5ml母液W :1.5ml（不該加）pvp0.2%50ml(1.2g-200ml )瓊脂:B1-B10

34、蔗糖：9g2.lg下午擴增愈傷組織于固體培養基配制與9.10日相同的液體培養基，轉接11日的懸浮材料。配制與9.15日相同的液體培養基，觀察并轉接15日的懸浮材料觀察記錄之前轉接的液體懸浮情況，并轉接材料：9.15-A4未褐變材料綠色少量細胞沉淀無明顯生長現 象未死亡9.10-C1未褐變材料綠色染菌無明顯生長現 象未死亡9.15-C7未褐變材料綠色染菌無明顯生長現 象未死亡9.15-C5未褐變材料綠色未染菌無明顯生長現象未死亡9.15-A3未褐變材料灰綠色少量細胞沉淀無明顯生長現象 未死亡9.10-C2未褐變材料白綠色液體微濁無明顯生長現象， 未死亡9.15-B7表面褐變材料灰褐色少量細胞沉淀

35、無明顯生長現象， 未死亡9.10-B7表面部分褐 變材料灰褐色細胞沉淀較少無明顯生長現象， 未死亡9.15-C6未褐變材料白綠色少量細胞沉淀有生長現象9.10-B6未褐變材料灰綠色溶液黃色渾濁，染 菌有生長現象未死亡9.15-B5未褐變材料灰綠色溶液黃色渾濁，染 菌無明顯生長現象 未死亡9.10-A3褐變材料白褐色溶液黃色渾濁，染 菌有生長現象 未死亡9.10-C7未褐變材料綠色少量細胞沉淀有生長現象 未死亡9.15-B2褐變材料黃黃色少量細胞沉淀有生長現象 未死亡9.15-A6部分褐變材料黃褐色溶液淺黃微濁無明顯生長現 象 未死亡9.10-A6部分褐變材料黃褐色溶液淺黃微濁無明顯生長現 象

36、未死亡9.15-B1褐變材料灰褐色細胞沉淀較少無明顯生長現象 未死亡9.10-C3未褐變材料白綠色細胞沉淀較少有生長現象 未死亡9.15-B1未褐變材料白灰色細胞沉淀較少有生長現象 未死亡2014.9.21 日擴增培養箱中的愈傷組織，配固體培養基2L,并接種。MS + NAA0.1mg/L+6-BA5mg/l+AC2L1ml/l50ml/lJ母液I: 100ml 母液川：200ul母液n :5ml母液W :5ml配固體培養基1L母液V: 2.5ml（不該加）蔗糖：30g|L瓊脂：7g2014.9.24 日擴增培養箱中的愈傷組織，配固體培養基2L,并接種。MS + NAA0.1mg/L+6-BA

37、5mg/l+AC1L1ml/l1oml/lA1-A3021日的6-BA濃度為0.1mg/l,故加入50ml/l;24日所配6-BA濃度為0.5mg/l，故只加入10ml/l 。MS+ TDZ0.4mg/L +NAA0.2mg/L+AC1L4ml2mlB1-B30廣-母液I: 100ml母液n :5ml母液川:200ul母液W:5ml配固體培養基1LY母液V: 2.5ml （不該加）蔗糖:30g瓊脂：7g2014.9.25 日配液體培養基1L :廠母液I: 100ml母液n :5ml母液川:200ul母液W:5ml上午配液體培養基1L 母液V: 2.5ml （不該加）蔗糖:30gpvp0.2%2

38、50ml （1.2g-200ml ）且每瓶液體培養基中加入0.5ml酶解液。并設置如下的激素水平:MS + NAA0.2mg/L+6-BA2.0mg/l+AC100ul200ulMS+ TDZ0.5mg/L + NAA0.2mg/L+AC250ul100ulMS+ TDZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L+AC200ul100ulA1-A10,共 10 瓶B1-B10,共 10 瓶C1-C10，共 10 瓶日觀察記錄之前的液體懸浮培養情況并轉接材料9.19-C4漸褐變材料黃褐色細胞沉淀較多無明顯生長現 象未死亡9.19-B5未褐變材料黃綠色少量細胞沉淀，染 菌無明顯生長現 象未死亡9.1

39、9-B6褐變材料黑褐色,無細胞沉淀。染 菌無明顯生長現 象未死亡9.19-C6未褐變材料黃綠色溶液渾濁，染菌無明顯生長現象未死亡9.19-B1材料全被球菌包裹9.10-A3 （百合）未褐變材料綠色少量細胞沉淀有白色幼嫩組織9.19-C5未褐變材料黃褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象， 未死亡9.19-A4未褐變材料黃綠色細胞沉淀較少無明顯生長現象， 未死亡9.19-B3材料全被球菌包裹9.19-C2未褐變材料黃綠色少量細胞沉淀，無 菌有生長現象，有 透明的芽生長現象9.19-C7未褐變材料黃綠色溶液輕微渾濁，少無明顯生長現象量細胞沉淀。未死亡9.19-A6部分褐變材料白褐色溶液澄清，少量細 胞沉淀

40、無明顯生長現象 未死亡9.19-B4材料全被球菌包裹9.10-C7未褐變材料黃褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象 未死亡9.19-A2部分褐變材料黃褐色溶液淺黃微濁 少量細胞沉淀有絲狀物出現9.10-C1未褐變材料全被球菌包裹9.19-A1材料全被球菌包裹9.15-B5材料全被球菌包裹9.19-A5材料全被球菌包裹9.19-B2未褐變材料黃褐色少量細胞沉淀 溶液較渾濁無明顯生長現象 未死亡母液川:200ul母液I: 100ml母液n :5ml配液體培養基1L母液V: 2.5ml pvp0.2%250ml設置激素水平如下：MS+ TDZ0.4mg/L +NAA0.2mg/L+AC200ul100ul

41、MS+ TDZ0.2mg/L + NAA0.4mg/L+AC100ul200ul由于PH試紙不精準的原因，導致液體培養基 。此次配制的液體倒掉了的。2014.10.10 日MS+ TDZ0.4mg/L + NAA0.2mg/L+AC4ml2ml母液I: 100ml& 母液川:200ul配液體培養基1L母液V: 2.5ml母液W :5ml（不該加）蔗糖：30g（1.5g-250ml）A1-A10，共 10 瓶B1-B10，共 10 瓶PH值有誤，有大量白色沉淀物母液n :5ml母液W :5ml（不該加）蔗糖：30g日配液體培養基1L :下午轉接液體材料并觀察記錄先前的懸浮培養情況:9.1

42、0 -A3未褐變材料黃褐色細胞沉淀較少無明顯生長現 象未死亡9.24-B4染菌，材料被球菌包裹9.24-C9染菌，材料被球菌包裹9.24-B9褐變材料黃褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象未死亡9.24-A8褐變材料褐色細胞沉淀較多 液體渾濁無明顯生長現象 未死亡9.24-A2褐變材料黑褐色細胞沉淀較少無明顯生長現象 未死亡9.24-A10褐變材料褐色少量細胞沉淀無明顯生長現象， 未死亡9.24-B1未褐變材料黃綠色細胞沉淀較多無明顯生長現象， 未死亡9.24-C9切片觀察9.24-B2染菌，材料被球菌包裹9.24-C2褐變材料褐色溶液淺褐，少量 細胞沉淀。無明顯生長現象 未死亡9.24-A6部分褐變材料白褐色 有白色絮狀物溶液深褐，大量細 胞沉淀無明顯生長現象 未死亡9.24-B3部分褐變材料白褐色 有白色絮狀物溶液深褐，少量細 胞沉淀無明顯生長現象 未死亡9.24-A1部分褐變材料白褐色 有白色絮狀物溶液深褐，大量細 胞沉淀無明顯生長現象 未死亡9.24-C4染菌，材料被球菌包裹9.24-C7褐變材料褐色溶液淺褐，少量 細胞沉淀。無明顯生長現象 未死亡9.24-B4染菌，材料被球菌包裹，液體渾濁9.24-B6褐變材料褐色溶液淺褐，少量 細胞沉淀。無明顯生長現象 未死亡9.24-C5褐變材料褐色溶液淺褐，少量 細胞沉淀。無明顯生長現象 死亡9.24-A3褐變材料褐色溶液淺褐，少量