1、 實實 驗驗 一一 氣相色譜法測定食用酒中乙醇含量氣相色譜法測定食用酒中乙醇含量一實驗?zāi)康?.了解氣相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)；2.學(xué)習(xí)和掌握使用氫火焰離子化檢測器的基本 操作；3.掌握以內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行色譜定量分析的方法及特 點；4.學(xué)習(xí)氣相色譜法測定乙醇含量的分析方法。二、實驗原理 氣相色譜法是一種高效、快速而靈敏的分離分析技術(shù)。 當(dāng)液體樣品由進(jìn)樣口注入后立即被汽化，并被載氣帶入色譜柱，經(jīng)過多次分配而得以分離的各個組分逐一流出色譜柱進(jìn)入檢測器，隨時間變化而產(chǎn)生的電信號由記錄儀得到氣相色譜圖。對氣相色譜圖進(jìn)行數(shù)學(xué)分析，即可對樣品進(jìn)行定性定量分析。三、儀器與試劑 1.儀器：氣相色譜儀、氫火焰檢測器（FID）

2、、 色譜柱、微量注射器、容量瓶 （10cm3）、色譜工作站、吸量管（2、 5cm3）。 2.試劑：無水乙醇(A.R)、無水n-C3H7OH(A.R)、 丙酮、食用酒。四、實驗步驟1. 色譜操作條件 柱溫：90；汽化室溫度：150；檢測器溫度：130；N2（載氣）流速：40cm3/min；H2流速：35cm3/min；空氣流速：400cm3/min； 2.標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定 用吸量管準(zhǔn)確吸取0.50cm3無水乙醇和0.50cm3無水n-C3H7OH于10cm3的容量瓶中，用丙酮定容至刻度，搖勻。用微量注射器吸取0.5L標(biāo)準(zhǔn)溶液，注入色譜儀內(nèi)，記錄各色譜峰的保留時間tR和色譜峰面積，求出以無水n-C3

3、H7OH為標(biāo)準(zhǔn)物的相對校正因子。3.樣品溶液的測定 用吸管吸取1.00cm3的食用酒樣品和0.50cm3的內(nèi)標(biāo)物（無水n-C3H7OH）于10cm3容量瓶中，用丙酮定容至刻度，搖勻。用微量注射器吸取0.5L樣品溶液，注入色譜儀內(nèi)，記錄各色譜峰的保留時間tR，對照比較標(biāo)準(zhǔn)溶液與樣品溶液的tR，以確定樣品中的醇，記錄 C2H5OH和n-C3H7OH色譜峰面積，求出樣品中C2H5OH的含量。 實實 驗驗 二二 氣相色譜法測定生物柴油中脂肪酸甲酯氣相色譜法測定生物柴油中脂肪酸甲酯一、實驗?zāi)康?. 了解氣相色譜儀的基本構(gòu)造與一般使用方法2. 掌握氣相色譜檢測器的原理和操作；3. 了解程序升溫色譜法的操作

4、特點；4. 學(xué)會用氣相色譜儀進(jìn)行歸一化法定量分析。二、實驗原理程序升溫是指色譜柱的溫度按照適宜的程序連續(xù)地隨時間呈線性或非線性升高。在程序升溫中，采用較低的初始溫度，使低沸點的組分得到良好分離，然后隨著溫度不斷升高，沸點較高的組分逐一“推出”。由于高沸點組分較快地流出，因而峰形尖銳，與低沸點組分類似。在一定的色譜操作條件下，每種物質(zhì)有一定的保留時間，而響應(yīng)值與進(jìn)樣量成線性關(guān)系。當(dāng)樣品中所有組分都能流出色譜柱，并能給出可以測定的信號時，可以采用采用歸一化法進(jìn)行定量分析。歸一化法只適用于樣品中所有組分都從色譜柱流出并被檢測器檢出、且都在線性范圍內(nèi)、同時又能測定或查出所有組分相對校正因子的樣品。三、

5、儀器與試劑 1.儀器：6890型氣相色譜儀；色譜柱：HP- innowax毛細(xì)管色譜柱 （300.250.25）；氫火焰離子化檢 測器；微量注射器。2.試劑：生物柴油；正己烷。四、實驗步驟1. 色譜操作條件：汽化室溫度280；檢測器溫度280；柱溫采用程序升溫：初始溫度170，保持0.5min，以5min的升溫速率升至200，然后以15min的升溫速率升至240，保持時間5min；載氣：N2，柱頭壓60kPa；氫氣：32mLmin；空氣：320mLmin；進(jìn)樣量：1L。2. 取一定量的生物柴油樣品于1mL的容量瓶中，用正己烷定容后，在上述色譜條件下進(jìn)行氣相色譜分析，記錄下各色譜峰的保留時間和峰

6、面積。100%iiiiif AXf A根據(jù)公式（1）計算各脂肪酸甲酯的百分含量。 實實 驗驗 三三 高效液相色譜法測定萘高效液相色譜法測定萘一、實驗?zāi)康?. 認(rèn)識高效液相色譜儀, 掌握高效液相色譜儀的基本操作；2. 掌握高效液相色譜法進(jìn)行定性和定量分析的原理； 3. 掌握外標(biāo)法進(jìn)行定量分析的方法。二、實驗原理在一定的色譜操作條件下，每種物質(zhì)有一定的保留時間，而響應(yīng)值與進(jìn)樣量成線性關(guān)系。外標(biāo)法也叫標(biāo)準(zhǔn)曲線法。三、儀器與試劑1.儀器:Shimadzu LC-10ATvp高效液相色譜儀； 紫外吸收檢測器（254mm）；C18柱， 25cm4.6mm；微量注射器；超聲波清 洗器1臺；溶劑過濾器1套。2

7、. 試劑:甲醇：色譜純；二次蒸餾水；萘：AR 級。四、實驗步驟1.色譜操作條件： 色譜柱：C18柱； 流動相：甲醇：水80：20 流速：1mL/min 檢測波長：254nm 柱溫：40； 進(jìn)樣量：20L。2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制；3. 樣品溶液的配制；4. 進(jìn)樣并記錄色譜圖 五、數(shù)據(jù)處理與分析100(%) ssiimAAP 實實 驗驗 四四 內(nèi)標(biāo)法測定聯(lián)苯內(nèi)標(biāo)法測定聯(lián)苯一、實驗?zāi)康?. 進(jìn)一步熟悉高效液相色譜儀的基本構(gòu)造與一 般使用方法；2. 理解內(nèi)標(biāo)法的測定原理和優(yōu)點；3. 初步學(xué)會設(shè)計色譜法進(jìn)行樣品測定的實驗步 驟，并以萘為內(nèi)標(biāo)物測定樣品中聯(lián)苯的含量。二、實驗原理在一定的色譜操作條件下，每種物質(zhì)

8、有一定的保留時間，而響應(yīng)值與進(jìn)樣量成線性關(guān)系。內(nèi)標(biāo)法也叫內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法。三、儀器與試劑1.儀器:Shimadzu LC-10ATvp高效液相色譜儀； 紫外吸收檢測器（254mm）；C18柱， 25cm4.6mm；微量注射器；超聲波清 洗器1臺；溶劑過濾器1套。2. 試劑:甲醇：色譜純；二次蒸餾水；萘、聯(lián) 苯：AR級。四、實驗步驟1.色譜操作條件： 色譜柱：C18柱； 流動相：甲醇：水90：10 流速：1mL/min 檢測波長：254nm 柱溫：40； 進(jìn)樣量：20L。2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制；3. 樣品溶液的配制；4. 進(jìn)樣并記錄色譜圖 五、數(shù)據(jù)處理與分析100(%) iisisiisisiiAAm

9、mmmAAP 實實 驗驗 五五 常見陰離子色譜分析常見陰離子色譜分析一、實驗?zāi)康?. 了解離子色譜儀的基本構(gòu)造與一般使用方 法；2. 能用于測定樣品中常見陰離子的含量。二、實驗原理 離子色譜法是以為離子交換樹脂為固定相，電解質(zhì)溶液為流動相的液相色譜方法，常以電導(dǎo)檢測器作為通用的檢測器。 常見陰離子經(jīng)過陰離子柱分離后，利用保留時間進(jìn)行定性分析，利用峰面積進(jìn)行定量分析。三、儀器與試劑1.儀器:ICS-90型離子色譜儀；電導(dǎo)檢測器；陰 離子分析系統(tǒng)，微量注射器。2. 試劑：Na2SO4、NaNO3、NaCl(均為分析 純)；9 mmol/L Na2CO3溶液。四、實驗步驟1. 色譜操作條件的設(shè)置；2

10、. 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制； 3. 樣品溶液的配制；4. 進(jìn)樣并記錄色譜圖。五、數(shù)據(jù)處理與分析100(%) ssiimAAP 實實 驗驗 六六 分子熒光光譜分析法測定維生素分子熒光光譜分析法測定維生素B2一、實驗?zāi)康?.了解熒光光譜分析基本原理；2. 掌握熒光法的定量分析方法；3. 了解日立F-2500型熒光分光光度計的構(gòu)造及 其使用方法。二、實驗原理維生素B2（核黃素）在一定波長的激發(fā)光照射下會發(fā)射出綠色熒光，根據(jù)熒光強度在一定濃度范圍內(nèi)與熒光物質(zhì)濃度成正比，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法對樣品進(jìn)行定量分析。三、儀器與試劑1.儀器：日立F-2500型熒光分光光度計，液體 樣品架，50mL容量瓶8個，100mL燒 杯2個

11、，洗瓶一個，玻璃棒二根，蒸餾 水。2. 試劑：1%的醋酸溶液； 維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱出10.0mg維生 素B2先溶于少量的1%的醋酸溶液，然 后轉(zhuǎn)移到1000mL容量瓶中，用1%的醋 酸溶液定容至刻度，搖勻，至陰暗處 保存。此液含維生素B210.0g/mL。四、實驗步驟1. 按照日立F-2500型熒光分光光度計的使用方 法開好儀器。2. 配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液：取5個50mL容量瓶，分 別加入1.00，2.00，3.00，4.00，5.00mL濃度 為10.0g/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用水稀釋至刻 度，搖勻。3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 把各標(biāo)準(zhǔn)樣品置于試樣架內(nèi)，設(shè)置好儀器的 工作條件，用蒸餾水做空白，分別掃描

12、空白 和標(biāo)樣的熒光光譜，根據(jù)峰高和濃度繪制標(biāo) 準(zhǔn)曲線。4. 未知試樣的測定 準(zhǔn)確稱出一定量的未知試樣于小燒杯中，用 水溶解并定容至100mL容量瓶內(nèi)，搖勻，用 測定標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的條件，測其熒光強度。五、數(shù)據(jù)處理與分析根據(jù)試液的熒光強度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出試液中維生素B2的濃度，按下列公式計算維生素B2的含量。維生素B2的含量=C100/G（g/g）C試液中維生素B2的濃度（從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查 出，單位是g/mL）C未知試樣的重量，單位是克（g）100試樣被稀釋的體積。 實實 驗驗 七七 紫外吸收光譜法測定苯甲酸紫外吸收光譜法測定苯甲酸一、實驗?zāi)康?. 了解紫外吸收光譜儀的基本構(gòu)造與一般使用 方法；2

13、. 能用于測定樣品中苯甲酸的含量。二、實驗原理苯甲酸在225nm處有最大吸收峰，其吸光度與濃度的關(guān)系服從朗伯比爾定律。三、儀器與試劑1.儀器： UV1600紫外分光光度計；10mL容量 瓶7個；20 mL、5 mL吸量管各1支。2. 試劑: 0.1molL-1NaOH溶液;苯甲酸鈉(AR); 蒸 餾水。四、實驗步驟1. 苯甲酸鈉貯備液的配制：稱量經(jīng)過干燥的苯 甲酸鈉適量于1000mL容量瓶中，用水溶 解，并定容。2. 苯甲酸鈉工作溶液的配制：取20.00mL貯備 液稀釋定容至1000mL。3. 苯甲酸鈉系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：分別取苯甲 酸鈉工作溶液0-5.00 mL按下表配制。容量瓶編號1234

14、5678工作液（mL）01.002.003.004.005.004.004.00加入NaOH（mL）1.001.001.001.001.001.001.001.00定容（mL)10.010.010.010.010.010.010.010.0C（ppm）02.04.06.08.010.0X1X2五、數(shù)據(jù)處理與分析1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：以苯甲酸鈉系列標(biāo)準(zhǔn)溶液 的吸光度為縱坐標(biāo)，相應(yīng)的濃度為橫坐標(biāo)， 繪制作A-C標(biāo)準(zhǔn)曲線。2. 樣品溶液中苯甲酸鈉含量計算：從A-C標(biāo)準(zhǔn) 曲線上查出X值，從而求出樣品中苯甲酸的 含量。 實實 驗驗 八八 雙波長法同時測定維生素雙波長法同時測定維生素C和和E一、實驗?zāi)康?

15、. 進(jìn)一步熟悉紫外吸收光譜儀的基本構(gòu)造，掌 握其一般使用方法；2. 能用雙波長法同時測定雙組分的含量。二、實驗原理吸光度具有加合性，根據(jù)兩組分吸收曲線的性質(zhì)，選擇兩個合適的測定波長，通過解聯(lián)立方程的可以同時測出樣品中雙組分的含量。三、儀器與試劑1. 儀器: UV1600紫外分光光度計；50mL容量瓶 10個；20 mL、5 mL吸量管各2支。2. 試劑: 維生素C;維生素E;無水乙醇。四、實驗步驟1. 維生素C和維生素E標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制；2. 維生素C和維生素E紫外吸收曲線的繪制，確 定測定波長；3. 維生素C和維生素E標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制；4. 未知試樣的測定。五、數(shù)據(jù)處理與分析1. 維生素C吸收曲

16、線的繪制；2. 維生素E吸收曲線的繪制；3. 根據(jù)吸收曲線測定波長的選定；4. 維生素C標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：5. 維生素E標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：6. 樣品溶液中維生素C和E含量計算。實實 驗驗 九九 原子吸收光譜法測定原子吸收光譜法測定井水、河水中鎂井水、河水中鎂一、實驗?zāi)康?學(xué)會原子吸收光譜法測定金屬元素的原理與 方法；.了解原子吸收分光光度計的基本構(gòu)造，初步 熟悉其操作方法；.掌握火焰法測鎂的條件選擇。二、實驗原理 將樣品試液吸入空氣乙炔火焰中，在火焰的高溫下，鎂化合物離解為鎂基態(tài)原子，基態(tài)原子蒸氣對鎂空心陰極燈發(fā)射的特征譜線產(chǎn)生吸收。將測得的試樣溶液的吸光度扣除試劑空白的吸光度，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線法，確

17、定試液中的鎂含量。三、儀器與試劑、儀器：TAS-986型/GGX-型原子吸收分光 光度計、試劑：10g/ml Mg標(biāo)準(zhǔn)液四、實驗步驟. 配制Mg標(biāo)準(zhǔn)系列取10g/ml Mg標(biāo)準(zhǔn)液0.50、1.00、0.50、 2.00、2.50ml，分別置于5個50ml容量瓶 中，用蒸餾水稀釋至刻度搖勻，得Mg標(biāo)準(zhǔn) 系列。. 樣品：井水直接取4.00ml稀釋至100ml；河水過濾 后取10ml，稀釋至100ml。元素光源燈電流波長通帶火焰燃燒器高度Mg Mg燈1.mA285.2nm2A乙炔空氣mm. 儀器檢測條件按照上述條件，根據(jù)儀器操作步驟依次從低到高濃度測定標(biāo)液和樣液。五、數(shù)據(jù)處理 采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法處理，樣

18、品稀釋倍數(shù)。附.正確連接儀器及計算機各連線和插頭，確認(rèn) 儀器電源開關(guān)處于“關(guān)”位，再開啟穩(wěn)壓器電 源。.順序打開打印機、顯示器、計算機電源開 關(guān)，等待計算機處于“Windows”界面。.裝上待測元素空心陰極燈，并記下燈位。打 開TAS-986主機電源開關(guān)，雙擊“AAwin”軟 件圖標(biāo)聯(lián)機“確定”，儀器自動進(jìn)入自檢。.自檢完成后，設(shè)定和選擇工作燈和預(yù)熱燈 “下一步” 修改或輸入正確的燈電流、 分光帶寬、燃?xì)饬髁俊⑷紵鞲叨群臀恢?“下一步“尋峰” “下一步”“完成”。.在任務(wù)欄擊“儀器”，選擇“燃燒器參數(shù)”， 調(diào) 節(jié)火焰原子化器的前后、上下及角度位 置，其對準(zhǔn)光路。.擊“儀器”選擇“扣背景方式”

19、選擇“氘 燈” 或“自吸”扣背景，并輸入適當(dāng)?shù)碾疅綦娏骰?窄脈沖電流，在能量窗口再進(jìn)行調(diào)節(jié)和能量 自動平衡。若不進(jìn)行背景校正，本步可省去。. 擊“參數(shù)”按鈕在常規(guī)界面輸入“測量重復(fù)次 數(shù)”、“采樣間隔”、及“采樣延時參數(shù)”；在顯 示界面輸入“吸光度顯示范圍”及“頁面更新時 間” 在數(shù)據(jù)處理界面選擇“計算方式”，輸入 “積分時間”、“濾波系數(shù)” “確定”。 .擊“樣品”按鈕選擇“校正方法”、“曲線方 程”、“ 濃度單位”“下一步”選擇“標(biāo)準(zhǔn)系列樣品個數(shù)”，輸入“標(biāo)準(zhǔn)系列樣品 濃度值” “下一步”選擇“未知樣品個數(shù)” “完成”。.順序打開空壓機“風(fēng)機開關(guān)” “工作開關(guān)”， 待壓力穩(wěn)定后，檢查并調(diào)節(jié)

20、出口壓力為0.25 0.3Mpa之間（推薦壓力0.25 Mpa）。10.打開乙炔鋼瓶總閥，檢查并調(diào)節(jié)出口壓力為 0.05 0.09 Mpa之間（推薦壓力0.06 Mpa）。11.擊“點火”按鈕點火吸噴蒸餾水1 2 分鐘 吸噴標(biāo)準(zhǔn)系列空白溶液擊“校零”按鈕自動調(diào) 零。12.擊“測量”按鈕順序吸噴標(biāo)準(zhǔn)系列溶液并在測 量窗口擊“開始”按鈕測量標(biāo)準(zhǔn)溶液，作校準(zhǔn)曲 線。13. 吸噴未知樣品溶液，擊“開始”按鈕測量未 知樣品。全部未知樣品測量完畢后擊“終 止”按鈕退出測量吸噴蒸餾水1 2 分 鐘清洗燃燒器。14. 擊“應(yīng)用”按鈕選擇“實驗記錄” 輸入 “測量元素”、“樣品名稱”、“分析員”、“記 錄” “

21、確定” 。15. 在測量表格上擊右鍵選擇“表格設(shè)置” 選擇所需顯示和打印的項目在任務(wù)欄擊 “打印”按鈕選擇所需打印的內(nèi)容擊“確 定”打印相應(yīng)內(nèi)容。16. 關(guān)閉乙炔鋼瓶總閥，燒去管路中余氣，待 火焰熄滅后按空壓機“放水閥”放水關(guān)閉 空壓機“工作開關(guān)” 1 2分鐘后關(guān)閉“風(fēng) 機開關(guān)”。17. 退出AAWin操作軟件關(guān)閉TAS-986主機 電源關(guān)閉打印機、計算機、穩(wěn)壓器電源。18. 整理實驗室衛(wèi)生、檢查實驗室水、氣、電安 全。1. 開機前準(zhǔn)備將主機各操作鈕置于適當(dāng)位置；安裝空心陰極燈。2. 開機依次開穩(wěn)壓器、總電源、調(diào)燈電流后預(yù)熱 1520分鐘；選擇分析線及狹縫寬度后，調(diào)燈及燃燒器 的位置，調(diào)負(fù)高壓，用“狀態(tài)檢查（工作選 擇）”檢查負(fù)高壓與15V電源是否正常。3. 點火關(guān)緊主機上各氣體調(diào)節(jié)針閥，將“空氣-笑 氣” 鈕旋至“空氣”，開排廢氣裝置； 開空壓機，調(diào)空氣輸入壓為23kgcm-2； 打開助燃?xì)忉橀y，開大至限壓開關(guān)被啟動 后，調(diào)助燃?xì)饬髁浚灰来未蜷_乙炔鋼瓶總閥、分閥，調(diào)節(jié)乙炔 輸出壓力0.8 kgcm-2，調(diào)燃?xì)饬髁亢簏c火。4. 測定依次從低到高濃