1、學習好資料歡迎下載專題 3 植物的組織培養專題復習表解、細胞的全能性含義生物體的細胞具有使后代細胞形成完整的個體的潛能。基礎每個體細胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質，都有發育成為完整個體的全部基因。程度由咼到低依次是受精卵生殖細胞體細胞；植物細胞動物細胞；體細胞中：幼嫩組 織細胞（分化程度低的細胞） 成熟的組織細胞（分化程度高的細胞）表現條件離體營養物質 激素 適宜外界條件與植物組織 培養的關系（1 1）植物細胞的全能性是植物組織培養的理論基礎（2 2）離體的植物組織或細胞經過脫分化和再分化能表達其全能性、植物組織培養過程比較過程名稱過程形成體特點條件脫分化（去分化）由離體的器官、組織或細胞

2、產生愈 傷組織的過程稱為脫分化排列疏松而無規則，是一種 高度液泡化的呈無定形狀 態的薄壁細胞1離體2提供營養物質3激素4提供適宜外界條件再分化脫分化產生的愈傷組織繼續培養， 又可以重新分化為根或芽等器官， 這個過程稱為再分化。有芽、根或有生根發芽能力營養生長生殖生長幼苗發育成完整的植物體的過程由根、莖、葉、花、果實、 種子組成栽培條件三、MSMS 固體培養基與微生物培養基項目MSMS 固體培養基牛肉膏蛋白胨培養基碳源蔗糖（維持細胞滲透壓）牛肉膏氮源無機鹽、大量兀素蛋白胨無機鹽大量兀素：N N、P P、S S、K K、CaCa、MgMg微量兀素：B B、MnMn、CuCu、ZnZn、FeFe、M

3、oMo、I I、CoCoNaClNaCl、牛肉膏、蛋白胨提供磷酸 鹽特殊營養 物質甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素（滿足離體植物細胞在正 常代謝途徑受一定影響后所產生的特殊營養物質需求）牛肉膏、蛋白胨提供維生素激素多種植物激素不需要四、植物激素在組織培養過程中的重要作用植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的比例等，都會影響實驗結果。按照不同的順序使用這兩類激素，會得到不同的實驗結果。使用順序實驗結果先使用生長素，后使用細胞分裂素有利于細胞分裂，但細胞不分化先使用細胞分裂素，后使用生長素細胞既分裂又分化同時使用分化率提高當同時使

4、用這兩類激素時，兩者用量的比例影響植物細胞的發育方向。生長素用量比細胞分裂素用量植物細胞的發育方向比值高時有利于根的分化、抑制芽的形成比值低時有利于芽的分化、抑制根的形成比值適中時促進愈傷組織的生長五、被子植物花粉發育過程1 1發育場所：被子植物雄蕊的花藥中。2 2分裂方式：花粉是由花粉母細胞經減數分裂和有絲分裂而形成的，因而花粉是單倍體的生殖細胞。其中有小 孢子母細胞到小孢子過程是減數分裂，其余均為有絲分裂。3 3發育過程：（1 1）圖像學習好資料歡迎下載l l3-fi3-fi 瞅柏仙相初仙缺和述畀(2(2)圖解：小孢子母細胞T四分體時期T單核期T雙核期(營養細胞+ +生殖細胞含兩個精子)4

5、 4區分四分體與四分體時期減數分裂過程中四分體：在減數第一次分裂時同源染色體聯會，每條染色體汗兩條姐妹染色單體，因此聯 會后的每對同源染色體含四條染色單體，叫四分體。花粉發育過程中的四分體時期： 小孢子母細胞經減數分裂形成 4 4 個單倍體細胞，4 4 個單倍體細胞連在一起, 稱為四分體時期。六、菊花組織培養與月季花藥培養的比較比較項目菊花組織培養月季花藥培養相原理植物細胞的全能性同:環節培養基配制方法、無菌技術及接種操作基本相冋占八、條件受溫度、酸堿度和光照等外界條件的影響選材未開花植株莖上部新萌生的側枝完全未開放的花雷外植體類型體細胞生殖細胞培養過程慟一T 靜段二Fk*娜寄 班不不冋的植物

6、組織，培養的難易程度差(1 1)不同植物的誘導成功率很不相同。(2 2 )就別很大，容易進行無性繁殖的植物也同一植物來說，親本植株的生理狀況對誘導成功容易進行組織培養。冋一種植物材率也有直接影響。(3 3)花期早期時的花藥比后期同內料，材料的年齡、保存時間的長短也的更容易產生花粉植株。 選擇合適的花粉發育時有影響。幼齡、保存時間短的植物材期是提高誘導成功率的重要因素。花粉發育的過料容易培養成功。程中，只有某一個時期對離體刺激敏感。一般來點因說，在單核期，細胞核由中央移向細胞一側的時期，花藥培養成功率最高。確定花粉發育時期的影最常用方法有醋酸洋紅法和焙花青- -鉻磯法，焙花青鉻磯法能將花粉細胞核

7、染成藍黑色。響(4 4)親本植株的生長條件、材料的低溫預處理以及接種密度等對誘導成功率都有一定影響。因1 1培養基的組成p.p.花藥培養對培養基配方的要求更為嚴格。花藥外2 2植物激素的濃度、使用先后順序以裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時更素及用里比例都會影響試驗結果。由于換培養基。菊花莖段的組織培養比較容易，因2 2需要嚴格控制使用激素的量因此，不必添加植物激素。3 3培養條件：pH=5.8pH=5.8、培養溫度控制在2525C左右，3 3外界條件：pH=5.8pH=5.8、溫度為 18-2218-22C,不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。并且每日用 12h12h 光照培養結果正常

8、植株單倍體植株生殖類型無性生殖有性生殖(單性生殖)實驗流程制備培養基T外植體消毒T接種T:選材T消毒T接種T培養T鑒疋和師選T移栽培養T移栽T栽培專題 6 植物有效成分的提取 專題復習表解知識整合咖4 41 1rtrt酬14*比粉irsnM.鈦JfcWW學習好資料歡迎下載1 1植物芳香油的提取方法提取方法實驗原理方法步驟適用范圍優點不足水蒸氣蒸餾利用水蒸氣將揮 發性較強的芳香 油攜帶出來1 1水蒸氣蒸餾2 2分離油層3 3除水過濾適用于提取玫 瑰油、薄荷油 等揮發性強的 芳香油簡單易行，便于 分離水中蒸餾會 導致原料焦 糊和有效成 分分解等問 題壓榨法通過機械加壓，壓 榨出果皮中的芳 香油1

9、1石灰水浸泡、漂洗2 2壓榨、過濾、靜置3 3再次過濾適用于柑橘、 檸檬等易焦糊 原料的提取生產成本低，能 保持原料原來的 結構和功能，常 溫下不發生化學 反應，質量提高分離較為困 難，出油率 相對較低萃取使芳香油溶解在 有機溶劑中，蒸發 溶劑后就可獲得 芳香油1 1粉碎、干燥2 2萃取、過濾3 3濃縮適用范圍廣， 要求原料的顆 粒要盡可能細 小，能充分浸泡在有機溶液 中出油率咼，易于 分離使用有機溶 劑處理不當 會影響芳香 油的質量2 2水中蒸餾、水上蒸餾和水汽蒸餾的比較比較項目水中蒸餾水上蒸餾水汽蒸餾相同點基本原理相同，都是利用水蒸汽將揮發性較強的芳香油攜帶出來不 同 占 八、 、原料放中

10、.tyj.tyj. 置位置原料放在蒸餾容器的水中，水 要完全浸沒原料容器中水的上方有篩 板，原料放在篩板上， 水量以沸騰時不浸濕原 料為宜蒸餾容器下方有一排 氣孔，連接外源水蒸 汽，上方有篩板，上面 放原料特點設備簡單，成本低，易于操作蒸餾時間短，出油率高3 3植物有效成分提取的比較比較 項目植物芳香油（萜類化合物及其衍生物）胡蘿卜素玫瑰精油橘皮精油成分主要是檸檬烯分為 a a 伙丫三類，B B 胡蘿卜素是其中最主要的成分性質化學性質穩定，難溶于水， 易溶于有機溶劑，能隨水蒸 汽一同蒸餾無色透明，具有誘 人的橘香胡蘿卜素是橘黃色結晶，化學性質比較穩定，不溶于 水，微溶于酒精，易溶于石油醚等有機

11、溶劑。來源玫瑰花瓣橘皮部分一是從植物中提取，二是從大面積養殖的巖藻中獲 得，三是利用微生物的發酵生產。用途制作高級香水的主要成分， 能使人產生愉悅感。是視頻、化妝品和 香水配料的優質原 料。胡蘿卜素可以用來治療因缺之維生素A A 而引起的各種疾病，如夜盲癥、幼兒生長發育不良，干皮癥等。胡蘿卜素還是常用的食品色素， 廣泛地用作食品、飲 料、飼料的添加劑。最近發現天然胡蘿卜素還具有使 癌變細胞恢復成正常細胞的作用。方法水中蒸餾法壓榨法萃取法紙層析法學習好資料歡迎下載1 1蒸餾裝置安裝順序從左到 右，自上而下。拆卸儀器的 順序與安裝時正好相反。2 2溫度計位置：使溫度計水 銀球的上限與蒸餾頭側管 的

12、下限處在同一水平線上。3 3冷凝管保證上端出水口向 上，通過橡皮管與水池相 連；下端進水口向下，通過 橡皮管與水龍頭相連。4 4加熱時防暴沸：墊石棉網， 向液體中加幾片沸石或碎 瓷片。5.5.玫瑰花與水的質量比為1:41:4。6 6燒瓶內液體體積占燒瓶容 積的1/31/3 2/32/3。7.7. 油水混合物加入 NaCINaCI 分 離油層加入無水 Na2SO4Na2SO4 除 水。8.8. 為提高產品質量，要嚴格 控制蒸餾溫度，可適當延長 蒸餾時間。9.9. 干玫瑰花也可用萃取的方 法提取玫瑰精油。胡蘿卜T粉碎T干燥T萃取T過濾T濃縮T胡 蘿卜素1.1. 影響萃取的因素主要 取決于萃取劑的性

13、質和 用量，同時受到原料顆 粒大小、緊密程度、含 水量、萃取溫度和時間 等的影響。干燥時要注 意控制溫度，溫度太高、 干燥時間太長會導致胡 蘿卜素的分解。2.2. 萃取過程中應該避免 明火加熱，采用水浴加 熱，因為有機溶劑都是 易燃物，直接使用明火 加熱容易引起燃燒、爆 炸。在加熱瓶口安裝冷 凝回流裝置，目的是防 止加熱時有機溶劑揮 發。3.3. 萃取液濃縮之前，要進 行過濾除去萃取液中的不溶物。4.4. 萃取劑的選擇胡蘿卜素可溶于乙醇和 丙酮，但他們是水溶性 的有機溶劑，因能與水 混溶而影響萃取效果， 所以不用它們作萃取 劑。在石油醚、醋酸乙 酯、乙醚、苯和四氯化 碳這五種溶劑中，石油 醚的

14、沸點最高，在加熱 萃取時不易揮發，所以 石油醚最適宜用作萃取 劑。量做基線T對照點樣T干 燥層析T對比觀察。1.1. 紙層析是層析法的一種, , 層析法又稱色層分析法或 色譜法，是一種基于被分 離物質的物理、化學及生 物學特性的不同，使它們在某種基質中移動速度不 同而進行分離和分析的方 法。層析法的最大特點是 分離效率高，它能分離各 種性質極相類似的物質。 而且它既可以用于少量物 質的分析鑒定，又可用于 大量物質的分離純化制 備。2.2. 層析時注意選擇干凈的 濾紙，為了防止操作時對 濾紙的污染，應盡量避免 用手直接接觸濾紙，可以 帶手套進行操作。3.3. 點樣時應注意點樣斑點 不能太大（直徑

15、應小于 0.5cm0.5cm）,如果用吹風機吹 干，溫度不宜過高，否則 斑點會變黃。將點好樣的 濾紙卷成筒狀，卷紙時注 意濾紙的兩邊不能相互接 觸，以免因毛細管現象導 致溶劑沿濾紙兩邊的移動 加快，溶齊愉沿不齊，影響結果。4.4. 層析時，不要讓層析液 沒及樣品原點，防止胡蘿卜素溶解在層析液中，實 驗失敗。實驗裝置rk*PM曲煩曲n t s世皿制畑1札citumtudui水蒸氣蒸餾加入 NaCINaCI 加入無水 NaSO4NaSO4實驗流程操石灰水浸泡T漂洗T壓榨T過濾T靜 置T再次過濾T橘 皮油1.1.為提高出油率，需 將柑橘皮干燥去 水，并用石灰水浸 泡，時間為 10h10h 以上。石灰水的作用 是破壞細胞結構， 分解果膠，防止橘 皮壓榨時滑脫， 提 高出油率。2 2 壓榨時還要分別 加入相當于橘皮質 量的 0 0 25%25%的小蘇 打和 5%5%