1、gj+100年+放射生物學領域 潛水醫學領域SOD缺血再灌注與自在基損傷腫瘤、免疫等各種生命過程+自在基： 損傷作用+ 信號作用+ 現代抗衰老研討的目的不是將自在基徹底去除，而是將自在基維持在一個適當的低程度，維持氧化和抗氧化防御之間的平衡。 一個原子或分子含有未成對電子，或是一個原子、分子或離子子， 帶有一個單獨不成對的電子。即是自在基外層只需一個子，因此急于抓取其他電子來穩定本人，而破壞其他分子大部分生物學和醫學所關懷的自在基是由氧分子衍生而氧分子衍生之自在基也同樣運用在以氮及碳分子為中心所衍生出 之自在基O2e O-2氧自在基；超氧化物自在基致線粒體DNA突變自在基對呼吸鏈的損傷自在基對

2、線粒體膜的損傷自在基破壞線粒體的鈣穩態 已有公認 ,線粒體鈣穩態的破壞是細胞壞死的最后共同通路。+燒烤、抽煙、致癌物質、環境的化學物質、氯化物、重金屬、酒精性飲料、抗癌藥物、猛烈運動等+線粒體是細胞呼吸和氧化的中心，氧自在基主要來源于線粒體呼吸鏈反響，這里可產生活細胞內90%以上的自在基。+自在基的種類繁多，其中，以超氧陰離子自在基(O2)和羥自在基(OH)等氧自在基最為重要近年來經研討發現的去除氧自在基的藥物很多，如眾所周知的維生素e、維生素a、維生素F 及丹參等，都能很好地去除氧自在基，在臨床上也已得到廣泛的運用。還有一些天然產物知母寧和蛋白類的化合物金屬硫蛋白、鈍頂螺旋藻藻膽蛋白也具有較

3、強的抗氧化才干。在目前眾多的去除氧自在基的藥物中，以中草藥及其提取成分的活性較強，在臨床的運用也非常廣泛.因此在中草藥中尋覓高效無不良反響的天然自在基去除劑的研討，成為醫藥學活潑的研討領域 。某些具有氧自在基去除才干的中草藥不僅可以治療與氧自在基添加而引起的有關疾病，如癌癥、缺血: 再灌注損傷、輻射損傷，還可經過去除氧自在基對面部色素堆積 如蝴蝶斑，黃褐斑有一定的療效。因此， 研討去除氧自在基的藥物及其制劑不僅在臨床治療上有艱苦意義而且在化裝品及保健食品的開發上具有較大的市場潛力。但在運用的過程中應恰當，否那么利少弊多。 09年，抗氧化劑的臨床運用及其研討進展+抗氧化劑(antioxidant

4、s)：+ 分為兩類：-由體內制造的抗氧化酵素+ -由體外補充的抗氧化食物+ 體內的抗氧化酵素，必需有有銅(Cu)鋅(Zn)硒(Se)鐵(Fe)等的參與+飲食中的抗氧化物質：胡蘿卜素+從飲食或營養補充品繼續補充抗氧化劑和營養素是必需的+ 09年，抗氧化劑的臨床運用及其研討進展+微量元素類 + - 羧乙基鍺倍半氧化物鍺-123+ 電子自旋共振技術ESR和比色法 OH和O2+ -硒-為含硒谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px的活性部分 O2所致脂質過氧化鏈鎖反響 克山病、肝癌及結腸癌的預防。+ -青絡鍺Ge-M10和青絡銅Cu-M5 + 抗癌藥的研發09年，抗氧化劑的臨床運用及其研討進展+藥用天然化合物+

5、-多糖類+ -藻類多糖 ESR和自旋捕集技術， OH和O2+ -菌類多糖 鄰苯三酚自氧化法測定+ -其他植物多糖 金線蓮多糖 沙棘多糖+-黃酮類化合物 ESR自旋捕捉法和微量量熱法實驗+-酚類 單酚類與多酚類 抗衰老、心腦血管+-萜類化合物及其甙+ -人參總甙類 犬腎移植模型+ -冬凌草甲素 OH和O2 抗癌+-蒽醌類化合物 蘆薈大黃素和蘆薈素09年，抗氧化劑的臨床運用及其研討進展+藥用植物+ -傘形科藥用植物+ 大都具有去除自在基+-馬齒莧+ 不同處置方法引起的馬齒莧水提物對O2作用的差別， 使得馬齒莧的臨床運用有所不同+-鮮花提取液+ 化學發光法 多數鮮花具有抗氧化活性，其中天竺葵、春蘭、

6、仙客來、萬壽菊等花瓣浸提液具有較強的去除OH的活性+-其他的藥用植物+ 大黃， 丹參， 三七， 銀杏， 陳皮， 荷葉， 桑葉等09年，抗氧化劑的臨床運用及其研討進展+酶類+-巴曲酶+ 蛇毒中提取的血栓素樣的蛋白酶，具有抗血栓作用+ 超氧陰離子自在基去除劑+-SOD+ 公認 有效期很短，只需幾小時，且不易經過細胞膜09年，抗氧化劑的臨床運用及其研討進展+化學合成藥+ -吲達帕胺和維拉帕米+ 離體兔心灌注模型實驗，設置吲達帕胺和維拉帕米組與對照組 MDA下降，SOD加強+ - 4-氧和4-羥四甲基哌啶氮氧自在基及其衍生物+ 明顯的抗脂質過氧化物09年，抗氧化劑的臨床運用及其研討進展+特異性抗氧化

7、是用比較特異的抗氧化物質來阻斷那些主要損害機體的自在基，保管正常或好的自在基的方法+物質的復原性不強，否那么能夠具有復原損傷效應，如維生素C+目前比較有出路的幾個是：尿酸、衣達拉豐藥物、氫氣、FK106(免疫抑制藥物)+另外一個比較有出路的是啟動內源性抗氧化系統的方法，就是氧化反響元件的激動物，如硫氧化復原蛋白、GSH合成等，這些物質是體內抗氧化最有效的系統，不需求補充抗氧化物質，就可以發揚作用，而且不會呵斥過度抗氧化，實踐上氧化復原最重要的是平衡+許多天然化合物能激動這個途徑例如蘿卜硫素、姜黃素，這些藥物具有非常好的抗癌作用+天然藥物抗氧化活性成分分別提取技術的開展+ 天然藥物有效成分的傳統

8、提取方法為索氏萃取法( Soxhletextraction , SE) 缺陷：部分過熱，溶液限制+ 新的液相色譜法的開展和運用, 為有效成分的提取提供了新的有利的方法。 如：+灌注色譜法可用于天然藥物中蛋白質、肽類、酶類、低聚糖類、生物堿類等的分別純化。+高速逆流色譜法(Hsccc)用于生物堿類、黃酮類、萜類、木脂素類、香豆素類及植物激素類等活性成分的分別提取+目前多采用 微波輔助萃取法(MAE) 和 超臨界流體萃取技術( SFE) 。MAESFE分別提取快速, 與索氏萃取法比較只需較少的溶劑且得率較高 。酚類化合物可以容易地用MAE提取而得最干凈的提取方法,萃取和分別合二為一，速度快，在接近

9、常溫的條件下操作，適宜于揮發性物質的分別+抗氧化活性的測定+ -體外抗氧化活性+ 總的抗氧化才干+ 消除活性氧才干+ -在體抗氧化作用試劑盒丙二醛含量可以反響出體內脂質過氧化損傷的程度。+主要為三大類：+ 體外抗氧化模型+ 脂質過氧化的抑制+ 去除各類活性氧、自在基才干的檢測方法+ 氧化復原法+ 細胞損傷模型+ H2O2 損傷細胞的體外模型+ 過氧化脂質損傷細胞的體外模型建立+ 體內抗氧化模型07年，徐清萍等，抗氧化劑抗氧化方法研討進展+以油脂為底物：以油脂為底物：+ 加速氧化方法：烘箱法、活性氧加速法等加速氧化方法：烘箱法、活性氧加速法等+ 利用金屬離子、自在基引發劑利用金屬離子、自在基引發

10、劑+氧化誘導期的指示方法能否客觀反映底物氧化氧化誘導期的指示方法能否客觀反映底物氧化+誘導期的終了，對評價抗氧化劑的活性非常關鍵。誘導期的終了，對評價抗氧化劑的活性非常關鍵。+ + 方法：碘量法方法：碘量法+ 硫氰酸亞鐵法硫氰酸亞鐵法 三價鐵離子與硫氰酸絡三價鐵離子與硫氰酸絡合合+ 共軛二烯酸測定法共軛二烯酸測定法+ 化學熒光法化學熒光法+ 增重法增重法+ 養壓法養壓法+ 茴香胺反響物法、克雷斯實驗法、胡蘿茴香胺反響物法、克雷斯實驗法、胡蘿卜素漂白法等卜素漂白法等+ + + 脂質過氧化的抑制07年，徐清萍等，抗氧化劑抗氧化方法研討進展+以亞油酸為底物+ 硫氰酸鐵法+ 硫代巴比妥酸法+ -利用亞

11、油酸氧化產生丙二醛和硫代巴比妥酸反響生成紅色物質，在532 nm有吸收。+卵磷脂氧化法+亞油酸甲酯氧化法+以鼠肝微粒體為底物脂質過氧化的抑制07年，徐清萍等，抗氧化劑抗氧化方法研討進展+去除羥自在基才干+ 產生羥自在基(OH)的體系有Fe EDTA一抗壞血酸一H20 體系、Fe 一EDTAH20 體系、黃嘌呤一黃嘌呤氧化酶一H 0 體系及紫外光照H 0 ，光解產生OH等。+ 方法：二甲基亞砜法 DMSO+ 脫氧核糖核酸降解法+ 亞硝基二甲苯胺(NPA)漂白法+ 水楊酸法+ 高效液相電化學檢測法+ 茜素紫顯色法去除各類活性氧、自在基才干的檢測方法07年，徐清萍等，抗氧化劑抗氧化方法研討進展+檢測

12、去除H202 才干的方法+去除過氧自在基才干的檢測方法+ 過氧自在基(RO )包括水溶性RO 和脂溶性RO + RO 可使順式十八碳四烯酸脂質過氧化，測定熒光強度(于324 nm激發，412 nm處釋放)可了解脂質過氧化的情況，推測受試物去除RO 的情況。+ 超氧陰離子自在基去除才干的測定+ 鄰苯三酚 蛋氨酸+ 鄰苯三酚法可經過測定鄰苯三酚的自氧化速率來確定待測物的抑制造用+ 去除二苯代苦味酰基自在基才干的檢測方法+ABTs方法 2，2一連氮一雙一(3一乙基苯并噻唑啉一6一磺酸去除各類活性氧、自在基才干的檢測方法07年，徐清萍等，抗氧化劑抗氧化方法研討進展+受試物直接去除自在基才干的檢測除以上

13、引見的方法外，受試物對各類自在基的去除作用還可用電子順磁共振(ESR)法。用ESR測試得到自旋加合物的電子自旋共振圖譜，得知受試物對自旋加合物信號強度的影響，從而了解受試物對自在基的去除情況07年，徐清萍等，抗氧化劑抗氧化方法研討進展+FRAP assay(Ferric Reducing Ability of plasma)：血漿高鐵復原才干分析才干+原理：本質是基于氧化復原反響的比色法+ 在低pH值的溶液中，Fe3+ 一TPTZ(Fe 3+一三吡啶三嗪)被抗氧化劑復原成Fe 2+一TPTz，溶液變成深藍色，并且在593 nm處有最大光吸收。+其他體外測定抗氧化活性的方法還有利用Cu2-Fen

14、ton反響， P標志檢測DNA的氧化損傷法，SPME法監測脂質過氧化系統中產生的揮發性羰基類化合物來評價抗氧化活性法等。體外抗氧化模型體外抗氧化模型氧化復原法07年，徐清萍等，抗氧化劑抗氧化方法研討進展+H202 損傷細胞的體外模型+ H202培育液 + MTT法察看細胞損傷及藥物對細胞損傷的維護作用+ 過氧化脂質損傷細胞的體外模型建立+ 過氧化脂質tBuOOH、NDE (2，4一nonadiena1)07年，徐清萍等，抗氧化劑抗氧化方法研討進展+用受試物延續喂飼大鼠或小鼠1個月3個月，+ 然后處死動物，測定其血或組織(如肝、腦)中+ MDA、單胺氧化酶(MAOB)及抗氧化酶SOD、+ 谷胱甘

15、肽過氧化物酶(GSHPx)及過氧化氫酶(CAT)，同對照組比較，假設MDA、MAOB降低，SOD、GSHPx、CAT等升高，那么闡明受試物具有抗氧化才干。07年，徐清萍等，抗氧化劑抗氧化方法研討進展+體外挑選具有抗氧化活性的物質可經過體內實驗進一步驗證。+體內實驗的特點是比較靈敏，周期較長，本錢較大，實驗比較繁瑣，不如體外實驗簡易方便，但卻是目前最準確、可信度最高的抗氧化劑的挑選方法。+天然抗氧化活性物質挑選對促進抗衰老、防癌和心血管系統疾病的保健食品、藥品的開發具有積極作用。07年，徐清萍等，抗氧化劑抗氧化方法研討進展+在化學任務者用實驗方法檢測某一類抗氧化劑抗氧化才干的根底上，根據所得的數

16、據，以計算機軟件為工具用量子化學模擬計算，確定抗氧化劑的構效關系，開創了用量子化學實際研討抗氧化劑才干的新路+可以對抗氧化劑的活性進展預測，且有能夠在實際上構造出新的活性更高的抗氧化劑，進而加速抗氧化劑的合成與挑選不同病人去除藥物的固有才干是不同的一位具有迅速代謝藥物才干的人，為獲得適宜的治療濃度，能夠需求更高的劑量、更頻繁地給藥一位代謝才干緩慢的病人，為防止發生毒性反響，能夠需求較低的劑量和較少的給藥次數對于平安范圍較窄的藥物尤為重要認識和闡明藥物反響個體和群體間差別的發活力制，提高藥物治療效果 闡明遺傳在機體對藥物和外源性物質反響個體變異中的作用從生物化學、藥理學、遺傳學和基因組學多學科研

17、討與藥物反響有關的蛋白質和相關基因，闡明決議藥物反響個體差別的根本機制 藥物代謝酶藥物代謝酶 受體受體 遺傳多態性遺傳多態性 藥物轉運體藥物轉運體1.人群調查人群調查 在臨床實際中發現某些個體病人對藥在臨床實際中發現某些個體病人對藥物產生異常藥物反響或代謝的根底上進展物產生異常藥物反響或代謝的根底上進展人群調查研討，可初步確定個體或種族間人群調查研討，可初步確定個體或種族間差別能否存在遺傳要素的影響。差別能否存在遺傳要素的影響。2.雙生子法雙生子法(twin method) 單卵雙生單卵雙生(monozygotic twin) 二卵雙生二卵雙生(dizygotic twin)v同卵雙生子(monozygotic t