1、風濕性疾病相關自身抗體淺析Bacteria, Fungi, Parasites, Viruses FUNGUS -Epidermophyton floccosum(causes athletes foot)VIRUS- PolioBACTERIA -Clostridium difficile (causes antibiotic-associated colitis & antibiotic-associated diarrhea)PARASITE -Tapewormn免疫的原始概念免疫的原始概念：指機體對病原生物有抵抗能力，即免除傳染病或瘟疫：指機體對病原生物有抵抗能力，即免除傳染病

2、或瘟疫n免疫的現代概念：免疫的現代概念： a 機體對機體對抗原性異物抗原性異物進行識別與清除進行識別與清除 b 對自身成分免疫耐受對自身成分免疫耐受 c 維持機體內環境穩定的能力維持機體內環境穩定的能力免除稅賦，免除差役免除稅賦，免除差役 immunitas免免于于疫疫患，患，免免除瘟除瘟疫疫 immunity免疫的概念免疫的概念中文中文“免疫免疫”最早見于明最早見于明免疫類方免疫類方“自己成分自己成分”與與“非己成分非己成分”n自身的自身的 & 外界的外界的 ？n免疫系統將免疫系統將免疫細胞發育過程中免疫細胞發育過程中接觸過的物質視為自己，接觸過的物質視為自己，未接觸過的物質視為非己

3、未接觸過的物質視為非己 舉例：交感性眼炎（晶狀體蛋白）舉例：交感性眼炎（晶狀體蛋白）表位擴展表位擴展n是自身免疫性疾病發生發展的一種機制n機體的免疫系統可不斷擴大所識別的自身抗原表位的范圍，對自身抗原不斷發動新的免疫攻擊，使疾病遷延不愈并不斷加重n在SLE的發生過程可觀察到表位擴展現象，患者體內可先發生對組蛋白H1的免疫應答，繼而出現對DNA的免疫應答n在類風濕關節炎、多發性硬化和胰島素依賴性糖尿病患者也觀察到了表位擴展的現象自身免疫自身免疫n 機體免疫系統受某種因素作用使自身免疫耐受削弱或破壞n 免疫系統會對自身成份包括正常或變性的組織、器官、 細胞、蛋白質或酶類等自身抗原產生免疫應答反應n

4、 出現自身抗體或致敏淋巴細胞的這種現象稱為自身免疫n 自身免疫可以是正常生理性的 例如： 針對衰老或死亡的自體細胞n 自身免疫也可以是病理性的，引起自身免疫病自身免疫性疾病（AID)特點特點：（1）多數是自發或特發性的，感染、藥物等外因可能有一定的影響（2）患者血清中存在有高水平的 球蛋白（3）患者血清中有高效價的自身抗體或出現與自身抗原反應的致敏 淋巴細胞（4）病損部位有變性的Ig沉積，呈現以大量淋巴細胞和漿細胞浸潤為主的慢性炎癥自身免疫性疾病（AID)特點特點：（5）病程一般較長，發作與緩解交替出現，僅有少數為自限性（6）女性多于男性（7）部分有遺傳傾向（8）糖皮質激素等免疫抑制劑有效（9

5、）常有其它自身免疫病同時存在（10）可復制出相似的動物疾病模型 臨床角度-自身免疫性疾病診斷的復雜性n多臟器、多系統受累不同時出現n同一疾病的疾病譜廣泛n不同AID的病理損害之間有交叉、重疊n在同一時間段不同病變對治療的反應不一n由于疾病本身的免疫紊亂和治療因素而繼發感染n當患者出現感染時表現不典型n隨時間的延續可能出現的分化和進展自身抗體自身抗體 【概念概念】 n由各種原因造成的機體B細胞產生針對自身組織 成分的抗體，稱為自身抗體n自身抗體是自身免疫性疾病的重要標志n每種自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗體譜 抗體的結構抗體的結構自身抗體與疾病的關系自身抗體與疾病的關系n 某些自身抗體對某種

6、疾病的診斷具有高度特異性，已經成為 該病的血清標記抗體或特異性抗體 n 某些自身抗體與疾病的活動性有相關性，少數自身抗體參與了免疫病病理性損傷 特異性較強的自身抗體特異性較強的自身抗體n抗Sm抗體系統性紅斑狼瘡n抗Scl-70抗體 系統性硬化癥n抗SSA/SSB抗體干燥綜合征n抗CCP抗體類風濕關節炎抗體滴度的高低可判斷疾病的活動性抗體滴度的高低可判斷疾病的活動性n抗雙鏈DNASLEnaCLSLE、磷脂抗體綜合征nRF 類風濕關節炎預測疾病的預后及臨床亞型預測疾病的預后及臨床亞型n抗抗Jo-1皮肌炎合并肺間質病變皮肌炎合并肺間質病變n抗抗Scl-70 彌漫性系統性硬化彌漫性系統性硬化n抗抗rR

7、NP 狼瘡腦病狼瘡腦病自身抗體的意義自身抗體的意義 n 自身免疫性疾病的診斷自身免疫性疾病的診斷n 疾病活動性的判斷疾病活動性的判斷n 療效的觀察及預后療效的觀察及預后n 指導臨床用藥等指導臨床用藥等n 進行不同疾病的鑒別診斷進行不同疾病的鑒別診斷自身抗體常用檢測方法自身抗體常用檢測方法項目項目檢驗方法檢驗方法SLE四項四項ANA間接免疫熒光抗DSDNA抗體間接免疫熒光抗組蛋白抗體ELISA抗核小體抗體ELISAENA系列系列抗RNP免疫印跡、 ELISA抗SM免疫印跡、 ELISA抗SSA免疫印跡、 ELISA抗SSB免疫印跡、 ELISA抗JO-1免疫印跡、 ELISA抗SCL-70免疫印

8、跡、 ELISA抗核糖體P蛋白免疫印跡、 ELISARA三項三項AKA（抗角質蛋白抗體）間接免疫熒光抗RA33ELISA抗CCP（抗環瓜氨酸肽抗體）ELISAANCA四項四項P-ANCA（熒光模型為核周模型）間接免疫熒光C-ANCA（熒光模型為細胞質模型）間接免疫熒光MPO-ANCA（髓過氧化酶抗體）ELISAPR3-ANCA（抗蛋白酶3抗體）ELISA常常見見的的自自身身抗抗體體及及其其檢檢測測方方法法(1)(2)自身免疫肝炎七項自身免疫肝炎七項檢驗方法檢驗方法ANA間接免疫熒光抗LMA抗（肝細胞膜抗體）間接免疫熒光ASMA（抗平滑肌抗體）間接免疫熒光抗LKM（抗肝腎微粒體抗體）間接免疫熒光

9、抗SLA（抗可溶性肝抗原抗體）間接免疫熒光AMA（線粒體抗體）間接免疫熒光抗LSP（抗肝臟特異性蛋白抗體）間接免疫熒光RF三項三項RF-IgGELISARF-IgAELISARF-IgMELISA抗磷脂綜合征三項（抗磷脂綜合征三項（ASP）ELISAPT-IgG（凝血素抗體）ELISAPT-IgMELISA抗2-糖蛋白1抗體ELISA常常見見的的自自身身抗抗體體及及其其檢檢測測方方法法抗核抗體抗核抗體(ANA)均質型均質型與與AHA（抗組蛋白抗體）（抗組蛋白抗體）、抗、抗DNA有關，有關，引起引起LE形成主要見于形成主要見于SLE、藥物性狼瘡、藥物性狼瘡核膜型核膜型 與抗與抗ds-DNA有關，

10、有關， 多見于多見于SLE，特別是有腎炎者，特別是有腎炎者抗核抗體抗核抗體(ANA)斑點型斑點型與抗與抗ENA有關，應進一步查特異性抗有關，應進一步查特異性抗體體核仁型核仁型多見于系統性硬皮病多見于系統性硬皮病類風濕因子（類風濕因子（RF）的檢測及應用）的檢測及應用n RF是一種抗IgG分子Fc片段抗原決定簇的抗體n是以變性IgG為靶抗原的自身抗體n可與人或動物的變性IgG結合，而不與正常IgG發生凝集n最多見于類風濕關節炎患者n有IgM、IgG、IgA和IgE型nIgM型為主要類型類風濕因子（類風濕因子（RF）檢測方法檢測方法：a.膠乳凝集試驗：只能定性或定量，靈敏度及特異性不變，只能檢測I

11、gM型RFb.速率散射比濁法：定量檢測，準確、快速，準確性和敏感性高于膠乳凝集試驗，也只能檢測IgM型RF。c.ELISA法：可檢出不同Ig類型的RF類風濕因子（類風濕因子（RF）臨床應用臨床應用n RF在RA中的陽性率為70左右n 是診斷RA的重要標準之一n RF定量與病情的活動性和嚴重性成正比n 持續高滴度的RF常提示RA病情活動，骨侵蝕發生率高，常可伴有皮下結節或血管炎等關節外表現，提示預后不良類風濕因子（類風濕因子（RF）RF并非RA獨有的特異性抗體，對RA的診斷不具特異性SLE 30% SS 70%90%SSc 20%30% MCTD 50%60%5%以下的正常人RF(+)一定是一定

12、是RA RF(-)一定就不是一定就不是RARA自身抗體譜及臨床意義自身抗體譜及臨床意義nRF 60-70RA中出現，量與中出現，量與RA活動性及嚴重性呈正相關活動性及嚴重性呈正相關。 亦在其它亦在其它CTD出現出現 n 抗抗CCP在在50RA中出現中出現（抗環瓜氨酸肽抗體）抗環瓜氨酸肽抗體） 特異特異性較高性較高nAKA（抗角蛋白抗體）抗角蛋白抗體）在在40RA陽性陽性nAPF（抗核周因子）抗核周因子） 在在52RA陽性陽性n抗抗RA33RA陽性率為陽性率為35n抗抗Sa在部分在部分RA陽性陽性以上抗體陽性有助于早期以上抗體陽性有助于早期RA及不典型及不典型RA的診斷和早期開展治療，改善預后的

13、診斷和早期開展治療，改善預后 是以核內可提取核抗原為靶抗原的自身抗體的總稱 它主要包括抗Sm、抗RNP、抗SSA、抗SSB、抗Jo-1、抗Scl-70、抗組蛋白抗體、抗核小體抗體、抗核糖體P-蛋白抗體、抗著絲點抗體,抗dsDNA。 不同的自身免疫性疾病可以產生不同的抗ENA抗體，ENA抗體的檢測對自身免疫性疾病的診斷和鑒別具有重要意義檢測方法檢測方法 免疫印跡法（IBT）、ELISA法、雙擴散法、對流免疫電流、金標法等。 免疫印跡技術不需要純化抗原，靈敏度高、特異性強、操作簡單，是廣泛采用檢測抗ENA抗體的技術nnRNPnSmnSS-AnSS-BnScl-70nJo-1nCENP BndsDN

14、An核小體核小體n組蛋白組蛋白n核糖體核糖體P蛋白蛋白n高滴度的抗U1-nRNP抗體是混合性結締組織病（MCTD）的標志n陽性率為95-100n滴度與疾病活動性相關n在30-40的系統性紅斑狼瘡患者中也可檢出抗U1-nRNP抗體，但幾乎總伴有抗Sm抗體n抗Sm抗體是系統性紅斑狼瘡的特異性標志，與抗dsDNA抗體一起，是系統性紅斑狼瘡的診斷指標，但陽性率僅為5-10n抗Sm抗體的檢測對早期,不典型的SLE或治療后的回顧性診斷具有很大幫助n抗SS-A抗體與各類自身免疫性疾病相關n最常見于干燥綜合征（40-80）、也見于系統性紅斑狼瘡（30-40）和原發性膽汁性肝硬化（20）中，偶見于慢性活動性肝炎

15、n在100的新生兒紅斑狼瘡中可出現抗SS-A抗體。該抗體可經胎盤傳給胎兒引起炎癥反應和新生兒先天性心臟傳導阻滯n抗SS-B抗體幾乎僅見于干燥綜合征（40-80） 和SLE（10-20）的患者中n男女比例約為29:1n在干燥綜合征中抗SS-A抗體和抗SS-B抗體常同時出現n見于25-75的進行性系統性硬化癥（彌散型）患者n因實驗方法和疾病活動性而異n在局限型硬化癥中不出現n診斷疾病-IFTn判斷疾病活動性-ELISAn對系統性紅斑狼瘡具有很高的特異性n除抗Sm抗體外，抗dsDNA抗體也可作為該病的一個血清學指標n陽性率為40-90%自身抗體檢測結果正確解讀自身抗體檢測結果正確解讀檢測方法局限性：

16、假陽性，假陰性檢測方法局限性：假陽性，假陰性臨床意義局限性：非特異性，生理性，疾病前期臨床意義局限性：非特異性，生理性，疾病前期臨床表現陽性，實驗室檢查陰性臨床表現陽性，實驗室檢查陰性實驗室檢查陽性，臨床表現陰性實驗室檢查陽性，臨床表現陰性自身免疫病自身抗體非常復雜自身免疫病自身抗體非常復雜SLE患者中存在患者中存在100多種自身抗體多種自身抗體Semin Arthritis Rheum. 2004 Oct;34(2):501-37.自身免疫病自身抗體非常復雜自身免疫病自身抗體非常復雜APS患者中存在患者中存在30種自身抗體種自身抗體J Autoimmun, 2008. 30(1-2): p.

17、 74-83.N Engl J Med 2003;349:1526-33.疾病預警疾病預警自身抗體在自身抗體在SLE發病前發病前9.4年出現年出現疾病預警疾病預警AMA在在PBC發病前發病前10年出現年出現臨床復雜性臨床復雜性急性肝衰患者出現急性肝衰患者出現2和和PBC特異性抗體特異性抗體臨床復雜性臨床復雜性抗抗CCP抗體在丙肝中抗體在丙肝中8.5n指標陰性是否意味著疾病的排除？指標陰性是否意味著疾病的排除？n指標陽性意味著什么？指標陽性意味著什么？矛和盾？矛和盾？特異性的局限特異性的局限n各指標與對應疾病之間： 如 SLE 抗Sm抗體特異性99% 敏感性僅為25%nRA RF陽性可出現在SLE, pSS, SSc, 慢性肺結核， 高球蛋白血癥等，5%正常人可出現低滴度的RF “自相矛盾自相矛盾”的結果的結果ANA (間接免疫熒光法)陽性，靶抗原陰性ANA (間接免疫熒光法)陰性，靶抗原陽性（膜條法）， 占10%，為客觀存在ANCA：熒光法陰性，但靶抗原陽性（5%）特異性指標陽性，人無相應癥狀特異性指標陽性，人無相應癥狀n健康人 - 一過性陽性（感染、焦慮、疲勞等），2月后復查