1、淺談瘧原蟲(chóng)鏡檢及鑒定方法韓秀麗(河南省新鄉(xiāng)市傳染病醫(yī)院453000)【摘要】瘧疾是我國(guó)五大寄牛蟲(chóng)病之一，也是世界六大熱帶病之一，主要分 布在熱帶、亞熱帶各國(guó)。我國(guó)經(jīng)過(guò)積極開(kāi)展瘧疾防治工作，現(xiàn)基木己無(wú)當(dāng)?shù)夭±?但近年來(lái)四種瘧疾均有輸入病例。2013年3月、2014年7月在我院發(fā)熱門(mén)診分 別檢出一例輸入性惡性瘧原蟲(chóng)。通過(guò)鏡檢能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)瘧原蟲(chóng)。木文簡(jiǎn)要講述了 薄血膜和厚血膜的制作方法，并陳述了瘧原蟲(chóng)類(lèi)型及瘧原蟲(chóng)臨床分期，最后瘧原 蟲(chóng)鏡檢及鑒定需要注意的事項(xiàng)，旨在提高瘧原蟲(chóng)鏡檢及鑒定水平。【關(guān)鍵詞】瘧原蟲(chóng) 鏡檢 鑒定方法【中圖分類(lèi)號(hào)】r446【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】a【文章編號(hào)】2095-1752 (201

2、4) 21-0258-02我國(guó)積極開(kāi)展瘧疾防治工作，雖然取得了很好的成果，但是由于我國(guó)的流動(dòng) 人口較多，隨著出國(guó)務(wù)工人員的增多，使得許多地方仍存在瘧疾病例。診斷瘧疾 和早期治療瘧疾的意義重大，現(xiàn)結(jié)合工作經(jīng)驗(yàn)簡(jiǎn)述瘧原蟲(chóng)鏡檢檢測(cè)及鑒定的方法。 詳細(xì)內(nèi)容如下：一、血片的制作方法將載玻片從右向左分成6等分，在第1格和第2格貼上編號(hào)和標(biāo)簽，在第3 格的正中央涂圓形厚血膜，第4格前緣至第6格的中部涂舌狀薄血膜。血片如果 作為標(biāo)木，則需要將薄血膜和厚血膜涂在同張玻片上。發(fā)熱病人和門(mén)診的血片每 片一個(gè)人，涂一個(gè)薄血膜和兩個(gè)厚血膜，避免血膜脫落對(duì)檢查結(jié)果造成影響2。1、厚血膜的制作方法用推片的一角刮取約4-5&

3、amp;mu;l的血量，確保載玻片和血滴充分接觸，由里 到外一個(gè)方法旋轉(zhuǎn)多圈，最后回到中心，涂成直徑0.8-lcm的圓形厚血膜。厚血 厚血膜不能出現(xiàn)劃痕，而且薄厚均勻。因?yàn)椋裱ぬ駱O易脫落，厚血膜太薄 則不能達(dá)到檢查要求3。2、薄血膜的制作方法用推片的一端邊緣的中點(diǎn)刮取約1-1.5μl的血量，確保載玻片和血滴充分 接觸，形成25-30°的夾角，待血液向兩側(cè)擴(kuò)展到2厘米左右吋，均勻而迅速 地輕輕向左推出舌狀的薄血膜，需要注意的是，推制的速度不能太快，也不能太 慢，要均勻適中。3、注意的爭(zhēng)項(xiàng)血片制作吋，一定要用清潔的載玻片，手持載玻片的兩側(cè)，避免沾上油污, 否則將

4、會(huì)影響鏡檢的結(jié)果。固定薄血膜時(shí)不要將甲醇觸碰到厚血膜。干燥厚血膜 時(shí)堅(jiān)決不能加熱，否則原蟲(chóng)會(huì)變形，在很大程度上影響鏡檢結(jié)果。沖洗染液時(shí)，用盆接滿水后漂洗，切勿水龍頭下沖洗，以免沖走厚血膜，不要將 染液倒掉后再漂洗，以免染料渣沉著在血膜上。4、制作血片的質(zhì)量要求吉氏染色后，薄血膜要平整，無(wú)皺折和空泡，沒(méi)有劃痕，厚血膜不能有脫落， 呈現(xiàn)的顏色是紫蘭色。二、正確的采血時(shí)間，提高鏡檢鑒定質(zhì)量在人體內(nèi)寄生的瘧原蟲(chóng)總共有四種，惡性瘧和間日瘧可以混合感染，卵形瘧 和三日瘧比較少見(jiàn)。惡性瘧和間日瘧可以分為間歇期、出汗期、發(fā)熱期、發(fā)冷期。 瘧原蟲(chóng)在發(fā)熱期和發(fā)冷期比較容易檢出。發(fā)熱期的瘧原蟲(chóng)主要是小滋養(yǎng)體，這個(gè)

5、時(shí)期的原蟲(chóng)剛剛分裂不久，有很多蟲(chóng)體，引起極易檢出。發(fā)冷期的瘧原蟲(chóng)基本都 是環(huán)狀體，極易檢出。在間歇期進(jìn)行血檢有利于鑒定和分類(lèi)瘧原蟲(chóng)，這個(gè)期間的蟲(chóng)子數(shù)量雖然少, 但是蟲(chóng)子的體積較大，極易識(shí)別，因此有利于蟲(chóng)子種類(lèi)的鑒別。臨床認(rèn)為惡性瘧在間歇期不宜進(jìn)行血檢，主要原因是在這個(gè)時(shí)期，很多原蟲(chóng) 進(jìn)到內(nèi)臟毛細(xì)血管，而外周血蟲(chóng)體比較少，這個(gè)吋候尚未出現(xiàn)配子體，因此血檢 的結(jié)果可能是陰性。三、鏡檢分析瘧原蟲(chóng)鏡檢的順序是先厚血膜后薄血膜厚血膜的紅細(xì)胞重疊，血量較多，而且干燥比較慢，導(dǎo)致瘧原蟲(chóng)皺縮，蟲(chóng)體 變形，相對(duì)薄血膜來(lái)說(shuō)，蟲(chóng)體和蟲(chóng)種的鑒別難度較大，但是由于原蟲(chóng)相對(duì)集中, 因此極易發(fā)現(xiàn)。鑒別薄血膜的要素是瘧色素，

6、瘧色素能夠區(qū)分其他生物和瘧原蟲(chóng) 的不同。薄血膜的原蟲(chóng)形態(tài)較清晰,而口結(jié)構(gòu)完整，能夠辨別原蟲(chóng)的形態(tài)特征和種類(lèi), 但是蟲(chóng)數(shù)較少，極易出現(xiàn)漏檢現(xiàn)象，因此需要注意的問(wèn)題有很多。首先要查看寄 生的紅細(xì)胞的具體變化。惡性瘧在發(fā)育期紅細(xì)胞中寄存，紅細(xì)胞的體積不會(huì)變大, 但是滋養(yǎng)體期開(kāi)始岀現(xiàn)紅色的、粗人的茂氏小點(diǎn)。間日瘧人多在網(wǎng)織紅細(xì)胞中寄 存，導(dǎo)致紅細(xì)胞的體積變大，滋養(yǎng)體期開(kāi)始出現(xiàn)紅色的、細(xì)微的薛氏小點(diǎn)。其次 要查看環(huán)狀體的數(shù)目和大小。惡性瘧環(huán)狀體比較小，有一個(gè)或兩者或兩個(gè)以上的 核，體積大概是紅細(xì)胞直徑的五分之一，蟲(chóng)體一般在紅細(xì)胞的邊緣寄存，呈現(xiàn)一 種鳥(niǎo)飛狀。間日瘧的環(huán)狀體比較大，有一個(gè)或者兩個(gè)核，體積大

7、概是紅細(xì)胞直徑 的三分之一。接著要查看配子體的形態(tài)和瘧色素的著色情況和分布情況。惡性瘧 配子體呈現(xiàn)的是臘腸形，瘧色素在核周?chē)植迹蚴杷苫蛎懿迹尸F(xiàn)棕褐色或者 是黑褐色。間日瘧配子體體積較大，呈現(xiàn)的是圓形，瘧色素的分布較均勻，呈現(xiàn) 的黃綠色或者黃褐色。最后要查看相同血片上各期蟲(chóng)體的具體分布。惡性瘧在的 配子體和環(huán)狀體岀現(xiàn)在外周血片，不容易看到裂殖體和滋養(yǎng)體。間日瘧各期形態(tài) 出現(xiàn)在外周血片。假如看見(jiàn)裂殖體和滋養(yǎng)體出現(xiàn)在外周血片，則可以判定為間日 瘧。四、討論病原學(xué)診斷和傳統(tǒng)的鏡檢都是診斷瘧疾的重要方法，優(yōu)點(diǎn)的價(jià)格低廉，并且 對(duì)設(shè)備沒(méi)有很高的要求，便于在基層展開(kāi)。及吋、準(zhǔn)確的診斷有利于治療和預(yù)防 瘧疾，降低瘧疾的發(fā)病率，提高國(guó)民的身體素質(zhì)。參考文獻(xiàn)1 王偉明，金小林，曹俊，楊國(guó)靜，周華云,李菊林，顧亞萍,梁幼生，高琪江蘇省瘧疾流行地理信息系統(tǒng)數(shù)據(jù)庫(kù)的建立j中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)” 2014,1(30):214-215.2 劉英杰，李瑩，潘艷艷,朱曉彤，劉軍，單風(fēng)平,曹雅明.不同毒力瘧原蟲(chóng)感染早 期根治性治療對(duì)免疫記憶形成影響的研究j 微生物學(xué)雜志,2013,&10):321321.3 張小萍.ict惡性瘧/間日瘧免疫層析分離測(cè)試法對(duì)卵形瘧的檢測(cè)j