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文檔簡介
1、-作者xxxx-日期xxxx觀察DNA和RNA在細胞中分布的實驗原理【精品文檔】觀察DNA和RNA在細胞中分布的實驗原理: 1甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠使DNA呈現綠色,吡羅紅使RNA呈現紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細胞染色,可以顯示DNA和RNA在細胞中的分布。 2鹽酸能夠改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,同時使染色休中的DNA和蛋白質分離,有利于DNA與染色劑結合。;30水浴保溫5min,作用為配合鹽酸水解,鹽酸濃度,水浴溫度和保溫時間都會影響水解效果,如水解度過低會影響后面染色效果,解度過高則會嚴重破壞細胞結構,干擾DNA和RNA觀察;鹽酸
2、水解的作用是"加速"和"有利于",該步驟可以省略,但會增加染色環節時間.水解當中,主要是質量分數為8%的鹽酸起作用。 鹽酸的作用:1.使染色體中的蛋白質和DNA分離,易于染色(主)。 2.使細胞膜的通透性改變,染色劑更易進入細胞,進而加快 染色速度。 烘干的作用:利于細胞貼在載玻片上,而不至于在水解和沖洗裝片的過程 中滑入溶液中(殺死細胞并不是烘干的本質意圖)。一、問題研究 1、原理與解析 (1)真核細胞的DNA主要分布在細胞核內,RNA主要分布在細胞質中。 (2)甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠對DNA親和力強,使DNA顯現
3、出綠色,而吡羅紅對RNA的親和力強,使RNA呈現出紅色。用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細胞染色,可同時顯示DNA和RNA在細胞中的分布。 (3)鹽酸的作用 鹽酸能改變細胞膜的通透性,加速染色劑的跨膜運輸; 鹽酸使染色體中的DNA與蛋白質分離,便于DNA與染色劑的結合。 注意事項 1.材料的選擇 選用的實驗材料既要容易獲得,又要便于觀察; 常用的觀察材料由人的口腔上皮細胞、洋蔥鱗片葉表皮細胞(為避免原有顏色的干擾,不可使用紫色表皮細胞) 2.取材要點 取口腔上皮細胞之前,應先漱口,以避免裝片中出現太多的雜質; 取洋蔥表皮細胞時,盡量避免材料上帶有葉肉組織細胞。 3.沖洗載玻片時水的流速要盡量慢,
4、切忌直接用水龍頭沖洗。 4.安全要點 用酒精燈烘烤載玻片時,不要只集中于材料處,而應將載玻片在火焰上來回移動,使載玻片均勻受熱,以免破裂; 烘烤后的載玻片不要馬上放入盛有稀鹽酸的燒杯中,最好先自然冷卻1分鐘。 5.換用高倍鏡觀察材料時,只能用細準焦螺旋進行調焦,切不可動粗準焦螺旋。 主要步驟(以觀察口腔上皮細胞為例) 1.取材 滴: 在潔凈的載玻片上滴一滴質量分數為0.9%的NaCl溶液; 刮: 用消毒牙簽在口腔內側壁上輕輕地刮幾下; 涂: 將牙簽上的碎屑涂抹在載玻片的生理鹽水中; 烘: 將涂有口腔上皮細胞的載玻片在酒精燈的火焰上烘干。 2.水解 解: 將烘干的載玻片放入裝有30ml質量分數為8%的鹽酸的小燒杯中,進行材料的水解; 保: 將小燒杯放入裝有30溫水的大燒杯中保溫5分鐘。 3.沖洗涂片 沖: 用緩緩的蒸餾水沖洗載玻片10秒鐘; 吸: 用吸水紙吸去載玻片上的水分。 4.染色 染:用2滴吡羅紅甲基綠混合染色劑滴在載玻片上,染色5分鐘; 吸: 吸去多余染色劑; 蓋: 蓋上蓋玻片。 5.觀察 低: 在低倍物鏡
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