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文檔簡介

1、微生物的生長繁殖微生物的生長繁殖與控制與控制2生物個體由小到大的增長,即表現生物個體由小到大的增長,即表現為細胞組分與結構在量方面的增加為細胞組分與結構在量方面的增加 生長生長指生物個體數目的增加指生物個體數目的增加 繁殖繁殖 由于微生物的個體極小,所以常用由于微生物的個體極小,所以常用群體生長群體生長來反映個體生長的狀況來反映個體生長的狀況 個體生長個體生長個體繁殖個體繁殖 群體生長群體生長 群體生長群體生長 = 個體生長個體生長 + 個體繁殖個體繁殖個體生長個體生長微生物細胞個體吸收營養物質,進行微生物細胞個體吸收營養物質,進行新陳代謝,原生質與細胞組分的增加為個體生長。新陳代謝,原生質與

2、細胞組分的增加為個體生長。群體生長群體生長群體中個體數目的增加。可以用重量、群體中個體數目的增加。可以用重量、體積、密度或濃度來衡量。體積、密度或濃度來衡量。3第一節第一節 微生物分離和純培養微生物分離和純培養平板劃線分離法平板劃線分離法 稀釋倒平板法稀釋倒平板法 單孢子或單細胞分離法單孢子或單細胞分離法 利用選擇性培養基分離法利用選擇性培養基分離法 純培養純培養(pure culture):微生物學中把從一個細胞或微生物學中把從一個細胞或一群相同的細胞經過培養繁殖而得到的后代,稱純一群相同的細胞經過培養繁殖而得到的后代,稱純培養。培養。41.平板劃線分離法平板劃線分離法 用接種環以無菌操作沾

3、取少許待分離的材料,在無菌用接種環以無菌操作沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線 ,如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經培養后,可在如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經培養后,可在平板表面得到單菌落。平板表面得到單菌落。 52.稀釋倒平板法稀釋倒平板法 673. 單孢子或單細胞分離法單孢子或單細胞分離法 采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個細胞采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個細胞或單個個體進行培養以獲得純培養或單個個體進行培養以獲得純培養 。 在顯微鏡下使用單孢子分離器進行機械操作,挑在顯微

4、鏡下使用單孢子分離器進行機械操作,挑取單孢子或單細胞進行培養。也可以采用特制的毛細取單孢子或單細胞進行培養。也可以采用特制的毛細管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來,然管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來,然后移到合適的培養基進行培養。后移到合適的培養基進行培養。 84. 選擇性培養基分離法選擇性培養基分離法 各種微生物對不同的化學試劑、染料、抗生素等具有不同各種微生物對不同的化學試劑、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力,利用這些特性可配制合適某種微生物而限制其它的抵抗能力,利用這些特性可配制合適某種微生物而限制其它微生物生長的選擇培養基,用它來培養微生物以獲得純培養。微生物生長的選

5、擇培養基,用它來培養微生物以獲得純培養。 微生物純培養分離方法的比較微生物純培養分離方法的比較分離方法分離方法應用范圍應用范圍平皿劃線法平皿劃線法方法簡便,多用于分離細菌方法簡便,多用于分離細菌稀釋倒平皿法稀釋倒平皿法即可定性,又可定量,用途廣泛即可定性,又可定量,用途廣泛單細胞挑取法單細胞挑取法局限于高度專業化的科學研究局限于高度專業化的科學研究利用選擇培養基法利用選擇培養基法適用于分離某些生理類型較特殊適用于分離某些生理類型較特殊的微生物的微生物9第二節第二節 微生物的生長規律微生物的生長規律 一、細菌群體生長規律一、細菌群體生長規律 在不補充營養物質或移去培養物,保在不補充營養物質或移去

6、培養物,保持整個培養液體積不變條件下,以時持整個培養液體積不變條件下,以時間為橫坐標,以菌數為縱坐標,根據間為橫坐標,以菌數為縱坐標,根據不同培養時間時細菌數量的變化,可不同培養時間時細菌數量的變化,可以作出一條反映細菌在整個培養期間以作出一條反映細菌在整個培養期間菌數變化規律的曲線。菌數變化規律的曲線。生長曲線生長曲線10生長曲線可分:生長曲線可分:延滯期延滯期對數期對數期 衰亡期衰亡期 穩定期穩定期 111. 延滯期延滯期 將少量菌種接入新鮮培養基后,在開始一段時將少量菌種接入新鮮培養基后,在開始一段時間內菌數不立即增加,或增加很少,生長速度接近間內菌數不立即增加,或增加很少,生長速度接近

7、于零,也稱于零,也稱延遲期、適應期延遲期、適應期。特點特點:分裂遲緩、代謝活躍分裂遲緩、代謝活躍通過遺傳學方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短;通過遺傳學方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短;利用對數生長期的細胞作為利用對數生長期的細胞作為“種子種子”;盡量使接種前后所使用的培養基組成不要相差太大;盡量使接種前后所使用的培養基組成不要相差太大;適當擴大接種量等方式縮短遲緩期,克服不良的影響。適當擴大接種量等方式縮短遲緩期,克服不良的影響。122. 對數期對數期 對數生長期的細菌個體形態、化學組成和生理對數生長期的細菌個體形態、化學組成和生理特性等均較一致,代謝旺盛、生長迅速、代時穩定,特性等均較一致,

8、代謝旺盛、生長迅速、代時穩定,所以是研究微生物基本代謝的良好材料。它也常在所以是研究微生物基本代謝的良好材料。它也常在生產上用作種子,使微生物發酵的遲緩期縮短,提生產上用作種子,使微生物發酵的遲緩期縮短,提高經濟效益。高經濟效益。 以最大的速率生長和分裂,細菌數量呈對數增以最大的速率生長和分裂,細菌數量呈對數增加。細菌內各成分按比例有規律地增加,表現為平加。細菌內各成分按比例有規律地增加,表現為平衡生長。衡生長。133. 穩定期穩定期 由于營養物質消耗,代謝產物積累和由于營養物質消耗,代謝產物積累和pH等環等環境變化,逐步不適宜于細菌生長,導致生長速率境變化,逐步不適宜于細菌生長,導致生長速率

9、降低直至零降低直至零(即細菌分裂增加的數量等于細菌死亡即細菌分裂增加的數量等于細菌死亡數量數量),結束對數生長期,進入穩定生長期。,結束對數生長期,進入穩定生長期。 原因:原因:獲得更多的菌體物質或代謝產物采取措施:獲得更多的菌體物質或代謝產物采取措施: 補充營養物質或取走代謝產物或改善培養條補充營養物質或取走代謝產物或改善培養條件,如對好氧菌進行通氣、攪拌或振蕩等件,如對好氧菌進行通氣、攪拌或振蕩等 144. 衰亡期衰亡期 細菌代謝活性降低,細菌衰老并出現自溶,產生或釋細菌代謝活性降低,細菌衰老并出現自溶,產生或釋放出一些產物,如氨基酸、轉化酶、外肽酶或抗生素等。放出一些產物,如氨基酸、轉化

10、酶、外肽酶或抗生素等。細胞呈現多種形態,有時產生畸形,細胞大小懸殊,有些細胞呈現多種形態,有時產生畸形,細胞大小懸殊,有些革蘭氏染色反應陽性菌變成陰性反應等。革蘭氏染色反應陽性菌變成陰性反應等。 該時期死亡的細菌以對數方式增加,但在衰亡期的后該時期死亡的細菌以對數方式增加,但在衰亡期的后期,由于部分細菌產生抗性也會使細菌死亡的速率降低。期,由于部分細菌產生抗性也會使細菌死亡的速率降低。 現象:現象:特點:特點:15二、生長的數學模型二、生長的數學模型 由一個細胞分裂成為兩個細胞的時間間隔稱為由一個細胞分裂成為兩個細胞的時間間隔稱為世代世代,一個,一個世代所需的時間就是世代所需的時間就是代時代時

11、(eneration time, G ),代時也就),代時也就是群體細胞數目擴大一倍所需是群體細胞數目擴大一倍所需 時間,有時也稱為時間,有時也稱為倍增時間倍增時間。指數生長可以用下式表示:指數生長可以用下式表示: b = B2nB, b 和和 t 可由試驗獲得,可由試驗獲得, n 可通過上式計算得出,可通過上式計算得出,將等式兩側取對數重排后得:將等式兩側取對數重排后得: lgb = lgB + nlg2 lgb - lgB lgb - lgB lg2 0.301 n=16例如:一培養液中微生物數目由開始的例如:一培養液中微生物數目由開始的12,000( B ),),經經4h ( t )后增

12、加到后增加到49,000,000( b ),),這樣,這樣, n (lg4.9107lg1.2104)0.30112借助于借助于 n 和和 t ,還可以計算出不同培養條件下的,還可以計算出不同培養條件下的代時代時G, G t / n在本例中,在本例中, G 460 / 12 20min該種微生物的代時為該種微生物的代時為20分鐘分鐘。在。在4小時內共繁殖了小時內共繁殖了12代代。17一些細菌的代時一些細菌的代時菌名菌名培養基培養基培養溫度培養溫度 代時代時E. coli(大腸桿菌)大腸桿菌) 肉湯肉湯 3717minE. coli 牛奶牛奶 3712.5Enterobacter aerogen

13、es(產氣腸細菌)產氣腸細菌)肉湯或牛奶肉湯或牛奶 371618E. aerogenes 組合組合 372944B. Cereus(蠟狀芽孢桿菌)蠟狀芽孢桿菌)肉湯肉湯3018B. thermophilus(嗜熱芽孢桿菌)嗜熱芽孢桿菌)肉湯肉湯5518.3Lactobacillus acidophilus(嗜酸乳桿菌)嗜酸乳桿菌)牛奶牛奶376687Streptococcus lactis(乳酸鏈球菌)乳酸鏈球菌)牛奶牛奶3726S. lactis乳糖肉湯乳糖肉湯3748Salmonella typhi(傷寒沙門氏菌)傷寒沙門氏菌)肉湯肉湯3723.5Azotobacter chroococc

14、um(褐球固氮菌)褐球固氮菌)葡萄糖葡萄糖2534446Mycobacterium tuberculosis(結核分枝桿菌)組合結核分枝桿菌)組合3779293Nitrobacter agilis(活躍硝化桿菌)活躍硝化桿菌)組合組合27120018三、同步培養三、同步培養 1. 概念概念 是一種培養方法,它能使群體中不同步的細胞是一種培養方法,它能使群體中不同步的細胞轉變成能同時進行生長或分裂的群體細胞。轉變成能同時進行生長或分裂的群體細胞。 同步生長:以同步培養方法使群體細胞能處于同一同步生長:以同步培養方法使群體細胞能處于同一生長階段,并同時進行分裂的生長方式生長階段,并同時進行分裂的生

15、長方式同步培養物常被用來研究在單個細胞上難以研究的同步培養物常被用來研究在單個細胞上難以研究的生理與遺傳特性和作為工業發酵的種子,它是一種生理與遺傳特性和作為工業發酵的種子,它是一種理想的材料。理想的材料。192. 同步培同步培養方法養方法 機械方法機械方法環境條件控制技術環境條件控制技術離心方法離心方法過濾分離法過濾分離法硝酸纖維素濾膜法硝酸纖維素濾膜法溫度溫度培養基成份控制培養基成份控制光照和黑暗交替培養光照和黑暗交替培養20硝硝酸酸纖纖維維素素濾濾膜膜法法離離心心法法21四、連續培養四、連續培養 連續培養連續培養(continous culture of microorganisms)是

16、在微是在微生物的整個培養期間,通過一定的方式使微生物能以恒定生物的整個培養期間,通過一定的方式使微生物能以恒定的比生長速率生長并能持續生長下去的一種培養方法。的比生長速率生長并能持續生長下去的一種培養方法。 連續培養的基本原則:微生物培養過程中不斷的補充營養連續培養的基本原則:微生物培養過程中不斷的補充營養物質和以同樣的速率移出培養物物質和以同樣的速率移出培養物連續培養類型連續培養類型恒濁連續培養恒濁連續培養恒化連續培養恒化連續培養221. 恒化連續培養恒化連續培養 在整個培養過程中通過控制培養基中某種營養物質的在整個培養過程中通過控制培養基中某種營養物質的濃度基本恒定的方式,保持細菌的比生長

17、速率恒定,使生濃度基本恒定的方式,保持細菌的比生長速率恒定,使生長長“不斷不斷”進行。進行。 生長速率的控制因子:一般是氨基酸、氨和銨鹽等氮源,或生長速率的控制因子:一般是氨基酸、氨和銨鹽等氮源,或是葡萄糖、麥芽糖等碳源或者是無機鹽,生長因子等物質是葡萄糖、麥芽糖等碳源或者是無機鹽,生長因子等物質 。恒化器連續培養通常用于微生物學的研恒化器連續培養通常用于微生物學的研究,篩選不同的變種。究,篩選不同的變種。23242. 恒濁連續培養恒濁連續培養 通過連續培養裝置中的光電系統控制培養液中菌通過連續培養裝置中的光電系統控制培養液中菌體濃度恒定、使細菌生長連續進行的一種培養方式。體濃度恒定、使細菌生

18、長連續進行的一種培養方式。 用于菌體以及與菌體用于菌體以及與菌體生長平行的代謝產物生長平行的代謝產物生產的發酵工業生產的發酵工業25263. 連續發酵與單批發酵相比連續發酵與單批發酵相比優點:優點:縮短發酵周期,提高設備利用率;縮短發酵周期,提高設備利用率; 便于自動控制;便于自動控制; 降低動力消耗及體力勞動強度;降低動力消耗及體力勞動強度; 產品質量較穩定;產品質量較穩定;缺點:缺點:雜菌污染和菌種退化雜菌污染和菌種退化27第三節第三節 環境因素對微生物的影響環境因素對微生物的影響 一、一、 環境對微生物生長的影響環境對微生物生長的影響影響因素:影響因素:氧氧 溫溫 度度 pH 值值28(

19、一一) 溫溫 度度 根據微生物生長的最適溫度不同,可以將微生物分為嗜根據微生物生長的最適溫度不同,可以將微生物分為嗜冷、兼性嗜冷、嗜溫、嗜熱和超嗜熱等五種不同的類型。它冷、兼性嗜冷、嗜溫、嗜熱和超嗜熱等五種不同的類型。它們都有各自的最低、最適和最高生長溫度范圍。們都有各自的最低、最適和最高生長溫度范圍。 微生物類型微生物類型 生長溫度生長溫度 最低最低 最適最適 最高最高 嗜冷微生物嗜冷微生物 0以下以下 15 20 兼性嗜冷微生物兼性嗜冷微生物 0 20-30 35; 嗜溫微生物嗜溫微生物 15-20 20-45 45以上以上 嗜熱微生物嗜熱微生物 45 55-65 80 超嗜熱或嗜高溫微生

20、物超嗜熱或嗜高溫微生物 65 80-90 100以上以上最適生長溫度:最適生長溫度:某菌分裂代時最短或生長速率最高時的培養溫度某菌分裂代時最短或生長速率最高時的培養溫度29(二二) pH微生物微生物最低最低pH最適最適pH最高最高pH細菌細菌3-56.5-7.58-10酵母菌酵母菌2-34.5-5.57-8霉菌霉菌1-34.5-5.57-8 微生物生長過程中機體內發生的絕大多數的反應是酶促微生物生長過程中機體內發生的絕大多數的反應是酶促反應,而酶促反應都有一個最適反應,而酶促反應都有一個最適pH范圍,在此范圍內只要條范圍,在此范圍內只要條件適合,酶促反應速率最高,微生物生長速率最大,因此微件適

21、合,酶促反應速率最高,微生物生長速率最大,因此微生物生長也有一個最適生長的生物生長也有一個最適生長的pH范圍。范圍。 30(三三) 氧氧根據氧與微生物生長的關系可將微生物分為:根據氧與微生物生長的關系可將微生物分為:好氧好氧微好氧微好氧耐氧型耐氧型兼性厭氧兼性厭氧專性厭氧專性厭氧微生物類型微生物類型最適生長的最適生長的O2體積分數體積分數好氧好氧微好氧微好氧氧的忍耐型氧的忍耐型兼性厭氧兼性厭氧專性厭氧專性厭氧等于或大于等于或大于202-l02以下以下有氧或無氧有氧或無氧不需要氧、有氧時死亡不需要氧、有氧時死亡3132自由基是一種強氧化劑,它與生物大分子互相作自由基是一種強氧化劑,它與生物大分子

22、互相作用,可導致產生生物分子自由基,從而對機體產用,可導致產生生物分子自由基,從而對機體產生損傷或突變作用,直至死亡。氧之所以對專性生損傷或突變作用,直至死亡。氧之所以對專性厭氧微生物以外的其他四種類型微生物不產生致厭氧微生物以外的其他四種類型微生物不產生致死作用,是因為它們具有死作用,是因為它們具有超氧物歧化酶超氧物歧化酶,可催化,可催化起氧化基化合物分解,最終分解成水。起氧化基化合物分解,最終分解成水。 氧對于好氧微生物生長雖然可以通過好氧呼吸產氧對于好氧微生物生長雖然可以通過好氧呼吸產生更多的能量,滿足機體的生長需要,但另一方生更多的能量,滿足機體的生長需要,但另一方面,氧對一切生物都會

23、使其產生有毒害作用的代面,氧對一切生物都會使其產生有毒害作用的代謝產物,如超氧基化合物與謝產物,如超氧基化合物與H2O2,這兩種代謝產這兩種代謝產物互相作用還會產生毒性很強的自由基物互相作用還會產生毒性很強的自由基OH.。 33生物體中超氧陰離子的形成與去除生物體中超氧陰離子的形成與去除O2 + eO2 ( O2 )超氧陰離子超氧陰離子在細胞內可由酶促或非酶促形成。在細胞內可由酶促或非酶促形成。超超氧物陰離子氧物陰離子歧化酶是在生物進化中發展出來的一種自我歧化酶是在生物進化中發展出來的一種自我保護方式。保護方式。H2O + O22 O2 + 2H+O2 + H2O22H2O12SOD好氧生物好

24、氧生物和耐氧細菌和耐氧細菌過氧化氫酶過氧化氫酶 好氧生物好氧生物過氧化物酶過氧化物酶 NADH2NAD耐氧菌耐氧菌34二、微生物生長的測定二、微生物生長的測定 評價不同的抗菌物質對微生物產生抑制評價不同的抗菌物質對微生物產生抑制(或殺死或殺死)作用的效果;作用的效果;客觀地反映微生物生長的規律;客觀地反映微生物生長的規律;評價培養條件、營養物質等對微生物生評價培養條件、營養物質等對微生物生長的影響;長的影響;微微生生物物生生長長35微微生生物物生生長長測測量量方方法法個體計數法個體計數法重重 量量 法法生理指標法生理指標法361.計數法計數法a. 直接計數直接計數利用血球計數板,在顯微鏡下計算

25、一定容積里樣利用血球計數板,在顯微鏡下計算一定容積里樣品中微生物的數量。品中微生物的數量。 缺點:缺點:不能區分死菌與活菌;不能區分死菌與活菌;不適于對運動細菌的計數;不適于對運動細菌的計數;需要相對高的細菌濃度;需要相對高的細菌濃度;個體小的細菌在顯微鏡下難以個體小的細菌在顯微鏡下難以觀察;觀察;37該方法是教學、科研、生產常用的一種測量細菌數的有效該方法是教學、科研、生產常用的一種測量細菌數的有效方法。土壤、水、牛奶、食品及其他材料中所含細菌、酵方法。土壤、水、牛奶、食品及其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等均可用此法測量。母、芽孢與孢子等均可用此法測量。每毫升原菌液活菌數每毫升原菌液活

26、菌數=培養皿菌落平均數培養皿菌落平均數稀釋倍數稀釋倍數5菌落形成單位:菌落形成單位:CFU/ml(/g)b.間接法(活菌計數法)間接法(活菌計數法)原理是每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可原理是每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落。以通過生長形成菌落。 382. 重量法重量法 通過樣品中蛋白質、核酸含量的測定間接推算通過樣品中蛋白質、核酸含量的測定間接推算微生物群體的生物量;微生物群體的生物量;蛋白質總量蛋白質總量=含氮量含氮量6.25細胞總量細胞總量=蛋白質總量蛋白質總量65%蛋白質總量蛋白質總量1.54每個細菌每個細菌DNA含量相當恒定含量相當恒定, 平

27、均為平均為8.410-5ng。以干重、濕重直接衡量微生物群體的生物量;以干重、濕重直接衡量微生物群體的生物量; 1mg 干菌體干菌體 = 4-5mg 濕菌體濕菌體 = 4-5 109個菌體個菌體測定多細胞及絲狀真菌生長情況的有效方法。測定多細胞及絲狀真菌生長情況的有效方法。393.生理指標測定法生理指標測定法樣品中微生物數量多或生長旺盛,這些指標愈明顯,樣品中微生物數量多或生長旺盛,這些指標愈明顯,因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量熱計等設備來測定相應的指標。熱計等設備來測定相應的指標。常用于對微生物的快速鑒定與檢測。常用于對微生物的快速鑒

28、定與檢測。微生物的生理指標,如呼吸強度、耗氧量、酶活性、微生物的生理指標,如呼吸強度、耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體生長的規模成正相關。生物熱等與其群體生長的規模成正相關。40第四節第四節 微生物生長繁殖的控制微生物生長繁殖的控制 一、基本概念一、基本概念防腐防腐(antisepsis):在某些化學物質或物理因子作用下,能防止在某些化學物質或物理因子作用下,能防止或抑制微生物生長的一種措施或抑制微生物生長的一種措施 消毒消毒(disinfection):利用某種方法殺死或滅活物質或物體中所利用某種方法殺死或滅活物質或物體中所有病原微生物的一種措施有病原微生物的一種措施滅菌滅菌(sterili

29、zation):指利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內指利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內的所有微生物的一種措施的所有微生物的一種措施化療化療(chemotherapy):利用具有選擇毒性的化學物質如磺胺、利用具有選擇毒性的化學物質如磺胺、抗生素等對生物體內部被微生物感染的組織或病變細胞進行治抗生素等對生物體內部被微生物感染的組織或病變細胞進行治療,以殺死組織內的病原微生物或病變細胞,但對機體本身無療,以殺死組織內的病原微生物或病變細胞,但對機體本身無毒害作用的治療措施。毒害作用的治療措施。 41二、控制微生物的化學物質二、控制微生物的化學物質 1. 抗微生物劑抗微生物劑 是一類能夠殺死微生物或

30、抑制微生物生長的化學物質。是一類能夠殺死微生物或抑制微生物生長的化學物質。抑菌劑抑菌劑 殺菌劑殺菌劑 溶菌劑溶菌劑 結合到核糖體上抑制蛋白質合成,導致生長停止,結合到核糖體上抑制蛋白質合成,導致生長停止,由于它們同核糖體結合不緊,它們在濃度降低時由于它們同核糖體結合不緊,它們在濃度降低時又會游離出來,核糖體合成蛋白質的能力恢復,又會游離出來,核糖體合成蛋白質的能力恢復,使生長恢復使生長恢復 緊緊地結合到細胞的作用靶上,即使在濃度降低緊緊地結合到細胞的作用靶上,即使在濃度降低時也不能游離出來,因此生長不能恢復時也不能游離出來,因此生長不能恢復 能抑制細胞壁合成或損傷細胞質膜能抑制細胞壁合成或損傷

31、細胞質膜 42抗微生物劑通常又將它們分為:抗微生物劑通常又將它們分為:消毒劑:消毒劑:可殺死微生物,通常用于非生物材料的滅菌或消毒。可殺死微生物,通常用于非生物材料的滅菌或消毒。防腐劑:能殺死微生物或抑制其生長,但對人及動物的體表組防腐劑:能殺死微生物或抑制其生長,但對人及動物的體表組 織無毒性或毒性低,可作為外用抗微生物藥物。織無毒性或毒性低,可作為外用抗微生物藥物。HgCl2、CuSO4、碘液、氯氣、乙烯氧化物、甲醛劑、臭氧碘液、氯氣、乙烯氧化物、甲醛劑、臭氧 有機汞、有機汞、0.1%-1硝酸銀、碘液、硝酸銀、碘液、70%乙醇、乙醇、3過氧化氫過氧化氫43各種抗微生物化學制劑殺菌能力的比較

32、標準:各種抗微生物化學制劑殺菌能力的比較標準:石炭酸系數:石炭酸系數: 指在一定時間內被試藥劑能殺死全部供試菌的指在一定時間內被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度和達到同效的石炭酸的最高稀釋度的比最高稀釋度和達到同效的石炭酸的最高稀釋度的比率。一般規定處理時間為率。一般規定處理時間為10分鐘,而供試菌定為分鐘,而供試菌定為Salmonella typhi(傷寒沙門氏菌)。傷寒沙門氏菌)。 在臨床上最早使用的消毒劑在臨床上最早使用的消毒劑-石炭酸石炭酸442. 抗代謝物抗代謝物 (Antimetabolite) 有些化合物在結構上與生物體所必需的代謝物很相似,有些化合物在結構上與生物體所必需的代

33、謝物很相似,以至可以和特定的酶結合,從而阻礙了酶的功能,干擾了代以至可以和特定的酶結合,從而阻礙了酶的功能,干擾了代謝的正常進行,這些物質稱為抗代謝物謝的正常進行,這些物質稱為抗代謝物。葉酸對抗物(葉酸對抗物(磺胺磺胺)、)、 嘌呤對抗物(嘌呤對抗物(6-巰基嘌呤巰基嘌呤)、)、 苯丙氨酸對抗物(苯丙氨酸對抗物(對氟苯丙氨酸對氟苯丙氨酸)、)、 尿嘧啶對抗物(尿嘧啶對抗物(5-氟尿嘧啶氟尿嘧啶) 胸腺嘧啶對抗物(胸腺嘧啶對抗物(5-溴胸腺嘧啶溴胸腺嘧啶)45磺胺藥物磺胺藥物對大多數革蘭氏陽性細菌(如肺炎球菌、溶血性鏈球菌對大多數革蘭氏陽性細菌(如肺炎球菌、溶血性鏈球菌等)、某些革蘭氏陰性細菌(

34、如痢疾桿菌、腦膜炎球菌、等)、某些革蘭氏陰性細菌(如痢疾桿菌、腦膜炎球菌、流感桿菌等)、對放線菌也有一定的作用。流感桿菌等)、對放線菌也有一定的作用。作用機理:磺胺是葉酸組成部分對氨基苯甲酸的結構類似作用機理:磺胺是葉酸組成部分對氨基苯甲酸的結構類似物。物。磺胺對人體細胞無毒性,因為人缺乏從對氨基苯甲酸合成磺胺對人體細胞無毒性,因為人缺乏從對氨基苯甲酸合成葉酸的相關酶葉酸的相關酶-二氫葉酸合成酶,不能用外界提供的對二氫葉酸合成酶,不能用外界提供的對氨基苯甲酸自行合成葉酸,而必須直接利用葉酸為生長因氨基苯甲酸自行合成葉酸,而必須直接利用葉酸為生長因子進行生長。子進行生長。463. 抗生素抗生素

35、抗生素抗生素(Antibiotic) 是由某些生物合成或半合成的一類次是由某些生物合成或半合成的一類次級代謝產物或衍生物,它們在很低濃度時就能抑制或影響它級代謝產物或衍生物,它們在很低濃度時就能抑制或影響它種生物的生命活動,如殺死微生物或抑制其生長。種生物的生命活動,如殺死微生物或抑制其生長。(1) 概念概念 自本世紀自本世紀40年代以來,已找到上萬種新抗生素,合成了年代以來,已找到上萬種新抗生素,合成了近近10萬種半合成抗生素,但其中在臨床上常用的僅幾十種。萬種半合成抗生素,但其中在臨床上常用的僅幾十種。47(2) 作用機制作用機制抑制細菌細胞壁合成抑制細菌細胞壁合成破壞細胞質膜破壞細胞質膜

36、作用于呼吸鏈以干擾氧化磷酸化作用于呼吸鏈以干擾氧化磷酸化抑制蛋白質和核酸合成抑制蛋白質和核酸合成4849(3) 細菌抗藥性的產生細菌抗藥性的產生抗性菌株特點:抗性菌株特點:細胞質膜透性改變,使抗生素不進入細胞或進入細胞后被細胞質膜透性改變,使抗生素不進入細胞或進入細胞后被細胞主動排出;細胞主動排出;藥物作用靶改變;藥物作用靶改變;合成了修飾抗生素的酶;合成了修飾抗生素的酶;抗性菌株發生遺傳變異,導致合成新的多聚體,以取代或抗性菌株發生遺傳變異,導致合成新的多聚體,以取代或部分取原來的多聚體;部分取原來的多聚體;50(4) 應用抗生素注意應用抗生素注意(1) 第一次使用的藥物劑量要足;第一次使用

37、的藥物劑量要足;(2) 避免在一個時期或長期多次使用同種抗生素;避免在一個時期或長期多次使用同種抗生素;(3) 不同的抗生素不同的抗生素(或與其他藥物或與其他藥物)混合使用;混合使用;(4) 對現有抗生素進行改造;對現有抗生素進行改造;(5) 篩選新的更有效的抗生素;篩選新的更有效的抗生素;51三、控制微生物的物理因素三、控制微生物的物理因素 溫度溫度輻射作用輻射作用過濾過濾滲透壓滲透壓干燥干燥超聲波超聲波521. 高溫滅菌高溫滅菌 高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌法 高壓蒸汽滅菌的溫度越高,微生物死亡越快。通常情況高壓蒸汽滅菌的溫度越高,微生物死亡越快。通常情況下溫度為下溫度為121.3。 衡量滅菌效果的指標衡量滅菌效果的指標 十倍致死時間十倍致死時間 (decimal reduction time):即在一定的溫度條即在一定的溫度條件下,微生物數量十倍減少所需要的時間。件下,微生物數量十倍減少所需要的時間。 熱致死時間熱致死時間(thennaldeathtime):即在一定溫度下殺死所有某即在一定溫度下殺死所有某一濃度微生物所需要的時間一濃度微生物所需要的時間 53 干熱滅菌干熱滅菌烘箱內熱空氣滅菌烘箱內熱空氣滅菌火

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