1、植物組織培養教學實習項目總結 植物組織培養教學實習項目總結 植物組織培養教學實習項目總結 作物生產技術101班姓名：馬一良 一：目的意義 植物的組織培養是依據植物細胞具有全能性這個理論，近幾十年來發展起來的一項無性繁殖的新技術。植物的組織培養廣義又叫離體培養，指從植物體分開出符合需要的組織.器官或細胞，原生質體等，通過無菌操作，在人工控制條件下進行培養以獲得再生的完整植株或生產具有經濟價值的其他產品的技術。狹義是指組培指用植物各部分組織，如形成層.薄壁組織.葉肉組織.胚乳等進行培養獲得再生植株，也指在培養過程中從各器官上產生愈傷組織的培養，愈傷組織再經過再分化形成再生植物。 運用植物組織培養技

2、術的意義：1、快速繁殖合格種苗。2、無病毒苗的培養。3、在育種上的應用4、工廠化育苗。5：保存種質資源。6：基因工程的運用二：工作內容 1：學習組培相關知識2：了解相關的實驗室及其設備3：試管苗快速繁衍技術4：植物脫毒技術 5：植物組織培養技術的一般培養方法6：種質立體培養7：ms培養基的制備8：滅菌技術9：無菌操作技術10：試管苗的煉苗與移栽培養步驟 第一步，將采來的植物材料除去不用的部分，將需要的部分仔細洗干凈，如用適當的刷子等刷洗。把材料切割成適當大小，即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數小時，沖洗時間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細小的材料，可裝入紗布袋內沖洗。流水沖洗

3、在污染嚴重時特別有用。洗時可加入洗衣粉清洗，然后再用自來水沖凈洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附著在植物表面的污物，除去脂質性的物質，便于滅菌液的直接接觸。當然，最理想的清洗物質是表面活性物質吐溫。第二步是對材料的表面浸潤滅菌。要在超凈臺或接種箱內完成，準備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手表等。用70%酒精浸1030秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用，加之70%酒精穿透力強，也很易殺傷植物細胞，所以浸潤時間不能過長。有一些特別的材料，如果實、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗，多層鱗片的休眠芽等等，以及主要取用內部的材料，則可只用70%酒精處理稍長的時間。處理完的材料在無菌條件

4、下，待酒精蒸發后再剝除外層，取用內部材料。 第三步是用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多，可依據狀況選取12種使用見表。第四步是用無菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，視采納的消毒液種類，涮洗3-l0次左右。無菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細胞的副作用注意：酒精滲透性強，幼嫩材料易在酒精中失綠，所以浸泡時間要短，防止酒精殺死植物細胞。老熟材料，特別是種子等可以在酒精中浸泡時間長一些，如種子可以浸泡5分鐘。升汞的滲透力弱，一般浸泡10分鐘左右，對植物材料的殺傷力不大。漂白粉容易導致植物材料失綠，所以關于幼嫩材料要慎用。在消毒液中加入濃度為0.080.12%的吐溫20或80一種濕潤劑，可以降低植物材

5、料表面張力，達到更好的消毒效 配制培養基 1愈傷組織誘導培養基：ms培養基蔗糖含量為10g/l，2,4d含量為2mg/l，瓊脂10g/l。 2試驗培養基：在ms培養基中加入iaa和6ba。 吲哚乙酸iaa)先用少量0.1mol/lnaoh溶解，6-芐基氨基腺嘌呤先用少量0.1mol/lhcl溶解，然后用蒸餾水稀釋，再加入培養基中。儀器設備 培養室，高壓滅菌鍋，水浴鍋，解剖刀，三角燒瓶100ml，燒杯，量筒，組培瓶，組培蓋或封口膜，棉線，接種箱或超凈工作臺，分析天平，長鑷子，剪刀，容量瓶，移液管，牛皮紙培養基滅菌 將配好的培養基加入瓊脂加熱溶解，調至ph5.8，趁熱分裝于100ml組培瓶中，每瓶

6、約20ml。待培養基冷卻凝固后，蓋上組培蓋，或蓋上封口膜并用棉線扎牢，然后在高壓滅菌鍋中1211kg/cm2下滅菌20min。取出組培瓶放在臺子上，冷卻后備用。接種操作所需的一切用具如長鑷子、解剖刀、剪刀等及滅菌水，需同時滅菌。三：體會 植物組織培養的特點：1、占用空間小，不受地區、季節限制。2、培養脫毒作物。3、培養周期短。4、可用組培中的愈傷組織制取特別的生化制品。5、可短時間大量繁殖，用于拯救瀕危植物。6、可誘導之分化成需要的器官，如根和芽。7、解決有些植物產種子少或無的難題。8、不存在變異，可堅持原母本的一切遺傳特征。9、投資少，經濟效益高。10、繁殖方式多，試用品種多11、培養條件可

7、以人為控制。 植物組織培養技術的前景與發展：世界上一些先進國家園藝植物組織培養技術的迅速發展從60年代就巳經開始，并隨著生長、分化規律性探究逐步深入，到了70年代僅花卉業就已在蘭花、百合、矮牽牛等二十幾種花卉幼苗生產上建立起大規模試管苗商品化生產，到1984年世界花卉幼苗產業的生產總值已達二十億美元，其中美國花卉幼苗市場總值為六億多美元。由于組織培養技術的應用，加快了花卉新品種的推廣。以前靠常規方法推廣一個新品種要幾年甚至十多年，而現在快的只要l2年就可在世界范圍內達到普及和應用。 我國采納快速繁殖技術，也使合格品種達到迅速的推廣和應用。如廣東切花菊“黃秀風的應用，使菊花變大，長勢強化，花色鮮艷，抗病力加強，打開了進入香港市場的渠道，使三十多種觀葉植物的推廣很快遍及全國，豐富了人們的生活；并將自然界的幾百個野生金錢蓮品種繁種馴化，培養了一批園林垂直綠化的材料，促進了園林業的發展。 植物組織培養也存有一定的困難，首先是繁殖效率與商品需要量的矛盾，有些作物由于繁殖方法尚未解決，因而無法滿足生產的需要，其次是在培養過程中如何減少變異株的發生。更重要的是應降低組培苗工廠化生產的成本，只有降低成本，才干更好的投產應用。總之，隨著組織培養這一技術的發展及各種培養方法的廣泛應用，使這一技術在遺傳育