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文檔簡介
1、專題19 實驗匯總一、檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)1糖的鑒定: 原理:(1)淀粉:遇碘液變藍色,這是淀粉特有的顏色反應。(2)還原性糖(單糖、麥芽糖和乳糖):與斐林試劑反應,可以產(chǎn)生磚紅色沉淀。材料用具:(1)實驗材料:蘋果或梨勻漿,馬鈴薯勻漿(2)配制:甲液:0.1g/ml的naoh溶液+ 乙液:0.05g/ml cuso4溶液 使用:混合后使用,且現(xiàn)配現(xiàn)用。 條件:水浴加熱實驗步驟:實驗結果分析:(1)淀粉:如果出現(xiàn)藍色,則待測樣品中含有淀粉;反之,則沒有。(2)還原性糖:如果出現(xiàn)磚紅色沉淀,則待測樣品中含有還原糖,反之;則沒有。2脂肪的鑒定:原理:脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色。(
2、在實驗中用50%酒精洗去浮色顯微鏡觀察橘黃色脂肪顆粒)材料用具:(1)實驗材料:花生種子,花生勻漿(2)試劑:蘇丹iii染液、蘇丹iv染液實驗步驟實驗結果分析:如果觀察到橘黃色(紅色),則待測樣品中含有脂肪;反之,則沒有。3蛋白質(zhì)鑒定:原理:蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色的顏色反應材料用具:(1)實驗材料:豆?jié){、鮮肝提取液(2)雙縮脲試劑:配制:a液:0.1g/ml的naoh溶液(2ml)和b液:0.01g/ml cuso4溶液(3-4滴)使用:分開使用,先加naoh溶液,再加cuso4溶液。實驗步驟實驗結果分析:如果出現(xiàn)紫色,則待測樣品中含有蛋白質(zhì);反之,則沒有。4、 注意事項:(1)還原性糖植
3、物組織取材條件? 答:淺色:不能用綠色葉片、西瓜、血液等材料,防止顏色的干擾。還原糖含量高:不能用馬鈴薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)。含糖量較高、顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜等。 (2)花生種子切片為何要薄? 答:只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。 (3)唯一需要加熱 還原糖鑒定,且必需水浴加熱,不能用酒精燈直接加熱。若不加熱則無磚紅色沉淀出現(xiàn)。 唯一需要顯微鏡 脂肪鑒定。(4)若用大豆做材料,必須提前浸泡;若用蛋清作材料,必須稀釋,防止其粘在試管壁上不易涮洗;且該實驗應預留部分組織樣液做對比。二、實驗:觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原一、實驗原理:原生質(zhì)
4、層(細胞膜、液泡膜、兩層膜之間細胞質(zhì))相當于半透膜,l 當外界溶液的濃度大于細胞液濃度時,細胞將失水,原生質(zhì)層和細胞壁都會收縮,但原生質(zhì)層伸縮性比細胞壁大,所以原生質(zhì)層就會與細胞壁分開,發(fā)生“質(zhì)壁分離”。l 反之,當外界溶液的濃度小于細胞液濃度時,細胞將吸水,原生質(zhì)層會慢慢恢復原來狀態(tài),使細胞發(fā)生“質(zhì)壁分離復原”。二、材料用具:紫色洋蔥表皮,0.3g/ml蔗糖溶液,清水,載玻片,鑷子,滴管,顯微鏡等三、方法步驟:(1)制作洋蔥表皮臨時裝片。(2)低倍鏡下觀察原生質(zhì)層位置。(3)在蓋玻片一側滴一滴蔗糖溶液,另一側用吸水紙吸,重復幾次,讓洋蔥表皮浸潤在蔗糖溶液中。(4)低倍鏡下觀察原生質(zhì)層位置、細
5、胞大小變化(變小),觀察細胞是否發(fā)生質(zhì)壁分離。(5)在蓋玻片一側滴一滴清水,另一側用吸水紙吸,重復幾次,讓洋蔥表皮浸潤在清水中。(6)低倍鏡下觀察原生質(zhì)層位置、細胞大小變化(變大),觀察是否質(zhì)壁分離復原。四、實驗結果分析:細胞液濃度外界溶液濃度 細胞失水(質(zhì)壁分離)細胞液濃度外界溶液濃度 細胞吸水(質(zhì)壁分離復原) 五、特別提醒(1)實驗成功的關鍵是實驗材料的選擇,選擇有大液泡并有顏色的植物細胞,便于在顯微鏡下觀察。(2)質(zhì)壁分離和質(zhì)壁分離復原中水分子移動是雙向的,結果是雙向水分子運動的差別所導致的現(xiàn)象。(3)質(zhì)壁分離后在細胞壁和細胞膜之間充滿的是濃度降低的外界溶液,因細胞壁是全透性且有水分子通
6、過原生質(zhì)層滲出來。(4)若用50%蔗糖溶液做實驗,能發(fā)生質(zhì)壁分離但不能復原,因為細胞過度失水而死亡。(5)若用尿素、乙二醇、kno3、nacl做實驗會出現(xiàn)自動復原現(xiàn)象,因外界物質(zhì)會轉移到細胞內(nèi)而引起細胞液濃度升高。(5)實驗拓展:可利用本實驗原理測定細胞液濃度、判斷細胞的死活、說明原生質(zhì)層的伸縮性大于細胞壁的伸縮性等。三、探究影響酶活性的因素一、酶的高效性比較過氧化氫在不同條件下的分解(1)實驗過程分析(2)實驗注意事項實驗時必須用新鮮的、剛從活的動物體中取出的肝臟作實驗材料。肝臟如果不新鮮,肝細胞內(nèi)的過氧化氫酶等有機物就會在腐生細菌的作用下分解,使組織中酶分子的數(shù)量減少且活性降低。二、酶的專
7、一性三、探究溫度對酶活性的影響(1)實驗過程分析 (2)實驗注意事項因為過氧化氫酶的反應底物過氧化氫受熱會分解,所以用其做溫度探究的實驗,會對實驗結果帶來干擾。 因為斐林試劑在使用時需要加熱,這對溫度探究帶來干擾,而使用碘液無需加熱,對實驗無干擾。四、探究ph對酶活性的影響 思考:為什么不能用淀粉酶做探究ph的實驗?答:因為淀粉在酸性條件下會分解,這對于判斷淀粉酶能否使得淀粉水解出現(xiàn)干擾。故不能使用。四、葉綠體中的色素的提取和分離1、原理:葉綠體中的色素能溶解于有機溶劑(如丙酮、酒精等)。 葉綠體中的色素在層析液中的溶解度不同,溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散得快;反之則慢。2、材料
8、用具:新鮮的綠葉(菠菜的綠葉等)。干燥的定性濾紙,試管,棉塞,試管架,研缽,玻璃濾斗,尼龍布,毛細吸管,剪刀,藥勺,量筒(10ml),天平。無水乙醇,層析液(20份在6090下分餾出來的石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成。93號汽油也可代用),sio2和caco3。3、方法步驟:(1)提取綠葉中色素:稱取綠葉5g剪碎置于研缽放入少許sio2和caco3加入10ml丙酮充分研磨過濾收集濾液(試管口用棉塞塞嚴);(2)制備濾紙條:將干燥的濾紙剪成6cm長,1cm寬的紙條,剪去一端兩角(使層析液同時到達濾液細線),在距剪角一端1cm處用鉛筆畫線;(3)畫濾液細線:用毛細管吸少量的濾液沿鉛筆線處小心均勻
9、地劃一條濾液細線,干燥后重復劃2-3次;(4)分離色素:向燒杯中倒入3ml層析液(以層析液不沒及濾液細線為準),將濾紙條尖端朝下略微斜靠燒杯內(nèi)壁,輕輕插入層析液中,用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯。4、結果分析:色素在濾紙條上的分布如下圖: (橙黃色) 最快(溶解度最大) (黃 色) (藍綠色) 最寬(含量最多) (黃綠色) 最慢(溶解度最小)5、注意:丙酮的用途是提取(溶解)葉綠體中的色素,石英砂的作用是為了研磨充分,碳酸鈣的作用是防止研磨時葉綠體中的色素受到破壞;層析液的的用途是分離葉綠體中的色素;分離色素時,層析液不能沒及濾液細線的原因是濾液細線上的色素會溶解到層析液中。五、探究酵母菌的呼吸方式1、實
10、驗原理:酵母菌是一種單細胞真菌,在有氧和無氧的條件下都能生存。在無氧或缺氧的條件下能進行無氧呼吸,在氧氣充裕的條件下能進行有氧呼吸,因此便于用來研究細胞的呼吸方式。在探究活動中,需要設計和進行對比實驗,分析有氧條件下和無氧條件酵母菌細胞的呼吸情況。co2可以使澄清的石灰水變渾濁,也可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇發(fā)生化學反應,變成綠色。2、實驗設計:3、實驗結果的分析:(1)檢測co2的產(chǎn)生:觀察石灰水渾濁程度或者溴麝香草酚藍水溶液變成黃色的時間長短,可以檢測酵母菌培養(yǎng)液中產(chǎn)生co2情況。根據(jù)相關實驗現(xiàn)象分析得出酵母既能進行有氧呼吸,也能進行無氧呼吸。
11、(2)檢測酒精的產(chǎn)生:將兩組實驗中的酵母菌培養(yǎng)液各取2ml,置于2只干凈的試管中,分別加入0.5ml溶有0.1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液,輕輕振蕩混允,觀察試管中溶液的顏色變化,分析得出酒精是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物。六、觀察植物細胞的有絲分裂實驗原理: 高等植物的分生組織有絲分裂較旺盛。可以用高倍鏡觀察植物細胞有絲分裂的過程,根據(jù)各個時期細胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的變化情況,識別該細胞處于有絲分裂的哪個時期。細胞核內(nèi)的染色體容易被堿性燃料(龍膽紫、醋酸洋紅)著色。材料用具:洋蔥(蒜、蔥)。顯微鏡,栽玻片,蓋玻片,玻璃皿,剪刀,鑷子,滴管。質(zhì)量分數(shù)15%的鹽酸與體積分數(shù)95%的酒精1:1配制成解離液,質(zhì)
12、量分數(shù)為0.01g/ml的或0.02g/ml的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅)。方法步驟:(1)洋蔥根尖培養(yǎng):實驗課前34天,取洋蔥一個,放在廣口瓶上。瓶內(nèi)裝滿清水,洋蔥底部接觸瓶內(nèi)水面,置于溫暖處,常換水。待根長5cm時,取健壯的根尖制片觀察。(2)裝片的制作:過程方 法時間目 的 解離上午10時至下午2時,剪去洋蔥根尖2-3mm,立即放入盛入有鹽酸和酒精混合液(1:1)的玻璃皿中,在溫室下解離。3-5min用藥液使組織中的細胞相互分離開來漂洗待根尖酥軟后,用鑷子取出,放入盛入清水的玻璃皿中漂洗。約10min洗去藥液,防止解離過度染色把根尖放進盛有龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)的玻璃皿中染色。3-5mi
13、n染料能使染色體著色。制片用鑷子將這段根尖取出來,放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把根尖能碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕的按壓載玻片。使細胞分散開來,有利于觀察(3)洋蔥根尖細胞有絲分裂的觀察:先低倍鏡觀察:找到分生區(qū)細胞(細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正在分裂)再高倍鏡觀察:找到分生區(qū)細胞后,移走低倍鏡,換上高倍鏡,用細準焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰。觀察:找出處于細胞分裂期中期的細胞,再找出前期、后期、末期的細胞。(根據(jù)染色體的變化特點判斷各個時期)實驗結果分析:中期細胞中的染色體的形態(tài)數(shù)目最清晰,染色體均排列在赤道板上。后期細胞中的染色體分布在細胞兩極。
14、末期細胞赤道板處出現(xiàn)細胞板,形成細胞壁,兩消、兩現(xiàn)。前期細胞中染色體散亂分布在細胞中央,兩消、兩現(xiàn)。考點提示: (1)培養(yǎng)根尖時,應選用老洋蔥,因為新洋蔥尚在休眠,不易生根。 (2)根尖分生區(qū)的細胞能進行有絲分裂;上午10時到下午2時細胞分裂活躍。 (3)解離是為了使細胞相互分離開來,壓片是為了使細胞相互分散開來;再加一塊載玻片是為了受力均勻,防止蓋玻片被壓破。 (4)分生區(qū)細胞中,什么時期的細胞最多?為什么? 答:間期;因為在細胞周期中,間期時間最長。 (5)所觀察的細胞能從中期變化到后期嗎?為什么? 答:不能,因為所觀察的細胞都是停留在某一時期的死細胞。 (6)觀察洋蔥表皮細胞能否看到染色
15、體?為什么? 答:不能,因為洋蔥表皮細胞一般不分裂。 (7)若觀察時不能看到染色體,其原因是什么? 答:沒有找到分生區(qū)細胞;沒有找到處于分裂期的細胞;染液過稀;染色時間過短。七、調(diào)查人群中的遺傳病方法和過程:1、可以以小組為單位進行研究,小組成員也可以分工進行調(diào)查。2、每個小組可調(diào)查周圍熟悉的410個家庭(或家系)中遺傳病的情況。3、調(diào)查時,最好選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病,如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等。4、調(diào)查時要詳細詢問,如實記錄。5、小組調(diào)查數(shù)據(jù)應在班級和年級中進行匯總(以保證調(diào)查的群體足夠大)4、對某個家庭進行調(diào)查時,被調(diào)查成員之間的血緣關系必須寫清楚,并注明性
16、別。5、必須統(tǒng)計被調(diào)查的某種遺傳病在人群中的發(fā)病率。,結果分析:被調(diào)查人數(shù)為2 747人,其中色盲患者為38人(男性37人,女性1人),紅綠色盲的發(fā)病率為1.38%。男性紅綠色盲的發(fā)病率為1.35%,女性紅綠色盲的發(fā)病率為0.03%。二者均低于我國社會人群男女紅綠色盲的發(fā)病率。結論:我國社會人群中,紅綠色盲患者男性明顯多于女性。注意:調(diào)查發(fā)病率時,隨機取樣,樣本足夠大; 調(diào)查遺傳方式時,選取患者家系調(diào)查,并畫出系譜圖。九、 培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化一、實驗原理:1、酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng),培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、ph、溫度等因素有關,我們可以根據(jù)培養(yǎng)
17、液中的酵母菌數(shù)量和時間為坐標軸做曲線,從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況。2、利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的細胞計數(shù)法,這種方法可以直接測定樣品中全部的細胞數(shù)目,所以一般用于單細胞微生物數(shù)量的測定,由于血球計數(shù)板上的計數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的,所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細胞數(shù)目來計算單位體積的細胞的總數(shù)目。二、實驗材料:酵母菌菌種,無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液。三、實驗用具:無菌水,試管,棉塞,恒溫培養(yǎng)箱,顯微鏡,無菌滴管,無菌移液管,小燒杯或小試管,血球計數(shù)板(2mm×2mm)、紗布、濾紙、鑷子、蓋玻片。四、方法步驟:1、取相同試管若干支,分別加入5ml肉湯培養(yǎng)
18、液,塞上棉塞。2、用高壓鍋進行高壓蒸汽滅菌后冷卻至室溫,標記甲、乙、丙等。3、將酵母菌母液分別加入試管各5ml,搖勻后用血球計數(shù)板計數(shù)起始酵母液個數(shù),做好記錄。4、將各試管送進恒溫箱,25下培養(yǎng)7天。5、每天同一時間,各組取出本組的試管,用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù),并作記錄,連續(xù)觀察7天。結果分析:在空間、食物等環(huán)境條件有限的情況下,剛接種到培養(yǎng)基上,種群數(shù)量增長緩慢;第二個階段種群數(shù)量呈指數(shù)增長;第三個階段種群數(shù)量達到最大并處于穩(wěn)定狀態(tài),即達到k值;第四個階段種群數(shù)量顯著下降。十、制作生態(tài)瓶或生態(tài)缸實驗原理:一個生態(tài)系統(tǒng)能否在一定時間內(nèi)保持自身結構和功能的相對穩(wěn)定,是衡量這個生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的一個重要方面。生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性與它的物種組成、營養(yǎng)結構和非生物因素等都有著密切的關系。將少量的植物、以這些植物為食的動物、分解者和非生物物質(zhì)放入一個密閉的廣口瓶中,便于形成一個人工模擬的微型生態(tài)系統(tǒng)小生態(tài)瓶。 通過設計并制作小生態(tài)瓶,觀察其中動植物的生存狀況和存活時間的長短,就可以初步學會觀察生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性,并進一步理解影響生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的各種因素。供選擇的材料:浮萍、滿江紅、黑藻、生有雜草的土塊、螺螄、蝸牛、蚯蚓、小魚。 河水(或井水、涼曬后的自來水)、洗凈的沙、凡士林(或蠟)、廣口瓶。方法步驟:(1)設計制作小生態(tài)瓶的方法步驟。(選擇生產(chǎn)者的種類、數(shù)量,選擇有捕
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