1、第三章第三章血液分析儀血液分析儀Hematologic AnalyzersKEY POINTSKEY POINTS1.Basic content of hematologic analyzers.2.Principles of hematologic analyzer based on one or two classic methods:electrical impedance and (or) optical detection.3.Parameters from hematologic analyzers and their clinical values.4.Characteristi

2、cs and significances of blood cell histograms and scattergram.5. Function assessment of hematologic analyzer. 血液分析儀血液分析儀, ,臨床血液一般檢查最常用儀器。臨床血液一般檢查最常用儀器。5050年代，美國庫爾特（年代，美國庫爾特（W.H.CoulterW.H.Coulter）發明）發明電子血細胞計數儀并申請專利。電子血細胞計數儀并申請專利。血液分析儀優勢血液分析儀優勢檢測項目多檢測項目多速度快速度快精度高精度高易操作易操作第一節 檢 驗 原 理一、儀器基本結構一、儀器基本結構1、

3、機械系統、機械系統 2、電學系統、電學系統 3、光學系統、光學系統 二、電阻抗法1、電阻抗原理，又稱庫爾特原理、電阻抗原理，又稱庫爾特原理2 2、白細胞計數和分類計數原理、白細胞計數和分類計數原理儀器將體積為儀器將體積為3535450fL450fL的血細胞，分為的血細胞，分為256256個通道（個通道（channelchannel）。每個通道：）。每個通道：1.64fl1.64fl。根據細胞大小，分別置于不同的通道中，顯根據細胞大小，分別置于不同的通道中，顯示血細胞體積分布直方圖示血細胞體積分布直方圖(Histogram)(Histogram)。 經溶血素處理脫水后，血細胞體積大小發生經溶血素

4、處理脫水后，血細胞體積大小發生了變化！了變化！第一群（第一群（353590fl90fl）小細胞區：淋巴細胞小細胞區：淋巴細胞（體積最?。w積最?。?。第二群（第二群（9090160fl160fl）單個核細胞區，（中單個核細胞區，（中間細胞）：單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿間細胞）：單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、原始、幼稚細胞、異常細胞等。性粒細胞、原始、幼稚細胞、異常細胞等。第三群（第三群（160fl160fl以上）以上）大細胞區：嗜中性粒細大細胞區：嗜中性粒細胞（體積最大）胞（體積最大）。三分群血液分析儀三分群血液分析儀正常白細胞分類模式圖（直方圖）正常白細胞分類模式圖（直方圖） %3

5、5 90 160 300 400 450(fl)3 3、紅細胞檢測原理、紅細胞檢測原理 紅細胞計數和血細胞比容測定與白細紅細胞計數和血細胞比容測定與白細胞計數相似。胞計數相似。 100 200 300 400 (fl)%4 4、血小板檢測原理、血小板檢測原理血小板計數（血小板計數（platelet, PLTplatelet, PLT）：）：隨紅細胞在一個系統中進行檢測隨紅細胞在一個系統中進行檢測。直方圖在228fl（不同儀器不一）。 10 20 30(fl)10 20 30(fl)%三、光散射法血液分析儀檢測原理三、光散射法血液分析儀檢測原理 組合應用組合應用 電學電學 光學光學 細胞化學等細

6、胞化學等1 1、白細胞檢測、白細胞檢測 （1 1）容量、電導、光散射）容量、電導、光散射（volume，conductivity， scatter, VCS）法法原理原理細胞體積技術細胞體積技術（測量（測量細胞大?。┘毎笮。╇妼约夹g電導性技術（測量細（測量細胞內部結構）胞內部結構）光散射技術光散射技術（測量細（測量細胞形態、細胞核和細胞胞形態、細胞核和細胞顆粒）。顆粒）。 體積 電導 光散射VCSVCS可顯示可顯示3 3種細胞散點圖種細胞散點圖DF1DF1（體積值和散射光值）（體積值和散射光值）DF2DF2（體積值和電導值）（體積值和電導值）DF3DF3（體積值和電導值）（體積值和電導值）

7、（2 2）電阻抗與射頻法（能透入細胞內，測）電阻抗與射頻法（能透入細胞內，測量核的大小及顆粒的多少）。量核的大小及顆粒的多少）。RF:RF:射頻電流射頻電流 細胞內部結構信息細胞內部結構信息DC:DC:直流電直流電 細胞大小的信息細胞大小的信息 （3 3）激光與細胞化學法）激光與細胞化學法 過氧化物酶檢測通道過氧化物酶檢測通道 嗜堿性粒細胞嗜堿性粒細胞/ /分葉核檢測通道分葉核檢測通道。 （4 4）多角度偏振光散射（）多角度偏振光散射（multi-angle polarized scatter separation of white cell, MAPSS）法）法 0 0：前角光散射：前角光散

8、射（1 13 3），可粗略），可粗略測定細胞大小。測定細胞大小。 1010：狹角光散射：狹角光散射（7 71111），可測），可測定細胞內部結構相對特征。定細胞內部結構相對特征。 9090：垂直光散射：垂直光散射（7070110110），測），測定細胞核分葉情況。定細胞核分葉情況。 9090：消偏振光散射：消偏振光散射（7070110110），），區分嗜酸性粒細胞與其他細胞。區分嗜酸性粒細胞與其他細胞。 2 2、光散射法紅細胞、血紅蛋白檢測原理、光散射法紅細胞、血紅蛋白檢測原理 低角度低角度(2(23 3) )：測量紅細胞體積。：測量紅細胞體積。 高角度高角度(5(51515) )：測定紅細胞

9、血紅：測定紅細胞血紅蛋白濃度。蛋白濃度。3 3、血紅蛋白檢測原理、血紅蛋白檢測原理 比色法比色法4 4、網織紅細胞計數原理、網織紅細胞計數原理 原理：原理：用新亞甲藍染色使紅細胞用新亞甲藍染色使紅細胞RNARNA著色或用熒光染料對著色或用熒光染料對RNARNA進行染色。進行染色。光散射法網織紅細胞檢測散點圖光散射法網織紅細胞檢測散點圖 第二節第二節 血細胞分析儀檢驗參數血細胞分析儀檢驗參數一、檢測參數 中高檔儀器檢測參數：中高檔儀器檢測參數： 20項左右或超過項左右或超過40多項。多項。二、相關參數的臨床應用二、相關參數的臨床應用第三節第三節 血細胞分析儀檢驗圖形血細胞分析儀檢驗圖形一、血細胞

10、直方圖一、血細胞直方圖 橫坐標為血細胞體積大小橫坐標為血細胞體積大小 縱坐標為不同體積細胞的相對頻率?？v坐標為不同體積細胞的相對頻率。1 1、白細胞直方圖、白細胞直方圖正常白細胞直方圖正常白細胞直方圖異常白細胞直方圖異常白細胞直方圖2 2、紅細胞直方圖、紅細胞直方圖（1 1）正常紅細胞分布：）正常紅細胞分布：5050200fl 200fl （2 2）異常紅細胞直方圖）異常紅細胞直方圖3 3、血小板直方圖、血小板直方圖正常血小板直方圖呈左偏態分布：正常血小板直方圖呈左偏態分布：2 230fl30fl分布，主要在分布，主要在2 215fl15fl。 異常血小板直方圖 第四節 儀器質量保證 一、一、

11、 可比性可比性 (comparability(comparability) ) 指血液分析儀測定結果，與常規方法所指血液分析儀測定結果，與常規方法所 測結果相比較。顯微鏡法是血細胞檢驗測結果相比較。顯微鏡法是血細胞檢驗基礎。基礎。 P P0.050.05有可比性；有可比性；P P0.050.05無可比性。無可比性。 結論：結論：計數細胞越多、選用吸管、計數計數細胞越多、選用吸管、計數盤越多，計數結果接近真值。盤越多，計數結果接近真值。實際工作中，鏡檢法很難達到此要求。實際工作中，鏡檢法很難達到此要求。二、準確性二、準確性 (accuracy)(accuracy) 準確性是指測定結果與真值一致性

12、的程度。準確性是指測定結果與真值一致性的程度。三、總重復性三、總重復性( (overall repeatabilityoverall repeatability) ) 指同一份標本多次測量的結果接近的程度。指同一份標本多次測量的結果接近的程度。重復測定重復測定1 1份抗凝靜脈血份抗凝靜脈血1010次，計算次，計算CVCV值。值。四、精密度四、精密度 (precision)(precision) 批內批內（within-batchwithin-batch）精密度：同一）精密度：同一批樣本重復測定結果的評價。批樣本重復測定結果的評價。批批間間(between-batch)(between-batch)精密度：對兩批精密度：對兩批或兩批以上樣本重復測定結果的評價?；騼膳陨蠘颖局貜蜏y定結果的評價。 精確度精確度和準確度和準確度五、攜帶污染率五、攜帶污染率(carry over)(carry over)連續測定連續測定1 1份高值樣本份高值樣本3 3次（次（i1i1、i2i2、i3i3）再測定再測定1 1份低值樣本份低值樣本3 3次（次（j1j1、j2j2、j3j3）