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文檔簡介

1、100g樣品中蛋白質含量樣品中蛋白質含量(g%) =每克樣品每克樣品含氮克數含氮克數1006.252. 紫外吸收紫外吸收 色氨酸、酪氨酸、苯色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸的最大吸收峰丙氨酸的最大吸收峰在在280nm波長附近波長附近 肽 鍵肽平面肽平面(peptide plane) summaryv 鐮刀形血紅蛋白鐮刀形紅細胞貧血(sickle cell anemia) 儲存氧氣儲存氧氣hb運輸氧氣運輸氧氣summary mb: 三級結構,無變構效應 hb: 四級結構,有變構效應(三)蛋白質構象改變與疾病 蛋白質的折疊發生錯誤,使蛋白質的構象發生改變,盡管其一級結構不變,仍可影響其功能,嚴重時可導致疾

2、病發生,此類疾病稱為蛋白構象疾病。例:瘋牛病 prpc prpsc (-helix) (-sheet) 變性因素: 加熱 強酸、強堿 有機溶劑:乙醇 重金屬離子: hg2+, pb2+ 變性劑:sds, 尿素 還原劑:-巰基乙醇 蛋白質的變性與復性一、透析(dialysis) 二、層析(chromatography) 離子交換層析 凝膠過濾 親和層析離子交換層析(ion exchange chromatography) 固定相離子交換樹脂 陽離子:酸性基團,帶負電,交換陽離子 陰離子:堿性基團,帶正電,交換陰離子 原理:蛋白質所帶電荷的性質和數量 凝膠過濾(gel filtration) 固定相:凝膠顆粒多孔性的網絡結構 原理:蛋白質分子大小不同(反篩效應)三、超速離心(ultracentrifugation) 原理:蛋白質密度不同 沉降系數(sedimentation coefficient, s): 與蛋白質密度和形狀有關 球狀蛋白質,s與分子量成正比 名解:名解: 肽平面肽平面 模序(體)結構域模序(體)結構域 蛋白

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