1、第一節第一節第一課時第一課時微生物微生物包括哪五類包括哪五類：真菌真菌原生動物原生動物特點特點：結構都相當簡單：結構都相當簡單,多數個體十分微小多數個體十分微小(o.1mm)的生物的總稱。的生物的總稱。 通常要用光學顯微鏡通常要用光學顯微鏡或電子顯微鏡才能看到，有的甚至沒有細胞結構或電子顯微鏡才能看到，有的甚至沒有細胞結構.且體內一般不含有葉綠素且體內一般不含有葉綠素.不能進行光合作用不能進行光合作用. 原核原核 原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界真核真核病毒病毒 sars病毒病毒 禽流感病毒禽流感病毒朊病毒（朊病毒（蛋白質病毒）蛋白質病毒）真菌真菌如圖是酵母菌電子顯微如圖是酵母菌電

2、子顯微鏡下的形態結構鏡下的形態結構酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌青霉青霉 了解有關培養基的基礎知識，進行無了解有關培養基的基礎知識，進行無菌技術的操作，進行微生物的培養。菌技術的操作，進行微生物的培養。 一、課題目標：一、課題目標： 掌握掌握培養基的制備培養基的制備、高壓蒸氣滅菌高壓蒸氣滅菌和和平板劃線法平板劃線法等基本操作技術，熟練、規范等基本操作技術，熟練、規范地進行無菌操作，成功地培養微生物。地進行無菌操作，成功地培養微生物。無菌技術的操作。無菌技術的操作。二、課題重點和難點：二、課題重點和難點：三、技能目標：三、技能目標：（2）按培養基的）按培養基的物理形態分：物理形態分： 液體培養基液體培

3、養基 半固體培養基半固體培養基 固體培養基固體培養基一一 基礎知識基礎知識:（3）按培養基的）按培養基的功能分：功能分： 基礎培養基基礎培養基選擇培養基選擇培養基鑒別培養基鑒別培養基（1）按培養基的）按培養基的化學成分分：化學成分分：天然培養基天然培養基合成培養基合成培養基半半合成培養基合成培養基閱讀課本分別說出閱讀課本分別說出它們的優點、缺點。它們的優點、缺點。培養基的種類液體培養基半固體培養基固體培養基據物理性質分天然培養基合成培養基據化學成分分選擇培養基鑒別培養基據用途分常用于工業生產常用于觀察微生物的運動、鑒定菌種用于微生物的分離、計數常用于工業生產常用于分類、鑒定在培養基中加入某種化

4、學物質，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長。例如，在培養基中加入青霉素，以抑制細菌、放線菌的生長，從而分離到酵母菌和霉菌。又如，在培養基中加入高濃度的食鹽可以抑制多種細菌的生長，但不影響金黃色葡萄球菌的生長。根據微生物的代謝特點，在培養基中加入某種指示劑或化學藥品配制而成，用以鑒別不同種類的微生物。例如，在培養基中加入伊紅和美藍，可以用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細菌：如果有大腸桿菌，其代謝產物就與伊紅和美藍結合，使菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤。選擇培養基加入青霉素的培養基加入青霉素的培養基: : 分離酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養基

5、加入高濃度食鹽的培養基: : 分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養基不加氮源的無氮培養基: : 分離固氮菌分離固氮菌不加含碳有機物的無碳培養基不加含碳有機物的無碳培養基: : 分離自養型微生物分離自養型微生物加入青霉素等抗生素的培養基加入青霉素等抗生素的培養基: : 分離導入了目的基因的受體細胞分離導入了目的基因的受體細胞加入氨基喋呤、次黃嘌呤和胸腺嘧啶加入氨基喋呤、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培養基核苷的培養基: : 分離雜交瘤細胞分離雜交瘤細胞 根據細胞生存所需物質的種類和根據細胞生存所需物質的種類和數量，用人工方法模擬合成的。數量，用人工方法模擬合成的。 合成培養基主要成分

6、是氨基酸、合成培養基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質。一些輔助物質。 優點：優點：標準化生產，組分和含量相標準化生產，組分和含量相對固定對固定; ;成本低成本低 缺點：缺點： 缺少某些成分，不能完全滿缺少某些成分，不能完全滿足體外細胞生長需要。足體外細胞生長需要。 合成培養基合成培養基: : 天然培養基有血清、血漿、和組天然培養基有血清、血漿、和組織提取液（如雞胚和牛胚浸液）。織提取液（如雞胚和牛胚浸液）。優點：優點：營養成分豐富，培養效果好營養成分豐富，培養效果好缺點：缺點：來源受限來源受限; ;成分復雜，影響對某成分復雜，影響對

7、某些實驗產物的提取和實驗結果的分析些實驗產物的提取和實驗結果的分析; ;易發生支原體污染易發生支原體污染; ;天然培養基：天然培養基：固體培養基：菌落固體培養基：菌落液體培養基：液體培養基：表面生長表面生長均勻混濁生長均勻混濁生長沉淀生長沉淀生長半固體培養基：半固體培養基：無動力無動力 有動力有動力( (彌散彌散) )( (是否運動是否運動) ) 培養基的配制原則培養基的配制原則： 目的要明確：目的要明確：根據培養的微生物種類、培養的根據培養的微生物種類、培養的目的等確定培養基的類型和配制量。目的等確定培養基的類型和配制量。 營養要協調：營養要協調：培養基中各種營養物質的濃度和培養基中各種營養

8、物質的濃度和比例要適宜。例如：碳氮比比例要適宜。例如：碳氮比4 1時，谷氨酸棒狀時，谷氨酸棒狀桿菌大量繁殖而產生谷氨酸少；碳氮比為桿菌大量繁殖而產生谷氨酸少；碳氮比為3 1時，時，菌體繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。菌體繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。 ph要適宜要適宜：細菌培養基：細菌培養基ph中性或偏堿性，霉菌中性或偏堿性，霉菌培養基呈酸性。培養基呈酸性。 細菌細菌ph為為：6.5-7.5； 放線菌放線菌ph為：為：7.5-8.5； 真菌真菌ph為：為：5.0-6.0微生物的五種營養要素微生物的五種營養要素碳源氮源（nitrogen source） 生長因子 微生物生長不可缺少的微量有機物質叫

9、生微生物生長不可缺少的微量有機物質叫生長因子。長因子。維生素維生素 氨基酸氨基酸 堿堿 基基 無機鹽（mineral salts） 水（wahtor） cncnc-micro 凡能為微生物提供生長繁殖所需碳元凡能為微生物提供生長繁殖所需碳元素的營養物質都稱為碳源素的營養物質都稱為碳源 。 凡是能為微生物提供所需氮元素的營養凡是能為微生物提供所需氮元素的營養物質都稱為氮源。物質都稱為氮源。無機無機c源：源：co2、碳酸鹽，只能被自養微生、碳酸鹽，只能被自養微生物利用物利用有機有機c源：各種糖類，其次是有機酸、醇源：各種糖類，其次是有機酸、醇類、類、 脂類和烴類化合物脂類和烴類化合物 碳源種類cn

10、cnc-micro分子態氮：固氮微生物以分子氮為唯一氮源分子態氮：固氮微生物以分子氮為唯一氮源 無機態氮：無機態氮：硝酸鹽、銨鹽硝酸鹽、銨鹽幾乎所有微生物能利用幾乎所有微生物能利用 有機態氮：有機態氮：蛋白質及其降解產物蛋白質及其降解產物 a實驗室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源實驗室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源 b生產用玉米漿、豆餅、葵花餅、花生餅等生產用玉米漿、豆餅、葵花餅、花生餅等氮源種類氮源種類cncnc-micro 構成微生物細胞的組成成分構成微生物細胞的組成成分 調解微生物細胞的滲透壓，調解微生物細胞的滲透壓， ph值和值和氧化還原電氧化還原電 位位 有些無機鹽如有些無機鹽如s

11、、fe還可做為自養微還可做為自養微生物的能源生物的能源 構成酶活性基的組成成分，維持酶活構成酶活性基的組成成分，維持酶活性。性。mg、ca、k是多種酶的激活劑是多種酶的激活劑 無機鹽（無機鹽（mineral saltsmineral salts） 無機鹽功能無機鹽功能cncnc-micro 構成微生物細胞以構成微生物細胞以c、h、o、n、p、s六六種元素為主，約占細胞干重的種元素為主，約占細胞干重的95以上；以上； ca、k 、mg、fe為大量元素，以無機鹽陽為大量元素，以無機鹽陽離子形式被吸收，配培養基要加離子形式被吸收，配培養基要加磷酸鹽、硫磷酸鹽、硫酸鹽。酸鹽。 zn、ca、mn、co、

12、mo等微量元素，在微等微量元素，在微生物培養中有生物培養中有0.1ppm就可以了，自來水原就可以了，自來水原料中已夠用，不需另加。料中已夠用，不需另加。無機鹽種類無機鹽種類cncnc-micro碳源、氮源、生長因子的比較來 源常用原料功 能碳源co2、nahco3、糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等糖類構成細胞物質和一些代謝產物，有些還是異養做生物的主要能源物質氮源n2、nh3、銨鹽、硝酸鹽、尿素、牛肉膏和蛋白胨等銨鹽、硝酸鹽等合成蛋白質、核酸以及含氮的代謝產物生長因子維生素、氨基酸、堿基酶、核酸等的組成成分 各種培養基的具體配方不同，但一般都包括哪些成分？ 答：不管哪種培養基，一般都含有答：不管

13、哪種培養基，一般都含有水水、碳碳源源、和、和氮源氮源、 無機鹽無機鹽等營養物質。等營養物質。 注注： 另外還需要滿足微生物生長對另外還需要滿足微生物生長對ph、特殊、特殊營養物質營養物質,例如例如:生長因子生長因子(即細菌生長必需，而自即細菌生長必需，而自身不能合成的化合物身不能合成的化合物,如維生素、某些氨基酸、嘌如維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶呤、嘧啶)以及氧氣、二氧化碳、滲透壓等的要求。以及氧氣、二氧化碳、滲透壓等的要求。 二二 無菌技術無菌技術：無菌操作泛指在培養微生物的無菌操作泛指在培養微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。操作中，所有防止雜菌污染的方法。1 1、煮沸消毒法煮沸消毒

14、法:100100煮沸煮沸5-6min5-6min2 2、巴氏消毒法：、巴氏消毒法：70-75 70-75 下煮下煮30min30min或或 80 80 下煮下煮15min15min3 3、化學藥劑消毒法、化學藥劑消毒法: :用用75%75%酒精、新潔酒精、新潔爾滅等進行皮膚消毒爾滅等進行皮膚消毒; ;氯氣消毒水源氯氣消毒水源4 4、紫外線消毒、紫外線消毒(1)常用消毒的方法：常用消毒的方法：1 1、灼燒滅菌、灼燒滅菌: :2 2、干熱滅菌：、干熱滅菌：160-170 160-170 下加下加熱熱1-2h1-2h。3 3、高壓蒸氣滅菌：、高壓蒸氣滅菌：100kpa100kpa、121 121 下

15、維持下維持15-30min.15-30min.(2)常用滅菌的方法：常用滅菌的方法：分類分類定義定義方法方法滅菌法滅菌法殺滅一切微生物殺滅一切微生物物理法：熱力、輻射、微物理法：熱力、輻射、微波、等離子體波、等離子體化學法：醛類、烷化劑化學法：醛類、烷化劑高效消高效消毒法毒法殺滅一切致病微殺滅一切致病微生物生物紫外線、含氯劑、臭氧、紫外線、含氯劑、臭氧、復配劑等復配劑等中效消中效消毒法毒法殺滅除芽孢外的殺滅除芽孢外的致病微生物致病微生物超聲波、碘類、醇類、酚超聲波、碘類、醇類、酚類類殺滅細菌繁殖體、殺滅細菌繁殖體、親脂病毒親脂病毒單鏈季胺鹽、雙胍類、中單鏈季胺鹽、雙胍類、中草藥、金屬離子草藥、

16、金屬離子常常識識1 無菌技術包括：無菌技術包括：（1）對實驗操作空間、操作者的衣著和手進行）對實驗操作空間、操作者的衣著和手進行 清潔和消毒清潔和消毒 ；（2）將培養器皿、接種用具和培養基等器具進行）將培養器皿、接種用具和培養基等器具進行 滅菌滅菌 ；（3）為避免周圍微生物污染，實驗操作應在）為避免周圍微生物污染，實驗操作應在 酒精燈火焰附近酒精燈火焰附近 旁進行；旁進行；（4）避免已滅菌處理的材料用具與）避免已滅菌處理的材料用具與 周圍物品周圍物品 相接觸。相接觸。2 消毒方法：消毒方法：（1）日常生活經常用到的是）日常生活經常用到的是 煮沸煮沸 消毒法；消毒法；（2）對一些不耐高溫的液體，

17、則使用）對一些不耐高溫的液體，則使用 巴氏巴氏 消毒法（作簡要介紹）；消毒法（作簡要介紹）；（3）對接種室、接種箱或超凈工作臺首先噴灑）對接種室、接種箱或超凈工作臺首先噴灑 石炭酸或煤酚皂石炭酸或煤酚皂 等溶等溶液以增強消毒效果，然后使用液以增強消毒效果，然后使用 紫外線紫外線 進行物理消毒。進行物理消毒。（4）實驗操作者的雙手使用）實驗操作者的雙手使用 酒精酒精 進行消毒；進行消毒；（5）飲水水源用）飲水水源用 氯氣氯氣 進行消毒。進行消毒。3滅菌方法：滅菌方法：（1）接種環、接種針、試管口等使用）接種環、接種針、試管口等使用 灼燒灼燒 滅菌法；滅菌法；（2）玻璃器皿、金屬用具等使用）玻璃器

18、皿、金屬用具等使用 干熱干熱 滅菌法，所用器械是滅菌法，所用器械是 干熱滅干熱滅菌箱菌箱 ；（3）培養基、無菌水等使用）培養基、無菌水等使用 高壓蒸汽高壓蒸汽 滅菌法滅菌法，所用器械是，所用器械是 高壓蒸高壓蒸汽滅菌鍋汽滅菌鍋 。（4）表面滅菌和空氣滅菌等使用）表面滅菌和空氣滅菌等使用 紫外線紫外線 滅菌法，所用器械是滅菌法，所用器械是 紫外紫外燈燈 。1.1.無菌技術除了用來防止實驗室的培養物無菌技術除了用來防止實驗室的培養物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？被其他外來微生物污染外，還有什么目的？2.2.請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果

19、需要，請選擇合適的方法。菌。如果需要，請選擇合適的方法。（1 1） 培養細菌用的培養基與培養皿培養細菌用的培養基與培養皿（2 2） 玻棒、試管、燒瓶和吸管玻棒、試管、燒瓶和吸管（3 3） 實驗操作者的雙手實驗操作者的雙手 答：無菌技術還能有效避免操作者自答：無菌技術還能有效避免操作者自身被微生物感染。身被微生物感染。答：（答：（1）、（）、（2）需要滅菌；（）需要滅菌；（3）需要消毒）需要消毒。1 1、器具的滅菌、器具的滅菌2 2、培養基的配制、培養基的配制3 3、培養基的滅菌、培養基的滅菌4 4、倒平板、倒平板5 5、微生物接種、微生物接種6 6、恒溫箱中培養、恒溫箱中培養7 7、菌種的保存

20、、菌種的保存三、實驗操作三、實驗操作 1.制備牛肉膏蛋白胨培養基（用于培養細菌）制備牛肉膏蛋白胨培養基（用于培養細菌）1)1)配制：計算、稱量配制：計算、稱量、熔、熔化化2)2)調節調節phph：用：用3%3%的的hci/naohhci/naoh調節調節 ph 7ph 70- 723)3)分裝：分裝過程中注意不要使培養基沾分裝：分裝過程中注意不要使培養基沾 在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。的一半為宜。4)4)包扎：包扎：操作步驟操作步驟: 5) 5)滅菌滅菌: :

21、 將將50ml50ml培養基培養基用玻棒轉移至三角錐瓶中，用玻棒轉移至三角錐瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮紙，再放入塞上棉花塞，包上牛皮紙，再放入高壓蒸氣高壓蒸氣滅菌滅菌鍋，在壓力為鍋，在壓力為100kpa100kpa、溫度為、溫度為121121，滅菌，滅菌151530min30min。 將將培養皿培養皿用舊報紙包裹，放入用舊報紙包裹，放入干熱滅菌干熱滅菌箱內，箱內，在在160160170 170 下滅菌下滅菌2h2h。 6)6)倒平板倒平板: : 待培養基待培養基冷卻到冷卻到50 50 左右時，在酒精燈附左右時，在酒精燈附近倒平板。近倒平板。2d2d后觀察平板，無雜菌污染才可用后觀察平板，無雜菌

22、污染才可用來接種來接種. . 7) 7)無菌檢查：無菌檢查： 將滅菌的培養基放入將滅菌的培養基放入3737的溫室中培養的溫室中培養24244848小時，以檢查滅菌是否徹底。小時，以檢查滅菌是否徹底。倒平板倒平板: 1) 1)、臨時保藏：、臨時保藏：接種到固體斜面培接種到固體斜面培養基，菌落長成后養基，菌落長成后置于置于44冰箱保存。冰箱保存。 2)2)、長期保存：、長期保存：甘油冷凍管藏法甘油冷凍管藏法1).1).培養基滅菌后，需要冷卻到培養基滅菌后，需要冷卻到50 50 左右時，左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養基的才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養基的溫度？溫度？ 答：答：

23、可以用手觸摸盛有培養基的錐形可以用手觸摸盛有培養基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。時，就可以進行倒平板了。2).2).為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？ 答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養基。污染培養基。注意注意:3).3).平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4).4).在倒平板的過程中，如果不小心將培養基在倒平板的過程中，如果不小心將培養基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用

24、來培養微生物嗎？為什么？來培養微生物嗎？為什么？ 答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，凝固答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，凝固后的培養基表面的濕度也比較高，將平板倒置，后的培養基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養基表面的水分更好地揮發，又可以既可以使培養基表面的水分更好地揮發，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養基，造成污染。防止皿蓋上的水珠落入培養基，造成污染。 答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養基上滋生，因此最好不要用這個平板間的培養基上滋生，因此最好不要用這個平板培養微生物。培養微生物。2 2、純化大腸桿菌、純化大腸桿菌: :接種方法有：

25、接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法平板劃線法和稀釋涂布平板法 平板劃線法平板劃線法: :通過接種環在瓊脂固體培養通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續畫線的操作基表面連續畫線的操作, ,將聚集的菌鐘逐步稀將聚集的菌鐘逐步稀釋分散到培養基的表面釋分散到培養基的表面. . 在數次畫線后在數次畫線后, ,可以分離到由可以分離到由一個細胞繁一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體殖而來的肉眼可見的子細胞群體, ,這就是這就是菌落菌落. .菌落： 單個或少數細菌在固體培養基上大量繁殖單個或少數細菌在固體培養基上大量繁殖時，就會形成一個肉眼可見的，具有一定時，就會形成一個肉眼可見的，具有一定形態結構的子細胞

26、群體，叫做菌落形態結構的子細胞群體，叫做菌落。 菌落是鑒定菌種的重要依據。菌落是鑒定菌種的重要依據。菌落細菌的菌落特征細菌的菌落特征因種而異因種而異 霉菌的菌落霉菌的菌落特征特征因種而異因種而異菌落劃線后劃線后 培養一段時間后培養一段時間后 1).1).為什么在操作的第一步以及每次劃線之為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環？在劃線操作結束時，仍然前都要灼燒接種環？在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環嗎？為什么？需要灼燒接種環嗎？為什么？ 答：操作的第一步灼燒接種環是為了避免接答：操作的第一步灼燒接種環是為了避免接種環上可能存在的微生物污染培養物；每次劃線種環上可能存在的微生物污染

27、培養物；每次劃線前灼燒接種環是為了殺死上次劃線結束后，接種前灼燒接種環是為了殺死上次劃線結束后，接種環上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環上的環上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數的增加，使每次劃線時菌種的數目逐漸減少，次數的增加，使每次劃線時菌種的數目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結束后灼燒接種環，能及時以便得到菌落。劃線結束后灼燒接種環，能及時殺死接種環上殘留的菌種，避免細菌污染環境和殺死接種環上殘留的菌種，避免細菌污染環境和感染操作者。感染操作者。 2).2).在灼燒接種環之后，為什么要等其在灼燒接

28、種環之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？冷卻后再進行劃線？答：以免接種環溫度太高，殺死菌種。答：以免接種環溫度太高，殺死菌種。 3).3).在作第二次以及其后的劃線操作時，在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？ 答：劃線后，線條末端細菌的數目比線答：劃線后，線條末端細菌的數目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。的菌落。四、課題

29、成果評價四、課題成果評價 （一）培養基的制作是否合格（一）培養基的制作是否合格 如果未接種的培養基在恒溫箱中保溫如果未接種的培養基在恒溫箱中保溫1 12 d2 d后無后無菌落生長，說明培養基的制備是成功的，否則需要重新菌落生長，說明培養基的制備是成功的，否則需要重新制備。制備。 （二）接種操作是否符合無菌要求（二）接種操作是否符合無菌要求 如果培養基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基如果培養基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點，則說明接種操作本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點，則說明接種操作是符合要求的；如果培養基上出現了其他菌落，則說明是符合要求的；如果培養基上出現

30、了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達到要求，需要分析原因，接種過程中，無菌操作還未達到要求，需要分析原因，再次練習。再次練習。 （三）是否進行了及時細致的觀察與記錄（三）是否進行了及時細致的觀察與記錄 培養培養12 h12 h與與24 h24 h后的大腸桿菌菌落的大小會有明后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同，及時觀察記錄的同學會發現這一點，并能觀察顯不同，及時觀察記錄的同學會發現這一點，并能觀察到其他一些細微的變化。這一步的要求主要是培養學生到其他一些細微的變化。這一步的要求主要是培養學生良好的科學態度與習慣。良好的科學態度與習慣。本課題知識小結本課題知識小結: :【典例解析】【典例解

31、析】 例例1 1關微生物營養物質的敘述中，正確的是關微生物營養物質的敘述中，正確的是: :a.a.是碳源的物質不可能同時是氮源是碳源的物質不可能同時是氮源 b.b.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量c.c.除水以外的無機物只提供無機鹽除水以外的無機物只提供無機鹽 d.d.無機氮源也能提供能量無機氮源也能提供能量 解析：解析：不同的微生物，所需營養物質有較大差別，要不同的微生物，所需營養物質有較大差別，要針對微生物的具體情況分析。對于針對微生物的具體情況分析。對于a a、b b選項，它的表達是選項，它的表達是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化

32、碳；有的碳源可同時是氮源，如同時是氮源，如nhnh4 4hcohco3 3；有的碳源同時是能源，如葡萄；有的碳源同時是能源，如葡萄糖；有的碳源同時是氮源，也是能源，如蛋白胨。對于糖；有的碳源同時是氮源，也是能源，如蛋白胨。對于c c選選項，除水以外的無機物種類繁多，功能也多樣。如二氧化碳，項，除水以外的無機物種類繁多，功能也多樣。如二氧化碳，可作為自養型微生物的碳源；可作為自養型微生物的碳源；nahconahco3 3，可作為自養型微，可作為自養型微生物的碳源和無機鹽；而生物的碳源和無機鹽；而naclnacl則只能提供無機鹽。對于則只能提供無機鹽。對于dd選項，無機氮源提供能量的情況還是存在的

33、，如選項，無機氮源提供能量的情況還是存在的，如nhnh3 3可為硝可為硝化細菌提供能量和氮源。化細菌提供能量和氮源。答案：答案：d例例2 2下面對發酵工程中滅菌的理解下面對發酵工程中滅菌的理解的是的是: :a.a.防止雜菌污染防止雜菌污染 b.b.消滅雜菌消滅雜菌c.c.培養基和發酵設備都必須滅菌培養基和發酵設備都必須滅菌 d.d.滅菌必須在接種前滅菌必須在接種前答案：答案：b 解析：解析：滅菌是微生物發酵過程的一個重要環節。滅菌是微生物發酵過程的一個重要環節。a a說的是滅菌的目的，因為發酵所用的菌種大多是單一說的是滅菌的目的，因為發酵所用的菌種大多是單一的純種，整個發酵過程不能混入其他微生

34、物（雜菌），的純種，整個發酵過程不能混入其他微生物（雜菌），所以是正確的；所以是正確的；b b是錯誤的，因為滅菌的目的是防止雜是錯誤的，因為滅菌的目的是防止雜菌污染，但實際操作中不可能只消滅雜菌，而是消滅菌污染，但實際操作中不可能只消滅雜菌，而是消滅全部微生物。全部微生物。c c是正確的，因為與發酵有關的所有設備是正確的，因為與發酵有關的所有設備和物質都要滅菌；發酵所用的微生物是滅菌后專門接和物質都要滅菌；發酵所用的微生物是滅菌后專門接種的，滅菌必須在接種前，如果接種后再滅菌就會把種的，滅菌必須在接種前，如果接種后再滅菌就會把所接菌種也殺死。所接菌種也殺死。編號編號成分成分含量含量粉狀硫粉狀硫10g10g（nhnh4 4）2 2soso4 40.4g0.4gk k2 2hpohpo4 44.0g4.0gmgsomgso4 49.25g9.25gfesofeso4 40.5g0.5gcaclcacl2 20.5g0.5gh h2 2oo100ml100ml例例3 3右表是某微生物右表是某微生物培養基成分，請據此回答：培養基成分，請據此回答：（1 1）右表培養基可培）右表培養基可培養的微生物類型