1、人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序1.目的基因的獲取目的基因的獲取2.基因表達載體的構建基因表達載體的構建3.將目的基因導入受體細胞將目的基因導入受體細胞4.目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序目前被較廣泛提取目前被較廣泛提取使用的目的基因有：蘇使用的目的基因有：蘇云金桿菌抗蟲基因、人云金桿菌抗蟲基因、人胰島素基因、人干擾素

2、胰島素基因、人干擾素基因、種子貯藏蛋白基基因、種子貯藏蛋白基因、植物抗病基因等。因、植物抗病基因等。基因操作的基本步驟基因操作的基本步驟一、提取目的基因一、提取目的基因將需要的基因從供體生物將需要的基因從供體生物的細胞內提取出來。的細胞內提取出來。供體生物細胞供體生物細胞取出取出DNADNA用限制酶剪用限制酶剪去多余部分去多余部分目的基因目的基因限制酶限制酶人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序獲得目的基因的方法獲得目的基因的方法1. 從基因文庫中獲取目的基因從基因文庫中獲取目的基因什么是基因文庫？什么是基因文庫？什么是部分基因文庫？什么是部分基因文庫？怎樣從

3、基因文庫中得到我們所需的目怎樣從基因文庫中得到我們所需的目的基因？的基因？目的基因的有關信息與什么相聯系？目的基因的有關信息與什么相聯系？人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序2.2.人工合成基因法人工合成基因法PCRPCR擴增技術擴增技術獲得目的基因的方法獲得目的基因的方法PCR (polymerase chain reaction)聚合酶鏈式反應聚合酶鏈式反應是一項再生物體外復制特定是一項再生物體外復制特定DNA片段片段的核酸合成技術。通過此技術，可獲的核酸合成技術。通過此技術，可獲取大量的目的基因。取大量的目的基因。人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學

4、學年生物12基因工程的基本操作程序PCR技術技術 原理：原理： 前提：前提： 過程：過程：PCR擴增儀擴增儀DNA雙鏈復制的基本原理雙鏈復制的基本原理一段已知目的基因的核苷酸序列一段已知目的基因的核苷酸序列 目的基因目的基因DNA受熱變性，解鏈；受熱變性，解鏈； 引物與單鏈互補結合；引物與單鏈互補結合； 合成鏈在合成鏈在DNA聚合酶作用下進行聚合酶作用下進行延伸。延伸。人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序二、基因表達載體的構建二、基因表達載體的構建基因工程的核基因工程的核心心基因操作的基本步驟基因操作的基本步驟目的：目的：所需物質：所需物質：使目的基因在受體

5、細胞中穩定存在，使目的基因在受體細胞中穩定存在，并且可以遺傳給下一代，同時使目的并且可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發揮作用。基因能夠表達和發揮作用。它們各自它們各自的作用是的作用是什么什么?人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序啟動子啟動子終止子終止子標記基因標記基因復制原點復制原點目目的的基基因因表達載體表達載體人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序用與提取目的基因用與提取目的基因相同的限制酶切割質相同的限制酶切割質粒使之出現一個切口，粒使之出現一個切口，將目的基因插入切口將目的基因插入切口處，讓目的基因的黏處，

6、讓目的基因的黏性末端與切口上的黏性末端與切口上的黏性末端互補配對后，性末端互補配對后，在連接酶的作用下連在連接酶的作用下連接形成重組接形成重組DNA分子。分子。人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序三、將目的基因導入受體細胞三、將目的基因導入受體細胞轉化轉化基因操作的基本步驟基因操作的基本步驟 基因工程中常用的受體細胞有大腸桿菌、枯草基因工程中常用的受體細胞有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農桿菌、酵母菌和動植物細胞等。桿菌、土壤農桿菌、酵母菌和動植物細胞等。 用人工的方法使體外重組的用人工的方法使體外重組的DNA分子轉移到分子轉移到受體細胞，主要是借鑒細菌或病毒侵染

7、細胞的途受體細胞，主要是借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。徑。 目的基因導入受體細胞后，就可以隨著受體細目的基因導入受體細胞后，就可以隨著受體細胞的繁殖而復制，由于細菌繁殖的速度非常快，胞的繁殖而復制，由于細菌繁殖的速度非常快，在很短的時間內就能夠獲得大量的目的基因。在很短的時間內就能夠獲得大量的目的基因。 人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序將目的基因導入受體細胞并使之擴增將目的基因導入受體細胞并使之擴增導入導入擴增擴增人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序將目的基因導入各類細胞的方法將目的基因導入各類細胞的方法 將目的基因導

8、入植物細胞將目的基因導入植物細胞 將目的基因導入動物細胞將目的基因導入動物細胞 將目的基因導入微生物細胞將目的基因導入微生物細胞農桿菌轉化法、基因槍法、花粉管通道法農桿菌轉化法、基因槍法、花粉管通道法顯微注射技術顯微注射技術感受態細胞吸收感受態細胞吸收DNA分子分子人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序農桿菌轉化法農桿菌轉化法 你能說說農桿菌轉化法的大概過程嗎？你能說說農桿菌轉化法的大概過程嗎？ 根據農桿菌可將目的基因導入雙子葉植根據農桿菌可將目的基因導入雙子葉植物的機理，你能分析出農桿菌不能將目物的機理，你能分析出農桿菌不能將目的基因導入單子葉植物的原因嗎？

9、的基因導入單子葉植物的原因嗎？ 如果想將一個抗病基因導入單子葉植物，如果想將一個抗病基因導入單子葉植物，理論上你認為該怎么做？理論上你認為該怎么做？人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序顯微注射技術顯微注射技術導入貯藏蛋白基因的超級羊和超級小鼠導入貯藏蛋白基因的超級羊和超級小鼠人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序將目的基因導入微生物細胞將目的基因導入微生物細胞 利用大腸桿菌可以生產出人的利用大腸桿菌可以生產出人的胰島素。若要生產人的糖蛋白，胰島素。若要生產人的糖蛋白，可以用大腸桿菌嗎？可以用大腸桿菌嗎？人教版教學名校聯盟山東省新泰市第二中學學年生物12基因工程的基本操作程序四、目的基因的檢測與鑒定四、目的基因的檢測與鑒定檢測轉基因生物的染色體檢測轉基因生物的染色體DNA上是否上是否插入了目的基因插入了目的基因檢測目的基因是否轉錄出檢測目的基因是否轉錄出mRNA檢測目的基因是否翻譯成蛋白質檢測目的基因是否翻譯成蛋白質基因操作的基本步驟基因操作的基本步驟分子雜交技術分子雜交技術人教版教