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1、專(zhuān)題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題3 分解纖維素的微生物的分離 編制人:張勇強(qiáng) 審核人:高二生物組 使用時(shí)間:2015年1月班級(jí): 組別: 姓名: _【學(xué)習(xí)目標(biāo)】簡(jiǎn)述纖維素酶的種類(lèi)及作用;掌握從土壤中分離出纖維素的微生物的方法。【自主學(xué)習(xí)】一、纖維素與纖維素酶1纖維素的化學(xué)組成: 三種元素,是一種 糖。纖維素的分布: 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,此外,木材、作物秸稈等也富含纖維素。2纖維素酶的作用:纖維素酶是一種 ,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即 酶、 酶 酶,前兩種酶使纖維素分解成 ,第三種酶將纖維二糖分解成 。二、纖維素分解菌的篩選 1篩選方法: 染色法。該方法可以通過(guò) 反應(yīng)直接篩選。
2、2篩選原理:剛果紅是一種染料,它可以與_形成_,但并不和 _發(fā)生這種反應(yīng),當(dāng)纖維素被 分解后,紅色復(fù)合物無(wú)法形成,培養(yǎng)基中出現(xiàn)以 為中心的 ,我們可以通過(guò) 來(lái)篩選纖維素分解菌。3、 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 1、從土壤中分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程可分為_(kāi)、_、_、_和_。 2、課題延伸(1)、為了確定分離得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行 實(shí)驗(yàn),纖維素酶的發(fā)酵方法有 發(fā)酵和 發(fā)酵。(2)、纖維素酶測(cè)定方法是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的 含量進(jìn)行定量測(cè)定。【合作探究】1、為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?2、 將濾紙埋在土壤中有什么作用?濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?3、閱讀教材p29“資料二選擇
3、培養(yǎng)基”和欄旁培養(yǎng)基配方,討論并回答下列問(wèn)題:(1).纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基屬于 (液體、固體)培養(yǎng)基。(2).纖維素分解菌鑒別培養(yǎng)基屬于 (液體、固體)培養(yǎng)基。(3).纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基的選擇作用機(jī)制是什么? 以纖維素粉為唯一碳源,只有纖維素分解菌才能生存。(4).若設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)說(shuō)明選擇培養(yǎng)的作用,應(yīng)控制的變量是 將纖維素粉改為葡萄糖 。3、閱讀教材p29 “資料三剛果紅染色法”,填表比較兩種染色法的各自的優(yōu)缺點(diǎn):染色法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)方法一方法二4、為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?【課堂自我檢測(cè)】1、從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是( ) 土壤取樣梯度稀釋選擇培養(yǎng)涂布培養(yǎng)篩選菌株 a
4、bcd2纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基有選擇作用,原因在于有( ) anano3bkclc酵母膏d纖維素粉3、分離土壤中纖維素分解菌所用到的方法是( ) 稀釋倒平板法涂布平板法單細(xì)胞挑取法選擇培養(yǎng)基分離 abcd4、分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作有誤的是( ) a經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 b富集培養(yǎng)這一步可省略,但培養(yǎng)纖維素分解菌少c經(jīng)稀釋培養(yǎng)后,用剛果紅染色 d對(duì)照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上5、纖維素、纖維素酶和控制纖維素酶合成的物質(zhì),它們的基本組成單位依次( ) a葡萄糖、葡萄糖和氨基酸b葡萄糖、氨基酸和核苷酸 c氨基酸、氨基酸和核苷酸d淀粉、蛋白
5、質(zhì)和核酸6、下列有關(guān)分解纖維素微生物的分離的敘述,不正確的是( ) a纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵 b對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步篩選后,無(wú)需再進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn) c纖維素酶的測(cè)定方法,一般是對(duì)所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定 d纖維素酶是一種復(fù)合酶7在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落是 ( ) a分解尿素的細(xì)菌 b硝化細(xì)菌 c分解纖維素的細(xì)菌 d乳酸菌 8本實(shí)驗(yàn)關(guān)于選擇培養(yǎng)目的敘述正確的是( ) a可以增加纖維素分解菌的濃度 b可以減少纖維素分解菌的濃度 c所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基 d所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基9.下列不屬于纖維素酶組分的是( ) a.c1酶 bcx酶 c葡萄糖苷酶 d半乳糖
6、苷酶10、剛果紅能與下列哪種物質(zhì)形成紅色復(fù)合物( ) a葡萄糖 b纖維二糖 c麥芽糖 d纖維素11、植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問(wèn)題:(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶,其中的葡萄糖苷酶可將 分解成 。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(cr)時(shí),cr可與纖維素形成 色復(fù)合物。用含有cr的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí),培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見(jiàn)下表):酵母膏無(wú)機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂cr溶液水培養(yǎng)基甲+-+培養(yǎng)基乙+-+注:“+”表
7、示有,“”表示無(wú)。據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲 (填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是 ;培養(yǎng)基乙 (填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是 ; (1)纖維二糖 葡萄糖 (2)紅色 透明圈 (3)不能 液體培養(yǎng)基不能分離單菌落 不能 乙培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素,不會(huì)形成cr-纖維素紅色復(fù)合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌(一)旁欄思考題1.本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同?答:本實(shí)驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。本課題通過(guò)選擇培養(yǎng),使纖維素分解菌得到增殖后,再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。2.為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?答:由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對(duì)提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。3.將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?答:將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10 cm左右腐殖土壤中。4.想一想,這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?你打算選
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