1、檢驗與臨床 檢驗及產品 上海同仁醫院檢驗科 袁維祥主任 檢驗一般了解 1檢驗科方法簡單了解 2PCT 3CRP 4心臟標準物 5總結 檢驗科和實驗室區別檢驗科和實驗室區別 檢驗科檢驗科 ： 常規工作常規工作 量大量大 臨床要求臨床要求 快快 臨床檢驗工作最基本要求臨床檢驗工作最基本要求 及時及時 方便方便 準確準確 臨床檢驗人員對儀器及試劑要求臨床檢驗人員對儀器及試劑要求 管用管用 好用好用 實用實用 實驗室：特殊項目實驗室：特殊項目 科研為主科研為主 量少量少 檢驗項目：形態學檢驗項目：形態學 定性和定量定性和定量 檢驗報告形式 一濃度分析 1定性 2定量 二形態報告 1細胞 2細菌 3管型

2、 一按反應原理分類（定量）一按反應原理分類（定量） 1 用化學試劑測定方法叫化學法。如蛋白用化學試劑測定方法叫化學法。如蛋白 鈣鈣 鎂鎂 2 用酶測定方法叫酶法。如葡萄糖用酶測定方法叫酶法。如葡萄糖 谷丙轉氨酶谷丙轉氨酶 3用抗原抗體反應原理方法叫免疫法。用抗原抗體反應原理方法叫免疫法。HBsAg 4用原子吸收方法叫色譜法。鉀用原子吸收方法叫色譜法。鉀 鈉鈉 5用電泳分離方法叫電泳法。蛋白電泳用電泳分離方法叫電泳法。蛋白電泳 高壓液相色譜高壓液相色譜 6測定蛋白分子用酶聯聚合反應即測定蛋白分子用酶聯聚合反應即PCR方法。方法。DNA 7生物傳感器。血氣生物傳感器。血氣 血糖血糖 二按方法敏感性

3、分類二按方法敏感性分類 1 超微量法超微量法 微克以下微克以下 皮克皮克 納克納克 一般用一般用 免疫發光法免疫發光法 激素激素 腫瘤標志物腫瘤標志物 2 微量法微量法 毫克以下毫克以下 微克微克 一般用金標一般用金標 法或膠乳法散射法法或膠乳法散射法 RF CRP 3 常量法常量法 克以下克以下 毫克毫克 一般用生化一般用生化 法法 白蛋白白蛋白 甘油三脂甘油三脂 根據反應產物特性分 1比色 常用生化測定 2比濁 抗原抗體測定 3散射 可標記乳膠 4測定光強度 往往標記 主要反應方式 1液體反應 生化 免疫等成本低 線性寬 靈敏度高 2干式反應 干生化 免疫層析 滲濾法 相 對靈敏度低 線性

4、窄 成本高 往往單人份 包裝 標記技術分類標記技術分類 1 放射物質標記放射物質標記 2 熒光物質標記熒光物質標記 3 酶物質標記酶物質標記 4 金標記（鐵金標記（鐵 銅銅 硒）硒） 5 發光物標記發光物標記 測定方法 1決定性方法 2參考方法 3常規方法 123的過程叫正確度傳遞 321的過程叫溯源 超微量分析（化學發光） 目前按方法形式分類目前按方法形式分類 1 板式發光（包被在板上）板式發光（包被在板上） 須洗滌和分須洗滌和分 離離 反應手續多反應手續多 反應反應 慢慢 2均相發光均相發光 分洗滌和無洗滌二種分洗滌和無洗滌二種 簡單簡單 和反應快和反應快 發光按反應方式：發光按反應方式：

5、 干式反應和濕反應干式反應和濕反應 儀器分：儀器分： 全自動全自動 半自動半自動 化學發光發光 免疫化學發光分：免疫化學發光分： 1 酶底物發光（鹼性磷酸酶）貝克曼酶底物發光（鹼性磷酸酶）貝克曼 2 直接發光（丫叮脂）直接發光（丫叮脂） 西門子西門子 3電發光（釕）電發光（釕） 羅氏羅氏 4時間分辨熒光（銪）時間分辨熒光（銪） 德普德普 5微粒熒光微粒熒光 透景透景 6無須分離直接發光無須分離直接發光 博陽博陽 方法學要求 1精密度 批內 批間 變異系數CV 表示 2正確度 和目前公認結果比較 偏差 5 3穩定性好 4反應快 5抗干擾能力強 分析儀器按反應狀態分類分析儀器按反應狀態分類 1 干

6、式反應干式反應 萬孚飛測萬孚飛測 金標定量金標定量 2 濕式反應濕式反應 生化儀生化儀 發光儀發光儀 四四 按反應方便程度分類按反應方便程度分類 1 手工法手工法 2 半自動半自動 3 全自動全自動 儀器要求 1精密度好 CV38C 或90次/每分 3呼吸頻率20次/每分 4白細胞12000/uL或4000/uL SIRS主要由微生物感染所引起，其他非感 染如嚴重缺氧，燒傷、急性胰腺炎等也可 以造成。 炎癥診斷試驗 1，體溫測量 2，白細胞計數和分類 3，血沉 4，血清蛋白電泳 5，CRP 6， IL-6 IL-8 PCT在膿毒血癥應用 1， 區分是否細菌感染，越高感染病情越重 2，肺炎中應用

7、 鑒別細菌性和病毒性 3，全身性真菌感染應用 4， 腦膜炎鑒別中應用 5，新生兒感染中應用 PCT監控具有高度感染的患者應用 1，重危患者 2，大手術后 3，器官移植 PCT在療效觀察中應用 1，膿毒癥 2，多器官衰竭 3，休克 4，感染后手術治療 CRP 1肝臟合成，結構五聚體 是一種急性時相反 應蛋白。 2特點：本地很低，當受到刺激時（一般6小 時）迅速升高可達1000倍。 3臨床應用普遍。 CRP與PCT的應用比較 CRP:炎癥過程的篩選 6小時后上升2天達高峰 CRP高提示病變存在。 PCT：診斷和監測細菌性疾病感染一個參數 是嚴重細菌性和真菌感染特異性標志。也是膿毒 癥和炎癥活動有關

8、多臟器衰竭的可靠指標。患者 好轉PCT比CRP反應快，而CRP有較長時間才下 降。 CRP和PCT的比較 相同：都是急性時相反應蛋白 CRP是臨床運用特點是炎癥指標，在感染性 炎癥和非感染性炎癥，組織損傷、局部和 全身的輕度 中度 重度的感染和各種輕 中度損傷中應用。 PCT運用在嚴重細菌感染及膿毒血癥 CRP和PCT的比較 PCT指標在細菌感染方面相對特異 CRP指標相對特異性差 在病毒感染中PCT不升高，CRP會輕中度升高， 在細菌感染中CRP呈現一般中度以上升高，持續時 間長，PCT只有在嚴重細菌感染時才會升高，治 療好轉就下降。 檢測項目主要臨床意義 臨床意義：共性有二點 1，診斷和鑒

9、別診斷 2，療效觀察 PCT臨床意義 PCT作為急性時相反應蛋白（APR)一 種，一般認為在持續毒素刺激下，68小 時開始升高 CRP臨床意義 1主要用于各種損傷、感染、治療等觀察。 2超敏CRP主要用于心血管疾病。 BNP 主要用于慢性心衰的評估 肌鈣蛋白 主要用于心肌損傷及梗死 PCT臨床意義總結 PCT只有在嚴重細菌、真菌、寄生蟲感染及 膿毒癥和多臟器功能衰竭時測定才有意義。 在自身免疫、過敏和病毒感染時不升高。 因此PCT在細菌性疾病鑒別、監控細菌性感 染及病程預后估計等方面有意義。 檢驗科發展方向 臨床檢驗發展基本要求：圍繞臨床檢驗發展基本要求：圍繞 及時及時 方便方便 準確方針準確

10、方針 1 整個檢驗科全自動整個檢驗科全自動 2 POCT（即時檢驗）（即時檢驗） 3系統化系統化 優點優點 溯源性溯源性 不準確度不準確度 4 信息化信息化 提高內涵、把握方向、持續進步提高內涵、把握方向、持續進步 1做企業或公司：誘惑多做企業或公司：誘惑多 最重要不是選擇而是放最重要不是選擇而是放 棄棄 得到空間更大得到空間更大 堅信基本判斷堅信基本判斷 項目項目 找對找對 成功一大半成功一大半 2生存法則：守住底線、創造空間生存法則：守住底線、創造空間 3確定方向：想做什么？能做什么？確定方向：想做什么？能做什么？ 4市場要什么：不是你有我有。而是排他性即唯市場要什么：不是你有我有。而是排

11、他性即唯 一性一性 5社會需要什么：可靠、放心、方便、環保社會需要什么：可靠、放心、方便、環保 最好創造新產業最好創造新產業 目前市場上哪些品牌可以真正實現一步法加樣？ PCT/心標等：明德、樂普、基蛋（金標半定量） CRP：迪倍思（金標半定量，加樣后需補加緩沖液），其他品牌 均需要加樣前稀釋/預處理 國賽CRP-散射比 濁法 操作步驟： 禾柏CRP-散射比 濁法 艾克美CRP-熒光 免疫法 奧普CRP-金標法 凱創CRP-金標法 熱景CRP-上轉發光法 檢驗科需要項目和方法 檢測簡單方便 檢測快速，成本低， 高的特異性和敏感性 能夠反映疾病的嚴重程度 早期準確診斷 反映預后和治療的療效 全自動 信息化 熒光免疫法 干式(POCT) 國內代表萬孚 特點：專一激發光及雙抗體保證高特 異性；信號級聯放大保證高靈敏度 p光路特異（專一激發光和吸收光），吸 收光背景干凈，光信號特異性高 p熒光微球共價標記：偶聯效率高，級聯 放大熒光信號，靈敏度高，量程大 p夾心法：免疫反應特異性較高 常見免疫學檢測方法 方法學/免疫學 標記物 檢測方法 代表廠家 舉例 POC T 熒光 定量 熒光免疫 層析 雙抗體夾 心法 異硫氰 酸熒光 素 熒光強度 萬孚、艾 克美 時間分辨 免疫層析 雙抗體夾 心法 鑭系