.,1,本標準是對水質銨的測定納氏試劑比色法（GB747987）的修訂。,水質氨氮的測定納氏試劑分光光度法,.,2,適用范圍,本標準適用于地表水、地下水、生活污水和工業廢水中氨氮的測定。當水樣體積為50ml，使用20mm比色皿時，本方法的檢出限為0.025mg/L，測定下限為0.10mg/L，測定上限為2.0mg/L（均以N計）。注：檢出限是指產生一個能可靠地被檢出的分析信號所需要的某種元素的最小濃度或含量；測定下（上）限：在測定誤差能滿足預定要求的前提下，用特定方法能夠準確地定量測定待測物質的最小（大）濃度或量。,.,3,方法原理,以游離態的氨或銨離子等形式存在的氨氮與納氏試劑反應生成淡紅棕色絡合物，該絡合物的吸光度與氨氮含量成正比，于波長420nm（可見光）處測量吸光度。反應式:2K2HgI4+3KOH+NH3NH2Hg2IO+7KI+2H2O,.,4,儀器設備,可見分光光度計：具20mm比色皿。氨氮蒸餾裝置：由500ml凱式燒瓶、氮球、直形冷凝管和導管組成，冷凝管末端可連接一段適當長度的滴管，使出口尖端浸入吸收液液面下。亦可使用500ml蒸餾燒瓶。比色皿可見分光光度計,.,5,分光光度計,概念：分光光度計，又稱光譜儀(spectrometer)，是將成分復雜的光，分解為光譜線的科學儀器。使用的原理：分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。其特點是靈敏度高；準確度高；測量范圍廣；在一定條件下，可同時測定水樣中兩種或兩種以上的物質組分含量等。,.,6,比色皿,1.簡介：比色皿一般為長方體，其底及兩側為磨毛玻璃,另兩面為光學玻璃制成的透光面采用熔融一體、玻璃粉高溫燒結和膠粘合而成。2.比色皿的光程：透光向的內徑增加比色皿光程的意義比爾朗伯定律數學表達式：A=KbcA為吸光度；K為摩爾吸收系數,它與吸收物質的性質及入射光的波長有關；c為吸光物質的濃度；b為吸收層厚度,也就是光程.從公式可以看出,光程越大,吸光度越大。,.,7,使用試劑,無氨水硼酸（H3BO3）溶液，=20g/L輕質氧化鎂（MgO）溴百里酚藍指示劑，=0.5g/L鹽酸淀粉-碘化鉀試紙納氏試劑氨氮標準溶液酒石酸鉀鈉溶液（=500g/L）硫代硫酸鈉溶液（=3.5g/L）硫酸鋅溶液（=100g/L）氫氧化鈉溶液，（=250g/L）氫氧化鈉溶液，c(NaOH)=1mol/L鹽酸溶液，c(HCl)=1mol/L,.,8,重要試劑的配置方法,一.無氨水（在無氨環境中用下述方法之一制備）1.離子交換法蒸餾水通過強酸性陽離子交換樹脂（氫型）柱，將流出液收集在帶有磨口玻璃塞的玻璃瓶內。每升流出液加10g同樣的樹脂，以利于保存。2.蒸餾法在1000ml的蒸餾水中，加0.1ml硫酸（=1.84g/ml），在全玻璃蒸餾器中重蒸餾，棄去前50ml餾出液，然后將約800ml餾出液收集在帶有磨口玻璃塞的玻璃瓶內。每升餾出液加10g強酸性陽離子交換樹脂（氫型）。3.純水器法用市售純水器臨用前制備。,.,9,2.納氏試劑1.二氯化汞-碘化鉀-氫氧化鉀（HgCl2-KI-KOH）溶液稱取15.0g氫氧化鉀（KOH），溶于50ml水中，冷卻至室溫。稱取5.0g碘化鉀（KI），溶于10ml水中，在攪拌下，將2.50g二氯化汞（HgCl2）粉末分多次加入碘化鉀溶液中，直到溶液呈深黃色或出現淡紅色沉淀溶解緩慢時，充分攪拌混合，并改為滴加二氯化汞飽和溶液，當出現少量朱紅色沉淀不再溶解時，停止滴加。在攪拌下，將冷卻的氫氧化鉀溶液緩慢地加入到上述二氯化汞和碘化鉀的混合液中，并稀釋至100ml，于暗處靜置24h，傾出上清液，貯于聚乙烯瓶內，用橡皮塞或聚乙烯蓋子蓋緊，存放暗處，可穩定1個月。,.,10,2.碘化汞-碘化鉀-氫氧化鈉（HgI2-KI-NaOH）溶液稱取16.0g氫氧化鈉（NaOH），溶于50ml水中，冷卻至室溫。稱取7.0g碘化鉀（KI）和10.0g碘化汞（HgI2），溶于水中，然后將此溶液在攪拌下，緩慢加入到上述50ml氫氧化鈉溶液中，用水稀釋至100ml。貯于聚乙烯瓶內，用橡皮塞或聚乙烯蓋子蓋緊，于暗處存放，有效期1年。注：為了保證納氏試劑有良好的顯色能力，配制時務必控制HgCl2的加入量，至微量HgI2紅色沉淀不再溶解時為止。配制100ml納氏試劑所需HgCl2與KI的用量之比約為2.35。在配制時為了加快反應速度、節省配制時間，可低溫加熱進行，防止HgI2紅色沉淀的提前出現。,.,11,酒石酸鉀鈉溶液，=500g/L。制取：稱取50.0g酒石酸鉀鈉（KNaC4H6O64H2O）溶于100ml水中，加熱煮沸以驅除氨，充分冷卻后稀釋至100ml。注：酒石酸鉀鈉試劑中銨鹽含量較高時，僅加熱煮沸或加納氏試劑沉淀不能完全除去氨。此時采用加入少量氫氧化鈉溶液，煮沸蒸發掉溶液體積的20%30%，冷卻后用無氨水稀釋至原體積。三.氨氮標準溶液1.氨氮標準貯備溶液，N=1000g/ml。稱取3.8190g氯化銨（NH4Cl，優級純，在100105干燥2h），溶于水中，移入1000ml容量瓶中，稀釋至標線，可在25保存1個月。2.氨氮標準工作溶液，N=10g/ml。吸取5.00ml氨氮標準貯備溶液（4.14.1）于500ml容量瓶中，稀釋至刻度。臨用前配制。,.,12,水樣及處理,1.樣品采集與保存水樣采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶內，要盡快分析。如需保存，應加硫酸使水樣酸化至pH2，25下可保存7d。2.樣品的干擾及消除水樣中含有懸浮物、余氯、鈣鎂等金屬離子、硫化物和有機物時會產生干擾，含有此類物質時要作適當處理，以消除對測定的影響。去除余氯：若樣品中存在余氯，可加入適量的硫代硫酸鈉溶液去除，用淀粉-碘化鉀試紙檢驗余氯是否除盡。（每加0.5ml可去除0.25mg余氯）去除金屬離子：在顯色時加入適量的酒石酸鉀鈉溶液，可消除鈣鎂等金屬離子的干擾。,.,13,若水樣渾濁或有顏色時可用預蒸餾法或絮凝沉淀法處理。,預蒸餾法,1.步驟：將50ml硼酸溶液移入接收瓶內，確保冷凝管出口在硼酸溶液液面之下。分取250ml樣品，移入燒瓶中，加幾滴溴百里酚藍指示劑，必要時，用氫氧化鈉溶液或鹽酸溶液調整pH至6.0（指示劑呈黃色）7.4（指示劑呈藍色），加入0.25g輕質氧化鎂及數粒玻璃珠，立即連接氮球和冷凝管。加熱蒸餾，使餾出液速率約為10ml/min，待餾出液達200ml時，停止蒸餾，加水定容至250ml。2.注意：蒸餾過程中，某些有機物很可能與氨同時餾出，對測定有干擾，其中有些物質（如甲醛）可以在酸性條件（pH1）下煮沸除去。在蒸餾剛開始時，氨氣蒸出速度較快，加熱不能過快，否則造成水樣暴沸，餾出液溫度升高，氨吸收不完全。餾出液速率應保持在10ml/min左右。蒸餾過程中，某些有機物很可能與氨同時餾出，對測定仍有干擾，其中有些物質（如甲醛）可以在酸性條件（pH1）下煮沸除去。部分工業廢水，可加入石蠟碎片等做防沫劑。3.蒸餾器清洗向蒸餾燒瓶中加入350ml水，加數粒玻璃珠，裝好儀器，蒸餾到至少收集了100ml水，將餾出液及瓶內殘留液棄去。,.,14,絮凝沉淀,100ml樣品中加入1ml硫酸鋅溶液和0.10.2ml氫氧化鈉溶液，調節pH約為10.5，混勻，放置使之沉淀，傾取上清液分析。必要時，用經水沖洗過的中速濾紙過濾，棄去初濾液20ml。也可對絮凝后樣品離心處理。濾紙中含有一定量的可溶性銨鹽，定量濾紙中含量高于定性濾紙，建議采用定性濾紙過濾，過濾前用無氨水少量多次淋洗（一般為100ml）。這樣可減少或避免濾紙引入的測量誤差。,.,15,標準曲線繪制,在8個50ml比色管中，分別加入0.00、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00和10.00ml氨氮標準工作溶液，其所對應的氨氮含量分別為0.0、5.0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0和100g，加水至標線。加入1.0ml酒石酸鉀鈉溶液，搖勻，再加入納氏試劑1.5ml或1.0ml搖勻。放置10min后，在波長420nm下，用20mm比色皿，以水作參比，測量吸光度。以空白校正后的吸光度為縱坐標，以其對應的氨氮含量（g）為橫坐標，由測得的吸光度,減去零濃度空白管的吸光度后,得到校正吸光度繪制其校準曲線,.,16,樣品測定,1.清潔水樣：直接取50ml，按與校準曲線相同的步驟測量吸光度。2.有懸浮物或色度干擾的水樣：取經預處理的水樣50ml（若水樣中氨氮質量濃度超過2mg/L，可適當少取水樣體積），按與校準曲線相同的步驟測量吸光度。注：經蒸餾或在酸性條件下煮沸方法預處理的水樣，須加一定量氫氧化鈉溶液，調節水樣至中性，用水稀釋至50ml標線，再按與校準曲線相同的步驟測量吸光度。3.空白試驗用水代替水樣，按與樣品相同的步驟進行前處理和測定。試劑空白的吸光度應不超過0.030（10mm比色皿）。,.,17,結果計算,結果計算水中氨氮的質量濃度計算：式中：N水樣中氨氮的質量濃度（以N計），mg/L；As水樣的吸光度；Ab空白試驗的吸光度；a校準曲線的截距；b校準曲線的斜率；V試料體積，ml。,.,18,準確度和精密度,氨氮濃度為1.21mg/L的標準溶液，重復性限為0.028mg/L，再現性限為0.075mg/L，回收率在94%104%。氨氮濃度為1.47mg/L的標準溶液，重復性限為0.024mg/L，再現性限為0.066mg/L，回收率在95%105%。重復性限：是用本方法在正常和正確操作情況下，由同一操作人員，在同一實驗室內，使用同一儀器，并在短期內，對相同試樣所作兩個單次測試結果，在95%概率水平兩個獨立測試結果的最大差值。再現性限：是