遺傳學實驗報告 題目：三點測交 班級：歷生本 組員：董軻 201023130107 孫菲 201023130110 任晴 201023130119 實驗時間： 2012年11月3日 教師簽字： 目錄實驗目的-3實驗原理-3實驗材料及用品-4實驗步驟-5注意事項-5實驗結果-6實驗分析-7實驗目的： 1.掌握三點測交的原理及方法。 2.學習三點測交的數據統計處理及分析方法。 3.了解繪制遺傳學圖的原理和方法。實驗原理： 連鎖交換定律：處在同一染色體上的兩個或兩個以上基因遺傳時，聯合在一起的頻率大于重新組合的頻率。重組類型的產生是由于配子形成過程中，同源染色體的非姊妹染色單體間發生了局部交換的結果。 三點測交：三點測交就是通過一次雜交和一次測交，同時確定三對等位基因（即三個基因位點）的排列順序和它們之間的遺傳距離，是基因定位的常用方法。主要過程是：用三顯性純合體和三隱性純合個體雜交，獲得三基因雜合體（F1），再使F1與三隱性基因純合體測交，通過對測交后代表現型及其數目的分析，分別計算三個連鎖基因之間的交換值，從而確定這三個基因在同一染色體上的順序和距離。 現用野生型18號果蠅與突變型6號果蠅雜交，6號作母本，18號作父本。由于小翅(miniature)、白眼(white)、焦剛毛(singed)，由位于X染色體上的三個隱性基因m，w和sn3決定。故得到的F1代中雌果蠅性狀均為長翅、紅眼和直剛毛，而雄果蠅性狀均為小翅、白眼和焦剛毛。F1代中雌果蠅為三雜合體，雄果蠅為隱形純合體。F1代雌雄果蠅自交，在產生配子的過程中，雌果蠅的兩條X染色體發生交叉互換，可以產生8種配子，由于各基因間的距離不一樣，產生的8中配子數目不等，而雄果蠅只產生2種配子，且無論哪種配子與雌果蠅產生的配子結合，后代的性狀均與雌配子的基因型相吻合。通過對F3代果蠅性狀的觀察和計數可以推知三個基因間的距離。 如果兩個基因間的單交換并不影響鄰近兩個基因的單交換，那么預期的雙交換頻率應當等于兩個單交換頻率的乘積，但實際上觀察到的雙交換值往往低于預期值，因為每發生一次單交換，對它鄰近位置也發生交換的機會產生影響，這叫干涉。一般用并發率表示干涉的大小。實驗材料及用品：黑腹果蠅品系：野生型18號果蠅（+） 突變型6號果蠅（w sn3 m) 儀器：恒溫培養箱、顯微鏡、解剖鏡、培養瓶、棉花塞、麻醉瓶、毛筆或解剖針、潔凈的白瓷板。試劑：乙醚等實驗步驟：1.11月4日21:00將6號種蠅瓶中的成蠅全部殺死。2.11月5日7:00選擇處女蠅3只， 15:00選擇處女蠅2只。3.11月5日15:00交配6號18號。4.11月12日放親本。5.11月15日21:00 F1自交（1號瓶）， 16日19:00 F1自交（2號瓶）， 17日11:00 F1自交（3號瓶）。6.11月23日16:30 1號瓶、2號瓶放親本。 24日20:00 3號瓶放親本。7.11月26日出現F2代成蠅，觀察并計數。注意事項：1.親代雜交時母本要選6號，父本選18號，否則F1代雜交時還需要選擇處女蠅，給實驗帶來不必要的麻煩。2.親代雜交時要選擇處女蠅，F1自交時不需要處女蠅，選擇處女蠅時要嚴格控制時間。3.在培養瓶內出現蛹時（下一代果蠅羽化之前），一定要將親本除去，否則混入下一代中，影響計數。4.在選擇果蠅進行雜交時，要將新培養瓶橫放，將果蠅放到瓶壁上，等果蠅蘇醒后，再將培養瓶豎立，以防止果蠅粘在培養基上，影響交配。5.在選擇雜交果蠅時，要輕度麻醉，以確保果蠅可以蘇醒，不影響交配；在觀察F2代性狀并計數時，要重度麻醉，以免在觀察計數過程中果蠅蘇醒，影響計數。6.F2代的計數時間不要超過13天，確保所計數的果蠅中沒有F3代。實驗結果：F2代性狀觀察表瓶號1號瓶2號瓶3號瓶日期11/2611/2711/2912/112/312/411/2611/2711/2811/2912/111/2611/2711/2912/112/3+118610191131318100292810863999123159131451414221313wsn3m11041018410043112181552151215934656661613101+m00012102000022110102200241126201wsn3+04101011200203020423341112023631+sn3m03124030010103001010110221031133w+22203020224452132011202531300222+sn3+00000000000000000000000000000000w+m00000000000000000001000100000000實驗分析：1.F2 觀察結果記錄表：測交后代表型觀察數 表型間是否重組w-sn3w-msn3-m+ + +366-w sn3 m237-+ + m36-+w sn3 + 53-+ sn3 m38+-w + + 60+-+ sn3 + 0+-+w + m2+-+合計重組值（%）79310012.618723.59111.4根據表中的重組值可以繪出遺傳學圖：12.611.4 M sn3 W24 m 、sn3 、W在X染色體上的相對位置由圖可知m 、sn3、W在X染色體上的相對位置和它們之間的圖距。2.計算并發率和干涉： 如果兩個基因間的單交換并不影響鄰近兩個基因的單交換。那么預期的雙交換頻率應等于兩個單交換頻率的乘積。但實際上觀察到的雙交換頻率往往低于預期值。因為每發生一次單交換，它鄰近也發生一次交換的機會就減少一些，這叫做干