第十單元生物技術(shù)與工程單元練（時(shí)間：75分鐘，滿分：100分）一、選擇題（本題共15小題，每小題3分，共45分。）1．從自然界選育出優(yōu)良菌株，再通過發(fā)酵工程大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)制成的活菌或其代謝物產(chǎn)品等正應(yīng)用于現(xiàn)代農(nóng)牧業(yè)的很多方面。下列敘述不屬于該方面應(yīng)用的是（

）A．生產(chǎn)微生物肥料增進(jìn)土壤肥力，改良土壤結(jié)構(gòu)B．將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再通過發(fā)酵工程生產(chǎn)乙型肝炎疫苗C．利用白僵菌防治玉米螟、松毛蟲等蟲害D．用單細(xì)胞蛋白制成微生物飼料【答案】B【分析】發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、種子擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純(生物分離工程)等方面?！驹斀狻緼、生產(chǎn)微生物肥料增進(jìn)土壤肥力，改良土壤結(jié)構(gòu)，屬于發(fā)酵工程在農(nóng)牧業(yè)的應(yīng)用，A正確；B、通過發(fā)酵工程生產(chǎn)乙型肝炎疫苗屬于發(fā)酵工程在醫(yī)藥衛(wèi)生方面的應(yīng)用，B錯(cuò)誤；C、利用白僵菌防治玉米螟、松毛蟲等蟲害，屬于發(fā)酵工程在農(nóng)牧業(yè)的應(yīng)用，C正確；D、用單細(xì)胞蛋白制成微生物飼料，屬于發(fā)酵工程在農(nóng)牧業(yè)的應(yīng)用，D正確。故選B。2．下列有關(guān)破傷風(fēng)芽孢桿菌的培養(yǎng)，敘述錯(cuò)誤的是（

）A．培養(yǎng)基中的蛋白胨提供的主要營(yíng)養(yǎng)是氮源和維生素B．培養(yǎng)基采用濕熱滅菌，培養(yǎng)采用干熱滅菌C．在培養(yǎng)基中加入青霉素可促進(jìn)破傷風(fēng)芽孢桿菌生長(zhǎng)，抑制真菌生長(zhǎng)D．將樣品與適宜溫度的培養(yǎng)基混合后倒入培養(yǎng)皿中，菌落主要出現(xiàn)在平板內(nèi)部【答案】C【分析】微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。對(duì)異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營(yíng)養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用?！驹斀狻緼、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，培養(yǎng)基中的蛋白胨主要提供氮源和維生素，A正確；B、滅菌是指用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌，培養(yǎng)基采用濕熱滅菌，培養(yǎng)皿采用干熱滅菌，B正確；C、青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成，所以添加青霉素的培養(yǎng)基能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，不影響真菌生長(zhǎng)，C錯(cuò)誤；D、由于破傷風(fēng)芽孢桿菌屬于厭氧型微生物，因此將樣品與適宜溫度的培養(yǎng)基混合后倒入培養(yǎng)皿中，菌落主要出現(xiàn)在平板內(nèi)部，D正確。故選C。3．某同學(xué)選用新鮮成熟的葡萄制作果酒，然后在果酒基礎(chǔ)上制作果醋，下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．果酒發(fā)酵時(shí)，每日放氣需迅速，避免空氣回流入發(fā)酵容器B．果酒發(fā)酵時(shí)，用斐林試劑檢測(cè)葡萄汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日增多C．果醋發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時(shí)D．果醋發(fā)酵時(shí)，用重鉻酸鉀測(cè)定醋酸含量變化，溶液灰綠色逐日加深【答案】C【分析】參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷！驹斀狻緼、酒精發(fā)酵是利用酵母菌的無氧呼吸，隨著果酒發(fā)酵的進(jìn)行，裝置內(nèi)會(huì)產(chǎn)生氣體（二氧化碳），容器內(nèi)壓強(qiáng)大于外界，所以空氣不會(huì)回流，每日放氣需迅速，避免發(fā)酵裝置中氣壓過大，造成爆炸，A錯(cuò)誤；B、葡萄汁是紅色，不能用斐林試劑檢測(cè)，同時(shí)果酒發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液中的葡萄糖不斷被消耗，因此用斐林試劑檢測(cè)葡萄汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日減少，B錯(cuò)誤；C、果酒制作會(huì)產(chǎn)生酒精和二氧化碳。在果酒基礎(chǔ)上制作果醋，酒精與氧氣發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生醋酸和水，幾乎沒有氣泡產(chǎn)生，發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時(shí)，C正確；D、重鉻酸鉀用于檢測(cè)酒精，不能用于測(cè)定醋酸含量，D錯(cuò)誤。故選C。4．普通六倍體小麥基因組龐大，研究相對(duì)困難。擬南芥基因組測(cè)序已完成，遺傳背景相對(duì)清晰。用紫外線分別照射普通小麥愈傷組織的原生質(zhì)體30s、1min、2min，再與擬南芥原生質(zhì)體進(jìn)行融合，可將小麥染色體小片段插入擬南芥基因組。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．紫外線照射可隨機(jī)破壞染色體結(jié)構(gòu)B．可利用滅活病毒促進(jìn)兩種原生質(zhì)體融合C．需設(shè)置單獨(dú)培養(yǎng)的未融合原生質(zhì)體作為對(duì)照組D．借助擬南芥的遺傳背景對(duì)小麥基因組進(jìn)行研究【答案】B【分析】染色體變異包括染色體結(jié)構(gòu)變異和染色體數(shù)目變異，其中數(shù)目變異中又分為整倍性變異和非整倍性變異?？蛇z傳變異包括：基因突變、基因重組、染色體變異，這些變異的遺傳物質(zhì)均發(fā)生了改變。【詳解】A、紫外線照射可隨機(jī)破壞染色體結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致發(fā)生染色體變異，A正確；B、可利用PEG促進(jìn)兩種原生質(zhì)體融合，滅活病毒只能用于動(dòng)物細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、為了排除無關(guān)變量的影響，對(duì)照組為單獨(dú)培養(yǎng)的未融合原生質(zhì)體，C正確；D、將小麥染色體小片段插入擬南芥基因組，借助擬南芥的遺傳背景對(duì)小麥基因組進(jìn)行研究，D正確。故選B。5．下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞工程操作的敘述，正確的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入瓊脂B．單克隆抗體制備過程中，第一次篩選的目的是獲得足夠數(shù)量的能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞C．干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等D．體細(xì)胞核移植過程中只能通過顯微操作方法去除細(xì)胞核【答案】C【分析】動(dòng)物細(xì)胞工程有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、單克隆抗體的制備等?！驹斀狻緼、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般用液體培養(yǎng)基，不需要加入瓊脂，A錯(cuò)誤；B、單克隆抗體制備過程中，第一次篩選是為了獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，C正確；D、目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法，也可以采用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法，D錯(cuò)誤。故選C。6．據(jù)統(tǒng)計(jì)，不孕不育患病率目前已經(jīng)高達(dá)18%。體外受精技術(shù)是胚胎工程的技術(shù)之一，下列有關(guān)胚胎工程的說法錯(cuò)誤的是（

）A．試管嬰兒技術(shù)繁殖后代屬于無性繁殖，為某些不孕夫婦提供生育機(jī)會(huì)B．判斷培養(yǎng)液中卵子是否受精通常以觀察到兩個(gè)極體或雌、雄原核作為標(biāo)志C．胚胎移植實(shí)質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移D．胚胎移植時(shí)可選取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳病基因檢測(cè)【答案】A【分析】1、試管嬰兒是指用人工的方法使精子與卵細(xì)胞在體外的試管中結(jié)合形成受精卵并進(jìn)行早期胚胎發(fā)育，然后把胚胎移植進(jìn)母體的子宮內(nèi)，胚胎和胎兒的發(fā)育在子宮中進(jìn)行，直至發(fā)育成熟，分娩產(chǎn)出?？梢?，“試管嬰兒”的生命始于一個(gè)細(xì)胞--受精卵，受精的部位是試管，其胚胎發(fā)育的主要場(chǎng)所是子宮，試管只是初期發(fā)育的場(chǎng)所。2、生殖細(xì)胞包括睪丸產(chǎn)生的精子和卵巢產(chǎn)生的卵細(xì)胞，含精子的精液進(jìn)入陰道后，精子緩慢地通過子宮，在輸卵管內(nèi)與卵細(xì)胞相遇，有一個(gè)精子進(jìn)入卵細(xì)胞，與卵細(xì)胞相融合，形成受精卵。【詳解】A、試管嬰兒是指用人工的方法使精子與卵細(xì)胞在體外的試管中結(jié)合形成受精卵并進(jìn)行早期胚胎發(fā)育，然后把胚胎移植進(jìn)母體的子宮內(nèi)，胚胎和胎兒的發(fā)育在子宮中進(jìn)行，直至發(fā)育成熟，分娩產(chǎn)出，屬于有性生殖，A錯(cuò)誤；B、多數(shù)哺乳動(dòng)物的第一極體不進(jìn)行減數(shù)分裂Ⅱ，因而不會(huì)形成兩個(gè)第二極體，在實(shí)際胚胎工程操作中，常以觀察到兩個(gè)極體或者雄、雄原核作為受精的標(biāo)志，B正確；C、胚胎移植是將胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動(dòng)物體內(nèi)，實(shí)質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移，C正確；D、在分割囊胚階段的胚胎時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則影響胚胎的發(fā)育，可以對(duì)滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析、遺傳病基因檢測(cè)等，D正確。故選A。7．T4DNA連接酶可將任意2個(gè)具有相同黏性末端的DNA片段連接在一起。該反應(yīng)過程需消耗ATP，其水解產(chǎn)生的腺苷一磷酸（AMP）通過共價(jià)鍵與酶相連，隨后AMP轉(zhuǎn)移至DNA片段，進(jìn)而完成連接反應(yīng)。下列敘述正確的是（）A．T4DNA連接酶的底物種類較多，故其無專一性B．T4DNA連接酶催化反應(yīng)后，其組成成分已改變C．ATP在該反應(yīng)過程中可能打開兩個(gè)特殊的化學(xué)鍵D．T4DNA連接酶需保存于最適溫度和pH條件下【答案】C【分析】1、DNA連接酶分為E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。這二者都能連接黏性末端，此外T4DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時(shí)的效率比較低。2、酶的特性：專一性、高效性和作用條件溫和。3、酶是催化劑，在催化反應(yīng)前后性質(zhì)不變?！驹斀狻緼、T4DNA連接酶有專一性，A錯(cuò)誤；B、酶在催化反應(yīng)前后性質(zhì)不變，故T4DNA連接酶催化反應(yīng)后，其組成成分不變，B錯(cuò)誤；C、ATP水解產(chǎn)生AMP需要打開兩個(gè)特殊的化學(xué)鍵，結(jié)合題干“該反應(yīng)過程需消耗ATP，其水解產(chǎn)生的腺苷一磷酸（AMP）通過共價(jià)鍵與酶相連”可推測(cè)ATP在該反應(yīng)過程中可能打開兩個(gè)特殊的化學(xué)鍵，C正確；D、T4DNA連接酶需在低溫和最適pH條件下保存，D錯(cuò)誤。故選C。8．干擾素是一種廣譜抗病毒制劑，是具有多種功能的活性蛋白質(zhì)（主要是糖蛋白），下圖為通過基因工程生產(chǎn)干擾素的部分操作，圖中①②③④表示相關(guān)操作過程。下列相關(guān)分析錯(cuò)誤的是（）

A．圖中過程①③中都需要用到限制性內(nèi)切核酸酶B．過程②需用熱穩(wěn)定性DNA聚合酶，②操作的原理是DNA半保留復(fù)制C．過程③操作要注意干擾素基因上有啟動(dòng)子、終止子及標(biāo)記基因等D．過程④為目的基因的導(dǎo)入，最后必須對(duì)干擾素進(jìn)行功能活性鑒定【答案】C【分析】基因工程又稱基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品?；蚬こ痰牟僮鞑襟E：1.提取目的基因；2.目的基因與運(yùn)載體結(jié)合；3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；4.目的基因的檢測(cè)和表達(dá)【詳解】A、圖中①表示獲取目的基因過程，②表示擴(kuò)增目的基因，③表示構(gòu)建基因表達(dá)載體過程，④表示導(dǎo)入目的基因過程，其中在獲取目的基因、構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中均需用到限制酶，A正確；B、②表示通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其利用原理是DNA半保留復(fù)制，該過程需用到耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶），B正確；C、過程③操作要注意最終構(gòu)建的基因表達(dá)載體上有干擾素基因、啟動(dòng)子、終止子及標(biāo)記基因，C錯(cuò)誤；D、過程④為目的基因?qū)耄詈笮鑼?duì)酵母菌分泌的干擾素與人體內(nèi)干擾素的功能活性進(jìn)行比較，以確定轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的功能活性與人體的相同，D正確。故選C。9．基因編輯技術(shù)CRISPR/Cas9系統(tǒng)包括兩個(gè)組分：一個(gè)是人工合成的短鏈RNA（sgRNA）和一個(gè)來自細(xì)菌的核酸酶Cas9。sgRNA與目的基因中希望被編輯的DNA序列相結(jié)合，然后Cas9切割該DNA序列，使DNA雙鏈斷裂，此時(shí)向細(xì)胞中加入大量可用于修復(fù)的模板DNA，細(xì)胞就會(huì)以這些片段為模板合成DNA，從而使特定的堿基序列被引入基因組中、下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．Cas9決定了基因編輯的位點(diǎn)和基因編輯的效率B．基因編輯技術(shù)可以破壞某個(gè)基因使其失去功能C．基因突變是不定向的而基因編輯能定向改變基因D．Cas9類似限制酶能夠使雙鏈DNA中的磷酸二酯鍵斷裂【答案】A【分析】1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；目的基因的檢測(cè)與表達(dá)。2、從分子水平上檢測(cè)目的基因的方法：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因－－DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA－－分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)－－抗原－抗體雜交技術(shù)。【詳解】A、由題干可知，Cas9只能切割與sgRNA結(jié)合的DNA序列，所以決定基因編輯位點(diǎn)的是sgRNA，而不是Cas9，A錯(cuò)誤；B、基因編輯技術(shù)可以修改特定基因的堿基排列順序，因此可以通過去除啟動(dòng)子等方式使得某個(gè)基因無法進(jìn)行表達(dá)，B正確；C、基因突變具有不定向性，而基因編輯技術(shù)可以對(duì)特定基因進(jìn)行特定的修改，是定向改變，C正確；D、Cas9和限制酶一樣，都可以切割DNA，使得DNA雙鏈斷裂，說明二者都能使得DNA中的磷酸二酯鍵斷裂，D正確。故選A。10．水蛭是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥材，主要藥理成分水蛭素是具有抗凝血作用的蛋白質(zhì)。通過蛋白質(zhì)工程操作用賴氨酸替代水蛭素第47位的天冬酰胺，可提高其抗凝血活性，相關(guān)流程如下圖，據(jù)圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是（

）

A．上述研究中目前直接的操作對(duì)象是水蛭素基因B．蛋白質(zhì)工程進(jìn)行中難度最大的操作是改造水蛭素基因C．指導(dǎo)c形成的新水蛭素基因的堿基序列可能不同D．改造后的水蛭素需要與天然水蛭素進(jìn)行抗凝血活性比較【答案】B【分析】蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列?！驹斀狻緼、圖示為蛋白質(zhì)工程，蛋白質(zhì)工程直接的操作對(duì)象是水蛭素基因，A正確；B、蛋白質(zhì)工程進(jìn)行中難度最大的操作是根據(jù)蛋白質(zhì)的功能設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，B錯(cuò)誤；C、由于新水蛭素經(jīng)過了重新設(shè)計(jì)，因而指導(dǎo)c形成的新水蛭素基因的堿基序列可能發(fā)生改變，C正確；D、題意顯示，通過蛋白質(zhì)工程操作用賴氨酸替代水蛭素第47位的天冬酰胺，可提高其抗凝血活性，因此需要進(jìn)行改造后的水蛭素需要與天然水蛭素進(jìn)行抗凝血活性比較，從而做出鑒定，D正確。故選B。11．草甘膦是一種可以殺滅多種植物（包括農(nóng)作物）的除草劑。其殺滅植物的原理是破壞植物葉綠體中的EPSPS合成酶。通過轉(zhuǎn)基因的方法，讓農(nóng)作物產(chǎn)生更多的EPSPS合成酶，就能抵抗草甘膦，從而不被草甘膦殺死。下列有關(guān)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆培育的分析，正確的是（

）A．可通過噴灑草甘膦來檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因大豆是否培育成功B．只要EPSPS合成酶基因進(jìn)入大豆細(xì)胞，大豆就會(huì)表現(xiàn)出抗草甘膦性狀C．只能以大豆的受精卵作為受體細(xì)胞D．抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆食品都是不安全的【答案】A【分析】植物基因工程的受體細(xì)胞可以是受精卵也可以是體細(xì)胞，動(dòng)物基因工程的受體細(xì)胞大多數(shù)為受精卵。轉(zhuǎn)基因技術(shù)是否成功是要看能否表現(xiàn)出新性狀，而不是基因是否導(dǎo)入；成功導(dǎo)入的基因存在轉(zhuǎn)錄翻譯能否正常發(fā)生的問題，同時(shí)也存在翻譯的蛋白質(zhì)是否有活性等問題。對(duì)轉(zhuǎn)基因植物需進(jìn)行個(gè)體水平檢測(cè)，如題可通過噴施草甘膦來檢測(cè)。食品安全性問題是一直是存在爭(zhēng)論的問題，我們要理性看待?！驹斀狻緼、轉(zhuǎn)基因大豆能產(chǎn)生更多的EPSPS合成酶，能抵抗草甘膦，不被草甘膦殺死，A正確；B、EPSPS合成酶基因進(jìn)入大豆細(xì)胞后不一定能成功表達(dá)，未必能變現(xiàn)出抗草甘膦性狀，B錯(cuò)誤；C、植物細(xì)胞的全能性較高，可將體細(xì)胞作為受體細(xì)胞，利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因大豆，C錯(cuò)誤；D、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，食品需要經(jīng)過一系列的安全評(píng)估，通過評(píng)估的是安全的，D錯(cuò)誤。故選A。12．實(shí)驗(yàn)人員將一段外源DNA片段（包含約850個(gè)基因）與絲狀支原體（一種原核生物）的DNA進(jìn)行重組后，植入大腸桿菌，制造出一種“新的生命”。該生物能夠正常生長(zhǎng)、繁殖。下列有關(guān)該技術(shù)應(yīng)用的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A．該技術(shù)可以制造某些微生物，用于生產(chǎn)藥品、制造染料、降解有毒物質(zhì)等B．由于存在生殖隔離，因此人造生命進(jìn)入自然界并不會(huì)破壞生物多樣性C．人造生命擴(kuò)散到自然界，有可能造成環(huán)境安全性問題D．此項(xiàng)技術(shù)可能被用來制造生物武器，從而危及人類安全【答案】B【分析】根據(jù)題中“將一段外源DNA片段(包含約850個(gè)基因)與絲狀支原體(一種原核生物)的DNA進(jìn)行重組后，植入大腸桿菌”，屬于基因工程，原理是基因重組?！驹斀狻緼、通過導(dǎo)入不同的目的基因，可用于生產(chǎn)藥品、制造染料、降解有毒物質(zhì)，A正確；B、“新的生命”是一個(gè)新的物種，由于其沒有天敵，進(jìn)入自然界后，會(huì)破壞生物的多樣性，B錯(cuò)誤；C、人造生命擴(kuò)散到自然界，競(jìng)爭(zhēng)能力強(qiáng)，因此能成為“入侵的外來物種”，有可能造成環(huán)境安全性問題，C正確；D、利用基因工程技術(shù)，在一些不致病的微生物體內(nèi)插入制備基因，或在一些致病的細(xì)菌或者病毒中插入能對(duì)抗普通疫苗或藥物的基因，就會(huì)培育出新的致病微生物或新的抗藥性增強(qiáng)的致病微生物，這些微生物可制成生物武器，D正確。故選B。13．下圖是對(duì)某生物B基因進(jìn)行基因編輯的過程，該過程中用sgRNA指引內(nèi)切核酸酶Cas9結(jié)合到特定的靶位點(diǎn)。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．sgRNA能與靶基因上特定堿基序列互補(bǔ)B．Cas9可特異性識(shí)別并斷裂核苷酸之間的磷酸二酯鍵C．基因突變是不定向的而基因編輯能定向改變基因D．使用該項(xiàng)基因編輯技術(shù)來預(yù)防人的某些疾病時(shí)需經(jīng)嚴(yán)格審查【答案】B【分析】用sgRNA可指引內(nèi)切核酸酶Cas9結(jié)合到特定的切割位點(diǎn)并進(jìn)行切割，進(jìn)而在Ⅰ、Ⅱ之間和Ⅱ、Ⅲ之間切割，被剪下的Ⅱ被水解，Ⅰ和Ⅲ連接形成新的B基因?！驹斀狻緼、sgRNA指引內(nèi)切核酸酶Cas9結(jié)合到特定的靶位點(diǎn)，所以sgRNA能與靶基因上特定堿基序列互補(bǔ)，A正確；B、Cas9可特?cái)嗔押塑账嶂g的磷酸二酯鍵，sgRNA具有特異性識(shí)別的作用，B錯(cuò)誤；C、由于sgRNA指引內(nèi)切核酸酶Cas9結(jié)合到特定的靶位點(diǎn)，所以基因編輯能定向改變基因，而基因突變是不定向的，C正確；D、基因編輯技術(shù)存在一定的風(fēng)險(xiǎn)，一是基因組編輯技術(shù)本身存在著識(shí)別準(zhǔn)確性等方面的問題；二是對(duì)人類基因進(jìn)行“改造”時(shí)要嚴(yán)格遵守法律法規(guī)，不能違反人類的倫理道德，因此使用該項(xiàng)基因編輯技術(shù)來預(yù)防人的某些疾病時(shí)需要經(jīng)過嚴(yán)格的審批，D正確。故選B。14．當(dāng)前生物技術(shù)發(fā)展非常迅猛，很多生物技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)與我們的日常生活密切相關(guān)。下列有關(guān)生物技術(shù)的說法或做法不正確的是（

）A．消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面B．我國(guó)堅(jiān)決反對(duì)克隆人，不允許進(jìn)行任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)C．對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割時(shí)，必須對(duì)整個(gè)胚胎進(jìn)行均等分割D．胚胎工程繁育良種時(shí)，供體和受體母畜都要進(jìn)行同期發(fā)情處理【答案】C【分析】生物技術(shù)的安全性主要集中在生物安全、食物安全和環(huán)境安全三個(gè)方面。【詳解】A、生物武器威脅巨大，消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面，A正確；B、我國(guó)對(duì)待克隆人的態(tài)度：堅(jiān)決反對(duì)克隆人，不允許進(jìn)行任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，B正確；C、對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割時(shí)，必須對(duì)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割，C錯(cuò)誤；D、胚胎工程繁育良種時(shí)，供體和受體母畜都要進(jìn)行同期發(fā)情處理，保證胚胎移植入相同的生理環(huán)境，D正確；故選C。15．野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，下圖為純化某氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、E為菌落。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．圖中①②④為完全培養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基B．A操作的目的是提高突變率，增加突變株的數(shù)量C．B的正確操作是用涂布器蘸取菌液后均勻地涂布在②表面D．經(jīng)C過程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進(jìn)行純化培養(yǎng)【答案】C【分析】題圖分析，圖中首先利用稀釋涂布平板法分離經(jīng)過誘變的細(xì)菌，然后運(yùn)用將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中，分別是基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基；在基本培養(yǎng)基中，某氨基酸突變株不能生長(zhǎng)，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長(zhǎng)，據(jù)此可以選擇出氨基酸突變株。【詳解】A、野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，根據(jù)題干信息和圖形分析，圖中①②④為完全培養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基，A正確；B、紫外線可以提高突變的頻率，A操作的目的是提高突變菌株的濃渡，B正確；C、B操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面，再用涂布器將菌液均勻的涂布在②表面，C錯(cuò)誤；D、從圖中可看出，D在基本培養(yǎng)基中無法生長(zhǎng)，在完全培養(yǎng)基中可生長(zhǎng)，說明D是氨基酸缺陷型菌落，故經(jīng)C過程影印及培養(yǎng)后，可從④培養(yǎng)基中挑取D菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)，D正確。故選C。二、非選擇題（本題共5小題，共55分。）16．黃曲霉是常見的真菌，多見于發(fā)霉的糧食、糧制品及其它霉腐的有機(jī)物上，黃曲霉素是由黃曲霉產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，具有極強(qiáng)的毒性和致癌性。科研人員用黃曲霉素B1（AFB1）的結(jié)構(gòu)類似物——香豆素（CAO1）篩選出能高效降解AFB1的菌株，具體過程如圖所示，其中序號(hào)代表過程。請(qǐng)回答：

(1)為了篩選到AFB1降解菌，應(yīng)在上采樣。若將樣品稀釋液再稀釋10倍，具體操作過程是。篩選AFB1降解菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，圖中1號(hào)培養(yǎng)基的碳源是，過程③所需要的工具有（答出兩種）。(2)菌體對(duì)有機(jī)物的降解途徑有胞外分泌物降解和菌體吸附降解兩種。實(shí)驗(yàn)小組對(duì)降解菌的發(fā)酵液進(jìn)行離心，發(fā)現(xiàn)上清液中APBI的殘留率明顯低于菌沉淀液的?？赏茰y(cè)，菌體降解AFB1的途徑主要是。(3)經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)上清液中存在多種蛋白質(zhì)，為驗(yàn)證蛋白質(zhì)K是降解APB1的有效成分，科研小組設(shè)計(jì)了實(shí)驗(yàn)過程，如下表，表中①、②、③分別表示（用“+”或“-”表示）。如果驗(yàn)證成功，則④與⑤的大小比較關(guān)系是。不同處理或測(cè)定試管甲試管乙培養(yǎng)過降解菌的上清液①②蛋白質(zhì)K水解酶+③一段時(shí)間后，分別加入含AFB1的培養(yǎng)基測(cè)定培養(yǎng)基中AFB1含量④⑤表中“+”表示添加，“-”表示不添加，甲乙試管所加物質(zhì)的量均相同【答案】(1)發(fā)霉的糧食、糧制品及其它霉腐的有機(jī)物1mL樣品稀釋液，加入9mL無菌水搖勻香豆素（無菌）玻璃刮鏟（或涂布器）、（無菌）滴管（或微量可調(diào)移液器）(2)胞外分泌物降解(3)++-④大于⑤【分析】篩選目的菌株時(shí)應(yīng)根據(jù)菌株的自身特點(diǎn)在特定范圍（條件）進(jìn)行篩選?！驹斀狻浚?）黃曲霉素一般來自污染的食品，因此在霉?fàn)€的食品中富含AFB1，其中可能含有較多的AFB1降解菌，因此篩選時(shí)可以從發(fā)霉的糧食、糧制品及其它霉腐的有機(jī)物中采樣。將1mL樣品稀釋液，加入9mL無菌水搖勻，則可將樣品稀釋液再稀釋10倍。圖中1號(hào)培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，根據(jù)題意，科研人員用黃曲霉素Bl（AFB1）的結(jié)構(gòu)類似物—香豆素（C9H6O2）篩選出能高效降解AFB1的菌株，故選擇培養(yǎng)基中的碳源為香豆素。過程③是稀釋涂布平板，需要的工具為無菌玻璃刮鏟（涂布）和無菌滴管（取稀釋液）。（2）若菌體降解途徑為胞外分泌物降解，分泌物平均分布在溶液中，則上清液和沉淀液中AFB1的殘留量應(yīng)基本相同；若菌體降解途徑為菌體吸附降解，則菌體所在的沉淀液中AFB1的殘留率應(yīng)明顯低于上清液。（3）為驗(yàn)證蛋白質(zhì)K是降解AFB1的有效成分，故實(shí)驗(yàn)的自變量是有無蛋白質(zhì)K，因變量是培養(yǎng)基中AFB1的含量。其他的變量都屬于無關(guān)變量，故表中①、②、③分別表示+、+、-。如果驗(yàn)證成功，則④中由于蛋白質(zhì)K被蛋白質(zhì)K水解酶水解，而沒有催化作用，⑤中的蛋白質(zhì)K具有活性，能夠降解AFBI，故最后④培養(yǎng)基中AFB1含量大于⑤培養(yǎng)基中AFB1含量。17．中國(guó)科學(xué)家成功培育出全球首例體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”。體細(xì)胞克隆猴的培育過程如圖所示。請(qǐng)分析回答問題：

(1)據(jù)圖可知，克隆猴培育過程用到了、和胚胎移植等技術(shù)。體細(xì)胞核移植技術(shù)的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)，原因是。(2)上述實(shí)驗(yàn)核移植的受體一般選用A猴處于減數(shù)分裂Ⅱ中期的，原因是該細(xì)胞體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進(jìn)表達(dá)的物質(zhì)。(3)目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是。(4)克隆猴的成功培育為阿爾茨海默病、自閉癥等腦疾病以及免疫缺陷病、腫瘤等疾病的機(jī)理研究、干預(yù)、診治帶來前所未有的光明前景。與以往用普通猴子做實(shí)驗(yàn)相比，克隆猴作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的優(yōu)勢(shì)是（答出一點(diǎn)即可）?！敬鸢浮?1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物體細(xì)胞核移植體細(xì)胞分化程度高，表達(dá)全能性十分困難(2)卵母細(xì)胞細(xì)胞核全能性(3)顯微操作（去核法）(4)體細(xì)胞克隆猴遺傳背景相同，可避免個(gè)體間差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，大大減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用數(shù)量；體細(xì)胞克隆猴制備時(shí)間縮短，基因編輯等可在體外培養(yǎng)的細(xì)胞中進(jìn)行【分析】動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎。在體外將采集到的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟，可以通過顯微操作技術(shù)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核和第一極體?！驹斀狻浚?）據(jù)圖可知，克隆猴培育過程用到了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)。體細(xì)胞核移植技術(shù)的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)，原因是體細(xì)胞分化程度高，表達(dá)全能性十分困難。（2）上述實(shí)驗(yàn)核移植的受體一般選用A猴減數(shù)分裂Ⅱ中期的（次級(jí)）卵母細(xì)胞，原因是卵母細(xì)胞體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。（3）目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作去核法，即在顯微鏡下進(jìn)行去除細(xì)胞核的操作。（4）與以往用普通猴子做實(shí)驗(yàn)相比，克隆猴作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的兩大優(yōu)勢(shì)是體細(xì)胞克隆猴遺傳背景相同，可避免個(gè)體間差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，大大減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用數(shù)量；體細(xì)胞克隆猴制備時(shí)間縮短，基因編輯等可在體外培養(yǎng)的細(xì)胞中進(jìn)行。18．目前全球面臨糧食安全問題，農(nóng)業(yè)發(fā)展至關(guān)重要，其中種植業(yè)尤為關(guān)鍵。在現(xiàn)代生物技術(shù)高速發(fā)展的背景下，越來越多的生物技術(shù)在育種中得到應(yīng)用?；卮鹣铝袉栴}：(1)通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖，取優(yōu)良品種的體細(xì)胞經(jīng)過脫分化形成，該過程一般需要避光，此時(shí)所用培養(yǎng)基中的碳源為（填“有機(jī)碳源”或“無機(jī)碳源”）。誘導(dǎo)生芽和生根的過程中，培養(yǎng)基的最大區(qū)別為。(2)無性生殖的作物連續(xù)種植多代后產(chǎn)量會(huì)下降，主要是感染的病毒傳給了子代。通過植物組織培養(yǎng)還可以對(duì)無性生殖的作物進(jìn)行脫毒處理，此時(shí)一般選?。ú课唬┑募?xì)胞，因?yàn)椤?3)耕地面積減少也是農(nóng)業(yè)面臨的一大問題，為了更充分地利用土地，有的研究者想到利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)制備“番茄—馬鈴薯”雜種植株，期望能得到地上結(jié)番茄，地下長(zhǎng)馬鈴薯的植株。該設(shè)想需要先利用去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，然后利用（答出兩種即可）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，融合細(xì)胞再生出細(xì)胞壁后經(jīng)過植物組織培養(yǎng)發(fā)育成完整植株。最終“番茄—馬鈴薯”雜種植株沒有實(shí)現(xiàn)地上結(jié)番茄、地下長(zhǎng)馬鈴薯的原因是?！敬鸢浮?1)愈傷組織有機(jī)碳源生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例和濃度不同(2)莖尖（或芽尖或根尖）植物分生區(qū)附近（莖尖）病毒極少，甚至無病毒(3)纖維素酶和果膠酶電融合法、離心法、聚乙二醇誘導(dǎo)生物基因的表達(dá)不是孤立的，它們之間相互調(diào)控、相互影響【分析】植物體細(xì)胞雜交是指將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法：物理法（離心、振動(dòng)、電激等）和化學(xué)法（聚乙二醇等）。植物體細(xì)胞雜交的意義：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)大親本范圍，培育作物新品種。【詳解】（1）植物組織培養(yǎng)過程中，經(jīng)脫分化過程可形成愈傷組織；愈傷組織形成和生長(zhǎng)、分化常在MS培養(yǎng)基上進(jìn)行，這說明MS培養(yǎng)基能夠給愈傷組織提供有機(jī)碳等物質(zhì)，故據(jù)此推斷MS培養(yǎng)基中的碳源是有機(jī)碳源；配制的誘導(dǎo)生芽和生根的培養(yǎng)基的最大區(qū)別是：生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例和濃度不同，其中誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例較高。（2）培育脫毒苗時(shí)，一般選取莖尖（或芽尖或根尖）部位的細(xì)胞作為外植體，其依據(jù)是植物分生區(qū)附近（莖尖）病毒極少，甚至無病毒。（3）植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性可知，可以利用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體；誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法有物理方法如電融合法、離心法，化學(xué)方法如聚乙二醇誘導(dǎo)等；由于生物基因的表達(dá)不是孤立的，它們之間相互調(diào)控、相互影響，故番茄——馬鈴薯雜種植株沒有實(shí)現(xiàn)地上結(jié)番茄、地下結(jié)馬鈴薯。19．非對(duì)稱細(xì)胞融合是指融合前分別用射線破壞供體的細(xì)胞核和用碘乙酰胺破壞受體的細(xì)胞質(zhì)，實(shí)現(xiàn)胞質(zhì)基因和核基因的優(yōu)化組合。已知甲植物細(xì)胞核基因具有耐鹽堿效應(yīng)，乙植物細(xì)胞質(zhì)基因具有高產(chǎn)效應(yīng)。某研究小組用甲、乙植物細(xì)胞進(jìn)行非對(duì)稱細(xì)胞融合相關(guān)研究，以期獲得高產(chǎn)耐鹽堿再生植株。請(qǐng)回答問題。(1)取甲植物芽尖與乙植物葉片（滅菌/消毒）后接種于含一定比例（填激素名稱）的MS固體培養(yǎng)基上誘導(dǎo)，產(chǎn)生愈傷組織；選擇生長(zhǎng)狀況較好的愈傷組織接種于特定的液體培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)，收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，加入酶去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體。(2)將甲植物原生質(zhì)體經(jīng)處理，乙植物原生質(zhì)體經(jīng)處理，對(duì)處理后的原生質(zhì)體在顯微鏡下用計(jì)數(shù)，確定原生質(zhì)體密度，兩種原生質(zhì)體等體積混合后，添加適宜濃度的PEG和0.08mol/L、pH9.5的CaCl2，目的是；誘導(dǎo)一定時(shí)間后，加入過量的培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋，稀釋的目的是終止。(3)將融合原生質(zhì)體懸浮液和液態(tài)的瓊脂混合，在凝固前倒入培養(yǎng)皿，融合原生質(zhì)體分散固定在平板中，并獨(dú)立生長(zhǎng)、分裂形成愈傷組織。下列各項(xiàng)中能說明這些愈傷組織只能來自于雜種細(xì)胞的理由有（填字母）a.甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)處理后失活，無法正常生長(zhǎng)、分裂b.同種融合的原生質(zhì)體因甲或乙原生質(zhì)體失活而不能生長(zhǎng)、分裂c.雜種細(xì)胞由于結(jié)構(gòu)和功能完整可以生長(zhǎng)、分裂d.培養(yǎng)基含有抑制物質(zhì)，只有雜種細(xì)胞才能正常生長(zhǎng)、分裂(4)將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽、生根的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)形成再生植株。為初步確定再生植株是否來自于雜種細(xì)胞，可通過技術(shù)進(jìn)行鑒定。【答案】(1)消毒細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素脫分化纖維素酶和果膠酶(2)碘乙酰胺射線血細(xì)胞計(jì)數(shù)板促進(jìn)原生質(zhì)體融合終止原生質(zhì)體融合(3)abd(4)PCR【分析】1、植物組織培養(yǎng)是指離體的組織或器官在人工控制的培養(yǎng)基及環(huán)境條件下增殖分化成完整植株的一種無菌培養(yǎng)技術(shù)；基本過程：離體的植物組織或器官脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化長(zhǎng)出叢芽→生根→移栽成活。2、植物組織培養(yǎng)技術(shù)原理：植物細(xì)胞的全能性.全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整植株的潛能。原因：生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因，從理論上講，生物體的每一個(gè)活細(xì)胞都應(yīng)該具有全能性。在生物體內(nèi)，由于基因的選擇性表達(dá)細(xì)胞不能表現(xiàn)出全能性，而是分化成為不同的組織器官。3、去細(xì)胞壁的方法：酶解法，即在溫和的條件下用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。4、植物組織培養(yǎng)過程中要消毒、殺菌和無菌操作的目的：避免雜菌在上面迅速生長(zhǎng)消耗營(yíng)養(yǎng)，且有些雜菌會(huì)危害培養(yǎng)物的生長(zhǎng)?！驹斀狻浚?）采用消毒可以保持甲植物芽尖與乙植物葉片的活性并避免微生物的污染；MS培養(yǎng)基中通常需要添加細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素，以啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化；外植體在MS培養(yǎng)基上，經(jīng)脫分化過程形成愈傷植物；細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，要除去細(xì)胞壁得用纖維素酶和果膠酶。（2）由于甲原生質(zhì)體提供的是核基因，用碘乙酰胺破壞受體的細(xì)胞質(zhì)，使其細(xì)胞質(zhì)失活：乙原生質(zhì)體提供的是細(xì)胞質(zhì)基因，用射線破壞細(xì)胞核，因此需使其細(xì)胞核失活?？刹捎醚?xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行計(jì)數(shù)。添加適宜濃度的PEG和0.08mol/L、pH9.5的CaCl2，目的是促進(jìn)原生質(zhì)體融合；加入過量的培養(yǎng)基可降低PEG濃度，使原生質(zhì)體融合終止。（3）將融合原生質(zhì)體懸浮液和液態(tài)的瓊脂糖混合，在凝固前倒入培養(yǎng)皿，融合原生質(zhì)體分散固定在平板中，并獨(dú)立生長(zhǎng)、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細(xì)胞源于同一個(gè)雜種融合的原生質(zhì)體。未融合的原生質(zhì)體因?yàn)榧?xì)胞質(zhì)或細(xì)胞接的失活，無法正常生長(zhǎng)、分裂，同種融合的原生質(zhì)體也因?yàn)榧自|(zhì)體細(xì)胞質(zhì)或乙原生質(zhì)體細(xì)胞核失活而不能生長(zhǎng)，分裂：只有雜種細(xì)胞才具備有活性的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，可以生長(zhǎng)、分裂，因此這些愈傷組織只能來自雜種細(xì)胞。故選abc。（4）為初步確定再生植株是否來自于雜種細(xì)胞，可通過提取純化再生植株的總DNA，可作為PCR擴(kuò)增的模板。20．已知鐮狀細(xì)胞貧血是一種單基因遺傳病，患者的血紅蛋白分子β肽鏈第6位氨基酸谷氨酸被纈氨酸代替，導(dǎo)致功能異常；而人類是乙型肝炎病毒的唯一宿主，接種乙肝疫苗是預(yù)防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后經(jīng)歷了血