132023-05-06發布DB13/T5688—2023本文件起草單位：石家莊贊皇縣蕊源蜂業有限公司、中國農業科學院蜜蜂研究所、石家莊市動本文件主要起草人：王強、王榮申、王岳森、魏月、王岳峰、孟君麗、許亞改、王占江、陳海軍、郭偉婷、張艷紅、杜義明、劉旭東、孫繼強、姚慧敏、謝峰、馬麗榮、路偉、張晨、賈二國、DB13/T5688—20233蜜蜂微孢子蟲病綠色防治技術規程本文件規定了蜜蜂微孢子蟲病綠色防治的術語和定義、技術流程圖、診斷與鑒定、防控等技術本文件適用于蜜蜂微孢子蟲病癥狀、形態及分子生物學診斷和綜下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用是一種侵染成年蜜蜂中腸上皮細胞引起蜜蜂發病的致病性真菌，包括蜜蜂微孢子蟲和東方蜜蜂指為殺滅包括蜜蜂疫病病原體或寄生蟲而采取的一種措施，適用于可能被直接或間接污染的場指系統而持續地收集、整理和分析與蜜蜂微孢子蟲病有關的信息，并及時向相關人士傳遞信息4蜜蜂微孢子蟲病綠色防治技術DB13/T5688—202345.1診斷流程當觀察到蜂群出現典型癥狀時，應遵循先通過個體癥狀觀察初步確診，再取樣后通過顯微鏡鑒5.2.1.1急性重癥感染b)蜂群表現：在蜂巢入口處及養蜂場地面，會見到患病爬行的和死去的蜜蜂，且蜂群群勢急5.2.1.2輕度感染DB13/T5688—20235a)病蜂活動狀況，患病蜜蜂表現出行動遲滯，腹部膨大，飛翔無力等癥狀；b)用鑷子從具有典型癥狀的蜜蜂腹部末端夾出中腸及后腸仔細觀察，健康蜜蜂中腸呈棕色，環紋明顯，并且具有彈性和光澤。如觀察到蜜蜂中腸膨大，呈乳白色，環紋不清，失去彈5.3.1.1樣品處理將采集的蜜蜂樣本，分離腹部置于研缽中，加入5mL～10mL蒸在明場或相差光學顯微鏡下以400～600倍進行5.3.1.2.1初診5.3.1.2.2鑒別按SN/T1683相關方法與酵母、真NaClDB13/T5688—20236標引序號說明:PCR反應體系準確吸取至PCR板孔中，設定反應5.3.2.3擴增產物的分離與鑒定擴增產物用2.0%的瓊脂糖凝膠電泳進行分離，GoldView染5.3.2.4診斷結果與辨別b)當凝膠中在218bp位置有明顯條帶時即可認為為保證所采集的樣品具有代表性，應按以下標準確定a)非定量診斷時，直接從蜂巢入口附近選取具有典型癥狀的成年蜜蜂；養蜂場場址按GB/T191683.1蜂場場址的選擇給出DB13/T5688—20237春繁期飼喂蜂蜜花粉時，不使用來歷不明的花粉，飼喂前應對花粉進行不少于20min的蒸汽消a)飼喂越冬飼料前應對飼料進行顯微鏡檢查，如巢脾中的蜂蜜或花粉中發現有微孢子蟲則應b)補飼選擇蜂蜜或白糖，白糖需要高溫溶解；c)越冬飼料的儲備量，視群勢強弱與越冬期長短貯備蜜脾。b)巢脾、蜂箱：長期保存的巢脾應置于空蜂箱中，蜂箱應整齊疊放并將所有縫隙密封，然后c)病死蜂：隨時收集養蜂場地面的病蜂及死亡蜂，集中焚燒或深埋，并在養蜂場地面撒生石每年從去除越冬包裝開始，直至下次越冬包裝前，應至少每3個月對蜂群進行1次蜜蜂微孢子蟲病的病原監測，定量調查蜂群受感染程度。根據上兩個年度的監測記錄及當前監測結果隨時調整本DB13/T5688—20238362（NosemaCeranae）CGGCGACGATGTGATATGAAACCCGGTCATTCTCAAA