常用根底培養基

★營養瓊脂

【用途】供作?般細菌培養和菌株的純化及傳種用

【原理】培養基含有氮源、碳源和微量無機鹽適合一股細菌的生長繁殖

【成分】蛋白豚10牛肉仔5.0氯化鈉5.0瓊脂粉20蒸飽水11^147.2~7.4

【制備上述成分(除瓊脂外)溶于水中校正pH后假設瓊脂，煮沸溶解，根據用途不同進行分裝，經121℃滅菌15min,

傾注平板或制成斜面，置冰箱保存，兩周內保持用完

【接種】根據用途不同按常規操作35C18?24h觀察結果

【觀察結果】在平板上除可以觀察菌落的形態外，還可以判斷溶血的情況：菌落周圍的培養基內紅細胞完全破壞為

B溶血，菌落周圍呈綠色為a溶血。溶血的情況可以顯微鏡下用低

【質量控制】金黃色葡萄球菌油落淺黃色，直徑＞1.5mm志賀痢疾囿菌落無色，直徑＞1.5mm銅綠假單胞菌，菌落無

色或淺綠色，直徑＞2.5mm

★血瓊脂培養基

【用途】適用于各類需氧及兼性厭氧細菌生長，?般細菌學檢驗標本的別離培養、溶血鑒別及菌種保存

【原理】羊血或兔血時細菌生長繁殖的良好營養物質。在45C?5DC的根底培養基中加參加血液(5?10%)可以

保存血液中某些不耐熱的生長因已同時血細胞不被破壞。假設將NaCI的濃度提高到0.85%,那么可使血平皿經35cl8?

24h后色澤仍然鮮艷。在血平板上除可以觀察菌落的形態外，還可以判斷溶血的情況：菌落周圍的培養基內紅細胞完全

破壞為B溶血。菌落周圍呈綠色為。溶血。溶血的情況可以顯微鏡下用低倍鏡觀察

【成分】牛肉浸出液1L蛋白膝10氯化鈉5瓊脂15無菌脫纖維羊血60mlpH7.2-7.4

【制備】將前四項成分混合，加熱溶化，校對pH,置三角瓶內，高壓滅菌(12rC15min)后冷至約50c,參加

無菌纖維羊血，旋轉式充分搖勻后傾平板。血瓊脂層厚4mm。凝固后，抽樣置于35℃培養18~24h,如無菌生長，冷

藏備用。

【接種】取標本增苗培養物或純培養物劃線接種到平板上，置35C培養1?2d，觀察結果

【觀察結果】在血平板上除可以觀察菌落的形態外，還可以判斷溶血的情況：菌落周圍的培養基內紅細胞完全被破

壞為B溶血，菌落周圍呈綠色為。

【質量控制】化膿性鏈球菌，ATCC19615,生長良好，B?溶血。肺炎鏈球菌，ATCC6303,為a溶業。表皮葡萄

球菌，ATCC12228,生長良好，不溶血。

★巧克力培養基

【用途】主要用于嗜血桿菌的劃離，亦可用于奈瑟菌的增菌培養。

【原理】流感嗜血桿菌培養時，需要依賴血液中的X及V因子方能生長繁殖，當培養基加熱至80?90C時，可使

血液中的紅細胞破裂，以利于嗜血桿菌，奈瑟菌等的生長培養。凡疑有這些菌種存在的標本，均應接種巧克力平板。血

液標本培養，增苗后又細菌生長，假設移種巧克力平板上，有利于別離更多的細菌。

【成分】牛肉浸出液1L蛋白陳10氯化鈉5瓊脂15無菌脫纖維馬血、丫:血或兔血100mlpH7.2?7.4

【制備】將前四項成分混合，加熱溶化，校對pH,高壓滅菌(12rC15min)后在80?9(TC以無菌方法參加血液,

搖勻后置90c水浴中。維持該溫度15min,使之呈巧克力色取出，至室溫冷至約50C,傾制平板。凝固后，抽樣置于

35℃培養18?24h,如無細菌生長，冷藏備用。

【接種】將可疑標本直接劃線接種于該培養基上，置35'C普通培養或置含5%?10%二氧化碳環境培養18?24h,

取出觀察細菌生長狀況。

【觀察結果】流感嗜血桿菌菌落微小（0.8mm）,無色透明、光滑整齊、似露滴狀,48h后達1.5mm,從血液或腦脊

液中別離的菌落往往形成液狀，菌落較大，老培養物菌落中心呈凹陷。

【質量控制】流感嗜血桿菌ATCC10211,生長良好，菌落典型。肺炎鏈球菌，ATCC6305,生長良好，菌落典型。

【保存】置冰箱，1周內用完。

★營養肉湯

【用途】用于一般細菌的增加培養，參加1%的瓊脂粉亦可作營養瓊脂。

【原理】該培養基含有氮及微晝無機鹽，適宜一般細菌的生長繁殖，因此是最根底的培養基。

【成分】牛肉浸液1L缶白臟13氟化鈉5PH7.2?7.4（牛肉浸液氏用3.0g牛肉膏和1L蒸儲水代替）

【制備】上述各成分混合溶解，校正pH。分裝試管，每管3?5mL高壓滅菌（121*C15min）,做無菌試驗后冷

藏備用。

【質量控制】金黃色葡萄球菌、傷寒沙門菌、化膿性鏈球菌均生長良好。

★肉浸液培養基

【用途】供作根底培養用。營養比肉膏湯好，一般營養要求不高的細菌均可生長。

【原理】牛肉含有豐富的營養物質，如蛋白質、碳水化合物及無機鹽類等，通過水解并用Nacl

【成分】新鮮牛肉500蛋白陳10規化鈉5蒸儲水1LpH7.4~7.6

【制備】1.將新鮮牛肉去除脂肪、肌膜及肌腱，切成小塊后用絞肉機絞碎（或用刀剁碎）。取500g碎肉，加蒸鐲水

1L,混合后置冰箱中冷浸過夜。

2.將肉浸液取出，煮沸20?30min（并不斷攪拌，以免沉底、燒焦）。冷后，用絨布或麻布擠壓過濾，使所有的肉

浸汁盡量擠出。

3.參加蛋白陳、氯化鈉，加熱溶解，補足蒸發的水分。矯正Ph至7.4?7.6.

4.用濾紙過濾,裝瓶。高壓滅菌（121C15min）即成肉浸液。

5.與1L肉浸液中參加2?3g瓊脂，即成肉浸液瓊脂。

【使用】根據用途不同可以制成營養肉湯，以此為根底制成其他培養基。如制作固體培養基，參加瓊脂1.5?2%

即成。

【質量控制】金黃色簡萄球菌、大腸埃希菌、傷寒沙門菌、痢疾志賀菌等均生長良好。

【保存】置冰箱可使用較長時間。

★牛腦心浸液培養基

【用途】用于培養要求較高的細菌。

【原理】牛心腦浸液是細菌牛長的營養物質,磷酸紙為緩沖劑,加卜話官的無機撲.有利干細菌的牛長繁殖.

【成分】牛腦（小牛腦制成浸液）200牛心（制成浸液）250豚陳或多陳10葡萄糖2Na2HPO4蒸你水1L。

【制備】1.將牛腦、牛心制成浸液，并加水至1L,參加固體成分，加溫溶解。

2.調整pH為7.6,分裝，高壓滅菌（12rC15min）?

3.牛腦心浸液中加放1.5?2%瓊脂，即為牛腦心浸液瓊脂。

［臨床經驗】1.培養厭氧菌時再參加半胱氨酸0.5g、

2.假設在此培養基中再參加酵母浸出物5g/1L,那么效果更佳。

肝浸液及肝浸液場

【用途】使用干對營養要求較高的細菌培養.

【原理】肝組織除了含有豐富的營養成分，如蛋白質、碳水化合物以及無機鹽外，還含有膽固醇、鐵化合物、血紅

蛋白等細菌生長因廣，有利于各種細菌的生長繁殖。

【成分】牛肝或豬肝500蛋白陳10氯化鈉5蒸儲水1LpH7.0

【制備】將新鮮的牛或豬肝洗凈，除去脂肪、漿膜、大血管、肝臟總管，絞碎，置鋁制容器內，加蒸溜水500ml,

經流動蒸汽加熱30min,取出調勻后，再蒸90min,然后，用數層紗布或絨布過濾。濾液中參加蛋白陳、氯化鈉，并加

蒸儲水至1L。加熱溶解-矯正pH至7.0,再置于流動蒸汽蒸30min。用濾紙過淀，分裝經高壓滅菌(121C15min),

即成肝浸液。于每100ml肝浸液中參加2?3g瓊脂，即成肝浸液瓊脂。

【保存】置冰箱內有效期較長。

★蛋白陳水

【用途】1.供細菌靛基質網腺)試驗用2.一般細菌培養和傳代

【原理】培養基中的蛋白陳含有色氨酸，能被有些細菌利用而成靛基質，與試劑對二甲負基苯醛縮二用咪。而不利

比色氨酸的細菌那么無此反響，故可器別細菌。因含有陳和氯化鈉，故可供一般培養和傳代。

【成分】蛋白陳(或胰蛋白陳)10氨化鈉5蒸儲水1LpH7.2

【制備】將上述成分溶于水中，校正pH,分裝試管，每管2?3m,至121c滅菌15min備用

【接種】將待檢菌接種培養基內，經35c培養18?24h0

【質量控制】大腸埃希菌，生長極好，靛基質(+)傷寒沙門菌，生長良好，靛基質(-)金黃色葡萄球菌，生長良

好，靛基質(-)

★血液增菌培養基

【用途】用于從血液、骨髓中別離常見病原菌。

【成分】牛肉浸液1L際腺或多價蛋白陳10氯化鈉5葡萄糖3?枸竦酸鈉3酵母浸膏3瓊脂0.750.75%對氨基苯

甲酸5mlpH7.4

【制備】將，述各成分混合校正pH。分裝于螺旋蓋有橡皮塞可穿刺的瓶，每瓶50ml。高壓滅菌(12rC15min)

后，無菌手續參加滅菌硫酸鎂(24.65%)溶液1mL也可選用各種商品血液培養系統。

★葡萄糖肉湯

【用途】用于血液增菌。

【成分】蛋白陳10敘化鈉5肉浸液(或心浸液)1L葡萄糖3枸椽酸鈉30.5%對氨基苯甲酸水溶液10ml

24.65%MgSO4?7H2O水溶液20ml青霉素酶1000U

【制備】將蛋白陳、氮化鈉混合于肉浸液中加熱溶解，再參加葡萄糖、枸椽酸鈉、對氨基茉甲酸及硫酸鎂，繼續煮

沸5min,并補足失水，調整pH至7.8。過濾分裝于帶有反口橡皮塞的玻璃瓶內，每瓶裝50ml,高壓滅菌115c20min,

每瓶參加青有素的50U,經無菌試驗合格后，冷卻備用。

【接種】將采取的血液標本，以無菌手續注入培養液瓶中(血液1ml,培養液10ml),置35'C培養箱內，每日取

出觀察一次結果。

【觀察結果】經35c培養，如有細菌生長，可出現數種不同的表現，應隨時做別離培養，可選用血瓊脂、EMB及

巧克力平板等。無細菌生長表現的培養瓶，需連續觀察7d,仍無細菌生長方可棄去。在觀察的過程中，至于應做2次別

離培養。

【臨床經驗】1.枸椽酸鈉為抗凝劑，使血液參加培養基中不凝固。

2.對氨基基甲酸能中和血液中橫胺類藥物的抑制作用。

3硫酸鎂能破壞血液中存在的網環素、金寄素、新霍素、多粘菌素及鏈寄素的抑制作用八

4.本培養基近年來有許多改進配方，如參加0.3?0.5%酵母浸育以增菌培養：加0.2%核酸刺激細菌生長；加0.1%

粘液素能被置于細菌的外表，使細菌免受抗體破壞：參加SPS可提高檢出率。

常用陽性及陰性球菌別離培養基

★甘露醇瓊脂

【用途】供致病性葡萄球菌別禹培養用。

【原理】根據致病葡萄球菌耐鹽性強和發碎甘露醇的兩大特性，在25g/L含鹽量的甘露醉瓊脂平板上能生長，并形

成橙黃色均落，酚紅指示劑起顯色作用。而凝固南陰性葡萄球菌不發醉甘露根呈現紅色菌落。微球菌及大局部革蘭陰性

桿菌根本不生長。因此該平板起選擇性別離和鑒別作用。

【成分】際蛋白陳10牛肉膏19氯化鈉25瓊脂20甘露醇100.2%酚紅水溶液12.5ml蒸懶水1LpH7.4

【制備】將上述成分（除甘露釀、酚紅外）溶于水中，加熱后溶解，校正pH后參加甘露醇和酚紅水溶液，搖勻分

裝，經115cl5min滅菌，待冷卻到50c時傾注平皿，凝固后冷藏備用.

【接種】取待檢標本或增菌培養物劃平板，置35℃培養18?24h.

【觀察結果】挑取橙黃色菌落，接種營養瓊脂斜面，經培養后做涂片和其他生化鑒定。

【質量控制】金黃色葡萄球菌，生長，菌落呈黃色，直徑＞1.0mm.表皮葡萄球菌，生長，菌落呈紅色，直徑）1.0mm.

普通變形桿菌、大腸埃細菌，根本不生長。

【保存】置冰箱內，使用期限2?3d,如用無菌塑料袋包裝可延長使用時間。

★哥倫比亞血瓊脂

【用途】供革蘭陽性球菌別離月。

【原理】培養基內含有蔡咤酸和黏菌素，對革蘭陰性菌有很強的抑制作用。

【成分】胰酪蛋白豚12牛肉蛋白豚15玉米淀粉1氯化鈉5黏菌素10mg蔡臟酸15mg瓊脂粉12蒸喇水1L脫纖

維羊血50mlpH7.2?7.4

【制備】將上述各成分（羊血和抗菌藥物除外）充分混合，加熱溶解，調pH7.2?7.5,115cl5min滅菌。待冷至

50℃時參加脫纖維羊血50ml及黏菌素和蔡吃酸（預先溶于5ml水中）,混勻，勿使產生氣泡。傾入無菌平皿，凝固后

備用。

【接種】取經過增菌的標本或其他標本，直接劃種于平板上，置35c24?48h觀察結果。

【質量控制】配成的培養基應呈鮮紅色，冰箱放置后可變為暗紅色。大腸埃希菌，ATCC25923,抑制性生長。肺

炎鏈球菌，ATCC6303,生長良好。叱膿性鏈球菌，ATCC19615,生長良好。

★卵黃雙抗瓊脂

【用途】供別離培養腦膜炎奈瑟菌用。

【成分】蛋白陳10氯化鈉5牛肉膏3玉米淀粉1.6750%卵黃鹽水懸液100ml多黏菌素B4.2mg萬古霉素3.3mg

瓊脂15?20g蒸儲水1L

【制備】將蛋白陳、氯化鈉、心肉膏溶解后，矯正pH至7.6,參加玉米淀粉（先以水調成糊狀）及瓊脂，混合后

115C20min滅菌。待冷至50c左右，參加卵黃和抗菌藥物（抗菌藥物先以少量無菌蒸饋水溶解），輕輕搖勻后，傾注

平板備用。

【接種】將標本立即別離接種子上述平板至35C,含5?10%二氧化碳環境培養20?24h,取出觀察結果。

【觀察結果】腦膜炎奈瑟菌在此平板上（20?24h）,菌落呈無色或米灰色，光滑濕潤，邊緣整齊，半透明，不產

生色素.

【質晝捽制】腦膜炎奈瑟菌牛長良好.

【保存】新鮮配置的平板置.4C冰箱可保存2~3比如用無菌塑料袋包裝可延長使用時間。

【臨床經驗】1.50%卵黃鹽水的制備：取新鮮雞蛋，用肥皂水洗凈蛋殼，浸于75%乙醇中30min,取出用無菌紗布

擦干，以無菌手續棄去蛋清，將蛋黃收集于置有玻璃珠的無菌三角燒瓶中搖勻，在加等量鹽水，用力振蕩，將卵黃攪碎,

使之呈均勻混懸液。

2.如無玉米淀粉，用可溶性淀粉代替，多黏菌素B亦可用硫酸多黏菌素E代替。

3.卵黃鹽水用10%脫纖維羊血代替，做成巧克力雙抗瓊脂，亦可作腦膜炎奈瑟菌培養用。

★淋病奈瑟菌別離瓊脂（GCAgar）

【用途】用于別離培養淋病奈瑟菌（亦可別離培養腦膜炎奈瑟菌））

【原理】因淋病奈瑟菌的繁殖對營養要求較高，標本含雜菌乂多，難以別離，所有培養基內必須含有馬血、血清及

卵黃,以及多種氨基酸、維生素和輔酶等增補劑，如lsovitaleX（BBL）\Vtox（Oxoid）^.另外,T-M（Thayer-Martin）培

養基是在GC瓊脂的根底上，添加抗菌藥物抑制劑以抑制革蘭陽性細菌和真菌的生長，增強其選擇性，提高檢出率。

【成分】根底瓊脂（雙倍濃縮）多價陳（Oxiod）15麥淀粉1.0氯化鈉5K2HPO44.0KH2Po41.0瓊脂粉10蒸飽

水500mlpH7.2增補劑2ml/100ml培養基馬血（水溶解物）00ml培養基

【制備】將根底瓊脂成分混合溶于水中，煮沸溶解，矯正pH,分裝每瓶100ml,經121

℃滅菌15min備用。臨用時將瓊脂根底100ml加熱熔化，冷卻至53C時參加無菌的5%馬血水溶液（先欲溫50C）

100ml,再參加增補劑2mL傾注平板。

注：T-M培養基：取GC瓊脂9、（雙倍濃度）100ml,參加血紅蛋白2%水溶液100mL增補齊U2mL在傾注平板

前參加抗菌藥物混合液1ml。

抗菌藥物培養基內最終濃度含有發：TMP5ug/ml,萬古霉素3ug/ml,多黏菌素7.5ug/ml,制需菌索12.5ug/ml。

【接種】取病灶部位分泌物（棉拭子），在取樣現場迅速直接涂布在.平板上，保溫到實驗室再做4區劃線，立即置

含10%二氧化碳溫箱內，亦可用二氧化碳（或蠟燭缸），注意培養環境的適度，培養1-5

【觀察結果】菌落較小（0.5?1.0mm）,濕潤，光滑，凸起，透明無色成水珠狀。然后做涂片染色鏡檢和氧化酶

等實驗等進行鑒定。

【質量控制】使用前必須進行目的菌的生長試驗，質量合格者，方可使用。

【保存】置冰箱內，一周內用完。

★卵黃糖發酵平板

【用途】檢測腦膜炎奈瑟菌生長反響，適用于現場大量標本的篩選。

【成分】牛肉浸膏3筑化鈉5蛋白陳10玉米淀粉1.6750%卵黃鹽酸懸液10ml瓊脂200.%酚紅溶液5ml蒸譚水

900ml糖（醇）按需參加pH7.4

【制備】1.將蛋白豚、牛肉膏、氯化鈉加水加熱溶解，調pH至7.

2.將玉米淀粉加于20ml蒸錨水中攪拌均勻，再參加90ml沸水，力加邊攪，使成糊狀，倒入上述溶液中，參加瓊

脂、糖類及指示劑，高壓滅菌121c20min備用。

3.待瓊脂根本冷卻至50c左右，加卵黃鹽水100ml,輕輕搖勻后傾注平板。凝固后置.35“C做無菌試驗，合格前方

可使用。

【接種】采用點種法，將腦膜炎奈瑟菌點種于上述平板上（接種量要大），置35C培養18?24h培養，生長菌落

為淡紅色，培養基背景轉黃色者為陽性。

【臨床經驗】1.腦膜炎奈瑟菌對糖發酹能力較弱.雖在發酹過程中曾一度使培養基變酸(變色】,但時間一長,就

會被細菌在代謝過程中不斷形成的堿性物質所中和，使培養基又逐漸轉為原來的中性或堿性顏色。如不及時觀察，容易

誤作陰性反響，故進行生化反響時應隨時觀察隨時記錄。

2.培養基內參加適量的玉米粉，可吸附培養環境中對該菌的毒性物質，以利于生長，培養溫度低于30℃或超過40c

均不能生長。

常用革蘭陰性桿菌別離培養基

★中國藍瓊脂

【用途】可抑制革蘭陽性細菌，使較好的弱選擇性培養基。

【原理】以中國藍為指示劑，無抑制作用，玫瑰紅酸僅能抑制革蘭陽性細菌生長，而對大腸桿菌沒有抑制作用。發

酵性革蘭陰性桿菌因分解乳糖能力不司，在此種平板上的菌落顏色不同，便于鑒別菌種。

該培養基中不含膽鹽，與SS瓊脂配對用于糞便中志賀菌和沙門菌的別離是比擬合理的。

【成分】牛肉膏5氯化鈉5蛋白陳10瓊脂15乳糖10蒸儲水1L無菌1%中國藍水溶液3ml1%玫瑰紅酸乙醇溶液

3mlpH7.2?7.4

【制備】將前6項成分混合，加熱熔化，校正pH(7.4)后，高溫滅菌(115,C15min),冷卻至60C,無菌手續

參加中國藍溶液和玫瑰紅酸乙醇溶液，充分搖勻后，傾制平板。

【接種】將檢材直接劃線別離于該平板上，至35'C18-24h觀察結果。

【觀察結果】在中國藍平板上，分解乳糖產酸的細菌，其菌落呈藍色：不分解乳糖的細菌，菌落為淡紅色的透明菌

落。

【質量控制】大腸埃希菌ATCC25922,菌落呈藍色。痢疾志賀菌I型，ATCC.13311,菌落呈淡紅色。鼠傷寒

沙門菌，ATCC,13311,菌落程淡紇色。

【保存】平板置4c冰箱保存，1周內用完。

【臨床經驗】1.中國藍水溶液徐徐煮沸或高壓115cl5min滅菌后然應用。玫瑰紅酸乙醇溶液，無需滅菌，但加熱

時應避開火焰。

2玫瑰紅酸能抑制革蘭陽性細菌生長，但對大腸埃希菌沒有抑制的作用，故各種標本接種量不宜太多。

3.次培養基pH約為7.4,制好后應呈淡紫紅色，假設過堿那么呈鮮紅色，過酸那么呈藍色，均不適用。

★伊紅亞甲藍瓊脂(eosinmethyleneblueagar)

【用途】供腸道致病菌及大腸菌群的別離。

【原理】伊紅和亞甲藍兩種燃料一酸一堿。兩者在培養基中為指示劑，對革蘭陽性菌有抑制生長作用。當大腸埃希

筐分解乳糖時，菌落中的伊紅和美藍相結合形成紫紅色的復合物，有時呈金屬光澤；而不分解乳糖的細菌其菌落為無色

或灰白色：有的細菌因產生堿性物質較多，而出現藍色菌落。

【成分】蛋白豚10K2HPO42瓊脂15乳糖10蒸偏水1L無菌2%伊紅-Y和亞甲藍溶液，充分搖勻，傾制平板。

【制備】將前5項成分混合，加熱溶化，校正pH后高壓滅菌。冷卻至60℃,無菌手續參加伊紅?丫和亞甲藍溶液,

充分搖勻，傾制平板。

【接種】取糞便標木或增菌物，劃線接種在平板上，置35℃培養18?24h觀察結果。

【觀察結果】根據檢驗目的不同，挑取無色菌落或挑選紫紅色及有金屬光澤的菌落轉種到克氏雙糖或三糖鐵瓊脂進

行鑒定。

★麥康凱平板

【用途】供腸道致病菌的別離培養和非發酵細菌鑒別用。

【原理】該培養基利用膽鹽來抑制革￥陽性細菌生K?.為中等程度選擇性培養基.抗菌力略強,有少數革當陰性菌

不生長：而對傷寒等沙門菌促進生長的作用。利用乳糖發酵，中性紅的顏色可把分解乳糖和不分解乳糖的組菌區別開。

沙門菌及志賀菌呈無色菌落，大腸埃希菌呈桃紅色菌落。

在麥康凱平板上能夠生長，是非發酵菌鑒定的一個根據。如果用麥康凱平板作為原始標本別離的培養基時，應注意

該標本在血平板上的細菌別離生長情況，以免遺漏局部被抑制牛?長細菌。

【成分】蛋白腺20氯化鈉5膽鹽5乳糖10瓊脂15?201%中性紅溶液5ml蒸儲水1LpH7.2

【制備】將各成分（除中性紅外）混合，加熱溶解，校正pH,參加中性紅溶液，高壓滅菌115cl5min,冷卻至

約50C,傾制平板，49冰箱（避光I保存，1周內用完。

【接種】取糞便標本或增菌物劃線接種到平板I；置35cl8-24h培界18?24h觀察結果。

【觀察結果】不發酵乳精的腸道細菌呈無色菌落，直徑約為2.0mm,光滑半?透明。大腸埃希菌呈紅包菌落。

【臨床經驗】非發酵細菌在該立板上是否生長，使臨床鑒定某些非發酵細菌的指標之一。

★SS瓊脂

【用途】用于?志賀菌和沙門菌別離

【原理】SS瓊脂為強選擇性培養基。其成分除了有必要的陳、牛肉膏等氮、碳源外，其他那么為選擇性抑制劑和

緩沖劑。如枸稼酸鈉、膽鹽、硫代硫酸鈉的協同作用與煌綠共同來抑制場道非病原性細菌及局部大腸埃希菌的生長：對

志賀菌屬及沙門菌屬相對抑制性較弱。硫代硫酸鈉有助于大腸菌的菌落著色，枸椽酸鐵能緩解某些藥物對病原菌的毒性

作用，同時與細菌產物起反響呈黑色菌落。中性紅可把分解乳糖和不分解乳糖的細菌鑒別開，前者為紅色菌落，后者為

無色菌落，故此具有選擇性鑒別作用，

【成分】牛肉浸粉5際陳或多價蛋白陳5乳糖10膽鹽8.5枸檄酸鈉8.5硫代硫酸鈉8.5枸椽酸鐵1瓊脂15?201%

斗性紅水溶液2.5ml0.1%煌綠水溶液0.33ml蒸鐳水1LpH7.0?7.1

【制冬】將上述成分（除中性紅、煌綠）混合于水中，加熱煮沸浴解（部高壓），校正pH,然后參加中性紅和煌

綠水溶液，充分混勻冷至50C時傾注平板。

【接種】將病人或帶菌者的各種標本直接劃線接種在該平板上，置35c培養18?24h觀察結果。

【質量控制】大腸埃希菌，抑制性生長，菌落程紅色。志賀痢疾I型，生長良好，菌落無色。福氏志賀菌，生長良

好，菌落無色

【觀察結果】沙門菌其菌落呈元色半透明，產生H2s者菌落中心呈黑色，局部菌株如亞利桑那亞屬出有分解乳糖

的菌落呈紅色、中心黑色，志賀菌屬的菌落呈無色透明。大腸埃希菌呈纖色混濁。宋內志賀菌能延緩發酵乳精，培養24h

厚可以出現紅色菌落。腸道致病菌的菌落均可達1.5mm以上。

【保存】避光，3d內用完，或保存于冰箱內備用.

【臨床經驗】煌綠要新配，中性紅要優質；此培養基因含膽鹽量較高，對腸道非病原性細菌有較強的抑菌力。在目

前商品培養基中，不同廠家的產品抑菌力不同，使用時應注意。選擇性過強，可能影響檢出率，所以，最好的方法是選

擇一種假設選擇平板，以配對互補使用。

★山梨醇麥康凱瓊脂

【用途】用于致病性、侵襲性和產毒性大腸埃希菌別離培養。

【原理】用山梨醇替代乳糖制成的麥康凱瓊脂有利于對局部大腸菌的鑒別。如致病性、侵襲性和產毒性大腸菌有局

部菌株不發酵山梨醇，在此培養基上生長的菌落呈無色，以識別。

【成分】蛋白腺5肺腺3氯化鈉5膽鹽5山梨醇10瓊脂粉120.01%結晶紫水溶液1m05%中性紅水溶液5ml蒸

餌水1LpH7.2

【制備】將卜述成分（除中性行、瓊脂粉、結晶紫、山.梨醇1混合于水中.參加溶解.校iFpH,再參加瓊脂粉加

熱煮沸溶解。分裝三角燒瓶100ml,經12lCl5min滅菌備用。臨用時：加熱溶解，再參加山梨酸、結晶紫及中性紅水

溶液，搖勻傾注平板。

【接種】將標本活增菌液直接別離到平板上，置35℃培養18?243

【觀察結果】與麥康凱瓊脂不同之處事挑取致病性大腸的菌落時，以無色菌落為主，同時也不能放棄紅色菌落，如

EPEC緩慢分解山梨醇，菌落呈紅色，EHEC。55H6菌落無色。

【質量控制】參照麥康凱瓊脂。

【保存】置冰箱，1周內用完。

★堿性瓊脂

【用途】供霍亂孤菌別離培養月。

【原理】利用霍亂弧菌怕酸不怕堿的特點，提高培養基的pH來抑制其他菌的生長，以利丁?目的菌的別離.

【成分】蛋白陳10牛肉育3敏化鈉5瓊脂20蒸偏水1LpH8.4

【制備】將上述成分混合于水口，加熱溶解，校正pH,分裝后高壓滅菌121cl5min傾注平板。

【接種】凡急性病人水樣便做增菌培養的同時，應直接將糞便標本別離到堿性瓊脂平板或亞硝酸鉀瓊脂平板I二。置

37c培養12?16h,觀察結果。

【觀察結果】霍亂弧菌生長較快，菌落大而扁平，呈青灰色，半透明，光滑濕潤。在亞硅酸鉀瓊脂上的落較小，呈

灰黑色。

【質量控制】各實驗室凡自配或商品培養基，在使用前必須用標準菌株或送上一級檢驗機構進行目的菌檢測，質量

可靠者方可使用。

曰-Tor弧菌，生長良好：大腸埃希菌25922,抑制性生長。

【保存】置冰箱，1周內用完。

★TCBS瓊脂

【用途】供霍亂弧菌及副溶血性弧菌別離培養用。

【原理】在堿性瓊脂的根底上，利用枸極酸鈉、硫代硫酸鈉和牛膽汁，加強了對革蘭陽性菌及大腸菌群等雜菌的抑

制。牛膽汁對霍亂弧菌生長乂有促進咋用。其中T.B和BTB作指示系統，把分解蔗糖的霍亂弧菌可不分解蔗糖的細菌鑒

別開。

【成分】酵母膏粉5蛋白膝10枸椽酸鈉10硫代硫酸鈉10牛膽汁粉8蔗糖20敘化鈉10枸椽酸鐵1麝香草酚藍

（T.B）0.04溟颼香草酚藍（BTB）C.04瓊脂粉12蒸鏘水1LpH8.4

【制備】將上述成分（除T.B和BTB）稱量混合于水中，加熱煮沸溶解，校正pH,再參加T.B和BTB指示劑，

混勻傾注無菌平板。

【接種】取病人糞便或增菌培養物，劃線別離于瓊脂平板上，置35c培養16?18h,觀察結果。

【質量控制】霍亂弧菌（小川、稻葉），生長良好,菌落2?3mm,黃色。副溶血性弧菌，生長良好,菌落2?3.5mm,

藍綠色。大腸埃希菌，根本生長良好,金黃色葡萄球菌，不生長。變形桿菌，受抑制。

【保存】置冰箱，1周內用完。

【臨床經驗】雀亂弧菌在此培養基上，血消凝集試驗有時不易乳化，應引起注意。

★慶大霉素瓊脂

【用途】供霍亂弧菌別離培養月。

【原理】該培養基以堿怦瓊脂作根底,參加枸檄酸鈉、亞硫酸鈉、灰大霉素以及多黏菌素R來抑制革毛陽性和陰

性桿菌的生長，而對霍亂弧菌無抑制性。在標本中雜菌較多時參加亞硫酸鉀1/20萬，對雜菌抑制效果更好，別離率更高。

【成分】蛋白豚10牛肉膏3氯化鈉5枸椽酸鈉10無水亞硫酸鈉S蔗糖10瓊脂15?20慶大霉素、多黏菌素B“雙

抗液"2ml蒸飽水1LpH8.4

【制備】將上述成分（除雙抗液）稱量混合于水中，加熱溶解，校正pH,分裝滅菌121cl5min,冷至50.C時，

每100ml內加“雙抗液”1.2mL傾注平板。如果標本中雜菌較多時，可另加0.5%亞硫酸鉀水溶液0.1ml,再傾注平板。

最后每亳升培養基內含有慶大霉素0.5U,多鉆菌素B0.6U,亞稀酸鉀1/20U。

【接種】將糞便標木活增菌培養物劃線接種到該平板上，置35七培養16?18h。

【觀察結果】由于該培界基抑制性強，而霍亂弧菌生長迅速，16h菌落達2mm,菌落青灰色，半透明，扁平，光

渭濕潤。培養時間長，菌落略黃色、隆起，中心厚而不透明。

【質量控制】霍亂弧菌（小川、稻葉）生長良好,培養18?24h菌落直徑2.5?3.0mm,大腸桿菌和變形桿菌受抑

制。

【保存】置冰箱內，1周內用完。

【臨床經驗】"雙抗液"配置.：98ml滅菌蒸儲水中參加慶大霉素（25000U/ml）1mL多黏菌素B或多黏菌素E

（3000000U/ml）1mL冰箱保存1個月用完。

*4號瓊■

【用途】供別離霍亂弧菌用。

【原理】培養基中所有慶大霉素主要抑制革蘭陰性細菌生長，十二烷基硫酸鈉和利凡諾（雷佛奴爾）主要抑制陽性

細菌生長，這3種藥品還有協同作用，故此培養基抑制雜菌的能力很強，為選擇性培養基。另一方面，由于亞硫酸鈉和

枸檄酸鈉有促進霍亂弧菌生長的作用，膽汁有保護霍亂弧菌和促進生長的雙重作用，在該培養基上霍亂弧菌能使亞碗酸

鉀復原成蹄，菌落中心呈黑色，邊緣淡黃色的大菌落與其他雜菌的小菌落很容易區別。

【成分】蛋白腺10氯化鈉5牛肉膏3亞硫酸鈉（無水）3枸椽酸鈉10豬膽汁粉5卜二烷基硫酸鈉20利凡諾（雷

佛奴爾）3瓊脂粉12慶大蠹素亞稀酸鉀混合液1ml蒸馀水1LpH8.0

【制備】將1~8成分放于玻璃或搪謊容器內（嚴禁用鋁制等金屬容卷），參加蒸館水，加熱混合后，調搐pH至

8.0,然后按1.2%參加瓊脂，煮沸至瓊脂溶化后，冷卻至60c

【接種】取待檢標本劃線接種亍平板上，置35c培養過夜。

【觀察結果】8h即可初步觀察結果，24h霍亂弧菌呈中心黑色較大而扁平的菌落，較易區別。

【質量控制】1.配成的培養基星亮黃色透明。

2.EI-Tor弧菌稻葉型和小川型均生長良好，大腸埃希菌ATCC25922不生長。

【臨床經驗】1.慶大霉素和亞硝酸鉀混合液應新鮮配制并置冰箱保存。

2.利凡諾應避光保存，而且每批均應預試前方可使用。成品培養基應避光保存。

IrHE瓊國

【用途】供沙門菌屬及志賀菌屬別離培養使用

【原理】該培養基既有較強的選擇性，又有一定的鑒別性，因為培養基內含有高濃度的膽鹽，能抑制革蘭陽性及大

版桿菌的生長，而有利于沙門菌的牛.長，因此具有選擇性。

培養基內含有乳糖、蔗糖和水楊素等3種糖作為鑒別系統，浪麝香草酚藍和酸性品紅指示劑作用，能把發酵糖類的

細菌區別開。前者為橘黃色，后者為淡藍色菌落。能產生H2s的沙門菌其菌落無色半透明，中心顯黑色，志賀菌在此培

養基上呈淡藍色半透明，因此易T鑒別。

【成分】蛋白陳12酵母浸膏3孔糖12蔗糖12水楊素2混合膽鹽9④.化鈉5硫代硫酸鈉5枸梭酸鐵倍%浪鷹香草

酚藍16ml0.5%酸性品紅12瓊脂粉12蒸儲水1LpH7.5

【制備】將上述成分（除指示劑）稱量混合于水中，加熱溶解,校正pH,最后寥加指示劑,冷卻至50?55c傾注

火苗平皿.

【接種】取糞便標本或增菌培養物，劃線接種于該平板上，置35℃培養18?24h觀察結果。沙門菌落呈淡藍色，

產生H2s者菌落中心呈黑色：志賀筐的菌落呈淡藍色半透明：大腸埃希菌落呈橘黃色，3種菌落大小根本相近。經18?

24h培養后，菌落直徑約2.0mm,

【質量控制】大腸埃希菌，菌落呈橘黃色。鼠傷寒沙門菌，菌落呈黑色。志賀菌，菌落淡藍色。金黃色簡萄球菌，

不生長。

【保存】置冰箱，1周內用完。

★GN增菌液

【用途】供志賀菌增菌培養用。

【原理】該培養基中含有枸極酸鈉和去氧膽酸鈉，對革蘭陽性菌有抑制作用，而對革蘭陰性桿菌抑制性較弱。

【成分】蛋白陳20葡萄糖1甘露醉2枸椽酸鈉5磷酸氫二鉀4磷酸二氫鉀1.5氯化鈉5蒸播水1LpH7.0

【制備】將上述成分稱量混合，加熱溶解，校正pH,分裝于試管5?10ml,經121℃15min滅菌備用。

【接種】取糞便標本或棉拭子取樣直接接種到增菌管內，置35?”C培養6?8h0

【觀察結果】培養物有細菌生長者，即別離到SS和麥康凱瓊脂平板上進行培養。

【質量控制】接種大腸埃希菌（ATCC25922）和痢疾志賀菌，10個活菌即可檢出。

【保存】置冰箱保存，2周內用完。

★四硫磺酸鹽（TT）增菌液

【用途】沙門菌增菌培養用。

【原理】TT增菌液中的碘氧化硫代硫酸鈉而形成四硫磺酸鈉（2Na2S2O3+l2->Na2S4O6）。四硫磺酸鈉對大腸

埃希菌有抑制作用，而有利于沙門菌的牛.長，但對志賀菌也有一定的抑制作用。碳酸鈣具有緩沖作用，使沙門菌不至于

區增菌液酸堿度的改變而死亡。

【成分】際陳或多陳5硫代硫酸鈉（Na2S2O3-5H2O）30碳酸鈣10膽鹽1蒸儲水1L碘液（碘6g,碘化鉀5g,

溶于20ml水中，儲存于棕色玻璃瓶內備用）

【制備】將上述成分（除碘液），混合后，加熱溶解，不必校正pH,每管分裝10ml,分裝時應充分振搖，使碳酸

鈣能均勻地分裝到各試管內。經高壓鬟汽115?121℃10min滅菌。

臨用時，于每只試管內加碘液0.2ml,混勻即可。

★亞硒酸鹽CSF）增菌液

【用途】沙門菌增菌培養用。

【原理】強選擇性增菌培養基，亞硒酸鹽對革蘭陽性菌有較強的抑制作用，又選擇性的抑制生長作用，對革蘭陰性

桿菌，有選擇性的抑制生長作用，尤丸對大腸埃希菌屬和志賀菌屬的細菌抑制性較為明顯，而對沙門菌屬那么無明顯的

抑制性。在磷酸緩沖劑的作用下，這種差異就更明顯，從而起到選擇作月。

【成分】亞硒酸氫鈉4蛋白陳5乳糖4磷酸氫二鈉9.5磷酸二氫鈉0.5蒸鐳水1LpH7.1

【制備】將上述各成分溶于水口，校正pH,分裝每管10ml,用流動蒸汽100C15?30min滅菌后，冷藏備用。

【臨床經驗】1.SF增菌液不宜用高壓蒸汽火菌。溫度過高，會有大量紅色沉淀形成，影響增菌效果。

2.pH必須為7.1,否則會產勺棕黃色沉淀。假設pH不符，可改變磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉的比例，進行調整。

3亞研酸鈉或亞硒酸氫鈉都可用.陋鹽是劇毒品.必須妥善使用、保管.硒的有機物和硒氫化合物時揮發性的.有

赤，勿吸入。

★堿性蛋白陳水

【用途】供霍亂弧菌增菌培養月。

【成分】蛋白陳20氯化鈉5蒸儲水1LpH8.6

【制備】將上述成分溶解于水口，校正pH,分裝于試管8?10mL經121cl5min備用。

【接種】將待檢標本接種到堿性蛋白陳水中，置37c培養6?8h,即別高到堿性瓊脂，慶大瓊脂或TCBS瓊脂平

板上。必要時做第二次增菌6?8h.

水樣增菌取50ml,10倍濃縮堿性陳水加水樣450ml,再參加1%無菌亞硒酸鉀溶液1ml和青霉素100U,置37c

培養過夜，再做第二次增菌6?8h,做別離培養。

【觀察結果】經6?8h培養，宦亂弧菌呈均勻混濁生長，外表有茵膜出現。

【質量控制】各實驗室自配或興用商品培養基，用前均需用標準落株進行檢測，生長良好者方可使用，

霍亂弧菌El-Tor生物菌，生長良好（6h）。大腸埃希菌ATCC25922,抑制生長（6h）.副溶血性弧菌，生長良好。

【保存】置冰箱，2周內用完。

【臨床經驗】假設在堿性陳水中參加1%亞瑞酸鉀0.5?那么成為亞硅限鉀堿性陳水，其增菌效果更為理想。

★耶爾森菌別離培養基CIN瓊脂

【用途】供小腸結腸炎耶爾森茴別離培養用。

【成分】H.理醇20明膠胰酶消化液10牛肉浸仔5豚陳5丙酮酸的2酵母音粉2氯化鈉1去氧膽酸鈉0.5中性紅

0.03新生霉素0.0025結晶紫0.001頭抱磺咤鈉（達克舒林）0.015氧苯酚（IrgasanDP300）0.004瓊脂粉12蒸鐳水

1LpH7.2?7.6

【制備】將上述成分（除新生律素和達克舒林）參加水中，煮沸溶化，冷至50C,以無菌手續參加新生霉素和頭

范橫咤鈉，婚姻內，傾入無菌平皿，備用。

【接種】取標本劃線接種于上述平板匕置22c培養48h0

【觀察結果】小腸耶爾森菌可利用甘露醇，其菌落nJ■形成中心深紅，有透明周邊的牛眼裝菌落。

【質量控制】配成之培養基應呈粉紅色或橘紅色透明。

小腸耶爾森菌接種后置22c培養48h,生長良好，菌落典型。

【臨床經驗】1.本培養基不需高壓滅菌。

2.該培養基穩定，置室溫可存放3?5d,冷置可保存1周。

其他細菌別離培養基

★CDC厭氧血瓊脂

【用途】本培養基營養較好，適用于多種厭氧菌的生長，也可作為選擇性培養基的根底，產黑色素的厭氧菌在標本

培養基上能形成典型菌落和色素，產氣莢膜梭菌有明顯的雙層溶血環。

【成分】胰福解酪蛋白15木瓜晦消化豆粉5（或植物陳）5氯化鋼51%氯化血紅素就.5ml酵母浸出粉5半胱翅酸

0.4瓊脂20蒸儲水1L脫纖維羊血50ml

【制備】將上述成分（除血液）混合溶解，調pH至7.4±0.1,121cl5min高壓蒸汽滅菌，冷卻至5TC參加脫纖

維羊血或兔血，搖勻后傾注平板。

★羅琴改進培養基(Lowenstein-Jendenmedium)

【用途】供結核分枝桿菌培養月.

【原理】結核分枝桿菌在人工培養時，必須含有足夠的特殊營養成分。天門冬素為細菌生長提供氮源。雞卵液與馬

鈴薯不僅是良好的營養物質，而且還能降低脂肪酸的毒性。甘油和枸椽酸鹽可補充碳源。鉀、鎂、磷、硫等無機鹽也是

細菌生長不可缺乏的生長元素、磷酸鹽:有緩沖作用，孔雀綠可抑制標本口的雜菌。

【成分】磷酸：氫鉀2.4MgSO4-7H2O0.24枸椽酸鈉（或枸嫁酸鎂）0.6天門冬素3.6甘油12ml蒸飾水1L馬鈴薯

淀粉30新鮮雞蛋液1L2%孔雀綠水溶液20ml

【制備】先將磷酸鹽、硫酸鎂、枸稼酸鎂、天門冬素及甘油加熱溶解于600ml蒸鐲水中，再填放馬鈴薯粉，邊放

邊攪拌，并繼續置沸水中加熱30min,待冷卻至60c左右時，參加雞散液1L及孔雀綠溶液200ml,充分混勻后，用無

菌操作分裝于?滅菌試管，每只5?6ml,塞緊橡皮塞（最好是翻口塞），置于血清凝固器內制成斜面，經85"C1h間歇滅

茜2次（或高壓滅菌103.43kPa20min）,待凝固后經無菌試驗，冷藏備用。

【接種】取晨咳痰或其他液體標本，經消化處理和離心沉淀的濃縮液0.1ml（約2滴）滴種于培養基的斜面上，盡

量搖晃，置35℃5%?10%二氧化碳溫箱內培養1?4周，觀察結果。

【觀察結果】凡在1周內發現生?長的菌落，一般不可能是結核分枝桿菌。在2周后牛.長的菌落，呈奶油狀，略帶

黃色，粗糙凸起，不透明，即取菌進行涂片染色鏡檢，及作其他鑒定。

【質量控制】自制或商品培養基在使用前，均應進行性能檢測，符合要求者方可應用。

【保存】置冰箱內2?4周有效。

【臨床經驗】1.本培養基pH約為.0，?般無須校正。

2.間歇滅菌的溫度不宜超過90C。

★亞硫酸鉀血瓊脂

【用途】別離白喉桿菌用。

【原理】白喉桿菌能吸收碎鹽，使其復原成金屬碗而形成黑色或灰黑色的菌落，因而在該培養基上較易區別。

【制備】先將蛋白陳、氯化鈉、牛肉杼、葡萄糖和胱額酸加水加熱溶解，調pH至7.6.參加瓊脂，高壓滅菌115c

15min,備用。

待上述根底培養基冷至50c左右時，用無菌操作參加已滅菌的亞確酸鉀溶液及羊血，混勻傾注平板。

【接種】將標本接種于亞硫酸鉀平板上。置35c孵箱，經24?48h培養，觀察結果。

【觀察結果】白喉桿菌能吸收諦鹽，使其復原成金屬硫而形成眼色或灰黑色的菌落。大局部其他菌落在此培養基上

被抑制，故較易鑒別。

★蠟樣芽胞桿菌選擇性瓊脂（Bacilluscereusselective）

【用途】用于各種食品螃樣芽胞桿菌菌落計數，及其他標本中需氧芽泡桿菌的別離培養，本培養基亦稱甘露醇卵黃

多黏菌素瓊脂（MYP瓊脂，mannitolsaltyilkpilymyxinagar）

【原理】本培養基內含有多面的素B,對革蘭陰性桿菌有抑制作用，卵黃主要是利用蠟樣芽胞桿菌卵磷脂酶陽性的

特征，于35C培養18?24h,其菌落周圍可出現一明顯沉淀環，以資鑒別。

【成分】蛋白陳10牛肉者1D小露醇10氯化鈉10瓊脂粉12蒸儲水950ml酚紅0.02550%1卵黃液50ml多黏菌

素B10萬UpH7.0?7.2

【制備】除酚紅、卵黃、多黏南素B,其余成分參加水中，加熱溶解。調pH7.0~7.2,加指示劑，121C75min高

壓滅菌。待冷至50C,參加50%卵黃液50ml,多鉆菌素B1000U,混勻，傾注無菌平皿。做無菌試驗合格后備用。

【接種】取待檢標本劃線接種立板，置35'C培養過夜。

【觀察結果】靖樣芽胞桿菌不利于甘露蟀.其菌落呈粉纖色.因產生卵磷脂幅.其菌落周闈形成一明亮的沉淀環C

假設菌落呈黃色那么不是蠟樣芽胞桿菌。

【質量控制】配成之平板應呈深紅色。

蠟樣芽胞桿菌接種平板35c過夜生長良好，菌落典型。

★彎曲菌選擇性培養基

(1)Skirrow培養基

【用途】