普通級實驗用羊的病原監(jiān)測普通級實驗用羊病原監(jiān)測旨在保障實驗用羊健康狀況，確保實驗結果可靠性。以下將從監(jiān)測范圍、采樣、檢測方法及流程、監(jiān)測結果判定與處理等方面詳細闡述。監(jiān)測范圍及病原種類普通級實驗用羊可能攜帶的病原較多，常見的細菌如布魯氏菌、金黃色葡萄球菌、多殺性巴氏桿菌、結核分枝桿菌等；病毒包括口蹄疫病毒、羊痘病毒、小反芻獸疫病毒、藍舌病病毒、偽狂犬病病毒等；寄生蟲有螨類、線蟲（如捻轉(zhuǎn)血矛線蟲）、吸蟲（如肝片吸蟲）、絳蟲（如莫尼茨絳蟲）等。采樣采樣動物應遵循隨機抽樣原則，在群體中選取健康狀況、年齡、性別等具有代表性的動物。采樣數(shù)量依據(jù)群體大小而定，一般群體數(shù)量少于100只時，至少抽取5-10只；群體數(shù)量在100-500只時，抽取比例為5%-10%；群體數(shù)量大于500只時，不少于50只。采樣部位與樣品類型-血液：采集羊的頸靜脈血，一般每只羊采血5-10mL，分別置于無抗凝劑和含抗凝劑的采血管中。無抗凝劑采血管用于血清分離，可檢測抗體；含抗凝劑采血管用于某些病原的核酸檢測或細菌培養(yǎng)。-組織：可采集肝、脾、肺、淋巴結等組織。采樣時使用無菌器械，每塊組織大小約為1-2cm3，放入無菌容器中，用于病原的分離培養(yǎng)、核酸檢測或病理檢查。-分泌物和排泄物：采集鼻腔分泌物、糞便、尿液等。鼻腔分泌物可用無菌棉拭子深入鼻腔采集；糞便和尿液收集后置于無菌容器。分泌物和排泄物可用于病原的分離鑒定，如檢測腸道寄生蟲蟲卵及病毒、細菌核酸。-皮膚刮取物：對于懷疑有皮膚寄生蟲感染的羊，用消毒刀片在病變皮膚與健康皮膚交界處刮取皮屑，直到微微出血，放入盛有10%氫氧化鈉溶液的容器中，用于螨蟲等寄生蟲檢查。采樣注意事項采樣過程嚴格遵守無菌操作規(guī)程，避免交叉污染。采樣人員應穿戴工作服、口罩、手套等防護用品。采集的樣品要及時標記，注明動物編號、采樣時間、采樣部位等信息，并盡快送實驗室檢測。檢測方法及流程細菌檢測-涂片鏡檢：將采集的組織或分泌物等樣品直接涂片，經(jīng)革蘭氏染色或抗酸染色后，在顯微鏡下觀察細菌的形態(tài)、大小、染色性等特征，初步判斷是否有細菌感染及細菌的類型。例如，革蘭氏陽性菌呈紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色；抗酸染色陽性為結核分枝桿菌等抗酸菌。-分離培養(yǎng)：將樣品接種到適宜的培養(yǎng)基上，如血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板等，在合適的溫度和氣體條件下培養(yǎng)。不同細菌的培養(yǎng)條件有所差異，如需氧菌在普通培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)，厭氧菌需在厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)一定時間后，觀察菌落形態(tài)、大小、顏色、透明度等特征，進一步分離純化細菌。-生化鑒定：對分離得到的細菌進行生化試驗，如糖發(fā)酵試驗、吲哚試驗、觸酶試驗等，根據(jù)細菌對不同底物的代謝能力和生化反應結果，確定細菌的種類。-血清學鑒定：用已知的特異性抗體檢測細菌抗原，常用方法有凝集試驗、沉淀試驗等。如布魯氏菌的虎紅平板凝集試驗，可快速篩查羊是否感染布魯氏菌。病毒檢測-病毒核酸檢測：采用核酸提取技術從樣品中提取病毒核酸，然后通過聚合酶鏈式反應（PCR）、反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應（RT-PCR）等方法擴增病毒特定的基因片段，經(jīng)電泳檢測擴增產(chǎn)物，判斷是否存在病毒核酸。例如，口蹄疫病毒、小反芻獸疫病毒等常用RT-PCR檢測。-血清學檢測：檢測羊血清中針對病毒的特異性抗體，常用方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、中和試驗等。ELISA具有操作簡便、靈敏度高的特點，可用于大規(guī)模的血清學篩查；中和試驗通過檢測抗體中和病毒感染細胞的能力，更準確地評估抗體滴度和免疫狀態(tài)。寄生蟲檢測-直接涂片法：將糞便等樣品直接制成涂片，在顯微鏡下觀察寄生蟲蟲卵或幼蟲。如檢查捻轉(zhuǎn)血矛線蟲蟲卵時，在低倍鏡下可見無色透明、橢圓形的蟲卵。-飽和鹽水漂浮法：將糞便與飽和鹽水混合，使蟲卵漂浮在液面，取液面物質(zhì)鏡檢，可提高蟲卵的檢出率。適用于大多數(shù)線蟲蟲卵的檢測。-沉淀法：對于吸蟲蟲卵等比重較大的寄生蟲，可采用沉淀法。將糞便加水混合、過濾，然后反復沉淀，取沉渣鏡檢。-皮膚刮取物檢查：將皮膚刮取物經(jīng)處理后，如加熱使角質(zhì)溶解，然后鏡檢，觀察是否有螨蟲等寄生蟲。監(jiān)測結果判定與處理結果判定根據(jù)各項檢測結果，按照相應的國家標準、行業(yè)標準或相關規(guī)范進行判定。如果檢測到病原微生物或寄生蟲，且達到一定的陽性率或感染強度，判定為感染陽性；未檢測到病原或檢測結果低于判定標準，則判定為陰性。處理措施-陽性結果處理：對于檢測出病原的羊，應及時隔離飼養(yǎng)，防止疫情擴散。根據(jù)病原的種類和感染情況，選擇合適的治療方法。如感染布魯氏菌的羊，為防止人獸共患疾病傳播，應進行撲殺、無害化處理；感染一般細菌或寄生蟲的羊，可使用相應的抗生素或驅(qū)蟲藥物治療。同時，對養(yǎng)殖環(huán)境進行全面的消毒，對與病羊接觸過的其他羊進行重新檢測和觀察。-陰性結果處理：監(jiān)測結果為陰性的羊可繼續(xù)用于實驗或正常飼養(yǎng)，但應定期進行再次監(jiān)測，確保羊群健康狀況持續(xù)穩(wěn)定。試題1.普通級實驗用羊常見的細菌病原不包括以下哪種？A.布魯氏菌B.流感病毒C.金黃色葡萄球菌D.多殺性巴氏桿菌2.普通級實驗用羊采樣數(shù)量在群體數(shù)量少于100只時，至少抽取多少只？A.1-2只B.3-4只C.5-10只D.10-15只3.采集羊頸靜脈血做血清檢測時，采血管應選擇？A.含抗凝劑B.無抗凝劑C.兩者均可D.不確定4.以下哪種采樣方法適用于檢測羊皮膚螨蟲？A.血液采樣B.組織采樣C.皮膚刮取物采樣D.分泌物采樣5.采樣過程中避免交叉污染應采取的主要措施是？A.采樣人員穿工作服B.嚴格遵守無菌操作規(guī)程C.采樣后及時標記D.盡快送實驗室檢測6.革蘭氏染色中，革蘭氏陽性菌呈現(xiàn)什么顏色？A.紅色B.紫色C.藍色D.黃色7.用于分離培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基通常不包括？A.血瓊脂平板B.巧克力瓊脂平板C.馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基D.麥康凱瓊脂平板8.生化鑒定細菌常用的試驗不包括？A.糖發(fā)酵試驗B.凝集試驗C.吲哚試驗D.觸酶試驗9.檢測羊口蹄疫病毒核酸常用的方法是？A.涂片鏡檢B.ELISAC.RT-PCRD.中和試驗10.檢測羊血清中針對病毒的特異性抗體，靈敏度高且適合大規(guī)模篩查的方法是？A.電泳試驗B.ELISAC.核酸提取D.分離培養(yǎng)11.以下哪種寄生蟲檢測方法可用于檢測吸蟲蟲卵？A.直接涂片法B.飽和鹽水漂浮法C.沉淀法D.皮膚刮取物檢查12.采集羊鼻腔分泌物應使用什么工具？A.注射器B.無菌棉拭子C.手術刀D.鑷子13.普通級實驗用羊群體數(shù)量在100-500只時，采樣比例為？A.1%-3%B.3%-5%C.5%-10%D.10%-15%14.羊痘病毒常用的檢測方法是？A.直接涂片法檢測細菌B.RT-PCR檢測核酸C.飽和鹽水漂浮法D.生化鑒定細菌15.下列哪種檢測屬于細菌的血清學鑒定方法？A.革蘭氏染色B.凝集試驗C.觸酶試驗D.糖發(fā)酵試驗16.檢測羊體內(nèi)寄生蟲，飽和鹽水漂浮法適用于？A.吸蟲蟲卵B.大多數(shù)線蟲蟲卵C.絳蟲節(jié)片D.螨蟲17.采樣時，對皮膚刮取物應放入以下哪種溶液中？A.生理鹽水B.75%酒精C.10%氫氧化鈉溶液D.蒸餾水18.分離培養(yǎng)細菌時，需氧菌一般在多少溫度下培養(yǎng)？A.25℃B.37℃C.42℃D.50℃19.抗酸染色陽性的細菌可能是？A.大腸桿菌B.金黃色葡萄球菌C.結核分枝桿菌D.綠膿桿菌20.檢測羊血清中針對病毒的中和抗體一般采用什么方法？A.ELISAB.中和試驗C.PCRD.涂片鏡檢21.檢測羊糞便中寄生蟲蟲卵，最常用的方法是？A.直接涂片法B.免疫熒光法C.核酸檢測D.組織培養(yǎng)法22.普通級實驗用羊群體數(shù)量大于500只時，采樣不少于多少只？A.20只B.30只C.40只D.50只23.采集羊血液時，含抗凝劑的采血管可用于以下哪種檢測？A.血清學檢測抗體B.病原的核酸檢測C.生化檢驗血糖D.甲狀腺功能檢測24.羊感染以下哪種病原需要撲殺、無害化處理？A.普通細菌感染B.螨蟲感染C.布魯氏菌D.肝片吸蟲25.對于檢測結果為陰性的羊，應？A.馬上淘汰B.繼續(xù)監(jiān)測C.立即用藥預防D.不再管理26.用直接涂片法檢測糞便時，在低倍鏡下可見無色透明、橢圓形蟲卵，可能是？A.吸蟲蟲卵B.絳蟲節(jié)片C.捻轉(zhuǎn)血矛線蟲蟲卵D.球蟲卵囊27.以下哪種病毒檢測方法中檢測病毒核酸的是？A.ELISAB.中和試驗C.RT-PCRD.乳膠凝集試驗28.金黃色葡萄球菌革蘭氏染色結果為？A.陰性（紅色）B.陽性（紫色）C.抗酸陽性D.無顏色29.檢測羊偽狂犬病病毒，常用的是？A.直接涂片法查細菌B.飽和鹽水漂浮法查蟲卵C.PCR檢測核酸D.生化鑒定細菌30.皮膚刮取物檢查螨蟲，顯微鏡下可見螨蟲的特征不包括？A.圓形或橢圓形B.有足C.會運動D.有翅膀31.羊采樣中，采集鼻腔分泌物使用無菌棉拭子應深入到？A.鼻孔外B.鼻腔淺層C.鼻腔深部D.咽喉部32.當檢測到羊感染一般細菌時，可采取的措施是？A.直接撲殺B.使用抗生素治療C.不用處理D.隔離觀察但不用藥33.以下哪種病原不屬于人獸共患病原？A.布魯氏菌B.狂犬病病毒C.羊肺炎支原體D.結核分枝桿菌34.小反芻獸疫病毒最常用的檢測方法是？A.直接檢測細菌B.ELISA檢測抗體C.RT-PCR檢測核酸D.沉淀法查蟲卵35.采集羊組織樣品時，每塊組織大小約為？A.0.1-0.5cm3B.1-2cm3C.2-5cm3D.5-10cm336.細菌的生化鑒定試驗中，能分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的細菌，糖發(fā)酵試驗結果是？A.培養(yǎng)基不變色B.培養(yǎng)基變紅且有氣泡C.培養(yǎng)基變藍D.培養(yǎng)基變黑37.檢測羊血清中藍舌病病毒抗體常用的方法是？A.直接涂片查細菌B.中和試驗C.飽和鹽水漂浮法D.生化鑒定細菌38.采集的樣品標記信息應不包括以下哪項？A.動物編號B.采樣人員姓名C.采樣時間D.采樣部位39.普通級實驗用羊病原監(jiān)測中，血液采樣多從以下哪個部位進行？A.前肢靜脈B.頸靜脈C.后肢靜脈D.股動脈40.羊感染寄生蟲時，用于分離寄生蟲的糞便樣品最好在什么時候采集？A.喂食前B.剛排下時C.放置一段時間后D.與其他物質(zhì)混合后41.用ELISA檢測羊血清中病毒抗體的優(yōu)點不包括？A.操作簡便B.靈敏度高C.成本高D.可大規(guī)模篩查42.檢測羊體內(nèi)后圓線蟲蟲卵，可選用的方法是？A.飽和鹽水漂浮法B.抗酸染色法C.革蘭氏染色法D.生化鑒定法43.采樣過程中避免交叉污染，采樣人員不需要穿戴的是？A.工作服B.墨鏡C.口罩D.手套44.羊感染結核分枝桿菌，檢測方法優(yōu)先選擇？A.飽和鹽水漂浮法查蟲卵B.ELISA檢測抗體C.抗酸染色涂片鏡檢D.生化鑒定細菌45.對于普通級實驗用羊的養(yǎng)殖環(huán)境，消毒頻率應根據(jù)？A.羊的年齡B.天氣情況C.監(jiān)測結果和發(fā)病情況D.羊的體重46.血清學檢測羊偽狂犬病病毒抗體，常用的方法是？A.直接涂片法B.中和試驗C.飽和鹽水漂浮法D.RT-PCR47.檢測羊糞便中肝片吸蟲蟲卵，最好用？