糧食中真菌毒素的液相色譜法定量分析一、基本原則本項目為農產品食品檢驗員職業技能操作比賽機構職工組項目。選手應按照《食品安全國家標準食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的測定》（GB5009.111-2016）第二法“免疫親和層析凈化高效液相色譜法”的規定，在規定時間內完成樣品前處理、標準曲線法定量測定糧食中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇含量。從樣品前處理操作、最佳色譜條件選擇、結果準確性、操作熟練性等幾方面進行考核。本項目滿分100分,占相應組別技能操作比賽總成績的40%。二、主要考核要求（一）比賽時間55分鐘。（二）選手根據比賽內容，合理計劃并安排實驗。（三）使用競賽統一提供的試劑、標準溶液，以及儀器與用具。（四）采用手工進樣。（五）在規定時間內，完成下列操作：1.按標準方法進行樣品前處理;2.按規定方法制作標準工作曲線（單點）;3.不做空白試驗，樣品做單試驗;4.根據提供的色譜圖，優化色譜分析條件;5.采用外標法定量測定樣品中待測組分含量。（六）打印色譜圖和相關數據。（七）在記錄表上如實填寫原始記錄并進行數據處理。要求記錄規范，計算正確，結果準確。（八）測定結束后，相關儀器復位。（九）提前完成者，按規定加分。三、主要儀器設備序號名稱規格數量備注1液相色譜儀附：紫外檢測器、C18柱、工作站、電腦、打印機等配套設備。型號另行公布1臺完好2色譜儀配套工具箱—1件—3高純氮（附減壓閥）99.99%1瓶完好4氮吹儀型號另行公布1臺完好5電子天平感量0.01g1臺清潔、完好6振蕩器往返式1臺完好7免疫親和柱型號另行公布2支完好8固相萃取裝置（帶空氣泵）型號另行公布1套完好9渦旋器型號另行公布1臺完好10漏斗架—1個完好11試管架—1個完好12注射器10mL，一次性1支潔凈、干燥、完好13注射器2mL，一次性1支潔凈、干燥、完好14試管具塞，10mL1只潔凈、干燥、完好15玻璃瓶具螺旋蓋，4mL1只潔凈、干燥、完好16微量注射器25μL1支潔凈、干燥、完好17吸量管1mL2支潔凈、完好18吸量管2mL2支潔凈、完好19吸量管5mL2支潔凈、完好20容量瓶10mL1只潔凈、干燥、完好21玻璃短頸漏斗10cm1只潔凈、干燥、完好22量筒100mL1只潔凈、干燥、完好23具塞錐形瓶250mL1只潔凈、干燥、完好24燒杯50mL2只潔凈、干燥、完好25水相微孔濾膜0.45?2個完好26玻璃纖維濾紙直徑11cm,孔徑1.5?4張完好27樣品勺不銹鋼，中號1把清潔、完好28稱量紙15cm×15cm5張清潔、完好29標簽紙—1張完好30廢物廢液杯1000mL1只潔凈、完好31計算器普通1個完好32儀器使用記錄表—1張清潔、完好33計時器—1個完好34A4紙—2張完好四、試劑及樣品序號名稱濃度/規格數量備注1甲醇色譜純——2乙腈色譜純——3聚乙二醇分析純—置于聚乙烯瓶中4DON標準儲備液100?/mL10mL置于聚乙烯瓶中5PBS緩沖鹽溶液—50mL—6一級水—500mL置于500mL聚乙烯瓶中7糧食樣品—100g粉碎后樣品置于250mL具塞廣口瓶中，標明樣品信息五、分值分配及評分要點序號比賽內容評分要點配分備注1樣品處理樣品提取采用振蕩提取、玻璃纖維濾紙過濾11—免疫親和層析凈化10—氮吹濃縮定容4—2儀器檢查與開機檢查儀器、流動相、色譜柱、檢測器等連接開機順序正確、設置色譜條件、平衡色譜柱5—3標準工作溶液配制移液管準備、標準溶液稀釋定容4—4色譜條件優化采用標準溶液進行色譜條件優化通過柱溫、流動相選擇、流動相流速選擇改善色譜分離性能和分析時間9—標準溶液、待測樣品分析微量進樣器清洗三次及以上，采用微量注射器準確吸取一定體積標準使用溶液、樣品溶液進樣分析5樣品溶液未經濾膜過濾，停止操作，本題不得分6關機分析工作結束后，按規范進行關機操作5—7原始記錄待測樣品編號、名稱、待測樣品質量、標準溶液濃度，標準溶液和樣品溶液保留時間及響應信號等14—8定量結果準確性考評測定結果與實際值偏差，根據偏差大小確定得分30—9文明操作無嚴重灑漏現象；廢液處理得當；實驗結束，清理臺面，儀器用具復位3—總分100—10其他1.每損壞1件玻璃儀器從總分中扣10分，但總得分≥0分；損壞3件以上（不包括3件）玻璃儀器，本項目成績計為0分。2.損壞進樣器從總分中扣30分。3.每提前1分鐘完成加2分,最多加6分。出現下列情況不加分：①未按標準