ICS65.020.01CCSB30DB36江西省地方標(biāo)準(zhǔn)DB36/T1699—2022辣椒抗灰霉病苗期人工接種鑒定技術(shù)規(guī)程Technicalregulationsforidentificationofartificialinoculationofpepperagainstgraymoldatseedlingstage2023-05-01實(shí)施江西省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB36/T1699—2022目次前言................................................................................II1范圍..............................................................................12規(guī)范性引用文件....................................................................13術(shù)語和定義........................................................................14育苗..............................................................................15人工接種..........................................................................26抗性鑒定..........................................................................2附錄A（資料性）辣椒灰霉病癥狀........................................................4IDB36/T1699—2022前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由江西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件起草單位：江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所、高安市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、永豐縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、彭澤縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、萬安縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、玉山縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、湖口縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局。本文件主要起草人：胡建坤、黃蓉、黃瑞榮、華菊玲、黃國東、張文志、張會(huì)國、曾招圣、曾欽華、賈志新、肖慧、姜仙美、倪永輝。IIDB36/T1699—2022辣椒抗灰霉病苗期人工接種鑒定技術(shù)規(guī)程1范圍本文件規(guī)定了辣椒抗灰霉病苗期人工接種鑒定的術(shù)語和定義、育苗、人工接種及抗病性鑒定與評(píng)價(jià)。本文件適用于辣椒品種對(duì)灰霉病抗性的鑒定和評(píng)價(jià)。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T2118蔬菜育苗基質(zhì)3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1病原菌是灰葡萄孢（Botrytiscinerea）的一種辣椒真菌性病害。主要發(fā)病癥狀詳見附錄A。4育苗以質(zhì)優(yōu)泥炭（粒徑0mm～6mm）為育苗基質(zhì)。搗碎后加入適量蔬菜復(fù)合肥（20gN、P、K三元復(fù)合肥，N：P：K15-15-15）與適量的清水混配均勻，調(diào)節(jié)基質(zhì)含水率至60%。育苗基質(zhì)選用標(biāo)準(zhǔn)參照NY/T2118蔬菜育苗基質(zhì)。1DB36/T1699—2022將制備好的基質(zhì)置入底部有孔的塑料育秧盤（規(guī)格：54cm×28cm×5cm，孔徑：6cm×6cm-3cm×3cm，32孔）中，基質(zhì)量以裝平秧盤為準(zhǔn)。秧盤中每孔穴播辣椒種子4粒～5粒，每個(gè)品種播種1盤，即32孔穴。4.3接種前管理將育苗盤置于20℃～25℃溫室大棚內(nèi)土層上，種子發(fā)芽出苗后，保持秧盤基質(zhì)濕潤。出苗7d～10d定苗，每穴保留健壯辣椒苗3株，常規(guī)管理。苗齡20d～25d，每盤追施尿素2g（兌水配成溶液）。辣椒苗可使用殺蟲劑防蟲，但不使用殺菌劑防病。待幼苗長至4葉期進(jìn)行接種鑒定。5人工接種5.1接種溫度以春、秋季為宜。露地接種，氣溫宜在18℃～25℃進(jìn)行；溫室（棚）接種，氣溫可調(diào)節(jié)至20℃左右。5.2接種體制備采用灰霉病菌強(qiáng)致病力菌株接種。由保存試管中挑取菌核或菌絲塊移至裝有PDA培養(yǎng)基的無菌培養(yǎng)皿中央進(jìn)行活化（20℃，3d～5d），于菌落邊緣用打孔器取新鮮菌絲塊接入新PDA培養(yǎng)基上，20℃下黑暗培養(yǎng)14d后用少量無菌水將灰霉菌孢子洗下，在光學(xué)顯微鏡下使用血球計(jì)數(shù)板對(duì)菌懸液中的孢子進(jìn)行計(jì)數(shù)，用無菌水將洗下的孢子液配成10/mL的孢子懸浮液待用。PDA培養(yǎng)基的制方為：200g土豆、20g6蔗糖和15g瓊脂粉，蒸餾水1L。保存于4℃條件下的辣椒灰霉病菌（Botrytiscinerea）菌株接種在平板PDA培養(yǎng)基上活化，取新鮮菌絲塊接入新的平板PDA培養(yǎng)基上，20℃下黑暗培養(yǎng)14d，收集灰霉菌孢子并配成106用移液槍定量吸取孢子懸浮液，將孢子液滴加在辣椒苗心生長點(diǎn)上，接種菌液量30μL/株。接種前將培育辣椒苗的基質(zhì)用清水澆透，接種后在育苗盤上支起小棚并用塑料膜覆蓋棚架密閉，每日于小棚四周澆水保濕。接種病菌后的辣椒苗可置溫室（棚）進(jìn)行管理，溫度20℃左右；平均溫度在18-25℃時(shí)也可在露地進(jìn)行管理。辣椒苗接菌后保濕24h，之后噴清水保持盤中基質(zhì)濕潤。露地管理雨天需做避雨處理，晴天氣溫偏高需做遮陽處理。保濕與避雨處理均可用竹條與塑料薄膜制成拱棚覆蓋辣椒苗。6抗性鑒定記錄接種日期、病害癥狀始現(xiàn)期。接種后20d～25d，調(diào)查參鑒材料的病株數(shù)，計(jì)算病株率，感病對(duì)照品種病株率達(dá)50%以上時(shí)進(jìn)行最終病情調(diào)查。病株率計(jì)算方法參照公式（1）。病株率（%）=發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100..................................(1)人工接種鑒定結(jié)果依據(jù)抗病性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)劃分辣椒品種的抗感水平。2DB36/T1699—2022根據(jù)調(diào)查統(tǒng)計(jì)的各品種苗期病株率，按照表1評(píng)定各參鑒品種對(duì)灰霉病的抗性。表1辣椒品種苗期抗灰霉病評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)抗性類型高抗（HR）抗（R）病株率（%）≤1.01.1～10.010.1～30.030.1～50.050.1～70.0＞70.0中抗（MR）中感（MS）感病（S）高感（HS）3DB36/T1699—2022AA附錄A（資料性）辣椒灰霉病癥狀該病從辣椒苗期至成株期均可發(fā)生，可危害辣椒的整個(gè)生育期。主要危害葉片、莖稈、花、果實(shí)。苗期發(fā)病，初子葉頂端褪綠變黃，濕度大時(shí)呈水浸狀軟腐；后擴(kuò)展至幼莖，幼莖變細(xì)縊縮呈棕褐色，使幼苗病莖折斷或萎蔫枯死。成株期發(fā)病，初始葉外沿褪綠形成水浸狀淺褐色病斑，擴(kuò)展后呈圓形或橢圓形、褐色并帶有淺褐色輪紋的大型病斑，濕度大時(shí)病斑上密布灰色霉層，發(fā)病末期可使