家畜冷凍精液生產技術規程2023-10-20實施2023-10-20實施本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件由甘肅省農業農村廳提出并監督實施。本文件由甘肅省畜牧業標準化技術委員會歸口。本文件起草單位：慶陽市農業科學研究院、正寧縣畜牧獸醫站。本文件主要起草人：施海娜、梁萬鵬、梁永虎、蘇濤龍、耿智廣、李世恩、劉雨田、朱正生、張金霞、徐振飛、宋敏、趙鳳妮、李菲菲。本文件由慶陽市農業科學研究院負責解釋。I本文件規定了家畜冷凍精液生產的種公畜要求、精液采集、精液處理和存儲運輸等方面的技術要求。本文件適用于牛、羊、馬、驢等家畜冷凍精液的生產，其它可參照執行。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。NY/T12343術語和定義牛冷凍精液生產技術規范羊冷凍精液生產技術規程馬和驢冷凍精液本文件沒有需要界定的術語和定義。4種公畜要求4.1種公畜的要求：牛按照NY/T1234的規定執行，山羊按照NY/T3186的規定執行，馬和驢按照NY/T3796的規定執行。4.2體型外貌和生產性能符合品種特性且具備特級、一級標準，無疫病。5采精準備5.1器械準備采精器械(采精外殼、內膽、一次性過濾采精袋、不銹鋼保溫集精杯、集精管)、離心機、移液器 (量程1μL、20μL、5mL)、精液冷凍架、磁力攪拌器、水浴鍋、高壓滅菌鍋、干燥箱、冷藏冷凍箱、長柄鑷子、生物顯微鏡、恒溫電熱板、液氮罐、家畜用密度儀、精液質量分析系統、立式平衡柜、灌裝打印一體機、程序冷凍儀、生物安全柜。5.2試劑耗材準備稀釋劑、蒸餾水、凡士林、生理鹽水、液氮、過濾采精袋、燒杯(100mL、200mL)、量筒(10mL、50mL)、量杯(100mL、200mL)、細管(0.25mL/劑、0.5mL/劑)、指型管、鑷子、剪刀、水銀溫度計、保溫瓶、無菌紗布、無菌紗布袋、載玻片、蓋玻片、濾紙、玻璃棒、噴壺、毛巾、標簽紙、記號筆、細繩。125.4.1種公畜采精前應用誘導的方法使其具有5.4.2利用發情母畜或假臺畜對種公畜進行調教，使其建立條件反射。內膽、集精杯、保溫套和一次性過濾采精袋。假陰道用75%的酒精棉球擦拭消毒，無消毒劑殘留后注人38.5℃~39.5℃左右溫水約500mL,假陰道內膽壁溫度保持在38.5℃~39.5℃,充入氣體使假陰道內膽壁6.1采精場所應保持安靜、清潔衛生，地面防滑，并有護欄等安全保護設施。6.2種公畜體表應清潔衛生，刷洗干凈外陰部位，如陰毛過長時應適度修剪。包皮確需沖洗的，沖洗干凈30min后才可進行采精操作。6.3將采精用具有規則地擺放在操作臺上，盛裝潤滑劑的燒杯每次使用前用水煮沸消毒后置于37.5℃6.4采精前將假陰道從恒溫箱中取出，在假陰道內膽前端三分之一處均勻涂抹少量潤滑劑(凡士林與液體石蠟1:1),牛、山羊假陰道后端套入乳膠三角漏斗并固定好，在漏斗的后端安裝上集精管，集精管可套裝有35℃溫水的平底塑料瓶并套上保溫套。馬、驢的假陰道后端安裝集精杯并套好保溫套。馬、驢的鮮精需用4層醫用紗布過濾，記錄采精量后將集精管置于37.5℃的水浴鍋中(牛、山羊不需此步驟)。正常精液色澤呈乳(灰)白色或淡黃色，有輕微的腥味。7.3.2鮮精活力(牛≥0.7、山羊≥0.65、馬≥0.6、驢≥0.65),冷凍后活力(牛≥0.4、山羊≥0.35、入2mL的離心墊，按1000rpm離心20min(不使用離心墊，則按600rpm～800rpm,離心10min),去掉上馬、驢參照附錄A進行稀釋量計算，牛、山羊按照原精液中，輕輕搖勻后將盛精液的燒杯放入37.5℃水浴鍋中水浴10min。將冷凍架放在泡沫箱內，在箱內倒入一定量的液氮，液氮面低于冷在-110℃~-130℃的溫度下熏蒸冷凍8min～10min,最后將精液細管全部浸入液氮中(應符合附錄B的要求、適用于科研院所地方優良品種保護、小型養殖企業良種快速擴繁)。8.1取一支細管凍精快速浸入37.5℃水浴鍋中并輕輕晃動，待溶解后立即取出，用吸水紙或紗布擦干8.2馬、驢、山羊凍精活力≥0.35為合格，牛凍精活力≥0.4為合格(鏡檢程序見7.3)。ZSN0520230601(譯為：早勝牛5號2023年06月01日生產)。34時隨時查看罐內液氮量并及時添加，確保凍精紗布袋始終浸入液氮液氮罐口密封牢固，嚴防液氮罐顛倒。搬運液氮罐時要輕拿輕放，避免液(資料性)不同活力精液稀釋量計算方法對于0.5mL細管，實際每支細管有0.4mL左右精液，要求每支細管的有效精子為0.50億個，則不同冷凍后精子活力的目標密度如表A.1所示。表A.1稀釋量計算凍后活力(0.50億/凍后活力)