ICS11.020CCSC50團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/CRHA088—2024————————————————————————————————病理免疫組織化學(xué)檢測質(zhì)控品要求Qualitycontrolspecimenset-upandusagespecificationforpathologyimmunohistochemicaldetection2024-10-14發(fā)布 2024-10-20實施中國研究型醫(yī)院學(xué)會 發(fā) 布T/CRHA088—2024目 次前言 Ⅱ引言 Ⅲ范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語和定義 1免疫組織化學(xué)檢測質(zhì)控品的分類及設(shè)置要求 5免疫組織化學(xué)檢測質(zhì)控品的設(shè)計與選擇 6操作方法及程序 6免疫組織化學(xué)檢測質(zhì)控品的判讀與報告 7檢測失敗的處理方法 7免疫組織化學(xué)檢測質(zhì)控品的質(zhì)量控制 7管理和文件 8附錄A（規(guī)范性）質(zhì)控品的染色判讀 9附錄B（規(guī)范性）質(zhì)控品日常操作規(guī)范 14附錄C（資料性）病理診斷抗體的Ⅰ級質(zhì)控品列表 16附錄D（資料性）質(zhì)控品的意義與特點 20附錄E（資料性）液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品 26附錄F（資料性）類組織質(zhì)控品 30參考文獻(xiàn) 33IT/CRHA088—2024前 言GB/T1.1—20201部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由中國研究型醫(yī)院學(xué)會超微與分子病理學(xué)專業(yè)委員會提出。本文件由中國研究型醫(yī)院學(xué)會歸口。首都醫(yī)科大學(xué)附屬首都醫(yī)科大學(xué)附屬IIT/CRHA088—2024引 言免疫組織化學(xué)技術(shù)是最重要的病理診斷輔助技術(shù)之一，其結(jié)果用于病理診斷和鑒別診方法標(biāo)準(zhǔn)無相關(guān)具體標(biāo)準(zhǔn)和要求。IIIT/CRHA088—2024病理免疫組織化學(xué)檢測質(zhì)控品要求范圍規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T22576醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力的專用要求GB/T27424—202042061—20221181—2021免疫組織化學(xué)試劑盒CNAS-CL02-A001:2023醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則的應(yīng)用要求術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1免疫組織化學(xué)immunohistochemistry,IHC利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，用已知抗體來檢測待測組織或細(xì)胞中的目標(biāo)抗原，（對組織細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定位、定性及定量研究的實驗技術(shù)，簡稱“免疫組化”，縮略語為“IHC”。3.2病理免疫組織化學(xué)檢測質(zhì)控品pathologyimmunohistochemistrycontrolspecimen注2：質(zhì)控品與免疫組化對照、對照物、對照品、對照物質(zhì)和質(zhì)控物質(zhì)是同義詞。3.3非特異性染色non-specificstaining免疫染色過程中，凡不屬于特異性抗原抗體反應(yīng)所出現(xiàn)的染色通常稱為非特異性染色。1T/CRHA088—2024[來源：YY/T1181-2021,3.7]3.4標(biāo)準(zhǔn)化normalization3.5免疫組化染色的檢測下限lowlimitofdetection,LLOD在已知的可低表達(dá)某一抗原蛋白的組織/細(xì)胞成分中觀察的陽性反應(yīng)，其設(shè)置必須遵循適用原則。3.6穩(wěn)定性stability質(zhì)控品的穩(wěn)定性：質(zhì)控品在規(guī)定界限內(nèi)保持其性能特性的能力。檢測流程的穩(wěn)定性：指免疫組化的實驗條件，包括抗體孵育溫度/時間等的一致性；以及免疫組化的實驗步驟，包括修復(fù)、洗滌、孵育、顯色等步驟的一致性。檢測結(jié)果的穩(wěn)定性：在相同樣本和實驗條件下，重復(fù)進(jìn)行免疫組化檢測，得到的結(jié)果是一致的。3.7均勻性homogeneity質(zhì)控品各指定部分中某個特定特性值的一致性。[來源：GB/T27424-2020,3.3]3.8準(zhǔn)確性accuracy檢測結(jié)果與檢測真值之間的一致程度。3.9可重復(fù)性reproducibility即檢測精確度，指相同的條件下，獲得的一系列檢測結(jié)果的一致程度。3.10特異性specificity3.11互換性commutability2T/CRHA088—20243.12短串聯(lián)重復(fù)序列shorttandemrepeats,STR短串聯(lián)重復(fù)序列，也稱微衛(wèi)星DNA（microsatelliteDNA），是一段包含1-6bp的重復(fù)DNA序列。由于其多態(tài)性和高突變率，又被稱為細(xì)胞的DNA指紋。STRSTR鑒定可檢測細(xì)胞是否發(fā)生交叉污染或者誤認(rèn)的情況。3.13單核苷酸多態(tài)性singlenucleotidepolymorphisms,SNP在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性，包括堿基的顛換、轉(zhuǎn)換、插入和缺失。3.14DNA條形碼DNAbarcode生物體內(nèi)能夠代表該物種特征的、標(biāo)準(zhǔn)的、有足夠變異的、易擴(kuò)增且相對較短的DNA片段。DNA條形碼技術(shù)是利用生物體DNA中一段保守片段對物種進(jìn)行快速準(zhǔn)確鑒定的新興技術(shù)，該技術(shù)基于對線粒體基因細(xì)胞色素c氧化酶亞基1（通常稱為CO1,COI1或COX1）測序結(jié)果進(jìn)行分型。質(zhì)控品的分類及設(shè)置要求質(zhì)控品分類按性質(zhì)分類質(zhì)控品分為內(nèi)對照/內(nèi)質(zhì)控品和外對照/外質(zhì)控品。內(nèi)對照/內(nèi)質(zhì)控品：指存在于待測樣本內(nèi)部，無需獨立提供的質(zhì)控品。外對照/外質(zhì)控品：指獨立于待測樣本外，需要額外添加的質(zhì)控品。按來源分類質(zhì)控品分為組織質(zhì)控品和細(xì)胞質(zhì)控品。F），又依據(jù)制作工藝可分為組織切片質(zhì)控品、組織懸液質(zhì)控品等。細(xì)胞質(zhì)控品：指采用細(xì)胞制品作為質(zhì)控品；細(xì)胞質(zhì)控品包括液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品（詳見附錄E）、固態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品等。按用途分類質(zhì)控品分為陽性質(zhì)控品和陰性質(zhì)控品。3T/CRHA088—2024陽性質(zhì)控品：指已知含有目標(biāo)抗原的免疫組化質(zhì)控品。陰性質(zhì)控品：指已知不含目標(biāo)抗原的免疫組化質(zhì)控品。按質(zhì)控精細(xì)化程度分類質(zhì)控品分為批次質(zhì)控品和片內(nèi)質(zhì)控品。（片內(nèi)質(zhì)控品：指在每張待測樣本玻片上設(shè)置的質(zhì)控品。按供應(yīng)來源分類質(zhì)控品分為自制質(zhì)控品和商品化質(zhì)控品。自制質(zhì)控品：指由各級各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)病理科自行制備和使用的質(zhì)控品。按級別分類質(zhì)控品分為Ⅰ級質(zhì)控品和Ⅱ級質(zhì)控品。（包括但不限于組織、細(xì)胞、商品化質(zhì)控品以及未來可能發(fā)現(xiàn)的更加穩(wěn)定、特異、準(zhǔn)確的物質(zhì)）。（市18種病理診斷抗體的Ⅰ級質(zhì)控品列表見附錄C5.4.1至5.4.3的要求。Ⅱ級質(zhì)控品：指經(jīng)過Ⅰ級質(zhì)控品比對驗證過的質(zhì)控品、或經(jīng)過3家三級或以上醫(yī)院病理（包括但不（如伴隨診斷抗體）的質(zhì)控品宜和Ⅰ級質(zhì)控品進(jìn)行比對驗證。5.4.1至5.4.3的要求。設(shè)置要求4T/CRHA088—2024質(zhì)控品的設(shè)置：用于免疫組化檢測性能驗證、或者應(yīng)嚴(yán)格質(zhì)控的項目（4.2.2與治療藥物靶點檢測相關(guān)的病理檢測項目和伴隨診斷項目，應(yīng)設(shè)置片內(nèi)質(zhì)控品?；蜃儺悾ㄈ缤蛔兓蛉笔В╊惒±頇z測項目，應(yīng)設(shè)置片內(nèi)質(zhì)控品。與診斷或鑒別診斷相關(guān)的病理檢測項目，宜設(shè)置片內(nèi)質(zhì)控品。質(zhì)控品的設(shè)計與選擇質(zhì)控品設(shè)計要求即使存在內(nèi)對照的情況下，仍宜設(shè)計質(zhì)控品作外對照，綜合監(jiān)測免疫組化染色結(jié)果。B。組織質(zhì)控品的選擇陽性質(zhì)控品的選擇優(yōu)先選擇含目標(biāo)抗原的正常組織。腫瘤組織質(zhì)控品應(yīng)優(yōu)先選用與待測樣本具有相同瘤種或相同腫瘤亞型的組織。陰性質(zhì)控品的選擇腫瘤組織質(zhì)控品應(yīng)優(yōu)先選用與待測樣本具有相同瘤種或相同腫瘤亞型的組織。細(xì)胞質(zhì)控品的選擇細(xì)胞質(zhì)控品應(yīng)具有溯源性證明資料或基因工程細(xì)胞系鑒定資料。細(xì)胞質(zhì)控品應(yīng)具有與組織質(zhì)控品的互換性。細(xì)胞質(zhì)控品的細(xì)胞密度應(yīng)適中，且在低倍鏡視野下其細(xì)胞應(yīng)呈現(xiàn)單層均勻分布。商品化質(zhì)控品的選擇（CNAS認(rèn)證或中國計量認(rèn)證（CMA認(rèn)證）或具有等同資質(zhì)的第三方檢驗機(jī)構(gòu)開具檢驗證明，該檢驗證明應(yīng)包含基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)檢驗的結(jié)論。商品化質(zhì)控品應(yīng)具有不少于三家省級或以上不同臨床病理質(zhì)控中心就不同方法的實用性、可重復(fù)性進(jìn)行比對和驗證的臨床試驗資料。5T/CRHA088—2024GB/T42061-2022建立相應(yīng)的質(zhì)量管理體系，形成文件和記錄，加以實施并保持有效運行。操作方法及程序質(zhì)控品的操作方法免疫組化檢測步驟應(yīng)符合《臨床技術(shù)操作規(guī)范:病理學(xué)分冊》的操作要求。質(zhì)控品的自動化檢測推薦使用具有自動化加樣功能的免疫組化染色儀器。對儀器平臺有要求的試劑，應(yīng)保證染色結(jié)果的一致性。質(zhì)控品的判讀與報告質(zhì)控品判讀基本原則18種病理診斷抗體的Ⅰ級質(zhì)控品的染色結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)見附錄C。質(zhì)控品判讀與報告在判讀待測樣本染色結(jié)果之前，應(yīng)先判讀質(zhì)控品的染色結(jié)果。質(zhì)控品的檢測結(jié)果符合設(shè)計預(yù)期，即判定本次免疫組化檢測合格。陽性質(zhì)控品或陰性質(zhì)控品結(jié)果不符合預(yù)期時，均判定為本次免疫組化檢測失敗。CNAS-CL02-A001:2023的要求。檢測失敗的處理方法應(yīng)建立檢測失敗的處理程序，確保及時發(fā)現(xiàn)、識別檢測失敗。應(yīng)梳理排查檢測失敗的原因，排除原因后重新檢測。應(yīng)記錄檢測失敗的原因、應(yīng)急補(bǔ)救措施、糾正措施及解決方案，以便實時溯源。質(zhì)控品的質(zhì)量控制自制質(zhì)控品的質(zhì)控要求通用要求6T/CRHA088—2024具體要求自制細(xì)胞質(zhì)控品應(yīng)與組織質(zhì)控品或驗證結(jié)果符合預(yù)期要求的組織進(jìn)行染色結(jié)果一致性比對驗證，避免自制細(xì)胞質(zhì)控品的物質(zhì)互換性問題。料應(yīng)包括細(xì)胞來源于符合預(yù)期要求的組織驗證結(jié)果、STR基因分型和/或單核苷酸多態(tài)性鑒定和/DNA商品化質(zhì)控品的質(zhì)控要求通用要求.3的要求。具體要求STR基因分型和/或單核苷酸多態(tài)性（SNP）鑒定和/DNA條形碼技術(shù)鑒定等可以確認(rèn)細(xì)胞來源的證明資料?；蚬こ碳?xì)胞系鑒定資料應(yīng)包括測序分析和免疫學(xué)驗證資料。管理和文件質(zhì)控品管理質(zhì)控品管理應(yīng)符合CNAS-CL02-A001:2023和GB/T22576的相關(guān)要求。文件與記錄要求7T/CRHA088—2024實驗室應(yīng)控制與本文件要求有關(guān)的內(nèi)部和外部文件。應(yīng)建立質(zhì)控品管理控制程序，實驗室應(yīng)建立和保存清晰的記錄以證明滿足本文件的要求。應(yīng)建立和實施與質(zhì)控品（8T/CRHA088—2024附錄A（規(guī)范性）本文件列舉了常用應(yīng)嚴(yán)格質(zhì)控項目的質(zhì)控品及染色結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)示例，見表A.1。表A.1常用應(yīng)嚴(yán)格質(zhì)控項目的質(zhì)控品及染色結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)抗體名稱質(zhì)控品 染色結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)PD-L1 扁桃體 扁桃體淺表鱗狀上皮無染色濾泡間區(qū)細(xì)胞絕大多數(shù)為胎盤 滋養(yǎng)層細(xì)胞呈現(xiàn)均勻中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞膜染色和任強(qiáng)度的細(xì)胞質(zhì)染色無染色的胎盤絨毛間質(zhì)和脈管可作為陰性內(nèi)對照。陽性細(xì)胞質(zhì)控品陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。HER2 乳腺癌（HER23+） 10%以上的浸潤癌細(xì)胞中觀察到強(qiáng)烈完整的細(xì)胞膜染色。乳腺癌（HER22+）10%以上的浸潤癌細(xì)胞中觀察到弱至中等陽性的完整10%的浸潤癌細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)而完整的細(xì)胞膜染色。乳腺癌（HER21+）10%乳腺癌（HER20）未觀察到染色或在≤10%的浸潤癌細(xì)胞呈現(xiàn)不完整的、微弱的細(xì)胞膜染色。（HER23+）

（HER22+）（HER21+）

應(yīng)有大于10%的細(xì)胞呈現(xiàn)弱至中陽性的完整的細(xì)胞膜染色。應(yīng)有大于10%的細(xì)胞呈現(xiàn)不完整的、微弱的細(xì)胞膜染色，且多數(shù)細(xì)胞存在不完整的細(xì)胞膜點狀染色。（HER20）

在任何部位均無陽性染色。9T/CRHA088—2024ER宮頸（如果存在和間質(zhì)（內(nèi)皮細(xì)胞和淋巴細(xì)胞除外呈現(xiàn)中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色。扁桃體分散的濾泡樹突狀細(xì)胞/T細(xì)胞和扁桃體鱗狀上皮細(xì)胞呈現(xiàn)至少弱至中陽性的細(xì)胞核染色（LLOD）。陽性細(xì)胞質(zhì)控品陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。PR宮頸大多數(shù)柱狀上皮細(xì)胞和間質(zhì)(內(nèi)皮細(xì)胞和淋巴細(xì)胞除外)呈現(xiàn)中至強(qiáng)陽性的明顯的細(xì)胞核染色；大部分基底鱗狀上皮細(xì)胞呈現(xiàn)至少弱但明顯的細(xì)胞核染色。扁桃體鱗狀上皮細(xì)胞和生發(fā)中心細(xì)胞均陰性。陽性細(xì)胞質(zhì)控品考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。ALK闌尾迷走神經(jīng)叢的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和散在的軸突呈現(xiàn)至少弱至染色。伴EML4-ALK易位幾乎所有腫瘤細(xì)胞都呈現(xiàn)至少弱至中陽性的顆粒狀細(xì)的肺腺癌胞質(zhì)染色。無EML4-ALK易位腫瘤細(xì)胞陰性。的肺腺癌陽性細(xì)胞質(zhì)控品考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。MLH1扁桃體外套區(qū)B細(xì)胞呈現(xiàn)弱至中陽性的細(xì)胞核染色，生發(fā)中心B細(xì)胞呈現(xiàn)中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色。MLH1表達(dá)缺失的腫瘤細(xì)胞陰性，間質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞核陽性。結(jié)腸癌陽性細(xì)胞質(zhì)控品考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。PMS2扁桃體外套區(qū)B細(xì)胞呈現(xiàn)弱至中陽性的細(xì)胞核染色，生發(fā)中心B細(xì)胞呈現(xiàn)中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色。10T/CRHA088—2024PMS2表達(dá)缺失的結(jié)腸癌

腫瘤細(xì)胞陰性，間質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞核陽性。陽性細(xì)胞質(zhì)控品 細(xì)胞應(yīng)有中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色細(xì)胞染色陽性率參考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品 參考質(zhì)控品說明書。MSH2 扁桃體 外套區(qū)B細(xì)胞呈現(xiàn)弱至中陽性的細(xì)胞核染色，生發(fā)中心B細(xì)胞呈現(xiàn)中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色。MSH2腸癌

腫瘤細(xì)胞陰性，間質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞核陽性。陽性細(xì)胞質(zhì)控品 細(xì)胞應(yīng)有中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色細(xì)胞染色陽性率參考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品 參考質(zhì)控品說明書。MSH6 扁桃體 外套區(qū)B細(xì)胞呈現(xiàn)弱至中陽性的細(xì)胞核染色，生發(fā)中心B細(xì)胞呈現(xiàn)中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色。MSH6腸癌

腫瘤細(xì)胞陰性，間質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞核陽性。陽性細(xì)胞質(zhì)控品 細(xì)胞應(yīng)有中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色細(xì)胞染色陽性率參考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品 參考質(zhì)控品說明書。EBER EBV感染的伯基特淋巴瘤

腫瘤細(xì)胞細(xì)胞核陽性。EBV感染的鼻咽癌 腫瘤細(xì)胞細(xì)胞核陽性。EBV感染的胃癌 腫瘤細(xì)胞細(xì)胞核陽性。陽性細(xì)胞質(zhì)控品 細(xì)胞應(yīng)有中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色細(xì)胞染色陽性率參考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品 參考質(zhì)控品說明書。HelicobacterHP）

HP陽性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。11T/CRHA088—2024HBsAgHBV感染的肝組織HBV感染的肝細(xì)胞呈現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)顆粒狀染色。未感染區(qū)域肝細(xì)胞陰性。陽性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。Ki67扁桃體幾乎所有生發(fā)中心B細(xì)胞（包括暗區(qū)和明區(qū)）以及鱗狀上皮基底旁細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色。闌尾大多數(shù)基底柱狀上皮細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色。肝臟才偶爾可見中性粒細(xì)胞陽性。陽性細(xì)胞質(zhì)控品考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。CD20扁桃體BB細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞膜染色，漿細(xì)胞也呈一定程度的弱陽性。闌尾固有層散在漿細(xì)胞常呈一定程度的弱陽性的細(xì)胞膜染色（LLOD）。肝臟散在B細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞膜染色。陽性細(xì)胞質(zhì)控品正?，F(xiàn)象。陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。CD117闌尾Cajal（卡哈爾間質(zhì)細(xì)胞和肥固有肌層中的平滑肌細(xì)胞或血管周圍的平滑肌細(xì)胞沒有任何染色。陽性細(xì)胞質(zhì)控品

陰性細(xì)胞質(zhì)控品 參考質(zhì)控品說明書。12T/CRHA088—2024CD10扁桃體幾乎所有的生發(fā)中心B細(xì)胞呈現(xiàn)中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞膜染色，套區(qū)B細(xì)胞和鱗狀上皮細(xì)胞均陰性。散在分布的中性粒細(xì)胞呈現(xiàn)至少弱陽性的細(xì)胞膜染色。陽性細(xì)胞質(zhì)控品細(xì)胞應(yīng)有中至強(qiáng)陽性的完整的細(xì)胞膜染色，細(xì)胞染色陽性率參考質(zhì)控品說明書，部分陽性細(xì)胞染色因細(xì)胞重疊或細(xì)胞切面影響，可能會出現(xiàn)類似細(xì)胞質(zhì)的染色，屬于正?，F(xiàn)象。陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。p53扁桃體超過50%的生發(fā)中心B細(xì)胞呈現(xiàn)弱至中陽性的細(xì)胞核染色。闌尾隱窩基底部分的分散的上皮細(xì)胞呈現(xiàn)弱至中陽性的細(xì)胞核染色，而腔上皮細(xì)胞是陰性的。陽性細(xì)胞質(zhì)控品細(xì)胞應(yīng)有中至強(qiáng)陽性的細(xì)胞核染色，細(xì)胞染色陽性率參考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。HMB45黑色素瘤活化的和腫瘤性黑色素細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)陽性的細(xì)胞質(zhì)染色。皮膚基底層色素細(xì)胞呈現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)染色。陽性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。陰性細(xì)胞質(zhì)控品參考質(zhì)控品說明書。13T/CRHA088—2024附錄B（規(guī)范性）質(zhì)控品日常操作規(guī)范質(zhì)控品位置演示質(zhì)控品位置演示見圖B.1。圖B.1質(zhì)控品位置演示質(zhì)控品具體設(shè)計要求本文件列舉了常用應(yīng)嚴(yán)格質(zhì)控項目的質(zhì)控品具體設(shè)計要求見表B.1。表B.1 常用應(yīng)嚴(yán)格質(zhì)控項目的質(zhì)控品具體設(shè)計要求抗體名稱 質(zhì)控品設(shè)計 位置要求 質(zhì)控品排列方式PD-L1 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列HER2 111至少1個陰性質(zhì)控品

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列ER 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列PR 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列ALK 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列MLH1 至少1個陽性質(zhì)控品 近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列14T/CRHA088—2024至少1個陰性質(zhì)控品PMS2 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列MSH2 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列MSH6 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列EBER 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列HP 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列HBsAg 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列Ki67 至少1個陽性質(zhì)控品 近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排至少1個陰性質(zhì)控品CD20 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列CD117 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列CD10 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列p53 11

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列HMB45 1個陽性質(zhì)控品1個陰性質(zhì)控品

近標(biāo)簽端或遠(yuǎn)標(biāo)簽端 呈上下縱向排列15T/CRHA088—2024附錄C（資料性）國際特設(shè)專家委員會推薦的18種病理診斷抗體的Ⅰ級質(zhì)控品列表本文件列舉了18種由國際特設(shè)專家委員會推薦的病理診斷抗體的Ⅰ級質(zhì)控品及其染色結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)，見表C.1。表C.118種病理診斷抗體的Ⅰ級質(zhì)控品及其染色結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)抗體名稱質(zhì)控品染色結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)CKpan闌尾幾乎所有柱狀上皮細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色（可見膜深染）。肝臟絕大多數(shù)肝細(xì)胞至少顯示弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色并伴膜深染（LLOD）。扁桃體所有鱗狀上皮細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色，CKpan顯示間質(zhì)網(wǎng)狀細(xì)胞呈弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色（LLOD）。CK8/18（CK）闌尾所有柱狀上皮細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色（可見膜深染）。肝臟絕大多數(shù)肝細(xì)胞至少顯示弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色并伴膜深染（LLOD）。扁桃體散在鱗狀上皮細(xì)胞呈中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色（陽性細(xì)胞數(shù)因標(biāo)本不同而異），CK8/18陽性間質(zhì)網(wǎng)狀細(xì)胞呈弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色（LLOD）。CK5/14（CK）扁桃體幾乎所有鱗狀上皮細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色。胰腺閏管內(nèi)散在柱狀上皮細(xì)胞均為弱至中度陽性細(xì)胞膜染色（LLOD）。肝臟均為陰性染色。CK20闌尾幾乎所有表層上皮細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色，絕大多數(shù)基底隱窩上皮細(xì)胞至少顯示細(xì)胞質(zhì)弱陽性（LLOD）。肝臟均為陰性染色。扁桃體均為陰性染色。CK7肝臟幾乎所有膽管上皮細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色。胰腺幾乎所有閏管上皮細(xì)胞均為弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色（LLOD）。16T/CRHA088—2024闌尾通常呈陰性染色，散在柱狀上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞可呈弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色。Vimentin闌尾上皮內(nèi)散在Ｔ細(xì)胞均為弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色，固有層大血管內(nèi)皮細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色。肝臟肝竇內(nèi)所有內(nèi)皮細(xì)胞和kupffer細(xì)胞均為弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色（LLOD）。胰腺絕大多數(shù)外分泌腺泡上皮細(xì)胞均為弱至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色。TTF-1甲狀腺幾乎所有上皮細(xì)胞均為強(qiáng)陽性細(xì)胞核染色。肺幾乎所有肺泡細(xì)胞和終末支氣管基底細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞核染色，終末支氣管柱狀上皮細(xì)胞至少顯示弱陽性細(xì)胞核染色（LLOD）。扁桃體均為陰性染色。CDX-2闌尾幾乎所有上皮細(xì)胞均為強(qiáng)陽性細(xì)胞核染色，常可見弱陽性細(xì)胞質(zhì)染色。胰腺大多數(shù)閏管上皮細(xì)胞均為弱至中度陽性細(xì)胞核染色（LLOD）。扁桃體均為陰性染色。CEA闌尾黏膜表層上皮刷狀緣均為中至強(qiáng)陽性染色，幾乎所有上皮細(xì)胞均為弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色（LLOD）；如果CEA在腺癌組織中過表達(dá)，那么黏膜表層染色是染色成功的唯一參照底限。扁桃體散在鱗狀上皮細(xì)胞呈中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色（陽性細(xì)胞數(shù)因標(biāo)本不同而異）。肝臟均為陰性染色。CD31扁桃體絕大多數(shù)套區(qū)B細(xì)胞均為弱至中度陽性細(xì)胞膜染色（LLOD）。胰腺幾乎所有內(nèi)皮細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞膜染色。肝臟幾乎所有肝竇內(nèi)皮細(xì)胞均為弱至中度陽性細(xì)胞膜染色（LLOD）。α-SMA闌尾所有血管、黏膜肌層及固有肌層的平滑肌細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色。17T/CRHA088—2024扁桃體幾乎所有血管平滑肌細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色。肝臟大多數(shù)竇周細(xì)胞至少顯示弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色（LLOD）。Desmin闌尾黏膜肌層和固有肌層內(nèi)所有平滑肌細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色，大多數(shù)血管平滑肌細(xì)胞呈弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色（LLOD）。肝臟肝細(xì)胞均為陰性染色，血管散在平滑肌細(xì)胞可呈弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色。扁桃體上皮細(xì)胞和淋巴細(xì)胞均為陰性染色，血管散在平滑肌細(xì)胞可呈弱至中度陽性細(xì)胞質(zhì)染色。CD3扁桃體TTT細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞膜染色。闌尾上皮內(nèi)散在T細(xì)胞均為弱至中度細(xì)胞膜陽性染色（LLOD）。肝臟散在T細(xì)胞至少顯示弱至中度細(xì)胞膜陽性染色（LLOD）。CD20扁桃體幾乎所有生發(fā)中心B細(xì)胞和套區(qū)B細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞膜染色，漿細(xì)胞也呈一定程度的弱陽性。闌尾固有層散在漿細(xì)胞常呈一定程度的弱陽性細(xì)胞膜染色（LLOD）。肝臟散在B細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞膜染色。Ki-67扁桃體幾乎所有生發(fā)中心B細(xì)胞（包括暗區(qū)和明區(qū)）以及鱗狀上皮基底旁細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞核染色。闌尾大多數(shù)基底柱狀上皮細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞核染色。肝臟大多數(shù)正常肝細(xì)胞均為陰性染色，散在中性粒細(xì)胞不應(yīng)表現(xiàn)任何程度的細(xì)胞核染色，只有炎癥和反應(yīng)性改變時才偶爾可見中性粒細(xì)胞陽性。S100扁桃體散在濾泡間區(qū)樹突細(xì)胞均為弱至強(qiáng)陽性細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)染色（LLOD）。18胰腺T/CRHA088—2024大多數(shù)胰島內(nèi)分泌細(xì)胞均為弱至強(qiáng)陽性細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)染色，所有脂肪細(xì)胞均為陽性染色（LLOD）。肝臟肝細(xì)胞及膽管上皮細(xì)胞均為陰性染色，可見散在的樹突狀細(xì)胞陽性。CgA胰腺大多數(shù)胰島內(nèi)分泌細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色。闌尾大多數(shù)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和軸突均為弱至中度陽性染色（LLOD），神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞均為強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色。肝臟肝細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞均為陰性染色，可見散在的周圍神經(jīng)軸突陽性染色。Syn闌尾大多數(shù)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和軸突均為中至強(qiáng)陽性染色；大多數(shù)杯狀細(xì)胞均為弱陽性細(xì)胞質(zhì)染色（LLOD）。胰腺大多數(shù)胰島內(nèi)分泌細(xì)胞均為中至強(qiáng)陽性細(xì)胞質(zhì)染色。肝臟肝細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞均為陰性染色，可見散在的周圍神經(jīng)軸突陽性染色。19T/CRHA088—2024附錄D（資料性）質(zhì)控品的意義與特點質(zhì)控品的意義質(zhì)控品的分類依據(jù)質(zhì)控品來源分類，質(zhì)控品分為組織質(zhì)控品和細(xì)胞質(zhì)控品。1)組織質(zhì)控品的分類——依據(jù)組織來源分類，組織質(zhì)控品分為剩余組織質(zhì)控品和類組織質(zhì)控品。——依據(jù)制作工藝分類，組織質(zhì)控品分為組織切片質(zhì)控品和組織懸液質(zhì)控品。2）細(xì)胞質(zhì)控品的分類細(xì)胞質(zhì)控品分為液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品和固態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品。不同質(zhì)控品的特征剩余組織質(zhì)控品01+2+3+各1（如HER2），在顯微鏡下找出目標(biāo)部位并標(biāo)記。②從標(biāo)記好的蠟塊上找出相應(yīng)組織位置，用0.2mm的空心針取出組織，并按照染色強(qiáng)℃20min2-4μm目前由于倫理風(fēng)險以及難以實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化批量生產(chǎn)等原因，上述形式的剩余組織質(zhì)控品，均不能用于市場化生產(chǎn)和銷售。類組織質(zhì)控品移植瘤組織質(zhì)控品20T/CRHA088—2024（包括已知表達(dá)目標(biāo)抗原的移植瘤組織和不表達(dá)或低表達(dá)該抗原的陰性組織移植瘤組織質(zhì)控品的制作需注意實驗動物的選擇、移植瘤的制備質(zhì)量、迭代變異控制，類器官組織質(zhì)控品類器官是指在體外三維（3D）環(huán)境中培養(yǎng)生長的微型細(xì)胞簇，這些細(xì)胞簇在細(xì)胞因子、化學(xué)小分子抑制劑/激活劑、培養(yǎng)基及其他添加劑等物質(zhì)作用下，經(jīng)過自組織并分化為功能性細(xì)胞群，具有類似相應(yīng)器官的組織結(jié)構(gòu)和遺傳學(xué)特點?；蛘吣[瘤組織。對于ESC/iPSC衍生的類器官，ESC/iPSC在各種細(xì)胞生長因子或小分子化合物（抑制劑/激活劑）以及基質(zhì)膠和細(xì)胞培養(yǎng)添加劑的逐步分化方案下，能夠按照類似于原腸胚形成和器官發(fā)生過程中的發(fā)育線索，從三個胚層生成類器官。對于ASC來源的類器官，ASC需要從胎兒或成人組織中產(chǎn)生；獲得單個ASC或含有ASC的組織單元之后，再通過3D3D培養(yǎng)，能夠衍生出腫瘤類器官。組織懸液質(zhì)控品組織懸液質(zhì)控品是一種通過對石蠟包埋組織切片進(jìn)行碎片勻漿化處理制成的懸液型質(zhì)控時，可使用組織芯片方法采取目標(biāo)組織/細(xì)胞、然后集中包埋處理；②切片：對蠟塊進(jìn)行大量切片2-3μm碾碎切片，并加入二甲苯溶解；充分溶解后進(jìn)行離心，2500rpm離心3min棄上清；加入無水乙醇重懸混勻后再離心3min1:20-1:50加入75%-100%乙醇重懸混勻，即為組織懸液質(zhì)控品；④免疫組化檢測：用10μL移液器分別在待測樣本玻片的近標(biāo)簽端和遠(yuǎn)標(biāo)簽端滴加2-3μL組織懸液質(zhì)控品，然后按日常檢測流程進(jìn)行烤片、檢測及閱片。組織懸液質(zhì)控品在病理科的檢測中具有很高的操作性，它能夠大大提高檢測的便利性。液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品21T/CRHA088—2024STR基因分型等分/不表達(dá)細(xì)胞系，可實現(xiàn)稀缺陽性靶標(biāo)的長期穩(wěn)定生產(chǎn)；④液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品的蛋白質(zhì)表達(dá)豐度經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)化控制，保持高度均勻和穩(wěn)定；固態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品其它種屬來源質(zhì)控品其它種屬來源的質(zhì)控品可能包括不同動物模型的組織樣本，如小鼠、大鼠、兔子、狗、不同質(zhì)控品的異同分析對前述不同類別質(zhì)控品的異同點進(jìn)行分析，見表D.1。不同質(zhì)控品的優(yōu)缺分析對前述不同類別質(zhì)控品的優(yōu)缺點進(jìn)行分析，見表D.2。22T/CRHA088—2024表D.1不同類別質(zhì)控品的異同分析質(zhì)控品類別剩余組織質(zhì)控品類組織質(zhì)控品組織懸液質(zhì)控品固態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品其他種屬來源質(zhì)控品來源醫(yī)療剩余人體組織醫(yī)療剩余人體組織醫(yī)療剩余人體組織培養(yǎng)細(xì)胞系培養(yǎng)細(xì)胞系動物組織有無倫理風(fēng)險有無有無無無前處理抗原變性處理(多聚甲醛+石蠟)抗原變性處理(多聚甲醛+石蠟)抗原變性處理(多聚甲醛+石蠟)抗原變性處理(多聚甲醛+石蠟)抗原變性處理(多聚甲醛+石蠟)抗原變性處理(多聚甲醛+石蠟)形態(tài)固態(tài)固態(tài)液態(tài)固態(tài)液態(tài)固態(tài)獲得方式及難易度需自制，繁瑣，耗時長有商品化，極少，如自制技術(shù)難度極高需自制，繁瑣，耗時長可商品化采購，如自制技術(shù)難度極高可商品化采購，如自制技術(shù)難度極高有商品化，極少，如自制技術(shù)難度極高物料成本低很高低中中高制備及使用人力成本高高低低極低（全自動化）高自動化使用可能無無無無可以無記錄和可追溯便利性低低低低高低片內(nèi)質(zhì)控可實現(xiàn)性難難易難易難質(zhì)控方案靈活性（加樣位置/數(shù)量）低低高低高低成品有效期長長較長短較長長勻質(zhì)性低，異質(zhì)性高低，異質(zhì)性高低，異質(zhì)性高勻質(zhì)性很高勻質(zhì)性很高低，異質(zhì)性高具備陰陽性質(zhì)控品具備具備具備具備具備具備稀缺靶點的質(zhì)控品不易獲得易獲取不易獲得易獲取易獲取不易獲得標(biāo)準(zhǔn)化程度相對低相對低相對低可符合GBT42061，標(biāo)準(zhǔn)化程度高可符合GBT42061，標(biāo)準(zhǔn)化程度高相對低23T/CRHA088—2024表D.2不同類別質(zhì)控品的優(yōu)缺分析質(zhì)控品類別優(yōu)點缺點須實驗室自行制備、管理，工作量較大，人工成本高昂；形式接近待檢組織，包含組織形態(tài)學(xué)等全面的組織信息；難以實現(xiàn)嚴(yán)格的質(zhì)量控制，材料和制備過程的標(biāo)準(zhǔn)化程度較低；剩余組織質(zhì)控品大部分檢測指標(biāo)對應(yīng)的組織樣本材料易于獲取，材料成本部分重要的檢測指標(biāo)對應(yīng)的組織樣本難以穩(wěn)定持續(xù)性獲??；忽略不計；跨院使用，存在倫理風(fēng)險，須經(jīng)復(fù)雜和嚴(yán)格的倫理審查程序；難以實現(xiàn)使用過程的標(biāo)準(zhǔn)化、自動化和質(zhì)控記錄的管理和溯源；形式接近待檢組織，包含組織形態(tài)學(xué)等全面的組織信息；類組織質(zhì)控品存在商品化質(zhì)控品，無需實驗室自行制備和管理，無需相應(yīng)的人工成本；質(zhì)控品的標(biāo)準(zhǔn)化程度高；與實驗室自制質(zhì)控品相比，存在額外材料成本，且成本很高；難以實現(xiàn)使用過程的標(biāo)準(zhǔn)化、自動化和質(zhì)控記錄的管理和溯源；不存在倫理風(fēng)險，便于跨院使用場景；須實驗室自行制備、管理，工作量較大；大部分檢測指標(biāo)對應(yīng)的組織樣本材料易于獲取；難以實現(xiàn)嚴(yán)格的質(zhì)量控制，材料和制備過程的標(biāo)準(zhǔn)化程度較低；組織懸液質(zhì)控品材料成本低廉；部分重要的檢測指標(biāo)對應(yīng)的組織樣本難以穩(wěn)定持續(xù)性獲??；使用方式簡單易行；跨院使用，存在倫理風(fēng)險，須經(jīng)復(fù)雜和嚴(yán)格的倫理審查程序；難以實現(xiàn)使用過程的標(biāo)準(zhǔn)化、自動化和質(zhì)控記錄的管理和溯源；存在商品化質(zhì)控品，無需實驗室自行制備和管理，無需相應(yīng)的人工成本；液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品可全自動化使用，使用過程的人工成本忽略不計，且使用過程標(biāo)準(zhǔn)化程度較高；質(zhì)控品的標(biāo)準(zhǔn)化程度很高；形式與待檢組織差異較大，無法包含組織形態(tài)學(xué)等全面的組織信息；與實驗室自制質(zhì)控品相比，存在額外材料成本；易于實現(xiàn)質(zhì)控記錄的管理和溯源；不存在倫理風(fēng)險，便于跨院使用場景；24T/CRHA088—2024固態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品存在商品化質(zhì)控品，無需實驗室自行制備和管理，無需相應(yīng)的人工成本；質(zhì)控品的標(biāo)準(zhǔn)化程度很高；不存在倫理風(fēng)險，便于跨院使用場景；形式與待檢組織差異較大，無法包含組織形態(tài)學(xué)等全面的組織信息；與實驗室自制質(zhì)控品相比，存在額外材料成本；難以實現(xiàn)使用過程的標(biāo)準(zhǔn)化、自動化和質(zhì)控記錄的管理和溯源；其他種屬來源質(zhì)控品形式接近待檢組織，包含組織形態(tài)學(xué)等全面的組織信息；大部分檢測指標(biāo)對應(yīng)的組織樣本材料可以通過制備獲得；不存在倫理風(fēng)險，便于跨院使用場景；尚未有商品化產(chǎn)品，實驗室自行制備的難度和成本很高；難以消除種屬差異帶來的，和目標(biāo)檢測樣本的差異；難以實現(xiàn)使用過程的標(biāo)準(zhǔn)化、自動化和質(zhì)控記錄的管理和溯源；25T/CRHA088—2024附錄E（資料性）定義（上明確具有或明確排除（即免疫組織化學(xué)檢測的蛋白靶標(biāo)（使用方法自動化應(yīng)用操作方法可使用配套的全自動免疫組織化學(xué)染色系統(tǒng)（包括全自動質(zhì)控加樣模塊和切片染色模塊），或全自動免疫組織化學(xué)質(zhì)控加樣染色一體機(jī)完成質(zhì)控品智能加樣和染色的全過程。切片準(zhǔn)備：在配套的系統(tǒng)軟件上，打印標(biāo)簽，粘貼到對應(yīng)的待檢組織樣本切片（白片）的玻片上，然后將切片放入全自動質(zhì)控加樣模塊（玻片處理系統(tǒng)）的玻片架中。質(zhì)控瓶上載及信息錄入：將液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品試劑瓶上載至儀器指定位置的瓶架中。在設(shè)備屏幕“質(zhì)控品”“掃碼質(zhì)控品質(zhì)控加樣方案設(shè)置：在設(shè)備屏幕“玻片”菜單界面下，點擊“質(zhì)控加樣設(shè)置”，可對每（陰/、數(shù)量、加樣位置等。質(zhì)控品加樣：點擊“開始加樣”選項，設(shè)備將按照預(yù)設(shè)的質(zhì)控加樣方案，全自動智能質(zhì)控品染色：質(zhì)控品加樣完成后，將切片上載至切片染色模塊（全自動免疫組織化學(xué)質(zhì)控加樣染色一體機(jī)可忽略此步驟全自動免疫組織化學(xué)染色系統(tǒng)可實現(xiàn)對所有切片的質(zhì)控品設(shè)置及添加情況的記錄，包括圖片掃描，并實時傳到實驗室的LIS/HIS系統(tǒng)保存，便于信息追溯。手工使用操作方法使用混勻儀將液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品試劑重懸，使之形成均一的細(xì)胞懸液（備注：無肉眼明顯可見的顆粒狀物質(zhì)或細(xì)胞沉淀）。使用10μL1.5μL26T/CRHA088—2024質(zhì)控品加樣完成后，切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，若在全自動免疫組化機(jī)上進(jìn)行實質(zhì)控品主要功能監(jiān)測免疫組化檢測過程中試劑的覆蓋范圍，避免試劑覆蓋不全導(dǎo)致的假陰性。（避免因此而導(dǎo)致的假陽性、假陰性、非特異性染色、染色弱等錯誤的染色結(jié)果。監(jiān)測免疫組化檢測過程中抗體試劑使用的準(zhǔn)確性，避免因使用錯誤試劑而導(dǎo)致的假陽性、假陰性、非特異性染色、染色弱等錯誤的染色結(jié)果。監(jiān)測免疫組化檢測過程中抗原修復(fù)條件，避免因抗原修復(fù)不當(dāng)（pH值、修復(fù)時長、修復(fù)溫度等異常），而導(dǎo)致的假陽性、假陰性、非特異性染色、染色弱等錯誤的染色結(jié)果。監(jiān)測免疫組化檢測過程中抗體孵育條件，避免因抗體孵育條件異常（孵育時長、孵應(yīng)用示例液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品監(jiān)測一抗試劑質(zhì)量波動以ALK免疫組化染色結(jié)果為例，當(dāng)ALK陰性液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品出現(xiàn)非特異陽性染色結(jié)果時，提示本次實驗所使用的一抗?jié)舛冗^高，此時同條件進(jìn)行染色的ALK陽性肺腺癌（組織質(zhì)控品）也出現(xiàn)了間質(zhì)非特異陽性著色。當(dāng)ALK陽性液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品染色陽性強(qiáng)度下降至弱到中等且陽性率無法達(dá)到80%圖E.1ALK液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品監(jiān)測一抗?jié)舛茸兓?7T/CRHA088—2024液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品監(jiān)測抗原修復(fù)條件變化以HER20/1+/2+/3+液態(tài)細(xì)胞質(zhì)HER2HER21+:大于10%的細(xì)胞呈現(xiàn)不完整的、微弱的細(xì)胞膜染色；HER22+：大于10%的細(xì)胞呈現(xiàn)弱至中等強(qiáng)度的完整的細(xì)胞膜染色HER23+:80%-100%細(xì)胞有強(qiáng)且完整的細(xì)胞膜（pH值不適或修復(fù)時長不足時，HER21+/2+/3+細(xì)胞的染色結(jié)HER21+/2+/3+的判讀要求，提示同步染色的待檢樣本染色結(jié)果不可信，不適用于診斷結(jié)果判讀。（圖E.2）圖E.2HER2液態(tài)細(xì)胞質(zhì)控品監(jiān)測修復(fù)條件變化28T/CRHA088—2024附錄F（資料性）定義應(yīng)用與價值移植瘤組織質(zhì)控品腫瘤生長和特性的動物模型。主要的移植瘤模型分為細(xì)胞系異種移植模型（CDX模型）和人源腫瘤異種移植模型（PDX模型）。CDX模型是將體外傳代培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞移植到免疫缺陷小鼠體內(nèi)形成移植瘤。PDX模PDX模型保留了親代腫瘤類器官組織質(zhì)控品類器官技術(shù)在腫瘤研究中的獨特價值在于其能夠保留患者腫瘤的遺傳多樣性與異質(zhì)性，PDX類組織的構(gòu)建過程移植瘤的構(gòu)建過程當(dāng)移植瘤生長到一定體積時，通過手術(shù)從小鼠體內(nèi)取出腫瘤組織，用于后續(xù)的驗證和研究。移植瘤的構(gòu)建過程見圖F.1。29T/CRHA088—2024圖F.1移植瘤的構(gòu)建過程202331(3):374-381.）類器官的構(gòu)建過程3D培養(yǎng)物；②共培養(yǎng)和微環(huán)境重建：進(jìn)一步通過建立適宜的共培養(yǎng)體系，包括引入多樣化的細(xì)胞種類和細(xì)胞外基質(zhì)，與3D培養(yǎng)物共同培養(yǎng)，以模擬和重建體內(nèi)微環(huán)境；③組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：運用一系列先進(jìn)的組織培養(yǎng)技術(shù)，如浸沒基質(zhì)膠培養(yǎng)法、3D微流控培圖F.2類器官的構(gòu)建過程（HuH,LyuX,YiM,etal.Organoidtechnologyandapplicationsincancerresearch.JHematolOncol.2018Sep15;11(1):116.）應(yīng)用示例CRISPR/Cas9技術(shù)建立了MLH1蛋白缺失型細(xì)胞系，并通過異種移植技術(shù)制備了移植瘤。經(jīng)蘇木素-伊紅染色（簡稱HE染色）和免疫組化檢測，這些樣本與臨床樣本高度相似，驗證了其作為MLH1缺失型免30T/CRHA088—2024F.3移植瘤樣本與臨床樣本的HE及IHC染色比對HEIHCCRISPR編輯的MLH1缺失型細(xì)胞系（GM12878Cas9_6GM12878Cas9_9）MLH1HCT116細(xì)胞系產(chǎn)生MLH1PMS2蛋白的核染色上呈現(xiàn)顯著缺失。HE染色中的紅色箭頭標(biāo)出了出血、MLH1蛋白缺失的陰性腫瘤細(xì)胞R,ZhangR,TanP,etal.DevelopmentofnovelqualitycontrolmaterialbasedonCRISPR/Cas9editingandxenograftsforMLH1proteindeficiencytesting.JClinLabAnal.2021;35(5):e23746.）31T/CRHA088—2024參 考 文 獻(xiàn)GoldsmithJD,FitzgibbonsPL,SwansonPE.PrinciplesofAnalyticValidationofClinicalImmunohistochemistryAssays.AdvAnatPathol.2015;22(6):384-387.《免疫組織化學(xué)檢測技術(shù)共識》編寫組.免疫組織化學(xué)檢測技術(shù)共識[J].中華病理學(xué)雜志,2019,48(2):87-91.TorlakovicEE,FrancisG,GarrattJ,etal.Standardizationofnegativecontrolsindiagnosticimmunohistochemistry:recommendationsfromtheinternationaladhocexpertpanel.ApplImmunohistochemMolMorphol.2014;22(4):241-252.TorlakovicEE,NielsenS,FrancisG,etal.Standardizationofpositivecontrolsindiagnosticimmunohistochemistry:recommendationsfromtheInternationalAdHocExpertCommittee.ApplImmunohistochemMolMorphol.2015;23(1):1-18.國家病理質(zhì)控中心,中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會,中國臨床腫瘤學(xué)會腫瘤病理專家委員會.實體PD-L1免疫組織化學(xué)檢測專家共識(2021版)[J].中華病理學(xué)雜志202150(7):710-718.HER2HER22019J].中華病理學(xué)雜志,201948(3):169-175.《胃癌HER2檢測指南》編寫組HER2檢測指南[J].中華病理學(xué)雜志,2011,40(8):553-557.楊文濤,步宏.乳腺癌雌、孕激素受體免疫組織化學(xué)檢測指南[J].中華病理學(xué)雜志,2015(4):237-239.HanleyKZ,BirdsongGG,CohenC,etal.Immunohistochemicaldetectionofestrogenreceptor,progesteronereceptor,andhumanepidermalgrowthfactorreceptor2expressioninbreastcarcinomas:comparisononcellblock,needle-core,andtissueblockpreparations.Cancer.2009;117(4):279-288.NishimuraR,AogiK,etal.Usefulnessofliquid-basedcytologyinhormonereceptoranalysisofbreastcancerspecimens.VirchowsArch.2011;458(2):153-158.中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)分會消化病理協(xié)作組,葉子茵,肖書淵,等.EB病毒感染組織檢測和病理診斷共識[J].中華消化雜志,2019,39(7):433-437.中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會,中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會皮膚病理學(xué)組.黑色素瘤病理診斷臨床實踐指南（2021版）[J].中華病理學(xué)雜志,2021,50(6):572-582.中華醫(yī)學(xué)會消化內(nèi)鏡學(xué)分會病理學(xué)組.胃黏膜幽門螺桿菌感染病理組織學(xué)專家共識[J].中華消化內(nèi)鏡雜志,2023,40(8):589-594.NielsenTO,LeungRimmDL,etal.AssessmentofKi67inBreastCancer:UpdatedRecommendationsFromtheInternationalKi67inBreastCancerGroup.JNatlCancerInst.2021;113(7):808-819.中國抗癌協(xié)會家族遺傳性腫瘤專業(yè)委員會.中國家族遺傳性腫瘤臨床診療專家共識(2021年版)(4)—家族遺傳性結(jié)直腸癌[J].中國腫瘤臨床,2022,49(1):1-5.中華醫(yī)學(xué)會,中華醫(yī)學(xué)會雜志社,中華醫(yī)學(xué)會全科醫(yī)學(xué)分會,等.慢性乙型肝炎基層診療指南（實踐版·2020）[J].中華全科醫(yī)師雜志,2021,20(3):281-289.CSCO胃腸間質(zhì)瘤專家委員會.中國胃腸間質(zhì)瘤診斷治療共識(2013年版)[J].臨床腫瘤學(xué)雜志,2013,18(11):1025-1032.ALK陽