天冬酰胺酶用于急性淋巴細胞性

白血病的治療組員：傅祥李堅張子謙蘇志有一、研究背景二、臨床藥物Asparec?三、總結與展望研究背景一、急性淋巴細胞白血病（ALL）兒童期最常見的癌癥形式，

美國每年約診斷有2900名20歲以下的患者最可治愈的癌癥之一，治療兒童的緩解率超過95％一種起源于B系或T系淋巴祖細胞的腫瘤性疾病二、天冬氨酸酶一類重要的蛋白水解酶，參與機體的新陳代謝及生物調控作用活性中心由兩個催化性天冬氨酸殘基組成天冬酰胺酶將L-天冬酰胺分解，

癌細胞突變無法合成天冬酰胺，

但又需要大量的氨基酸進行代謝與增值，

從而抑制腫瘤生長。研究背景1、大腸桿菌來源的天冬酰胺酶EC-ASNase及其PEG修飾產物PEG-EC-ASNase，先作為臨床一線用藥。2、天然歐文氏菌來源的天冬酰胺酶ASNase（n-crisantaspase）3、Sepctrila?德國的MedacGmbH公司研發(fā)的重組天冬酰胺酶2016年1月獲EMA（歐洲藥品管理局）批準上市治療對象：出生到18歲的嬰兒和兒童問題：臨床數據表明使用這兩種藥物的患者

至少有17%會發(fā)生超敏反應研究背景三、治療藥物急性淋巴細胞白血病（ALL）治療的二線藥物，在大腸桿菌來源的酶出現(xiàn)過敏反應時使用臨床藥物Asparec?Asparec?AlizeEUSApharma和爵士合作開發(fā)新型聚乙二醇化重組歐文氏菌L-天冬酰胺酶

（PEG-r-crisantaspase）目前正在進行臨床三期試驗臨床藥物Asparec?制備過程編碼枯草芽孢桿菌ENX信號肽歐文氏菌ASNase的序列接入導入大腸桿菌BL21菌株中得到表達載體轉化的工程化菌

表達重組蛋白（r-crisantaspase）發(fā)酵至合適的細胞塊后IPTG誘導提取純化r-crisantaspasePEG修飾PEG-r-crisantaspase藥理學研究5U/Kg的PEG-r-crisantaspase相當于250U/Kg的n-crisantaspase（50倍）治療效果：免疫原性研究結論：聚乙二醇化能有效降低了天冬氨酸酶的免疫原性體外細胞毒性不同敏感細胞系：PEG修飾的天冬氨酸酶表現(xiàn)出更高的活性PEG-r-crisantaspase體外水解Asn和Gln實驗☆☆Gln的水解能力：歐文氏菌來源的ASNase顯著強于EC-ASNase結論：Gln消耗可增強ASNase對癌細胞的毒性作用解釋了細胞毒實驗PEG修飾的天冬氨酸酶活性更高

PEG-r-crisantaspase對白血病小鼠的抗白血病作用結論：

PEG-r-crisantaspase能增加分解Asn，

控制白細胞的發(fā)展，提高小鼠存活時間總結展望ASNase是治療ALL中不可或缺的藥物1、天然歐文氏菌來源的ASNase（n-crisantaspase）2、Sepctrila?2016年1月獲EMA（歐洲藥品管理局）批準上市ALL治療的二線藥物存在問題臨床藥物PEG-r-crisantaspase1、保留了65％的原始r-crisantaspase活性1、免疫原性問題易產生超敏反應2、天冬酰胺酶ASNase的沉默失活2、通過體外體內實驗都證明了其良好的治療作用3、幾乎無免疫原性，不易產生超敏反應參考文獻[1]ChienWW,AllasS,RachinelN,etal.Pharmacology,immunogenicity,andefficacyofanovelpegylatedrecombinantErwiniachrysanthemi-derivedL-asparaginase[J].Investigationalnewdrugs,2014,32(5):795-805.[2]FigueiredoL,ColePD,DrachtmanRA.AsparaginaseErwiniachrysanthemiasacomponentofamulti-agentchemotherapeuticregimenforthetreatmentofpatientswithacutelymphoblasticleukemiawhohavedevelopedhypersensitivitytoE.coli-derivedasparaginase[J].Expertreviewofhematology,2016,9(3):227-234.[3]vanderSluisIM,VroomanLM,PietersR,etal.Consensusexpertrecommendationsforidentificationandmanagementofasparaginasehypersensitivityandsilentinactivation[J].haematologica,2016,101(3):279-285.[4]LopesAM,Oliveira-NascimentoL,RibeiroA,etal.Therapeuticl-asparaginase:upstream,downstreamandbeyond[J].Criticalreviewsinbiotechnology,2017,37(1):82-99.

參考文獻[5]KumarK,KaurJ,WaliaS,etal.L-asparaginase:aneffectiveagentinthetreatmentofacutelymphoblasticleukemia[J].2014.[6]AndradeAF,BorgesKS,SilveiraVS.UpdateontheuseofL-asparaginaseininfantsandadolescentpatientswithacutelymphoblasticleukemia[J].ClinicalMedicineInsights.Oncology,2014,8:95.[7]HijiyaN,vanderSluisIM.Asparaginase-associatedtoxicityinchildrenw