PAGEPAGE1第1課時(shí)蛋白質(zhì)的分別與提取[隨堂檢測(cè)][學(xué)生用書P52]學(xué)問(wèn)點(diǎn)一蛋白質(zhì)分別技術(shù)1．凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)依據(jù)的原理是()A．依據(jù)蛋白質(zhì)分子與凝膠的親和力的大小B．依據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小C．依據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷的多少D．依據(jù)蛋白質(zhì)溶解度的大小解析：選B。凝膠色譜法是依據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分別蛋白質(zhì)的一種方法。2．下列有關(guān)透析的敘述，錯(cuò)誤的是()A．用于透析的薄膜要具有選擇透過(guò)性B．透析膜是一種半透膜C．透析能使小分子自由出入，而將大分子保留在袋內(nèi)D．透析膜可用于更換樣品的緩沖液解析：選A。透析膜能使小分子自由出入，大分子不能通過(guò)，具有半透性，但不具有選擇性，A項(xiàng)錯(cuò)。透析過(guò)程中小分子可自由出入，因此，可用于更換樣品的緩沖液，B、C、D項(xiàng)都正確。3．電泳實(shí)現(xiàn)樣品中各種蛋白質(zhì)分子的分別是利用了()A．各種分子帶電性質(zhì)的差異B．分子本身的大小不同C．分子形態(tài)的不同D．以上都正確解析：選D。電泳是利用了待分別樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形態(tài)的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分別。學(xué)問(wèn)點(diǎn)二電泳法與凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)的過(guò)程4．如圖為凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)示意圖和SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳示意圖。據(jù)圖分析不正確的是()A．在裝填圖甲中凝膠色譜柱時(shí)一旦發(fā)覺(jué)柱內(nèi)有氣泡存在，就須要重裝B．圖甲中大分子蛋白質(zhì)因阻力大而移動(dòng)慢，所以最終從層析柱中流出來(lái)C．圖乙中凝膠中加入的SDS可以使蛋白質(zhì)遷移速率完全取決于分子大小D．已知凝膠中的SDS帶負(fù)電，則應(yīng)在電泳槽的①處接電源負(fù)極，②處接電源正極解析：選B。在裝填凝膠色譜柱時(shí)，凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要?jiǎng)蚍Q，不能有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)影響蛋白質(zhì)洗脫的次序，A正確；圖甲中大分子蛋白質(zhì)因不簡(jiǎn)潔進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)速度快，所以最先從層析柱中流出來(lái)，B錯(cuò)誤；SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳的遷移速率完全取決于分子大小，因此圖乙中凝膠中加入的SDS可以使蛋白質(zhì)遷移速率完全取決于分子大小，C正確；凝膠中的SDS帶負(fù)電，所以電泳槽的①處接電源負(fù)極，②處接電源正極，D正確。5．如圖能正確表示相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)，屬于在凝膠中的行進(jìn)過(guò)程的是()解析：選B。相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不簡(jiǎn)潔進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快，A錯(cuò)誤；相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)簡(jiǎn)潔進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng)的速度慢，相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不簡(jiǎn)潔進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快，B正確；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不簡(jiǎn)潔進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，C錯(cuò)誤；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不簡(jiǎn)潔進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，且其路程短，移動(dòng)的速度快，D錯(cuò)誤。6．紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成的，血紅蛋白的主要功能是攜帶O2。我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行試驗(yàn)，來(lái)提取和分別血紅蛋白。依據(jù)材料回答下列問(wèn)題：(1)試驗(yàn)前取簇新血液，要在采血器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來(lái)，立刻進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是________________________________________________________________________。(2)在對(duì)樣品進(jìn)行處理時(shí)，主要包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分別血紅蛋白溶液、透析等步驟。其中透析技術(shù)的原理是________________________________________________________________________。(3)同學(xué)甲利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分別，在電泳過(guò)程中，影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素包括蛋白質(zhì)分子的________、________以及分子的形態(tài)等。(4)圖1、圖2分別是同學(xué)甲、乙利用同一種樣品分別得到的結(jié)果，則圖2中與圖1中蛋白質(zhì)P對(duì)應(yīng)的是________________________________________________________________________。解析：(1)加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固。(2)透析的原理是小分子可以自由進(jìn)出透析袋(半透膜)，而大分子不能通過(guò)。(3)電泳時(shí)，影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素有蛋白質(zhì)分子大小、帶電性質(zhì)及分子的形態(tài)等。(4)SDS凝膠電泳裝置是垂直的裝置，此種電泳方法主要取決于蛋白質(zhì)分子量的大小，與電荷無(wú)關(guān)，同時(shí)加樣在“－”極，通電后，樣品蛋白質(zhì)向“＋”極移動(dòng)，相對(duì)分子質(zhì)量相對(duì)小的，移動(dòng)距離大，因此從圖1的電泳結(jié)果分析，P比N、M移向“＋”距離大，說(shuō)明P的相對(duì)分子質(zhì)量相對(duì)比較小，因此洗脫出來(lái)的時(shí)間比較長(zhǎng)，符合圖2中的丙。答案：(1)防止血液凝固(2)小分子可以自由進(jìn)出透析袋(半透膜)，而大分子不能通過(guò)(3)大小帶電性質(zhì)(4)丙[課時(shí)作業(yè)][學(xué)生用書P91(單獨(dú)成冊(cè))]一、選擇題1．下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取的說(shuō)法中，不正確的是()A．一般用機(jī)械方法破裂生物組織B．破裂細(xì)胞常用的方法有研磨法、超聲波法和酶解法C．一般來(lái)說(shuō)，酸性蛋白質(zhì)要用酸性溶液抽提D．抽提得到的蛋白質(zhì)粗提取物可用離心法去除固體雜質(zhì)解析：選C。一般酸性蛋白質(zhì)要用偏堿性溶液抽提。2．離心沉降法是純化蛋白質(zhì)的方法之一，在這一過(guò)程中蛋白質(zhì)會(huì)分層，這一現(xiàn)象與蛋白質(zhì)的何種性質(zhì)有關(guān)()A．酸堿性B．所帶電荷多少C．分子大小和密度D．種類解析：選C。依據(jù)蛋白質(zhì)之間或蛋白質(zhì)與其他分子之間在分子大小和密度上的不同，采納離心沉降法，使其分層而分別；酸堿性不同可用電泳法；所帶電荷多少不同可采納電泳法等。3．利用凝膠色譜法哪種蛋白質(zhì)先洗脫出來(lái)()A．相對(duì)分子質(zhì)量大的B．溶解度高的C．相對(duì)分子質(zhì)量小的D．所帶電荷多的解析：選A。相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)能進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道，洗脫路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而沿凝膠顆粒間的空隙移動(dòng)，洗脫路程較短，移動(dòng)速度較快，首先洗脫出來(lái)。4．在pH＝5.12時(shí)進(jìn)行電泳，下列哪種蛋白質(zhì)既不向正極移動(dòng)也不向負(fù)極移動(dòng)()A．血紅蛋白：pI(等電點(diǎn))＝7.07B．魚精蛋白：pI＝12.20C．α1-球蛋白：pI＝5.06D．β-球蛋白：pI＝5.12解析：選D。β-球蛋白在pH＝5.12時(shí)不帶電，在電泳時(shí)既不向正極移動(dòng)也不向負(fù)極移動(dòng)。5．關(guān)于蛋白質(zhì)提取的敘述中，不正確的是()A．分別與純化蛋白質(zhì)之前首先要用適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ沟鞍踪|(zhì)釋放出來(lái)B．抽提時(shí)要依據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性選擇不同的溶劑C．蛋白質(zhì)的粗提取物離心可除去一些小分子雜質(zhì)D．蛋白質(zhì)的粗制品可能是多種蛋白質(zhì)的混合物解析：選C。分別純化蛋白質(zhì)之前要先讓細(xì)胞中的蛋白質(zhì)釋放出來(lái)，A正確；提取蛋白質(zhì)時(shí)，要依據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性選用不同的溶劑，B正確；對(duì)蛋白質(zhì)的粗提取物離心可以除去一些固體雜質(zhì)，C錯(cuò)誤；蛋白質(zhì)的粗制品是多種蛋白質(zhì)的混合物，D正確。6．下列有關(guān)凝膠色譜法和電泳法的說(shuō)法，正確的是()A．它們都是分別蛋白質(zhì)的重要方法B．它們的原理相同C．運(yùn)用凝膠色譜法須要運(yùn)用緩沖溶液而電泳不須要D．以上說(shuō)法都正確解析：選A。不同蛋白質(zhì)的分子量不同，因此凝膠色譜法可以依據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分別蛋白質(zhì)；電泳法中帶電分子的遷移速度不僅與分子大小有關(guān)，也與分子所帶的電荷有關(guān)，A正確、B錯(cuò)誤；這兩種方法都用到緩沖溶液，以調(diào)整溶液的酸堿度，C錯(cuò)誤。7．下列關(guān)于蛋白質(zhì)純化方法的敘述，錯(cuò)誤的是()A．純化主要是依據(jù)蛋白質(zhì)以及蛋白質(zhì)與其他物質(zhì)之間的理化性質(zhì)的差異進(jìn)行的B．透析法可去除小分子化合物雜質(zhì)，原理是不同分子所攜帶凈電荷不同C．通過(guò)限制離心速率，可使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)沉降分層，從而分別不同的蛋白質(zhì)D．不同的物質(zhì)在同一電場(chǎng)中的泳動(dòng)速度不同，因此可用電泳法分別蛋白質(zhì)解析：選B。透析法是利用蛋白質(zhì)分子不能透過(guò)半透膜的特性，將蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分別開(kāi)來(lái)。8．下列關(guān)于血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳試驗(yàn)的說(shuō)法，不正確的是()A．試驗(yàn)所用的巴比妥緩沖液的pH為8.6B．點(diǎn)樣是在薄膜的光澤面上進(jìn)行的C．試驗(yàn)后可以得到五條色帶D．整個(gè)試驗(yàn)最關(guān)鍵的步驟是點(diǎn)樣解析：選B。在點(diǎn)樣時(shí)，用蓋玻片在薄膜的非光澤面且離薄膜一端2cm處輕輕點(diǎn)樣。9．下圖是人血清蛋白在以醋酸纖維薄膜為支持物，pH為8.6的巴比妥緩沖液中電泳分別結(jié)果示意圖，由此圖不能得出的結(jié)論是()A．在pH為8.6的巴比妥緩沖液中γ、β、α2、α1和清蛋白都帶負(fù)電荷B．在pH為8.6的巴比妥緩沖液中電泳時(shí)，γ、β、α2、α1和清蛋白遷移速率不同C．β球蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量肯定比α球蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量大D．在pH為8.6的巴比妥緩沖液中γ球蛋白遷移速率最慢，清蛋白遷移速率最快解析：選C。帶電粒子在電場(chǎng)中遷移的速率是帶電粒子帶電性質(zhì)、帶電量、粒子大小、粒子形態(tài)共同作用的結(jié)果。10．如圖是用除去DNA的濾液進(jìn)行血紅蛋白的提取和分別試驗(yàn)裝置，下列敘述不正確是()A．用圖甲裝置對(duì)濾液進(jìn)行處理，其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)B．圖乙裝置的試管中收集到的液體中最先出現(xiàn)的是相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)C．用圖乙裝置分別血紅蛋白時(shí)，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每管收集5mL，連續(xù)收集D．圖丙裝置中電泳法分別提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有肯定量的電荷，在電場(chǎng)的作用下向一極移動(dòng)解析：選B。圖甲裝置為透析法，通過(guò)對(duì)濾液進(jìn)行處理，其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，A正確；圖乙裝置為凝膠色譜法，試管中收集到的液體中最先出現(xiàn)的是相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)，B錯(cuò)誤；用圖乙裝置分別血紅蛋白時(shí)，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每管收集5mL，連續(xù)收集，C正確；丙裝置中電泳法分別提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有肯定量的電荷，在電場(chǎng)的作用下向一極移動(dòng)，D正確。11.如圖表示對(duì)某蛋白質(zhì)溶液進(jìn)行SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳的結(jié)果(類似于紙層析法分別色素)，下列相關(guān)敘述不正確的是()A．蛋白質(zhì)上某些基團(tuán)解離后可使蛋白質(zhì)帶電，電場(chǎng)中帶電的蛋白質(zhì)分子(或多肽)會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)B．蛋白質(zhì)在SDS—聚丙烯酰胺凝膠中的遷移速度完全取決于其所帶凈電荷多少C．蛋白質(zhì)在SDS—聚丙烯酰胺凝膠中的遷移速度基本取決于其分子量大小D．電泳結(jié)果表明溶液中蛋白質(zhì)可能有兩種，但也可能只有一種解析：選B。蛋白質(zhì)的氨基與羧基可發(fā)生解離，使其帶正電或負(fù)電，在電場(chǎng)中發(fā)生遷移。SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳中所加的SDS可完全掩蓋蛋白質(zhì)本身所帶電荷，故其移動(dòng)速度與本身所帶電荷無(wú)關(guān)，而由其分子量大小確定。SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳會(huì)使蛋白質(zhì)水解成肽鏈，故結(jié)果所示可能只有一種蛋白質(zhì)(有兩種肽鏈)，也可能有兩種蛋白質(zhì)。12．下列關(guān)于凝膠色譜法的原理及操作，不正確的是()A．是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分別開(kāi)的一種方法B．在洗脫過(guò)程中，大分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而最先流出，而小分子可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部而流速緩慢，最終流出C．凝膠內(nèi)部有很微細(xì)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，其空隙大小與被分別的物質(zhì)分子的大小無(wú)相應(yīng)關(guān)系D．一般狀況下，凝膠對(duì)要分別的物質(zhì)沒(méi)有吸附作用，因此全部要分別的物質(zhì)都應(yīng)當(dāng)被洗脫出來(lái)解析：選C。凝膠色譜法是依據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量大小分別蛋白質(zhì)的有效方法。凝膠是由多糖類化合物構(gòu)成的，其內(nèi)部有很微細(xì)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢；而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部，路程較短，移動(dòng)速度較快，因此在洗脫過(guò)程中先分別出來(lái)。不同的凝膠，其立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)不同，孔隙大小不同，因此可分別的分子大小也不同。凝膠一般對(duì)分別的物質(zhì)無(wú)吸附作用，所以要分別的物質(zhì)都應(yīng)當(dāng)被洗脫出來(lái)，這是凝膠色譜法與一般層析法的不同。二、非選擇題13．請(qǐng)依據(jù)血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳試驗(yàn)回答下列問(wèn)題：(1)試驗(yàn)所用的主要試劑有：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)試驗(yàn)所用緩沖液的pH為_(kāi)_______，為什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)點(diǎn)樣應(yīng)點(diǎn)在薄膜的哪一面？__________，方法是：用__________在血清中蘸一下，在離薄膜一端________cm處輕輕按下，隨即提起。(4)實(shí)施電泳時(shí)，每厘米膜寬電流強(qiáng)度為_(kāi)_______________________________________________________________________，電泳時(shí)間為_(kāi)_______________________。解析：(1)血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳試驗(yàn)需配制的試劑有巴比妥緩沖液、染色液、漂洗液、透亮液等。(2)試驗(yàn)所用的緩沖液的pH為8.6，因?yàn)榇藭r(shí)血清中的各種蛋白質(zhì)都呈負(fù)電性，而且彼此電荷大小不同，便于分別。(3)在點(diǎn)樣時(shí)，用蓋玻片在膜的非光澤面且離薄膜一端2cm處輕輕點(diǎn)樣。(4)在實(shí)施電泳時(shí)，蓋上電泳槽蓋，在薄膜平衡約10min后通上電源，調(diào)整電流強(qiáng)度至每厘米膜寬0.4～0.8mA，電泳時(shí)間為60～90min。答案：(1)巴比妥緩沖液、染色液、漂洗液、透亮液等(2)8.6在此pH下，血清中的各種蛋白質(zhì)都呈負(fù)電性，而且彼此電荷大小不同，便于分別(3)非光澤面蓋玻片2(4)0.4～0.8mA60～90min14.凝膠色譜技術(shù)是20世紀(jì)六十年頭初發(fā)展起來(lái)的一種快速而又簡(jiǎn)潔的分別技術(shù)，由于設(shè)備簡(jiǎn)潔、操作便利、不須要有機(jī)溶劑，對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分別效果，目前已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，不但應(yīng)用于科學(xué)試驗(yàn)探討，而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。據(jù)圖回答問(wèn)題：(1)a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從層析柱中洗脫出來(lái)的是________，緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)自己制作凝膠色譜柱時(shí)，在色譜柱底部d位置相當(dāng)于多孔板的結(jié)構(gòu)可由________替代。(3)裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)洗脫用的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體______(填“相同”或“不同”)，洗脫時(shí)，對(duì)洗脫液的流速要求是________。解析：用凝膠色譜法分別各種蛋白質(zhì)時(shí)，大分子蛋白質(zhì)先洗脫出來(lái)，小分子蛋白質(zhì)后洗脫出來(lái)。大分子蛋白質(zhì)由于直徑較大，不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔，而只能分布于顆粒之間，所以向下移動(dòng)的速度較快。小分子蛋白質(zhì)可進(jìn)入凝膠內(nèi)，在向下移動(dòng)的過(guò)程中，從一個(gè)凝膠顆粒內(nèi)擴(kuò)散到顆粒間隙后再進(jìn)入另一凝膠顆粒，如此不斷地進(jìn)入和擴(kuò)散，小分子蛋白質(zhì)的下移速度落后于大分子蛋白質(zhì)。在裝填凝膠色譜柱時(shí)，不得有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分別效果；洗脫時(shí)要調(diào)整洗脫液流速，保持穩(wěn)定。答案：(1)aa的相對(duì)分子質(zhì)量大，無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快(2)尼龍網(wǎng)或尼龍紗(3)氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分別效果(4)相同保持穩(wěn)定15．商品化植酸酶主要來(lái)自微生物，首先篩選出產(chǎn)酶的菌株，然后制備植酸酶，請(qǐng)依據(jù)下面的流程圖回答問(wèn)題：(1)Ⅰ中的主要成分有哪些？____________________；Ⅱ中包含哪些成分？__________________。(2)請(qǐng)寫一種純化得到植酸酶的方法：________________________________________________________________________；其原理是________________________________________________________________________。解析：植酸酶是蛋白質(zhì)，屬于大分子有機(jī)物，含酶的發(fā)酵液經(jīng)過(guò)透析后，能夠除去小分子雜質(zhì)，這樣就能夠得到植酸酶。對(duì)于粗提取的植酸酶可以用凝膠色譜法進(jìn)行提純，由于蛋白質(zhì)帶有電荷，亦可用電泳法進(jìn)行純化。答案：(1)小分子雜質(zhì)植酸酶等多種蛋白質(zhì)(2)凝膠色譜法依據(jù)蛋白質(zhì)之間分子量的大小差異進(jìn)行純化(或電泳法依據(jù)蛋白質(zhì)之間電荷、分子量的大小等差異進(jìn)行純化)16．某生物愛(ài)好小組在“蛋白質(zhì)的提取和分別”試驗(yàn)中，打算從豬的血液中初步提取血紅蛋白，設(shè)計(jì)的“血紅蛋白提取、分別流程圖”如下，試回答下列有關(guān)問(wèn)題：eq\x(\a\al(試驗(yàn)打算,（配制緩沖液、血細(xì)胞懸液）))→eq\x(\a\al(樣品處理,（洗滌、破裂、離心等）))→eq\x(\a\al(蛋白質(zhì)粗分別,（透析）))→eq\x(\a\al(純化、純度鑒定,（凝膠色譜法、電泳等）))(1)樣品處理中紅細(xì)胞的洗滌要用________反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入肯定量的低濃度、pH＝7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢瑁梢云屏鸭t細(xì)胞，破裂細(xì)胞的原理是___________