…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年蘇科新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下列關于果酒和果醋制作的敘述，正確的是（）A.在果酒和果醋制作全過程中，都需要嚴格滅菌B.果酒發酵、果醋發酵過程中溫度分別控制在30℃、20℃C.果醋發酵過程中，要適時通過充氣口充氣D.利用酵母菌釀酒時，密封時間越長，產生的酒精量就越多2、與乳酸桿菌屬于同類生物的是（）A.毛霉B.根霉C.酵母菌D.醋酸菌3、以下是制定并研究設計的“試管牛”工廠化生產技術流程；其中正確的順序應是（）

①卵母細胞的采集和培養②精子的采集和獲能③畫出“試管牛”工廠化生產技術流程圖④受精⑤胚胎的早期培養A.①②③④⑤B.①②④⑤③C.③①②④⑤D.①②⑤④③4、生物技術的發展速度很快，已滅絕生物的“復生”將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛死亡，以下提供的“復生”野驢個體的方法中能夠成功的是（）A.將野驢的體細胞取出，利用細胞培養技術，可培育成新個體B.將野驢的體細胞兩兩融合，再經組織培養培育成新個體C.取出野驢的體細胞核移植到母家驢的去核卵細胞中，經孕育培養成新個體D.將野驢的一個基因導入家驢的受精卵中，培育成新個體5、某研究者利用細胞工程制備抗A的單克隆抗體。先用抗原(A)分別免疫3只同種小白兔(X、Y和Z)，每只小白兔免疫5次，每次免疫一周后測定各小白兔血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數)，制備B淋巴細胞時，免疫小白兔的血清抗體效價需達到16000以上，結果如圖所示。下列有關敘述錯誤的是（）

A.將抗原A注入小白兔體內的目的是為了獲得免疫產生的抗A抗體B.最適合用于制備B淋巴細胞的小白兔YC.骨髓瘤細胞與B淋巴細胞的融合可以使用滅活的病毒進行促融D.融合細胞需經多次篩選獲得足夠數量的能分泌抗A抗體的雜交瘤細胞6、癌癥患者進行化療或放療之后，體內白細胞數量大幅度降低，可以注射粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（GM-CSF）增加白細胞的數量。在自然條件下，此細胞因子的含量很低，很難獲得。某科研團隊將人的GM-CSF基因導入大腸桿菌，大量生產重組GM-CSF，滿足了臨床需求。下列有關敘述正確的是（）A.可通過PCR的方法獲取GM-CSF基因B.構建GM-CSF基因表達載體需要限制酶和DNA聚合酶C.基因表達載體上的復制原點可以調控GM-CSF基因的表達D.可通過顯微注射的方式將GM-CSF基因導入大腸桿菌評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)7、豬瘟病毒（CSFV）蛋白質外殼上的E2蛋白；對于病毒入侵細胞至關重要。研究人員利用E2蛋白來制備抗CSFV單克隆抗體的過程如圖。下列敘述錯誤的是（）

A.注射E2蛋白后，從小鼠脾臟中獲得的B淋巴細胞均能產生E2蛋白抗體B.過程②可使用PEG融合法或滅活病毒誘導法，得到的③不一定是雜交瘤細胞C.細胞③經一次篩選即可得到足量多的能產生E2蛋白抗體的雜交瘤細胞D.此過程生產的單克隆抗體既可用于CSFV的檢測，也可用于該種豬瘟的治療8、為探究某物種的等位基因“CST1”與“cst1E81K”的功能，科研人員將表達CST1和cst1E81K的質粒分別導入無法吸收葡萄糖的酵母菌（以麥芽糖為碳源），經處理后再將其接種在含不同碳源的培養基上，結果如下圖所示，下列說法正確的是（）

A.上述酵母菌在接種前的處理是對其進行等濃度梯度的稀釋B.在含葡萄糖類似物的培養基上，導入CST1的酵母菌存活率最高C.據圖推測，CST1的功能可能是轉運葡萄糖進入細胞D.導入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率大于導入CST1的酵母菌9、我國制作泡菜歷史悠久。《中饋錄》中記載：“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸，加燒酒少許。如有霉花，加燒酒少許。壇沿外水須隔日一換，勿令其干。”下列說法錯誤的是（）A.“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸”的目的是徹底滅菌B.“霉花”主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往來自蔬菜C.“壇沿外水須隔日-換，勿令其干”的目的是保證壇內適宜濕度D.制作泡菜的時間越長，亞硝酸鹽的含量越高10、在動物細胞培養的過程中，貼壁的細胞不一定都能增殖并形成克隆（單個細胞繁殖形成的細胞群體），而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞，這一特點可用于測定動物細胞的增殖能力。大致流程如下圖，相關敘述不正確的是（）

A.出現接觸抑制后，細胞克隆停止增殖B.克隆細胞與接種的細胞的遺傳信息不一定相同C.胰蛋白酶可使細胞分散成單個利于計數D.需采用固體培養基培養才能形成細胞克隆11、體細胞核移植胚胎組的蛋白甲基化可導致克隆效率降低；毛殼素是組蛋白H3K9甲基化轉移酶SUV39H1/2的特異性化學抑制劑，使用毛殼素處理供體細胞，可降低SUV39H1/2在供體細胞和核移植胚胎中的表達水平，提高豬胚胎的發育率，如圖是利用不同濃度毛殼素處理對豬胚胎細胞核移植技術成功率的實驗流程示意圖，下列敘述正確的是（）

A.克隆豬的遺傳物質來自供體細胞和代孕母豬B.過程①使用的培養液需添加動物血清或血漿C.過程④采用滅活的病毒處理以促進精卵結合D.過程⑤成功與否與代孕母豬的生理狀態有關12、關于現代生物工程技術應用的安全性，下列說法正確的是（）A.對待生物武器的態度應明確而堅定，即堅決禁止生物武器B.對轉基因植物的外源DNA要認真選擇，避免產生對人體有害或過敏的蛋白質C.我國不反對治療性克隆，允許有限制地進行克隆人實驗D.一旦發現轉基因生物出現了安全性問題，要馬上停止實驗，并銷毀重組生物13、利用基因工程技術可使大腸桿菌生產人的胰島素原。下列相關敘述中，錯誤的是（）A.人和大腸桿菌在合成胰島素原時，轉錄和翻譯的場所是相同的B.DNA連接酶能催化磷酸與脫氧核糖形成化學鍵C.通過檢測發現大腸桿菌中沒有胰島素原產生，則可判斷重組質粒未導入受體菌D.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原有較高的生物活性14、下列關于微生物發酵的敘述，錯誤的是（）A.制備培養基過程中，需要在滅菌后進行pH的調節B.制作果酒時適當加大接種量可以提高發酵速率，抑制雜菌生長C.現代發酵工程選育出性狀優良的菌種后即可進行發酵罐內的發酵D.醋酸菌能將乙醇變成乙醛而后變為乙酸，故夏天開瓶后的紅酒容易變酸評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)15、通過統計平板上的________________，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結果準確，一般選擇菌落數在_________________________的平板進行計數。16、動物基因工程：______。17、在___________條件下，DNA與___________反應呈現______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。18、對于DNA的粗提取而言，就是利用DNA與RNA、蛋白質和脂質等在__________方面的差異，提取DNA，去除雜質。（人教P54）19、動物細胞培養的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉入培養瓶中進行______培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續_____培養。20、今年年初；爆發了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細胞，使機體產生_________性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統對肺細胞強烈攻擊引發肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）科學家采集了感染新型冠狀病毒并已康復的甲、乙兩人的血液，檢測相關抗體的水平，結果如圖1。據此分析，應選取_________的B淋巴細胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細胞的感染率，結果如圖2。據此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機體內相應的__________細胞迅速增殖分化，產生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。評卷人得分四、判斷題(共1題，共8分)21、我國對轉基因技術的方針是研究上要大膽，堅持自主創新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴格，堅持依法監管。（選擇性必修3P104）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共36分)22、甘蔗是華南地區一種重要的經濟作物。某研究團隊從甘蔗根際土壤中分離出了幾種固氮菌；實驗方案如下。

回答下列問題：

（1）Ashby培養基的營養成分主要包括水、無機鹽_________等。實驗中第一次在Ashby培養基上接種的方法是________，在Ashy平板上進行多次接種的目的是_________________________

（2）固氮菌能產生固氮酶。為評估固氮酶的活性，可以檢測____________．

（3）研究發現，上述固氮菌還能產生IAA。取一定體積的固氮菌菌液離心，獲得上清液，現欲測定上清液中IAA的含量，請利用以下試劑，寫出實驗思路。_______

供選試劑：標準的1g/L的IAA母液，蒸餾水，S試劑(與IAA反應顯紅色，且顏色深淺與IAA濃度成正相關）23、【生物技術實踐】

科學家發現家蠅體內存在一種抗菌活性蛋白；這種蛋白質具有極強的抗菌能力，受到研究者重視。

（1）分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據蛋白質分子的______________、大小及形狀不同，在電場中的________不同而實現分離。

（2）可用金黃色葡萄球菌來檢驗該蛋白的抗菌特性。抗菌實驗中所用培養基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細菌生長提供_________和_______________。

（3）分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養基中接種等量菌液。培養一定時間后，比較兩種培養基中菌落的_____________；確定該蛋白質的抗菌效果。

（4）細菌培養常用的接種方法有_______和___________。實驗結束后，對使用過的培養基應進行_____________處理。24、被稱為“水中小白鼠”的斑馬魚是一種體長4厘米左右的熱帶淡水魚；與人類基因同源性高達87%，并有相似的器官；生理功能和信號通路。由于發育周期短、費用低、體外受精、透明等優點，斑馬魚現在越來越廣泛地應用于毒性檢測、疾病模型創制、藥物篩選等領域中。

研究人員欲通過使胰島素基因表達受阻從而構建糖尿病模型斑馬魚。嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑；通過將其注入斑馬魚受精卵可阻礙相關基因的表達。針對其作用原理，現有兩種假說：

假說1：嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切。

假說2：嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切。

為了驗證上述假說；研究人員進行了如下實驗：

(1)從受精卵發育了3天的實驗組和對照組的細胞中提取總RNA，再通過逆轉錄獲得cDNA。若假說1成立，選擇上圖所示引物2和引物3進行PCR后的結果為______（填字母）。A．實驗組有雜交帶B．實驗組無雜交帶C．對照組有雜交帶D．對照組無雜交帶(2)若要證明假說2成立，進行PCR時，需要選擇上圖所示引物有____________。

(3)采用PCR技術擴增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)為了獲取大量斑馬魚胚胎干細胞用于藥物篩選，可加入__________________，用于分散斑馬魚囊胚中的__________________。再取分散細胞作為初始材料進行______培養，然后分瓶繼續培養。培養瓶中添加輸卵管上皮細胞作為______細胞，以提高斑馬魚胚胎干細胞的數量。25、研究者改造與腸道共生的大腸桿菌；口服該工程菌后激活機體特異性免疫，實現腫瘤的預防和治療。

(1)部分腸道細菌能夠分泌外膜囊泡（OMV）；如圖1．OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內豐富的免疫細胞。細菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白。

研究者利用含圖2所示元件的表達載體轉化大腸桿菌制備工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表達產物能夠與樹突狀細胞表面的特異性受體結合，提高樹突狀細胞_____OMV的能力。

(2)為研究上述工程菌在人為可控條件下引發特異性免疫反應的效果，研究者用健康小鼠進行如下實驗：。組別第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小時后，飲用含阿拉伯糖的水結果檢測第1組空載體+第12天，每組隨機取5只小鼠等量的脾臟細胞與黑色素瘤細胞共培養，檢測殺傷率，結果如圖3．第2組ClyA-Fc+第3組ClyA-OVA+第4組第5組

注：“+”；“-”代表是否飲用；

口服工程菌12小時后其在腸道內存在數量較多。

①第4、5組的操作是_____。圖3結果說明工程菌在人為可控條件下引發特異性免疫反應，理由是_____。

②為進一步驗證上述結論，研究者進行如下實驗：先加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，再加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，檢測熒光細胞的數目，若第5組_____為最大值；則上述結論成立。

A．帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物。

B．帶有綠色熒光標記的細胞毒性T細胞特異性抗體。

C．第1-5組小鼠脾臟細胞。

③腫瘤患者術后極易復發，研究者重復上表實驗，并在第3次口服工程菌后第50天給小鼠注射黑色素瘤細胞。目的是_____。

(3)該工程菌的研發為不同腫瘤的精準治療和預防提供了可能。依據本研究，設計針對肺癌治療的工程菌表達載體元件：_____。評卷人得分六、綜合題(共4題，共12分)26、“試管嬰兒”是通過將不孕夫婦的精子和卵細胞取出在試管中完成受精；并在試管中培養使其發育到一定時期，再將胚胎移入女性子宮內發育成的胎兒。“試管嬰兒技術”不僅使一部分不能生育的男女重新獲得了生育的機會，也為人類的優生優育開辟了新的途徑。

（1）在體外受精時，精子首先要進行___________處理，卵細胞則要培養到___________（時期）才能與精子結合。

（2）“試管嬰兒”的形成用到的生物技術有___________（填序號）。

①早期胚胎培養②體外受精③胚胎移植④核移植。

（3）采用胚胎分割技術，能得到“同卵雙胞胎”。這種技術一般采用發育良好、形態正常的___________胚。對胚胎進行分割時，要特別注意將___________均等分割；否則會影響分割后的胚胎恢復和進一步發育。

（4）現在大多數人反對設計嬰兒性別。其原因是可能破壞人類正常的___________；違反倫理道德。

（5）早期胚胎中的___________細胞，不僅可以應用于哺乳動物胚胎性別鑒定，還可應用于治療人類的某些疾病，如老年癡呆癥、糖尿病等；體外誘導分化培育出人造組織器官用于___________、研究體外細胞分化等領域。27、性別控制技術在畜牧生產中的應用；充分發揮了受性別限制的生產性狀（如泌乳；生長速度、肉質等）的最大經濟效益。如圖所示，依據X染色體的DNA含量比Y染色體多，用流式細胞儀將牛的兩種精子分離開來，再通過試管動物技術獲得所需性別的試管牛。回答下列問題：

（1）將分離出的精子用鈣離子載體A23187溶液進行_________處理后，才能與培養成熟的卵細胞融合形成受精卵。受精過程中防止多精入卵的生理反應有________________________。

（2）若培育生產血清白蛋白的乳腺生物反應器，需將血清白蛋白基因與_________的啟動子等調控組件重組在一起，通過顯微注射等方法導入受精卵_________（填“甲”或“乙”）中，然后將該受精卵繼續培養到_________階段移入受體；使其生長發育成轉基因試管牛。

（3）在胚胎移植前，需要用激素對“代孕母體”作_________處理。由于受體_________；從而保證胚胎能在受體內存活。

（4）用Y染色體上決定性別的SRY基因對滋養層細胞的DNA進行檢測，可達到鑒定胚胎性別的目的，這種檢測方法采用的是__________________技術。28、人的犬瘟熱（CD）是由犬瘟熱病毒（CDV）引起的高度接觸性；致死性傳染病。CDV的RNA編碼的血凝素蛋白（H蛋白）是宿主免疫系統的主要目的抗原；是產生中和抗體的重要抗原，在抗病毒免疫中占有重要地位。因此，制備針對H蛋白的單克隆抗體具有很高的醫用價值。

（1）H蛋白單克隆抗體制備過程中，首先用CDV弱毒株對小鼠進行____________處理，一段時間后從小鼠脾中得到能產生針對H蛋白的抗體的B淋巴細胞；同時，通過____________技術培養小鼠的骨髓瘤細胞，培養液中通常需要加入____________等一些天然成分，另外還需要O2和CO2，CO2的主要作用是____________________________________。

（2）將獲得的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞在適宜的條件下混合培養，培養液中加入____________的病毒誘導二者融合，然后將其接種到特定選擇培養基中培養，進行第一次篩選，篩選出的是____________細胞，然后再進行相關操作做第二次篩選，最終選出________________________細胞；注射到小鼠腹腔內或體外培養獲取單克隆抗體。

（3）單克隆抗體能準確的識別抗原的細微差異，與特定抗原發生特異性結合。該原理用于疾病的診斷，優點是________________________；如將細胞毒素類藥物與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合，可實現對腫瘤細胞的________________________殺傷。29、下圖為試管牛及牛胚胎分割示意圖。請據圖回答：

(1)為了獲得足夠多的細胞1，需要給供體母牛注射相關激素進行______________處理，采集到1后要培養到減數第二次分裂的____________期才具備與獲能精子受精的能力。

(2)判斷1是否受精的依據是在卵細胞膜和透明帶之間出現兩個____________。

(3)進行胚胎分割時，應選擇發育良好、形態正常的發育到____________或____________時期胚胎進行操作。在分割得到3、4時應注意對____________均等分割，以免影響胚胎的恢復和進一步發育。要鑒定分割胚胎的性別，可取_____________的細胞做DNA分析性別鑒定。胚胎分割可能是_______________的一種生殖方式。

(4)獲得試管牛的最后一道工序是________________。

(5)胚胎在受體內能夠存活的生理學基礎是_______________________________________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、C【分析】【分析】

1.果酒的制作離不開酵母菌；酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進行酒精發酵。溫度是酵母菌生長和發酵的重要條件，20℃左右，酒精發酵時，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發酵過程當中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

2.醋酸菌是一種好氧細菌；只有當氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動。醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當進行深層發酵時，即使只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。當氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃。

【詳解】

A；家庭制作果酒、果醋和腐乳時不需要嚴格滅菌處理；A錯誤；

B；果酒發酵過程中溫度控制在20℃；果醋發酵過程中溫度控制在30℃，B錯誤；

C；參與果醋制作的醋酸菌是嗜氧菌；因此在果醋發酵過程中，要適時通過充氣口充氣，從而有利于醋酸菌的代謝，C正確；

D；利用酵母菌釀酒時；在一定范圍內，發酵時間越長，產生的酒精量越多，但時間過長后，由于營養物質的消耗等原因，酒精產量減少，D錯誤。

故選C。

【點睛】2、D【分析】【分析】

乳酸桿菌是原核生物；無核膜和細胞器膜。

【詳解】

A；毛霉是真核生物；A錯誤；

B；根霉是真核生物；B錯誤；

C；酵母菌真核生物；C錯誤；

D；醋酸菌是原核生物；D正確。

故選D。3、B【分析】【分析】

試管動物技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精并通過培養發育為早期胚胎后；再經移植后產生后代的技術，可見試管動物技術主要包括體外受精；早期胚胎培養和胚胎移植技術。

【詳解】

“試管牛”培育的一般流程是卵母細胞的采集和培養；精子的采集和獲能、受精、胚胎的早期培養和胚胎移植、畫出“試管牛”工廠化生產的技術流程圖；即B正確。

故選B。

【點睛】4、C【分析】【分析】

動物核移植的概念：將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發育成一個新的胚胎；這個新的胚胎最終發育為動物個體；核移植得到的動物稱克隆動物；動物體細胞核移植技術的應用：①加速家畜遺傳改良進程，促進良畜群繁育；②保護瀕危物種，增大存活數量；③生產珍貴的醫用蛋白；④作為異種移植的供體；⑤用于組織器官的移植等。

【詳解】

A；由于動物細胞的全能性受到限制；目前動物細胞還不能培養成動物個體，A錯誤；

B；由于動物細胞的全能性受到限制；目前動物細胞融合技術還不能產生生物體，B錯誤；

C；將野驢的體細胞核移植到雌性家驢的去核卵細胞中；可以克隆形成野驢，C正確；

D；將野驢的一個基因導入家驢的受精卵中；只能培育出轉基因驢，不能讓野驢“復生”，D錯誤。

故選C。5、A【分析】【分析】

分析柱形圖：用抗原（A）分別免疫3只同種小白兔（X；Y和Z）；每只小白兔免疫5次，每次免疫一周后測定各小白兔血清抗體的效價，由圖可知，隨著免疫次數的增加，血清抗體效價逐漸升高。在第四次沒有過程中出現了Y血清抗體均達到16000以上；在第五次中，Y的效價最大，最適合用于制備B淋巴細胞；B細胞與骨髓瘤細胞形成的雜交細胞有三種：B淋巴細胞自身融合的細胞，骨髓瘤細胞自身融合的細胞和雜交瘤細胞。

【詳解】

A；將抗原A注入小白兔體內的目的是為了刺激小白兔發生體液免疫；從而獲得已免疫的B淋巴細胞，A錯誤；

B；在第五次中；Y的效價最大，所以最適合用于制備B淋巴細胞的是第五次免疫后的Y小白兔，B正確；

C；骨髓瘤細胞與B淋巴細胞的融合常使用滅活的病毒進行促融；也可用物理或化學的方法進行促融，C正確；

D；雜交細胞需經多次篩選才可獲得只分泌抗A抗體的雜交瘤細胞；第一次篩選可獲得雜交瘤細胞，第二次篩選可獲得只分泌抗A抗體的雜交瘤細胞，D正確。

故選A。

【點睛】6、A【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；PCR是一項體外擴增DNA分子的技術；可用于目的基因的獲取及擴增，故可通過PCR的方法獲取GM-CSF基因，A正確；

B；構建GM-CSF基因表達載體是基因工程的核心；該過程需要限制酶和DNA連接酶，B錯誤；

C；基因表達載體上的啟動子是RNA聚合酶識別和結合的位點；可以調控GM-CSF基因的表達，C錯誤；

D；大腸桿菌屬于原核生物；將目的基因導入原核生物的方法是鈣離子處理法（感受態細胞法），D錯誤。

故選A。二、多選題(共8題，共16分)7、A:C【分析】【分析】

將漿細胞和骨髓瘤細胞融合；經篩選獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞進行體內或體外培養，獲得大量的特異性抗體的技術，稱為單克隆抗體的制備。

【詳解】

A；注射E2蛋白后；從小鼠脾臟中獲得的B淋巴細胞有多種，不一定能產生E2蛋白抗體，A錯誤；

B；過程②可使用PEG融合法或滅活病毒誘導法；得到的③可能是雜交瘤細胞，或者是融合的B細胞或是融合的骨髓瘤細胞，B正確；

C；細胞③要進行克隆化培養和抗體檢測；經過多次篩選，才可獲得足量多的能產生E2蛋白抗體的雜交瘤細胞，C錯誤；

D；豬瘟病毒（CSFV）的檢測采用抗原-抗體雜交技術；抗CSFV的單克隆抗體能與豬瘟病毒（CSFV）蛋白質外殼上的E2蛋白結合，故此過程生產的單克隆抗體可用于CSFV的檢測，D正確。

故選AC。8、A:C【分析】【分析】

從左圖看出；在添加麥芽糖的培養基中空質粒組；導入CST1和導入cst1E81K的酵母菌的酵母菌菌落數目相差不大，但在麥芽糖+葡萄糖類似物組中，導入CST1的酵母菌菌落數目最少，說明吸收葡萄糖類似物最多。

【詳解】

A；從圖中可以看出；后一稀釋濃度是前一稀釋濃度的5倍，所以是進行等濃度梯度的稀釋，A錯誤；

B；在含葡萄糖類似物的培養基上；導入CST1的酵母菌菌落顏色最淺，說明存活率最低，B錯誤；

C；導入CST1的酵母菌在葡萄糖類似物的培養基上菌落數目降低；由于葡萄糖類似物被吸收后可以殺死酵母菌，因此可以推測CST1能轉運葡萄糖類似物進入酵母菌，所以其功能可能是轉運葡萄糖進入細胞，C正確；

D、在麥芽糖+葡萄糖類似物的培養基中，導入cst1E81K的酵母菌菌落數目多，說明其存活率更高，由于葡萄糖類似物被吸收后可以殺死酵母菌，因此可以推測導入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率小于導入CST1的酵母菌；D錯誤。

故選C。9、A:C:D【分析】【分析】

1；泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌．在無氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。2、在制作泡菜時所配制的泡菜鹽水要煮沸，以殺滅鹽水中的微生物，防止雜菌污染。泡菜制作過程中，溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短、容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。

【詳解】

A；“泡菜之水；用花椒和鹽煮沸”的目的提升泡菜味道、減少水中的溶氧量和消毒殺菌防止雜菌污染，A錯誤；

B；“霉花”是指泡菜壇表面的一層白膜；主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往來自蔬菜，B正確；

C；“壇沿外水須隔日一換；勿令其干”的目的是保證壇內的無氧環境，C錯誤；

D；制作泡菜的過程；亞硝酸鹽的含量呈先上升后下降的趨勢，D錯誤。

故選ACD。10、D【分析】【分析】

動物細胞培養的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養液中（原代培養）→放入二氧化碳培養箱培養→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞；制成細胞懸液→轉入培養液（傳代培養）→放入二氧化碳培養箱培養。

【詳解】

A；在動物細胞培養的過程中；當出現接觸抑制后，細胞克隆停止增殖，A正確；

B；在細胞分裂的過程中；可能會發生基因突變，因此，克隆細胞與接種的細胞的遺傳信息不一定相同，B正確；

C；胰蛋白酶可使細胞分散成單個；從而利于計數，C正確；

D；需采用液體培養基培養才能形成細胞克隆；D錯誤。

故選D。11、B:D【分析】【分析】

細胞核移植是指通過顯微操作將一個細胞的細胞核移植到一個去核的卵母細胞內的技術過程。體細胞核移植技術包括核供體細胞與受體細胞的準備；細胞核移植、重構胚的融合、激活、培養和移植等過程。

【詳解】

A；克隆豬的細胞核遺傳物質來自提供細胞核的胎豬成纖維細胞；克隆豬的細胞質遺傳物質來自去核的卵母細胞，A錯誤；

B；過程①不僅需要在培養液中添加毛殼素；還需要在培養液中添加動物血清或者血漿，提供一個類似生物體內的環境，B正確；

C；過程④使用顯微操作技術使胎豬成纖維細胞與去核卵母細胞融合；C錯誤；

D；過程⑤是胚胎移植；胚胎移植時供體與受體的生理狀態要相同，否則無法成功妊娠，D正確。

故選BD。12、A:B:D【分析】【分析】

1；生物武器是利用生物戰劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來；給人類的生存安全構成了嚴重威脅。

2；轉基因生物的安全性問題包括食物安全、生物安全和環境安全。

3；“治療性克隆”將使人胚胎干細胞（簡稱ES細胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細胞移植到去核卵母細胞中構建形成重組胚胎；體外培養到一定時期分離出ES細胞，獲得的ES細胞定向分化為所需的特定類型細胞（如神經細胞、肌肉細胞和血細胞），用于治療。

【詳解】

A；對待生物武器的態度應明確而堅定；即在任何情況下都不發展、不生產、不儲存生物武器，堅決禁止生物武器，A正確；

B；轉基因要注意基因安全；對外源DNA要進行認真選擇，避免產生對人體有害的或過敏的蛋白質，B正確；

C；中國對于克隆人的態度是不反對治療性克隆；禁止進行克隆人的實驗，C錯誤；

D；一旦發現轉基因生物出現了安全性問題；包括食品安全、生物安全和生態安全，要馬上停止試驗，并銷毀重組生物，D正確。

故選ABD。13、A:C:D【分析】【分析】

大腸桿菌是原核生物；原核細胞與真核細胞相比，最大的區別是原核細胞沒有被核膜包被的成形的細胞核（沒有核膜；核仁和染色體）；原核細胞只有核糖體一種細胞器；原核細胞中，轉錄和翻譯在相同時空中進行，而真核生物的轉錄和翻譯過程在不同時間和空間進行。

【詳解】

A；人體胰島細胞是真核細胞；在合成胰島素原時，轉錄在細胞核中進行，翻譯在細胞質的核糖體上進行，原核細胞沒有細胞核，A錯誤；

B；DNA連接酶能在兩個相同黏性末端配對后的磷酸與脫氧核糖之間形成化學鍵（磷酸二酯鍵）；B正確；

C；通過檢測；大腸桿菌中沒有胰島素原產生，不能判斷重組質粒未導入受體菌，也可能是導入后沒有表達，C錯誤；

D；大腸桿菌是原核生物；沒有內質網和高爾基體，不能對胰島素原進行加工，因此人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原沒有生物活性，D錯誤。

故選ACD。14、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的無氧呼吸產生酒精；醋酸菌在糖源；氧氣充足時；直接將葡萄糖氧化為醋酸；在糖源不足、氧氣充足時，可利用酒精，即乙醇作為呼吸底物，先將乙醇變成乙醛而后變為乙酸（醋酸）。

【詳解】

A；制備培養基過程中；pH的調節應在滅菌前進行，A錯誤；

B；制作果酒時適當加大接種量；酵母菌菌體的基數增大，可使其快速形成優勢菌群，抑制雜菌生長，提高發酵速率，B正確；

C；現代發酵工程選育出性狀優良的菌種后；為滿足發酵過程的需要，還要對菌種進行擴大培養，之后才可進行發酵罐內的發酵，C錯誤；

D；醋酸菌能夠氧化酒精產生醋酸；造成葡萄酒的敗壞。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天開瓶后的紅酒容易變酸，D正確。

故選AC。三、填空題(共6題，共12分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數30～30016、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提高動物生長速度、改善畜產品品質、用轉基因動物生產藥物17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍色二苯胺18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】物理和化學性19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代20、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據曲線圖可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細胞的感染率。根據柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細胞，使機體產生特異性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質是蛋白質。

（2）免疫系統對被新冠病毒感染后肺細胞強烈攻擊引發肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應選取甲的B細胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機體內相應的記憶細胞迅速增殖分化，產生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。

【點睛】

本題結合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結構，明確病毒沒有細胞結構；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優點及相關應用，能結合圖中信息準確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶四、判斷題(共1題，共8分)21、A【分析】【詳解】

轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應；過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）；對待轉基因技術的利弊，正確的做法應該是趨利避害，不能因噎廢食。我國對轉基因技術的方針是一貫的、明確的，就是研究上要大膽，堅持自主創新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴格，堅持依法監管。

該說法正確。五、實驗題(共4題，共36分)22、略

【分析】【分析】

培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養基質，培養基中一般含有水；碳源、氮源和無機鹽。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物種和氧氣的要求。固氮微生物可利用空氣中的氮氣，故培養基無需再加入氮源。純化微生物時常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）固氮菌可利用空氣中的氮氣作為氮源，所以Ashby培養基的營養成分主要包括水；無機鹽、碳源等；不需要額外加入氮源。將土壤稀釋液進行梯度稀釋后再接種的方法為稀釋涂布平板法，在Ashy平板上進行多次接種的目的是提高固氮菌的純度。

（2）固氮酶的活性越大；單位時間內的固氮量越大，所以為評估固氮酶的活性，可以檢測單位時間內的固氮量。

（3）S試劑可與IAA反應顯紅色；且顏色深淺與IAA濃度成正相關，所以可用蒸餾水對IAA母液進行梯度稀釋，加入S試劑制成標準顯色液，往上清液中加入S試劑，與標準顯示液進行比色，與上清液顏色相近的標準顯示液中IAA的濃度計為上清液中IAA的濃度。

【點睛】

本題考查固氮菌的培養和篩選，意在考查考生對所學知識的靈活應用能力。【解析】碳源稀釋涂布平板法提高固氮菌的純度單位時間內的固氮量用蒸餾水對IAA母液進行梯度稀釋，加入S試劑制成標準顯色液，往上清液中加入S試劑，與標準顯示液進行比色，與上清液顏色相近的標準顯示液中IAA的濃度計為上清液中IAA的濃度23、略

【分析】【詳解】

（1）電泳法分離蛋白質；是根據蛋白質分子的電荷；大小及形狀不同，在電場中的遷移速度不同而實現分離。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白質較多；可作為碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培養基中；金黃色葡萄球菌應該不能生長或生長很少，未加入抗菌蛋白的培養基中金黃色葡萄球菌應該能生長，菌落較多。

（4）平板劃線法、稀釋涂布平板法都能使接種的菌種在固體培養上充分分散，對使用過的培養基應進行滅菌處理，是為了防止細菌擴散污染。【解析】①.電荷（帶電情況）②.遷移速度③.碳源④.氮源⑤.數量⑥.平板劃線法⑦.稀釋涂布平板法（稀釋混合平板法）⑧.滅菌24、略

【分析】【分析】

根據題干信息分析；糖尿病模型斑馬魚的構建的原理是使胰島素基因表達受阻，而使胰島素基因表達受阻是通過給斑馬魚受精卵注射嗎啉反義寡核苷酸實線的；嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑，其作用的機理有兩種假說：可能是導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切，也可能是導致RNA前體上內含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切。

(1)

根據引物2和引物3在胰島素基因片段上的位置；通過PCR擴增能得到內含子2的序列，若假說1成立，即嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切，故實驗組中應含有內含子2的序列，而對照組的該片段被切除了，因此用引物2和引|物3進行PCR反應，其結果為實驗組中有雜交帶，而對照組中無雜交帶。

故選AD。

(2)

若要證明假說2成立；即RNA前體上內含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切下去，則可以選擇圖示引物5和引物2；引物5和引物6進行PCR，觀察是否有雜交帶出現。

(3)

由于DNA聚合酶不能從頭合成DNA；而只能從引物3′端延伸DNA鏈，因此DNA復制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶處理斑馬魚囊胚中的內細胞團；可以獲得分散的斑馬魚胚胎干細胞，然后對其進行原代培養，接著分瓶繼續培養。培養瓶中添加輸卵管上皮細胞作為飼養層細胞，以提高斑馬魚胚胎干細胞的數量。

【點睛】

解答本題的關鍵是掌握基因的表達的相關知識點，明確基因轉錄出來的mRNA是要經過加工成為成熟的mRNA才能作為翻譯的模板的，并能夠根據題干提取有效信息進行答題。【解析】(1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能從頭合成DNA；只能從3′端延伸DNA鏈，因此DNA復制需要引物。（得分點：“只能從3′端延伸DNA鏈”）

(4)胰蛋白酶內細胞團原代飼養層25、略

【分析】【分析】

樹突狀細胞為抗原呈遞細胞；可識別；攝取和傳遞抗原信息。

【詳解】

（1）細菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白；而OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內豐富的免疫細胞。所以，ClyA基因的作用為表達出細菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，進而融合基因可以被免疫細胞識別。Fc表達產物能夠與樹突狀細胞表面的特異性受體結合，進而提高樹突狀細胞識別；攝取和傳遞抗原信息的能力。

（2）①根據表格和柱狀圖可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐漸增加部件，且第4組和第5組工程菌都是完整的，即第4組:ClyA-OVA-Fc第5組:ClyA-OVA-Fc，但是第4組飲用含阿拉伯糖的水，進而激活融合基因的表達；第5組不飲用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表達。所以，第3；5組含有OVA，在人為控制口服阿拉伯糖后產生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細胞的殺傷率較高；1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導，殺傷率均低。

②小鼠脾臟細胞具有免疫細胞；可在抗原刺激下引起特異性免疫。帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物可引起小鼠脾臟細胞發生特異性免疫，故先加入第1-5組小鼠脾臟細胞和帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物進行保溫，判斷特異性免疫的強度；

故選AC。

再加入帶有綠色熒光標記的細胞毒性T細胞特異性抗體；目的是檢測OVA抗原肽復合物是否能夠產生特異性細胞毒性T細胞。

故選B。

若第5組同時被紅色和綠色熒光標記的細胞數目占比越多；說明工程菌在人為可控條件下引發特異性免疫反應，結論成立。

③腫瘤患者術后極易復發；說明特異性免疫功能減弱。所以，可多次注射黑色素瘤細胞，進而研究該口服工程菌是否能夠誘發長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復發。

（3）本實驗中融合基因里面有OVA（黑色素瘤細胞特異性抗原），所以只需將OVA替換為肺癌細胞特異性抗原即可。即將元件中的OVA替換為肺癌細胞特異性表達的抗原基因。【解析】(1)表達ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面識別；攝取。

(2)第4組:ClyA-OVA-Fc和-第5組:ClyA-OVA-Fc和+第3；5組含有OVA；在人為控制口服阿拉伯糖后產生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細胞的殺傷率較高;1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導，殺傷率均低ACB同時被紅色和綠色熒光標記的細胞數目占比研究該口服工程菌是否能夠誘發長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復發。

(3)將元件中的OVA替換為肺癌細胞特異性表達的抗原基因六、綜合題(共4題，共12分)26、略

【分析】【分析】

1；精子獲能：精子必須在雌性動物的生殖道中發生相應的生理變化后；才能獲得受精能力的生理現象；

2；卵子的準備：在輸卵管中發育到減數第二次分裂中期；才具備與精子受精的能力；

3；“試管嬰兒”的形成用到的生物技術有體外受精；早期胚胎培養，胚胎移植等技術；

4；胚胎分割是指采用機械方法將早期胚胎分割成2等份、4等份或8等份等；經移植獲得同卵多胎的技術。

【詳解】

（1）在體外受精時；首先要對精子進行獲能處理，嚙齒動物；家兔和豬等動物的精子一般采用培養法。牛、羊等家畜的精子放在一等濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中，采用化學誘導法；卵細胞則要培養到減數分裂第二次分裂中期才能與獲能的精子結合；

（2）依題意可知：“試管嬰兒”的形成；需在體外的試管中完成受精，并在試管中培養使其發育到一定時期，再將胚胎移入女性子宮內發育成胎兒，即用到的生物技術有②體外受精；①體外培養和③胚胎移植；不需要用到核移植技術；

（3）采用胚胎分割移植技術；能得到“同卵雙胞胎”。胚胎分割時一般采用發育良好；形態正常的桑椹胚或囊胚。在進行此項操作時，要特別注意將囊胚的內細胞團均等分割。

（4）試管嬰兒技術和母親正常懷孕；生產過程的不同之處是：試管嬰兒是“體外受精”形成的受精卵；且早期胚胎發育是在試管中進行的，再經過“胚胎移植”得到的產物；反對設計嬰兒性別，是因為可能會破壞人類的性別比例；

（5）胚胎干細胞是從原始性腺或早期胚胎中分離得到的；不僅可以應用于哺乳動物胚胎性別鑒定，還可應用于治療人類的某些疾病(如老年癡呆癥；糖尿病等)；ES細胞體外誘導分化，培育出人造組織器官并用于器官移植；研究體外細胞分化等。

【點睛】

對試管動物技術、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細胞等相關知識的識記和理解，是解決本題的關鍵。【解析】獲能減數分裂第二次分裂中期（或MⅡ中期）①②③桑椹胚或囊胚內細胞團性別比例胚胎干細胞器官移植27、略

【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括：①對供；受體的選擇和處理(選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體；有健康的體質和正常繁殖能力的受體。用激素進行同期發情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理)；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養或保存(對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發育到桑椹或胚囊胚階段)；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查。

據圖分析；牛的精子有兩種，含X染色體精子和含Y染色體精子，其中甲形成的受精卵中含有XX，則試管牛甲是雌性，而乙成的受精卵中含有XY，則試管牛乙是雄性。

【詳解】

（1）精子獲能后才具有受精能力。將分離出的精子用鈣離子載體A23187溶液培養的目的是為了讓精子獲能；獲能后的精子與培養成熟的卵細胞融合形成受精卵，在該過程中，