學校細胞實驗室管理規則1、細胞生物學實驗室是進行各種細胞培養的凈化級實驗室，由實驗人員提出申請，填寫細胞培養室使用申請表，經培訓后方可進行實驗，進出細胞室實驗需要嚴格預約與登記。如有不符合實驗室工作和生物安全要求的，實驗室負責人和細胞室工作人員有權責令整改。嚴禁未經許可擅自進入細胞培養室或使用相關設備。2、凡進入細胞培養室的人員要有嚴格的無菌操作概念，任何人員初次使用細胞室必須有本實驗室人員陪同指導，待完全掌握操作規定之后方可獨立操作。3、細胞培養室正常使用過程中，實驗用品應盡量一次帶入，進出細胞室請隨手關門。嚴禁將與實驗無關的易燃、易爆及其他有毒有害物品帶入細胞室；在本室內不得進行病原性微生物等其它易污染物的操作，嚴禁從事任何高危生化實驗（如攻毒攻菌實驗）。4、實驗人員應愛護實驗室各類儀器，按照規則使用并保持設備清潔。實驗中的昂貴設備，未經許可不得擅自開關。精密儀器需經專門培訓后方能操作未經許可不得改變設備儀器的預設參數。設備儀器出現故障或發生事故，應及時向實驗室負責人報告，安排專業人員進行檢修。5、使用儀器前認真閱讀“操作規則”，并嚴格按“操作規則”進行操作，未經管理者同意不得擅自更改儀器程序。使用后儀器恢復原位，并填寫“使用情況記錄”。如儀器出現故障，請及時通知實驗室老師。因操作不當導至儀器、設備、實驗器材的損壞，追究實驗者責任，并按學校有關規定賠償。6、愛護實驗室公共財物，實驗耗材由實驗者自行提供。節約用電，注意防火防盜，杜絕一切可能導致火災的行為。7、禁止在培養室吸煙、進餐，實驗過程中嚴禁喧嘩、閑聊，嚴禁隨意反復進出培養室。進入細胞室的實驗人員必須遵守清潔衛生值日安排。每月做全面清潔消毒一次，每周掃除兩次，超凈臺上濾網需每月清洗一次。在確認無菌室無人后方可開紫外燈殺菌。8、具體操作規則詳見附錄《細胞生物學實驗室操作規則》。附錄：細胞生物學實驗室操作規則第一條常規操作1.穿著專用實驗服。實驗人員必須在細胞室準備間內更換細胞室專用實驗服，嚴禁不穿實驗服進入細胞室，嚴禁穿細胞室實驗服外出。2.穿著專用拖鞋。在準備間換下自己的鞋子，盡量避免在緩沖間走動、停留。3．按培養室的要求洗手、將衣服及與實驗無關的物品存放在指定地點。4．細胞室中培養基、胰酶、血清等均分裝后專人專用，并做好記錄，每個項目組或每位操作者可以攜帶專用的移動箱，并對自己實驗物品需做好標記，未經同意不得擅自使用他人物品，避免交叉污染。不得擅自查看或取出他人培養的細胞或實驗記錄。本室所有物品用完之后按原樣放回，不得擅自借出或帶出到其他實驗室。5、進入核心室要戴手套并用75%酒精或含氯消毒水消毒。必要時需穿戴帽子、口罩、防護服等。6、實驗暫停，操作人離開時，及時熄滅酒精燈。7、每次實驗結束后，應及時用75%酒精或含氯消毒液清理桌面、臺面、地面。整理好用過的實驗器材。細胞培養過程中自帶廢液缸，清理廢棄物，廢棄物品帶出操作間。實驗區用紫外線照射30分鐘，并做好記錄。觀察培養箱中CO2的濃度、溫度、供氣壓力等參數，待正常后方可離開。8、嚴禁涉及腺病毒慢病毒載體等感染實驗的廢棄物直接倒入醫療垃圾桶。9、水浴鍋內需加無菌水，每兩周進行更換并消毒，注意使用完要注意關閉。10、做好細胞培養記錄，以了解細胞生長情況，用于資料的分析和整理。第二條培養箱使用規則1、從培養箱取放物品前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開門時間和減少開門次數。注：培養箱中的空氣是經過過濾的潔凈空氣。長時間敞開或頻繁開關培養箱，容易造成污染。2、從培養箱拿取細胞時輕拿輕放，動作迅速，隨手關緊培養箱門。未經允許，禁止翻看、移動他人細胞或樣品，如有特殊需要的，請聯系實驗室負責人協調。不按規則進行操作造成他人細胞損失，需酌情賠償。3、培養瓶皿放入培養箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發后再放入，以免培養箱內滯留過多乙醇蒸氣。4、培養箱內細胞培養的放置需整潔有序，方便查找，同時應盡量提高培養箱的使用效率，負責老師可視實驗情況啟用或停止空培養箱的使用，節約資源。5、普通培養中的細胞，若非實驗特殊需要，每瓶/板細胞每天只需要觀察生長狀態一次，2人以上共用的細胞，可約好時間一起觀察。注：頻繁將細胞拿出觀察，容易給培養箱造成污染，同時也會影響細胞生長條件的恒定。6、原代細胞需放置在原代培養專用培養箱培養，不得放置于其他培養箱，如一段時間內無原代細胞實驗，負責人可協調安排培養箱供其他細胞培養使用。7、觀察培養箱實際溫度與濕度與設定值是否相符。定期檢查CO2氣體量是否充足，不足時及時通知細胞室管理員更換CO2鋼瓶。CO2氣體量密切注意培養箱內的增濕盤，定期更換無菌水并進行消毒。密切注意培養箱內情況，如出現霉變、菌斑、支原體和衣原體感染或其他明顯染菌跡象，應立即通知管理員及其它使用者。第三條顯微鏡使用規則1、倒置相差顯微鏡使用前，用酒精棉從中間至周圍擦拭載物臺。2、使用顯微鏡后應隨手降低光源亮度，使用完畢注意關閉。離開細胞室時或較長時間不需使用時，及時關上電源，延長燈泡壽命。盡量避免頻繁開關顯微鏡電源。3、一次細胞實驗使用完畢后，在顯微鏡使用情況記錄本上登記。4、熒光顯微鏡屬于貴重儀器需遵循貴重儀器預約使用規程。5、熒光顯微鏡熒光關閉后半小時內不允許再次開啟。第四條超凈臺相關操作規則1、超凈臺使用遵循預約原則。在細胞室入口處預約，細胞室內填寫使用登記。a：無預約者若有必要在他人預約時段內使用，需先征得預約者的同意，否則應無條件讓出工作臺，以免耽誤他人實驗。b：使用記號筆在預約記錄本上提前預約下一周的使用時間，請注意周六周日是指上周的周末。c：預約內容請包括：時間范圍，姓名，如特殊實驗請寫明。2、超凈臺使用前用紫外燈照射15分鐘滅菌，實驗用品從左至右依次擺放，酒精燈居中（生物安全柜禁用酒精燈等帶明火的物品）。使用前、后需用酒精棉球擦拭工作區消毒，所有物品放入超凈臺內使用前均應消毒，超凈臺內嚴禁堆放過多物品影響風路平衡，不同超凈臺內物品嚴禁頻繁交換使用。3、點燃酒精燈前需檢查瓶中酒精是否足夠，液面應占瓶高1/3-2/3。注：消毒用75%的酒精，酒精燈用95%以上的酒精，向噴壺或燈內添加酒精時請留意。4、超凈臺中應擺放廢液杯，用于暫時存放廢棄物，實驗結束后將杯內加入NaOH溶液處理片刻，廢液垃圾倒入水池并同時用水沖釋，固體垃圾倒入生物樣品專用垃圾桶中。注：廢液缸應及時處理，嚴禁長時間放置，以免留有大量培養液滋生細菌。5、細胞實驗后任何含有細胞培養污物的培養瓶，離心管，移液管等必須及時帶出細胞房。第五條冰箱、試劑等相關操作規則1、從冰箱取放物品動作要迅速，關門時要檢查門是否關好。按類別存放試劑。嚴禁長時間敞開冰箱門。2、各人存放于冰箱內的培養液、生化試劑、樣品要注明姓名、配制日期、樣品名稱，特殊試劑需獲得細胞室管理人員同意后方能放置。不得使用他人的培養液或其他生化試劑。3、分裝好的血清長時間保存于-80℃，使用前放于4℃預解凍。原則上解凍好的血清應全部配成含血清的培養基備用，若有剩余，則暫存于4℃并盡快使用。盡量不要使用他人開過的血清，以免交叉污染。4、細胞室內的冰箱空間有限，盡量僅放置使用頻率較高的試劑。請勿將一些閑置試劑，污染試劑長期放置在細胞室。5、工作人員會定期對冰箱進行清理，發現無標記，過期試劑等違規物品將全部清除出去，并且查找試劑配置人給予警告。第六條進入細胞室物品控制1、所有進入細胞室的物品需盡量經過紫外照射，酒精表面消毒。2、嚴禁將可能含有污染物或病原菌的實驗物品帶入細胞室。3、細胞室內僅放置少量實驗必須耗材即可，不得整箱搬入，出現潔凈室內物品堆積狀況。4、細胞室內儲物柜的物品放置由相關管理人員安排，并做標記。第七條細胞室清潔守則1、每周值日生時間從周六開始，至下周五結束。2、日常維護：注意培養箱顯示正常，顯微鏡，冰箱，超凈臺的正常使用與維護。細胞室內以及門口生物樣品專用垃圾桶的及時清理。3、每周值日（安排實驗時兩次，未安排時一次，周三或周五下午兩點）：擦拭超凈臺（用酒精棉球），用酒精滅擦桌面及桌上儀器、拖地，紫外消毒細胞室30分鐘。3、每月大清潔：每月30日下午兩點用紫外線消毒細胞室，酒精和消毒水清潔。清潔順序：擦超凈臺（用酒精棉球）；用消毒水滅擦桌面，培養箱，超凈臺以及冰箱外壁，及桌上的儀器，細胞室墻面；給水浴鍋加水或換水，細胞室衣柜和拖鞋擺放整齊，拖地，紫外消毒細胞室30分鐘。注：若上周值日生及時