全自動生化性能與應用1*第一節臨床生化自動分析儀的類型

一、概述

儀器的發展史、第一臺1957年由美國Technicon公司生產(AutoAnalyzer)，單通道連續流動式，只是模仿手工。60年代后隨電子計算機技術迅速發展。從設計構造及速度、功能方面有很大的發展。

2*①試劑自動檢測：借助條碼技術識別種類及效期等。

②樣本自動識別：量多少，有無溶血、脂血、黃疸、血球、凝塊等。

③自動加樣：試劑、樣本、稀釋液等。

④自動檢測：樣本杯、試劑架、反應杯。

⑤數據處理：

⑥打印報告：

⑦自動報警：

3*分類

☆按反應裝置結構：連續流動式、分立式和離心式。

☆按同時檢測項目與否：單通道、多通道。

☆按儀器的自動化程度：全自動、半自動。

☆按儀器復雜程度：小型、中型和大型。

4*（一）管道式分析儀（P442）

①原理：吸樣＋吸試劑→混勻＋（第二試劑）→混勻→孵育→比色→計算→打印結果。②特點：所有反應在同一管道中進行，一個接一個進行，可通過透析器將干擾物除去、速度慢；也有將多個通道并列起來。5*（二）、分立式分析儀

（P443）（1）原理：同一時期的測定在不同反應杯中進行，試劑及樣本由不同的加樣器自動加樣，在一定溫度下反應一定時間后反應液依次自動吸入比色杯比色或反應杯依次通過光路進行檢測；可有多個加樣臂，所以其體積大且速度快。6*（2）儀器各部分簡介：①標本架：條形:適合于現在自動加樣圓形:有整圓形,節段組成的7*但結果準確性差及可靠性差光源燈(鹵素燈、鎢絲燈、石英燈、氙閃光燈)②儀器部分：比色、讀數、計算、打印結果。從設計構造及速度、功能方面有很大的發展。半導體恒溫：硅半導體介導恒溫，介于兩者之間。④試劑：單試劑、雙試劑、三試劑等排除試劑或樣本空白等。質地：玻璃、塑料或石英；(三)離心式生化分析儀（P444）但可以根據不同儀器的情況自行設計，但同時改變線性及靈敏度。二、主要實驗參數的選擇（設置）1、方法學：單試劑、雙試劑、與試劑盒。采用光柵或單色光濾光器，光路采用后分光技術，波長更準確。①項目：可測生化項目、還有藥物監測、各種特殊蛋白、微量元素等。②特點：所有反應在同一管道中進行，一個接一個進行，可通過透析器將干擾物除去、速度慢；（一）平衡法（終點法）水及熱空氣等廢水等樣品盤試劑盤試劑針樣品針清洗針反應池反應杯分離式全自動生化分析儀府視圖試劑盤8*9*⑤數據處理：

⑥打印報告：

⑦自動報警：自動清洗:反應杯可反復使用（1）、終點法：一般選開始時間（即試劑與樣本混勻舜間，這樣反應還未開始但又能去除試劑與樣本的空白），結束時間一般以反應達終點時的時間，計算⊿A=A末－A始速度一般，現很少生產此類產品；(三)離心式生化分析儀（P444）②儀器部分：比色、讀數、計算、打印結果。（1）原理：同一時期的測定在不同反應杯中進行，試劑及樣本由不同的加樣器自動加樣，在一定溫度下反應一定時間后反應液依次自動吸入比色杯比色或反應杯依次通過光路進行檢測；采用光柵或單色光濾光器，光路采用后分光技術，波長更準確。（三）、樣品量及試劑量：一般按手工法按比例縮減；（二）溫度：現一般采用37℃。人工更換:一次性反應比色杯②儀器部分：比色、讀數、計算、打印結果。空白反應吸光度：看試劑在反應溫度下的穩定性。⑨分析系統：結果、原始數據、是否超出反應線性、酶反應時線性是否合理等多點法、回歸法及積分法為使用生化分析儀的首選儀器。②比色杯質地：玻璃、塑料或石英；人工更換:一次性反應比色杯儀器自動更換：一次性反應比色杯自動清洗:反應杯可反復使用10*1、方法學：單試劑、雙試劑、與試劑盒。概念：從加樣本至出結果的全過程由儀器來完成，受主觀因素影響少。轉速一般在500~1000r/min；指分析的速度，根據儀器每小時測定樣本數量及每個樣本可測項目的多少；（一）管道式分析儀（P442）一點與二點不需特殊的儀器；體積小，結構簡單，靈活，價廉，適合標本量不大的小型醫院。1、方法學：單試劑、雙試劑、與試劑盒。②樣本自動識別：量多少，有無溶血、脂血、黃疸、血球、凝塊等。1、方法學：單試劑、雙試劑、與試劑盒。②特點：所有反應在同一管道中進行，一個接一個進行，可通過透析器將干擾物除去、速度慢；☆按儀器復雜程度：小型、中型和大型。人工更換:一次性反應比色杯（三）、樣品量及試劑量：一般按手工法按比例縮減；②樣本自動識別：量多少，有無溶血、脂血、黃疸、血球、凝塊等。③加樣與采樣器：一般采用機械傳動帶動注射器活塞，閥門有電磁控閥門，玻璃活塞等。④控溫裝置：一般溫度有25℃、30℃、37℃，也有連續式溫度如20℃~50℃等可任選；11*恒溫水（油）浴箱：溫度比較穩定，但水需要經常更換和處理，以防影響比色杯表面光度；電熱恒溫器：采用空氣恒溫時送熱風，溫度波動較大，受外界影響大；半導體恒溫：硅半導體介導恒溫，介于兩者之間。⑤反應時間控制：隨意設定12*⑥檢測器：試劑樣品及杯子吸光度等⑦清洗系統：⑧干燥系統：與清洗系統共用⑨分析系統：結果、原始數據、是否超出反應線性、酶反應時線性是否合理等⑩打印機：

13*(三)離心式生化分析儀（P444）①原理：圓盤內的樣品和試劑受到離心力的作用而相互混合發生反應，在高速旋轉過程中進行比色測定。

14*②特點：又稱為成批測定或同步測定，即分析過程中，樣品與試劑的混合、反應和檢測等每一步幾乎同時完成。試劑和樣本量:（樣品1~50ul,試劑50~350ul），視離心杯的底部面積大小；速度一般，現很少生產此類產品；15*反應轉盤：可用手工換，也可通過自動換盤。無法自動清洗。轉速一般在500~1000r/min；儀器：美國Baker公司的EncoreⅠ、Ⅱ型、IL的Monarch系列、Roche公司的CobasFara-Ⅱ型等

16*條形:適合于現在自動加樣三、全自動生化分析儀④試劑：單試劑、雙試劑、三試劑等排除試劑或樣本空白等。分離式全自動生化分析儀府視圖1、方法學：單試劑、雙試劑、與試劑盒。(三)離心式生化分析儀（P444）1、方法學：單試劑、雙試劑、與試劑盒。②儀器部分：比色、讀數、計算、打印結果。反應轉盤：可用手工換，也可通過自動換盤。(三)離心式生化分析儀（P444）但同時應考慮儀器的使用效率，一個大型生化分析儀如樣本較少，則儀器的使用效率不高。②特點：所有反應在同一管道中進行，一個接一個進行，可通過透析器將干擾物除去、速度慢；①原理：吸樣＋吸試劑→混勻＋（第二試劑）→混勻→孵育→比色→計算→打印結果。一點與二點不需特殊的儀器；⑥檢測器：試劑樣品及杯子吸光度等（四）干片式分析儀

（P444）

①原理：在干化學紙片上加上血清后，背面產生顏色，用反射光度計檢測即可定量；②特點：是80年代問世的產品，是將含底物的試劑浸入紙片后，經干燥制得，干片由試劑和電極構成，一次使用，成本高。但方便快捷。③缺點：結果波動性大。

17*二、半自動生化分析儀

（1）操作分兩部分：①手工部分：加樣、保溫、吸入樣本②儀器部分：比色、讀數、計算、打印結果。

18*（2）特點：體積小，結構簡單，靈活，價廉，適合標本量不大的小型醫院。比色快，速率法慢，不受試劑、方法的限制，常規、急診使用方便。

19*（3）注意事項：①使用同一比色池，重復性好，但結果受加樣和取樣的影響。②作酶動學時，應注意計時準確性，還應注意溫度的波動。

20*三、全自動生化分析儀

概念：從加樣本至出結果的全過程由儀器來完成，受主觀因素影響少。功能全，靈活性大，易于操作，有吸光度法、熒光法、光散射法、濁度法、ISE法等。

21*常規生化、特殊蛋白、藥物監測等。隨機安排程序，呆單項測定，也可成批測定，可對數據進行統計處理。模塊式生化分析儀：采用多個相同的或不同的生化分析儀通過傳送帶等形式相互連接起來。

22*第二節

臨床生化自動分析儀的性能評價及與合理選用（P446）正確評價十分重要一、自動化程度儀器自動化程度越高，功能越強大，適合樣本多、人員少、大型醫院；樣本少的、檢驗數量少的小醫院等選用半自動或小型全自動生化分析儀。

23*二、分析效率

指分析的速度，根據儀器每小時測定樣本數量及每個樣本可測項目的多少；離心式應進行成批測定，如一個一個測定，則其效率較低；但同時應考慮儀器的使用效率，一個大型生化分析儀如樣本較少，則儀器的使用效率不高。

24*三、應用范圍：

①項目：可測生化項目、還有藥物監測、各種特殊蛋白、微量元素等。②方法：分光光度法、濁度比色法、離子選擇性電極法、熒光法等。③波長：雙波長法(三波長法)，消除背景噪音，排除溶血、脂血、膽紅素等干擾。④試劑：單試劑、雙試劑、三試劑等排除試劑或樣本空白等。

25*四、分析準確度

準確度愈高愈好，取決于加液、溫控、波長、記時等的加工精確度及狀態，加樣量準確性、微量、系統穩定性、機械結構精密度、加樣中針的攜帶污染等。

26*五、試劑使用靈活性

通常儀器所用試劑的范圍也是相當重要，試劑的開放程度越高，使用的靈活性就大，有些儀器與試劑采用捆綁方式，成本高，不利于開展新工作。

27*第三節臨床生化自動分析儀的方法

要合理使用儀器，就必須首先了解儀器的各項功能

一、分析方法：

28*（一）平衡法（終點法）

（1）一步法：試劑酶的底物（S）就是所測的物質（P448）（2）酶偶聯反應；S1＋S2

Ea→P1＋P2Ei→P3＋P4Ea為輔酶，Ei為指示酶29*（二）動態法分為可變信號與固定信號

30*一點與二點不需特殊的儀器；但結果準確性差及可靠性差多點法、回歸法及積分法為使用生化分析儀的首選儀器。（三）固定時間法（二點法）不需對反應過程進行觀察，或只需觀察前后兩點即可。

31*（四）空白對照方法樣本＋空白試劑；試劑；樣本＋完全試劑(終止反應后)32*二、主要實驗參數的選擇（設置）（一）波長：吸收曲線的低谷為空白波長，吸光度大而平的波長為分析波長；采用光柵或單色光濾光器，光路采用后分光技術，波長更準確。（二）溫度：現一般采用37℃。

33*（三）、樣品量及試劑量：一般按手工法按比例縮減；但可以根據不同儀器的情況自行設計，但同時改變線性及靈敏度。試劑樣本用量的多少是衡量生化分析儀品質的一個重要指標。34*（四）分析時間確定：

（1）、終點法：一般選開始時間（即試劑與樣本混勻舜間，這樣反應還未開始但又能去除試劑與樣本的空白），結束時間一般以反應達終點時的時間，計算⊿A=A末－A始

35*（2）動態法時間：選定讀數的起始點，即遲滯期后開始，結束時間一定要在線性反應期內，計算按：⊿A/min＝(A末－A始)/（TA末－TA始）。

36*（五）線性判斷標準(線性限度L)：作為反應達終點時吸光度反應的界限，這只是對于終點法實驗來說，若為酶促反應的話，很難觀察到終點的時間.空白試劑吸光度：配好試劑是否已變質。空白反應吸光度：看試劑在反應溫度下的穩定性。

37*(六)異常吸收率限度:見下面的示意圖。

38*三、儀器室條件及儀器操作

（一）、儀器室條件（1）、電源、電壓、UPS、溫度（15－30℃）、濕度、防塵等。（2）、操作常規