1T/CSTCXXXX—XXXX西番蓮組培苗本標準規定了西番蓮組培苗的術語和定義、莖段選擇、外植體處理、繼代培養、生根培養、組培苗移栽、出圃、育苗檔案技術要求。本文件適用于西番蓮屬種質的組織培養育苗。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NYT2517-2013植物新品種特異性、一致性和穩定性測試指南西番蓮3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1西番蓮組培苗passifloraLinnaeusplantletsinviro3.2批batch來源于同一個外植體的再生芽，擴繁、生根得到質量一致的組培苗的總和為一批。4質量要求種源來源清晰，品種純正、遺傳穩定可靠。無病害、生長健壯，植株形態正常的組培苗，組培苗質量符合表1的要求。表1西番蓮組培苗質量分級項目級別一級二級莖粗（mm）1.0~2.493.0~4.9展開葉片數（片）4~54~5白根數（條）2T/CSTCXXXX—XXXX植株顏色綠色→深綠色淺綠色→綠色5組培苗培育5.1外植體5.1.1外植體的采集選擇品種性狀優良、生長健壯、無病蟲害癥狀的母株為組培苗培育材料，剪取植株的新梢嫩枝10cm~15cm經保濕處理后裝入塑料袋內密封。5.1.2外植體的處理方法剪取長度為2cm~3cm的嫩枝頂芽，剪去嫩葉，保留葉柄，在中性洗滌劑溶液中浸泡10min~15min，流水沖洗至無泡沫；取出瀝干（若田間外植體則出用棉花絮輕擦拭頂芽莖干），移到無菌超~凈臺中用75%乙醇溶液消毒30s，無菌水漂洗2次，再用0.1%~0.15%HgCl溶液消毒5min~8min，無菌水漂洗5次，吸干水分。接種外植體前將解剖刀和鑷子在酒精燈或恒溫滅菌器300℃滅菌30min，冷卻后使用。5.2培養條件晝夜溫度（25±0.5）℃/（27±0.5）℃,濕度50%~60%，光照強度2500Lux~4500Lux，光照時間16h/d。5.3培養過程5.3.1腋芽誘導培養切取長度5mm~10mm的普通莖尖或莖段，切去外植體嫩葉、葉柄和卷須，接種至腋芽啟動培養基中，培養瓶上標注培養基編號、品種代號和接種日期，培養30d。5.3.2叢生芽的培養將已萌發的腋芽切離外植體，接種在叢生芽培養基上進行培養，每30d更換一次培養基，獲得叢生芽。5.3.3繼代培養從獲得叢生芽上切取帶1個~2個芽的莖段轉接到繼代培養基中培養，每30d~45d更換一次培養基。5.3.4生根培養從叢生芽中切取嫩莖長度達1.5㎝或以上的單芽，接種至生根培養基誘導生根，培養25d~28d后，對同一個外植體培育的再生植株進行編號、品種、日期標記，并記錄為同一批。5.3.5繼代次數培養材料的繼代次數控制在10代之內。5.4組培苗移栽3T/CSTCXXXX—XXXX5.4.1移栽要求5.4.2煉苗移栽前，將試管苗放置在自然光散射、溫度為28~30℃的溫室中進行14d煉苗，加入少量的清水在組培瓶內并將瓶蓋半開煉苗3d，移栽時流水沖洗掉組培苗基部培養基，放陰涼處，備用。5.4.3移栽馴化基質用自來水浸泡濕潤，裝進干凈的育苗杯中，用稀釋1500倍~2000倍的50%多菌靈澆透基質，移栽的組培苗放置在苗床上，用薄膜小拱棚保濕，相對濕度控制在75%~85%，光照強度4500Lux左右，高溫時打開拱棚兩端進行通風降溫，25d后逐漸移開薄膜進行幼苗常規管理，每一棵移栽苗均做好品種代號、種植日期的標注。移栽所用基質含珍珠巖、草碳、蛭石等成分，移栽前用。6田間性狀鑒定隨機抽取15株優異品種的組培扦插苗種植在田間無病害的地塊上進行田間性狀觀察，包括植物學特征、花期、盛果期、果實性狀和產量。觀察與統計按照NY/T2517規定進行。7.1出圃要求組培苗高度為30cm~50cm才達到出圃要求，同時苗木健康、生長勢旺盛，葉片顏色深綠，葉片5片~10片，無病害。7.2運輸要求運輸組培苗木時，應用塑料筐或泡沫箱，避免擠壓。8育苗檔案應建立完整的育苗檔案，包括組培苗育苗圃、成苗率、不同生長階段管理措施、出圃數量、出苗日期、銷售對象、自然災害、病蟲害發生情況、階段總結等記錄過程。4T/CSTCXXXX—XXXX西番蓮簡介與培養基配方A.1西番蓮西番蓮屬（Passifloraedulis）是西番蓮科的多年生常綠草質藤本植物，該屬約有520種，大多數以觀花及庭院栽培，僅有60多種可以供鮮食，世界上用于水果商業栽培的百香果主要有6種：紫色百香果（PassifloraedulisSims）、黃色百香果（Passifloraedulisf.flavicarpa）、甜西番蓮（Passifloraligularis）、樟葉西番蓮（Passifloralaurifolia）大西番蓮（Passifloraquadrangularis）及香蕉西番蓮（Passifloramollissima目前我國商業化西番蓮主要是黃色西番蓮（Passifloraedulisf.flavicarpa）(2n=2x=18)和紫色西番蓮（PassifloraedulisSims）(2n=2x=18)兩個主要栽培種群，果實為漿果，因其含有上百種芳香物質，且香氣濃郁，因而得名“百香果”。A.2不同階段培養基配方腋芽啟動培養基為MS+6-BA1.5mg/L+ZT0.02mg/L；紫果叢生芽培養基：1/2MS+6-BA0.3mg/L+ZT0.05mg/L+IBA0.01mg/L+NAA0.01mg/L，黃果叢生芽培養基：1/2MS+6-BA0.3mg/L+ZT0.05mg/L+IBA0.01mg/L+NAA0.01mg/L；生根培養基：MS+IBA3.5mg/L，1/2MS+NAA0.7mg/L。5T/CSTCXXXX—XXXX苗期病蟲害