湖南省長沙瀏陽市2025屆高三3月份第一次模擬考試生物試卷考生請注意：1．答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi)，不得在試卷上作任何標記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi)，第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔。考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．腎上腺素和迷走神經(jīng)都參與兔血壓的調(diào)節(jié)，腎上腺素作用于心臟使其活動加強導(dǎo)致血壓升高;迷走神經(jīng)末梢釋放物質(zhì)A作用于心臟使其活動減弱導(dǎo)致血壓降低?下列相關(guān)敘述正確的是（）A．腎上腺素使心臟活動加強表明該激素是一種高能化合物B．推測物質(zhì)A是一種神經(jīng)遞質(zhì)，進入心臟細胞后起調(diào)節(jié)作用C．若藥物B與物質(zhì)A爭奪受體，推測藥物B與腎上腺素具有協(xié)同作用D．腎上腺素進行的調(diào)節(jié)方式比迷走神經(jīng)反應(yīng)更快?作用時間更短2．金魚草中紅花寬葉與白花窄葉雜交，得到的F1自交，F(xiàn)2中有10株紅花寬葉，20株紅花中等葉，10株紅花窄葉，20株粉紅花寬葉，40株粉紅花中等葉，20株粉紅花窄葉，10株白花寬葉，20株白花中等葉以及10株白花窄葉。下列敘述錯誤的是（）A．兩對性狀由兩對等位基因控制，遵循自由組合定律B．F2中屬于純合體的是紅花寬葉、紅花窄葉、白花寬葉、白花窄葉C．若親本為純合的紅花窄葉和白花寬葉，F(xiàn)2也可得到與上述相同的結(jié)果D．F2中紅花中等葉與粉紅花窄葉雜交，F(xiàn)3中白花中等葉占1/43．蘋果醋是以蘋果為原料經(jīng)甲乙兩個階段發(fā)酵而成，下列說法錯誤的是（）A．甲階段的發(fā)酵溫度低于乙階段的發(fā)酵溫度B．過程①②在酵母菌細胞的細胞質(zhì)基質(zhì)進行，③在線粒體進行C．根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，乙過程需要在無氧條件下完成D．產(chǎn)物乙醇與重鉻酸甲試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗4．以下關(guān)于生物進化方面的敘述，正確的是（）A．多倍體生物形成后，它與原物種之間能夠進行雜交，因而它不是一個新物種B．外來入侵物種與本地物種間的選擇過程能改變該地進化的速度和方向C．根據(jù)現(xiàn)代進化理論，自然選擇導(dǎo)致群體基因頻率的改變，意味著新物種的形成D．一個物種可以由多個種群組成，一個種群也可以由多個物種的個體組成5．圖為特異性免疫發(fā)生過程的圖解，有關(guān)敘述正確的是（）A．圖中表示了細胞的分裂分化情況，這些細胞的核基因都相同B．①②③過程都經(jīng)過了細胞間直接接觸識別完成信息交流C．細胞一、細胞二、細胞三都有記憶功能，稱為記憶細胞D．④過程的完成需經(jīng)遺傳信息的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯，以及胞吐等過程6．遺傳、變異與進化是生命的基本特征。下列敘述中不正確的是（）A．任何獨立生活的生物體都是以DNA作為遺傳物質(zhì)B．生物變異的根本來源是基因突變，具有低頻性、多方向性等特點C．自然選擇學(xué)說的提出否定了“用進廢退”現(xiàn)象的存在D．蠑螈、鱷魚、大猩猩和人四種生物中，大猩猩和人的DNA堿基序列差異最小二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）回答下列（一）、（二）小題。（一）回答下列有關(guān)發(fā)酵食品生產(chǎn)工藝的問題：（1）豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。影響豆豉風味的主要因素，除了菌種類型、發(fā)酵溫度、pH、氧氣等環(huán)境因素，還有________（答2個因素）。（2）目前的豆豉發(fā)酵基本是一次性的，每次都經(jīng)過“培養(yǎng)基滅菌→___→發(fā)酵→提取”，周而復(fù)始。能否________發(fā)酵、生產(chǎn)、提取是今后的發(fā)展方向。（3）根據(jù)所學(xué)知識判斷，下面哪種微生物更適合用豆芽汁培養(yǎng)基培養(yǎng)_________A醋桿菌B酵母菌C乳酸菌D農(nóng)桿菌（4）在果醋發(fā)酵工藝中，用谷殼糠等將醋桿菌固定化，裝在發(fā)酵瓶，下端直角玻璃管中塞____________用以過濾空氣；物料瓶內(nèi)裝___________________，鋁箔封口。發(fā)酵過程若流速過快，則可能導(dǎo)致____________，為保障品質(zhì)，需對發(fā)酵瓶流出液________________。（二）為開發(fā)利用沿海灘涂鹽堿地，我國科學(xué)家應(yīng)用基因工程培育出了耐鹽堿水稻新品系，大大提高了水稻等農(nóng)作物的種植面積，增加了糧食產(chǎn)量。據(jù)此請回答下列問題：（1）欲將耐鹽堿基因和Ti質(zhì)粒進行重組形成重組質(zhì)粒需要的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和____________，限制酶一般需要________種，這樣設(shè)計的目的是____________。（2）將重組Ti質(zhì)粒構(gòu)建完成后導(dǎo)入農(nóng)桿菌，經(jīng)篩選后，對含目的基因的農(nóng)桿菌進行大量繁殖，其目的是____________。（3）取田間水稻的幼胚經(jīng)消毒后接種到____________（固體、半固體、液體）培養(yǎng)基上誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，利用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染愈傷組織后，將其接種到MS生根培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中細胞分裂素具有解除高濃度生長素____________的作用。（4）經(jīng)組培獲得水稻試管苗后，提取其葉片組織中的DNA，采用PCR技術(shù)擴增目的基因，目的是為了____________。要檢測到轉(zhuǎn)基因水稻中目的基因的表達產(chǎn)物，一般采用的方法是_________。8．（10分）突尼斯軟籽石榴是一種熱門水果，深受大家喜愛，但其抗寒能力差，這成為限制該種石榴栽培的重要因素。科學(xué)家們利用基因工程對其進行定向改造，以得到抗寒性強的優(yōu)良品種。下圖表示構(gòu)建基因表達載體的方法，圖中標注的是限制酶的酶切位點，請回答下列問題：（1）在切割目的基因時選擇的兩種限制酶最好為____________________，選擇兩種限制酶的優(yōu)勢是可避免________________。（2）可通過________技術(shù)對獲得的抗寒基因進行體外擴增，該過程使DNA解旋的方法與細胞內(nèi)復(fù)制時的差異是________________，體外擴增時使用的酶具有的顯著特點是__________________。（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入經(jīng)________（過程）培養(yǎng)成的軟籽石榴的愈傷組織中常用________法。9．（10分）我國一科研團隊將小麥液泡膜Na＋/K＋逆向轉(zhuǎn)運蛋白基因（TaNHX2基因）轉(zhuǎn)移到水稻細胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽水稻新品種。回答下列有關(guān)問題：（1）獲取目的基因的方法很多。若已知TaNHX2基因序列，可以用________擴增該基因。首先根據(jù)序列設(shè)計、合成________并投入反應(yīng)體系，同時，還需要放入dNTP、目的基因、Taq酶等。還可以人工合成TaNHX2基因，如圖1表示人工合成的兩條若干個堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補平，獲得雙鏈DNA。從功能看，Klenow酶是一種________酶。（2）圖2是3種限制酶的識別與酶切位點示意圖，構(gòu)建基因表達載體的時候，經(jīng)BamHⅠ酶切割得到的目的基因可以與圖3所示質(zhì)粒被________酶切后的產(chǎn)物連接，理由是____________________________。連接后的重組質(zhì)粒________（填“能”“不能”或“不一定能”）被BamHⅠ切割。（3）基因表達載體通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化作用，就可以使目的基因進入植物細胞，并將其____________________，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。（4）小麥與水稻差異很大，但卻通過基因重組后，水稻能夠合成小麥的蛋白質(zhì)，這是因為_______________________________________________________。10．（10分）白細胞介素是人體重要的淋巴因子，具有免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學(xué)家將藥用蛋白轉(zhuǎn)向植物生產(chǎn)，如圖是將人的白細胞介素基因?qū)腭R鈴薯中，培養(yǎng)生產(chǎn)白細胞介素的過程。（tsr為一種抗生素—硫鏈絲菌素的抗性基因）（1）提取人的白細胞介素基因適宜選用的限制酶是___________，不能使用限制酶SmaI的原因是___________。（2）除圖示方法外，也可從利用___________法構(gòu)建的cDNA文庫中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)大量擴增，需提供Taq酶和___________等。（3）將目的基因?qū)腭R鈴薯細胞常采用___________法，其原理是將目的基因?qū)隩i質(zhì)粒上的___________。（4）為篩選出含目的基因的馬鈴薯細胞，需要在培養(yǎng)基中添加___________。最終為了檢測目的基因是否在馬鈴薯中表達，可通過____________方法進行分子水平的檢測。11．（15分）我國南方部分地區(qū)是β—地中海貧血癥（多在嬰兒期發(fā)病）高發(fā)區(qū)。研究發(fā)現(xiàn)，該病患者的β—珠蛋白（血紅蛋白的組成部分）合成受阻，原因是血紅蛋白β鏈第39位氨基酸的編碼序列發(fā)生了改變，由正常基因A突變成致病基因a（如下圖所示。AUG、UAG分別為起始密碼子和終止密碼子）。回答下列問題：（1）過程①所需要的酶是______。過程①與過程②在時間上具有不連續(xù)性，其主要原因是______。（2）若異常mRNA翻譯產(chǎn)生了異常β—珠蛋白，則該異常β—珠蛋白由______個氨基酸組成。（3）為監(jiān)測和預(yù)防β—地中海貧血癥，可通過了解家庭病史，分析該遺傳病的______，估算出后代的患病風險，并進一步通過______等手段，有效降低患兒的出生率。（4）基因治療是治療該病最有效的手段，但存在技術(shù)、倫理、安全性等諸多問題。請你為患者提供兩條目前可行的治療建議：______。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

血壓的調(diào)節(jié)是一個神經(jīng)-體液調(diào)節(jié)過程。腎上腺素的生理作用是作用于靶細胞心臟細胞，促進心跳，作用后立刻被滅活。迷走神經(jīng)通過釋放神經(jīng)遞質(zhì)作用于心臟細胞表面的受體發(fā)揮作用。激素與神經(jīng)遞質(zhì)作用的共同點主要是：都需要與相應(yīng)的受體結(jié)合后才能發(fā)揮作用，發(fā)揮作用后都立刻被滅活或運走，都屬于信息物質(zhì)，不參與代謝，只傳遞調(diào)節(jié)代謝的信息。【詳解】A、腎上腺素是一種激素，只能起調(diào)節(jié)作用，不能提供能量，故不是高能化合物，A錯誤；B、神經(jīng)遞質(zhì)一般與靶細胞膜上的受體識別并傳遞信號，不進入細胞，B錯誤；C、腎上腺素作用于心臟使其活動加強導(dǎo)致血壓升高，迷走神經(jīng)末梢釋放物質(zhì)A作用于心臟使其活動減弱導(dǎo)致血壓降低。若藥物B與物質(zhì)A爭奪受體，則物質(zhì)A的作用不能正常發(fā)揮，血壓將升高，所以可推測藥物B與腎上腺素具有協(xié)同作用，C正確；D、神經(jīng)調(diào)節(jié)比體液調(diào)節(jié)反應(yīng)快，作用的時間短。腎上腺素進行的調(diào)節(jié)方式為激素調(diào)節(jié)，所以比迷走神經(jīng)的調(diào)節(jié)反應(yīng)慢、作用時間更長，D錯誤。故選C。2、D【解析】

由題意可知，F(xiàn)2中紅花:粉紅花:白花=1:2:1，寬葉:中等葉:窄葉=1:2:1。【詳解】A、根據(jù)題意，金魚草的兩對性狀由兩對等位基因控制，為不完全顯性，遺傳遵循自由組合定律，A正確；B、F2中表現(xiàn)有粉紅花、中等葉為雜合體，所以純合體為紅花寬葉、紅花窄葉、白花寬葉、白花窄葉，B正確；C、根據(jù)F2的表型比可推出親本是純合的紅花寬葉與白花窄葉，也可以是純合的紅花窄葉和白花寬葉，C正確；D、F2中紅花中等葉與粉紅花窄葉雜交，F(xiàn)3中的表現(xiàn)型有粉紅花中等葉、粉紅花窄葉、紅花中等葉、紅花窄葉，無白花中等葉，D錯誤。故選D。【點睛】本題中需要考生根據(jù)1:2:1的分離比推出控制這兩對相對性狀的基因均為不完全顯性，且根據(jù)兩對相對性狀的表現(xiàn)型組合推出兩對性狀符合基因的自由組合定律，再進行相關(guān)的分析。3、C【解析】

據(jù)圖分析，圖示為以蘋果為原料經(jīng)甲乙兩個階段發(fā)酵形成蘋果醋的過程，其中甲階段為酒精發(fā)酵，乙階段為醋酸發(fā)酵；①表示有氧呼吸和無氧呼吸的第一階段，發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)；②表示無氧呼吸的第二階段，發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)；③表示有氧呼吸的第二和第三階段，發(fā)生在線粒體。【詳解】A、圖中甲階段為酒精發(fā)酵，乙階段為醋酸發(fā)酵，酒精發(fā)酵的溫度低于醋酸發(fā)酵，A正確；B、根據(jù)以上分析可知，圖中過程①②在酵母菌細胞的細胞質(zhì)基質(zhì)進行，③在線粒體進行，B正確；C、醋酸桿菌為好氧菌，因此乙過程需要在有氧條件下完成，C錯誤；D、無氧呼吸產(chǎn)生的乙醇（酒精）與重鉻酸甲試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗，D正確。故選C。4、B【解析】

生物進化的實質(zhì)是種群基因頻率的改變．突變和基因重組、自然選擇及隔離是物種形成過程的三個基本環(huán)節(jié)，通過它們的綜合作用，種群產(chǎn)生分化，最終導(dǎo)致新物種的形成，其中突變和基因重組產(chǎn)生生物進化的原材料，自然選擇使種群的基因頻率發(fā)生定向的改變并決定生物進化的方向，隔離是新物種形成的必要條件。【詳解】A、不僅能進行雜交，還要能產(chǎn)生可育后代，才是一個物種，A錯誤；B、外來入侵物種與本地物種間的選擇過程能改變該地進化的速度和方向，B正確。C、根據(jù)現(xiàn)代進化理論，自然選擇導(dǎo)致群體基因頻率的改變，意味著種群發(fā)生了進化，而生殖隔離的產(chǎn)生，才意味著新物種的形成，C錯誤；D、一個物種可以由多個種群組成，但是一個種群只能由一個物種的個體組成，D錯誤。故選B。【點睛】本題考查了現(xiàn)代生物進化理論的相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系。5、A【解析】

識圖分析可知，圖中骨髓中的造血干細胞分裂后形成的子細胞，一部分繼續(xù)在骨髓中分化形成B細胞，另一部分轉(zhuǎn)移到胸腺中發(fā)育成熟為T細胞。抗原經(jīng)過吞噬細胞的攝取、處理后，大部分抗原呈遞給T細胞，T細胞受到抗原刺激后分泌淋巴因子作用于B細胞，同時T細胞會增殖與分化形成效應(yīng)T細胞和記憶T細胞，抗原經(jīng)過T細胞識別后呈遞給B細胞，少部分抗原可以直接刺激B細胞，B細胞受到抗原和淋巴因子的作用下增殖與分化。形成漿細胞和記憶B細胞，漿細胞可以分泌抗體與抗原發(fā)生特異性結(jié)合。因此圖中細胞一為B細胞，細胞二為記憶T細胞，細胞三為記憶B細胞；①過程是吞噬細胞對抗原的攝取、處理和呈遞過程，②過程效應(yīng)T細胞與靶細胞密切接觸的過程，③過程是T細胞將抗原呈遞給B細胞，同時分泌淋巴因子作用于B細胞的過程，④過程為漿細胞合成和分泌抗體的過程。【詳解】A、圖中展示了免疫相關(guān)細胞的分裂分化情況，細胞的分裂分化不會改變核基因，細胞分化只是基因選擇性表達的過程，A正確；B、①②過程經(jīng)過直接接觸完成了細胞間信息交流，而③過程通過分泌淋巴因子間接完成了細胞間信息交流，B錯誤；C、根據(jù)以上分析可知，細胞一為B細胞，無記憶功能，C錯誤；D、④過程的沒有完成遺傳信息的復(fù)制，D錯誤。故選A。6、C【解析】

1、可遺傳的變異是由遺傳物質(zhì)改變引起的，可以遺傳給后代，包括：基因突變、基因重組和染色體變異，其中根本來源是基因突變，具有普遍性、隨機性、低頻性、不定向性和多害少利性的特點。

2、達爾文的自然選擇學(xué)說內(nèi)容要點：過度繁殖，生存斗爭，遺傳和變異，適者生存。【詳解】A、因為病毒無細胞結(jié)構(gòu)，不能獨立生活，必須依賴宿主細胞生活；獨立生活的生物是指有細胞結(jié)構(gòu)的生物，它們的遺傳物質(zhì)都是DNA，所以任何獨立生活的生物體都是以DNA作為遺傳物質(zhì)，A正確；

B、可遺傳變異的來源有基因突變、基因重組和染色體變異，根本來源是基因突變，具有普遍性、隨機性、低頻性、不定向性和多害少利性的特點，B正確；

C、用進廢退是一種生物學(xué)現(xiàn)象，不是進化的原因，而自然選擇學(xué)說內(nèi)容是解釋生物進化的原因，所以說自然選擇學(xué)說的提出沒有否定“用進廢退”現(xiàn)象的存在，C錯誤；

D、蠑螈、鱷魚、大猩猩和人四種生物中，大猩猩與人的親緣關(guān)系最近，DNA堿基序列與人的差異最小，D正確。

故選C。【點睛】本題綜合考查了遺傳、變異和進化的相關(guān)知識，要求考生需將所學(xué)知識形成知識網(wǎng)絡(luò)，明確它們之間的聯(lián)系，這樣才能對本題進行準確作答。二、綜合題：本大題共4小題7、大豆品種（原料）、發(fā)酵時間接種連續(xù)地B脫脂棉球酒水混合物發(fā)酵不充分定期檢測/監(jiān)控（答到一個詞給分）DNA連接酶2防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化以及定向連接獲取大量重組質(zhì)粒（讓目的基因擴增或克隆目的基因）半固體抑制根生長檢測目的基因是否成功導(dǎo)入抗原-抗體反應(yīng)【解析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量。2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?、基因工程的操作步驟：一是獲取目的基因；二是構(gòu)建基因表達載體（核心）；三是將目的基因?qū)胧荏w細胞（導(dǎo)入植物細胞一般有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管道法等）；四是檢測和鑒定目的基因（一是檢測目的基因是否導(dǎo)入成功，二是檢測目的基因是否成功表達，三是檢測目的基因控制的性狀是否在能在植株上表現(xiàn)出來）。【詳解】（一）（1）影響豆豉風味的因素很多，包括菌種類型、發(fā)酵溫度、pH、氧氣等環(huán)境因素還有發(fā)酵的大豆品種原料和發(fā)酵時間。（2）發(fā)酵過程利用了微生物的代謝，因此培養(yǎng)過程要經(jīng)過“培養(yǎng)基滅菌→接種→發(fā)酵→提取”。這種發(fā)酵技術(shù)基本上是一次性的，因此如何連續(xù)性低發(fā)酵、生產(chǎn)、提取是今后的發(fā)展方向。（3）豆芽汁培養(yǎng)基適合培養(yǎng)真菌，選項中只有酵母菌屬于真菌，故選B。（4）醋酸菌是好氧細菌，下端直角玻璃管中塞脫脂棉球用以過濾空氣。物料瓶內(nèi)裝酒水混合物，鋁箔封口。發(fā)酵過程若流速過快，則可能導(dǎo)致發(fā)酵不充分，為保障品質(zhì)，需對發(fā)酵瓶流出液進行定期檢測。（二）（1）重組質(zhì)粒構(gòu)建過程中，用的工具酶包括限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，其中限制性核酸內(nèi)切酶一般用兩種，這樣防止目的基因和質(zhì)粒發(fā)生自身環(huán)化以及定向連接。（2）為了獲取大量重組質(zhì)粒，可對含目的基因的農(nóng)桿菌進行大量繁殖。（3）愈傷組織的培養(yǎng)采用的是半固體培養(yǎng)基。生長素具有兩重性，低濃度促進生長，高濃度抑制生長，在MS生根培養(yǎng)基上，細胞分裂素具有解除高濃度生長素抑制生根的作用。（4）提取葉片組織的DNA，采用PCR技術(shù)擴增目的基因，鑒定目的基因是否成功導(dǎo)入。對于檢測轉(zhuǎn)基因水稻中目的基因是否表達，可采用抗原-抗體雜交方法。【點睛】本題考查視頻發(fā)酵和基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記相關(guān)發(fā)酵技術(shù)的原理、方法和流程，基因工程的原理及意義，掌握基因工程采用的工具及具體操作步驟，能結(jié)合所學(xué)的知識準確分析各題。8、SmaI和PstI質(zhì)粒自身成環(huán)和質(zhì)粒與目的基因的反向連接PCR體外擴增目的基因利用加熱至90~95℃的高溫使DNA解旋，細胞內(nèi)復(fù)制目的基因使用解旋酶使DNA解旋耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）脫分化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化【解析】

分析題圖可知：HindIII的切割位點會破壞質(zhì)粒的標記基因，AluI會破壞目的基因，故不能用上述兩種酶切割。【詳解】（1）根據(jù)圖中各種限制酶的切割位點，既可以獲得目的基因又不能破壞質(zhì)粒上的標記基因，故選用SmaI和PstI；選擇兩種酶的優(yōu)勢是可避免含有目的基因的外源DNA自身環(huán)化，可以防止質(zhì)粒自身環(huán)化，也可避免質(zhì)粒與目的基因的反向連接。（2）對獲得的抗寒基因進行體外擴增，可用PCR技術(shù)；在細胞內(nèi)DNA復(fù)制需要解旋酶將雙鏈解開，而PCR技術(shù)利用加熱至90~95℃的高溫使DNA解旋；該技術(shù)使用的DNA聚合酶具有耐高溫的特性。（3）軟籽石榴的愈傷組織經(jīng)過植物組織培養(yǎng)得過程中的脫分化環(huán)節(jié)得到；將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。【點睛】明確基因工程的基本操作程序是解答本題的關(guān)鍵，且能明確限制酶的選擇依據(jù)，結(jié)合題圖分析作答。9、PCR技術(shù)引物DNA聚合Sau3AⅠBamHⅠ和Sau3AⅠ兩種酶切割片段產(chǎn)生的黏性末端互補不一定能插入到植物細胞的染色體DNA上水稻和小麥共用一套遺傳密碼【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）擴增目的基因常采用PCR技術(shù)；需要根據(jù)設(shè)計序列合成引物；從圖中看出Klenow酶的作用是以DNA分子的一條鏈為模板，以脫氧核苷酸為原料合成DNA分子，催化磷酸二酯鍵的形成，所以是一種DNA聚合酶。（2）由圖2可知，BamHI酶和Sau3AI兩種酶切割片段產(chǎn)生的黏性末端互補，故BamHI酶切割得到的目的基因可以與圖3所示質(zhì)粒被Sau3AI酶切后的產(chǎn)物連接。連接后的重組質(zhì)粒可能形成不同的序列，所以不一定能再被BamHI切割。（3）基因表達載體通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化作用，就可以使目的基因進入某植物根細胞，并將其插入到植物細胞的染色體DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。（4）小麥與水稻差異很大，但小麥和水稻共同一套遺傳密碼，故通過基因重組后，水稻能夠合成小麥的蛋白質(zhì)。【點睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟等，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題。10、PstⅠ和HindⅢ限制酶SmaⅠ酶切位點位于白細胞介素基因中部，使用它會造成目的基因斷裂反轉(zhuǎn)錄引物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化T-DNA硫鏈絲菌素抗原—抗體雜交【解析】

分析題圖，圖示表示人的白細胞介素基因表達載體的構(gòu)建過程，載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點，所以切割載體和目的基因時用限制酶PstⅠ和HindⅢ，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。獲取目的基因的方法包括從基因文庫中獲取、cDNA文庫法、