2025屆黑龍江省哈爾濱尚志中學高三下學期第五次調研考試生物試題注意事項：1．答卷前，考生務必將自己的姓名、準考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應題目的答案標號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標號。回答非選擇題時，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列關于生態系統的敘述正確的是（）A．一個生態系統，不需要從外界獲得物質補給就能長時間維持穩定B．生態系統中的能量流動，指的是能量在生產者和消費者之間進行傳遞的過程C．如果生產者凈初級生產量為零時，它的生物量不一定為零D．人工魚塘中流入該生態系統的總能量就是生產者固定的總初級生產量2．下列有關興奮在反射弧中傳導過程中的描述，正確的是（）A．反射活動進行時，興奮在神經纖維上的傳導是雙向的B．內環境Na+濃度增大則神經元的靜息電位減小C．突觸后神經興奮時Na+被動運輸到突觸后膜內D．神經元釋放的乙酰膽堿需經血液運輸而發揮作用3．下圖為人體某生理活動的模型。下列相關敘述不正確的是（）A．若甲為T細胞，物質N為淋巴因子，則乙可以是B細胞B．若甲為漿細胞，物質N為抗體，則乙可以是位于靶細胞內的病毒C．若甲為腎上腺，物質N為腎上腺素，則乙可以是肌細胞D．若甲為突觸前神經元，物質N為神經遞質，則乙可為肌肉細胞4．細胞內幾乎所有的化學反應均需酶的參與，下列有關酶的敘述錯誤的是（）A．有氧呼吸的第一階段需要多種酶參與B．一種酶可以成為另一種酶作用的底物C．增加底物濃度，酶促反應的速率將會加快D．驗證酶的專一性實驗中酶的種類可以是自變量5．質子泵在泵出H+時造成膜兩側的質子濃度差為陰離子的跨膜運輸提供了驅動力。下圖為某植物根細胞通過質子泵吸收H2PO4-和NO3-的示意圖，下列說法正確的是（）A．運輸H2PO4-和NO3-的載體蛋白的空間結構相同B．抑制細胞呼吸不會影響H2PO4-和NO3-的跨膜運輸C．質子泵同時具有酶的功能和載體蛋白的功能D．圖中離子的運輸方式和根細胞吸收水的方式相同6．我國科學家發現，當有稻瘟病菌入侵水稻時，在光照條件下，水稻體內的LHCB5蛋白第24位的蘇氨酸就會發生磷酸化，加速向葉綠體中積累，經過一系列的變化，會誘發活性氧的產生。在活性氧作用下，葉綠體內專門的抗稻瘟病基因表達后，水稻抗稻瘟病的能力會提高，下列有關敘述錯誤的是（）A．陰雨連綿、光照不足的天氣更易暴發稻瘟病B．抗稻瘟病基因經轉錄、翻譯形成LHCB5蛋白C．葉綠體內的蛋白質不都由葉綠體基因控制合成D．LHCB5蛋白的功能變化與它的結構變化有關二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）將銀邊天竺葵（葉邊緣呈白色，中央為綠色）預先放在黑暗中48h小時，選取植株上若干生長良好、大小相同的葉片，采用適當的方法殺死韌皮部細胞阻斷有機物轉移，再用不透光的黑紙遮蔽左側葉片后把植株放在陽光下照射一段時間，用打孔器分別在葉片中的①、②、③部位取下相同面積的圓片。請回答：（1）葉圓片①的葉肉細胞中能產生ATP的場所是______________。（2）若將葉圓片①②③放在酒精中加熱脫色，用清水漂洗后滴加碘液。能驗證“光是光合作用必要條件”的組別是___________（填寫序號），實驗結果是___________；能驗證“光合作用場所是葉綠體”的組別是_____________（填寫序號），實驗結果是_____________。（3）若將葉圓片①②③烘干稱重，計算該植物葉片總光合速率時應該用①②的干重，而不用②③的干重，理由是______________________。8．（10分）2019年年底在湖北武漢爆發了新冠肺炎病的流行。研究表明這是由新型冠狀病毒（2019-nCov）感染引起。該病毒為單股正鏈RNA（+RNA）病毒，主要通過飛沫傳播，通過人的口腔、呼吸道黏膜感染人體。可以用核酸試劑盒檢測。戴口罩可有效預防感染。結合所學知識回答下列問題：（1）試劑盒檢測的原理：_______________________。（至少寫2種）（2）新型冠狀病毒不是通過皮膚細胞感染，而是通過黏膜細胞感染，其原因是________________________________。（3）新型冠狀病毒侵入人體后寄生在宿主細胞中，___________能識別被寄生的寄主細胞，并與之密切接觸，使其裂解死亡；新型冠狀病毒被釋放出來，而后會被_________免疫產生的________所凝集，使之失去侵染能力，最后被吞噬細胞吞噬消化。（4）假定病毒基因組+RNA含有8000個堿基，其中A和U占堿基總數的40%。以病毒基因組+RNA為模板合成一條子代+RNA的過程共需要堿基G和C______個。（5）病毒寄生在蝙蝠體內，但不會引起蝙蝠大量死亡，這是病毒和蝙蝠兩種生物長期____________的結果。9．（10分）科學家利用轉基因技術培育了OsPHDI（水稻內原本也存在該基因>過量表達的水稻植株，以提高水稻的抗逆性（如抗干旱、抗高鹽）。回答下列問題：（l）為了驗證OsPHDI基因的表達是否受逆境誘導，實驗組需要給兩葉期水稻設置_______條件，實驗結果顯示_______，說明OsPHDI基因的表達受逆境誘導。（2）為了培育OsPHDI基因過量表達植株進行如下操作：①利用PCR技術擴增獲得大量OsPHDI基因，該操作的前提是_______。②將OsPHDI基因與含有GFP（綠色熒光蛋白基因）的載體結合，此處GFP的作用是_______。③常用_______法將表達載體導入水稻細胞；若受體細胞中出現綠色熒光，能否說明OsPHDI基因已成功導入受體細胞，并說出理由______________。④最后利用_______技術培育出完整的抗逆性植株，該技術利用的生物學原理是______________10．（10分）基因打靶技術是建立在基因同源重組技術以及胚胎干細胞技術的基礎上而發展起來的一種分子生物學技術。請結合圖示回答下列有關問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質，導致細胞死亡。（1）將目的基因和與細胞內靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術將打靶載體導入胚胎干細胞，這樣打靶載體和與細胞內靶基因同源的區段就有機會發生同源重組。（3）為了篩選發生同源重組的細胞，可在培養液中加入__________。最后還需要通過__________技術鑒定同源重組的細胞（去除靶基因），將這樣的細胞通過動物細胞培養后，獲得大量打靶成功的細胞。其中，暫時不用的細胞進行__________保存。（4）將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細胞”或“生殖細胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現基因完全被“修飾”過的小鼠。11．（15分）研究發現柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白質）均有抑菌作用，兩者的提取及應用如圖所示。（1）柚皮精油的提取往往采用壓榨法，不用水中蒸餾法的原因是____________________。壓榨得到的糊狀液體可通過____________________除去其中的固體雜質。（2）純化乳酸菌素時可用電泳法，電泳是指____________________。若分離帶電荷相同的蛋白質，則其相對分子質量越大，遷移速度越____________________。（3）在利用高壓蒸汽滅菌鍋對培養基滅菌時，鍋內水加熱煮沸后，必須_________________，再關上閥門，以保證滅菌溫度達到121℃。做抑菌實驗時，在長滿致病菌的平板上，會出現以抑菌物質為中心的透明圈。可通過測定____________________來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。（4）柚皮油也可以用萃取法來提取，萃取效率主要取決于____________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

生產者可以通過光合作用或化能合成作用，直接利用無機環境的CO2合成自身的組成物質，也能通過細胞呼吸直接將CO2釋放到無機環境中；消費者只能通過細胞呼吸向無機環境釋放CO2但不能直接利用CO2；物質循環應是在無機環境與生物群落之間進行的；物質循環是在整個生物圈中進行的，而比生物圈小的任何一個生態系統都不能獨立進行物質循環。【詳解】A、物質是循環的，一個自然生態系統，不需要從外界獲得物質補給就能長時間維持穩定，但人工生態系統需要額外補給，A錯誤；B、能量流動是指是指生態系統中的能量輸入、傳遞、轉化和散失的過程，B錯誤；C、生產者的生物量就是凈初級生產量在某一調查時刻前的積累量，即生產者的光合量除去生產者自身的呼吸量，故生產者凈初級生產量為零時，它的生物量不一定為零，C正確；D、人工魚塘中流入該生態系統的總能量就是生產者固定的總初級生產量和人工補償輸入的飼料等的能量，D錯誤。故選C。2、C【解析】

神經細胞未受刺激的時，鉀離子大量外流形成靜息電位，受刺激時，鈉離子大量內流形成動作電位。【詳解】在反射過程中，刺激從感受器開始，產生興奮通過傳入神經、神經中樞、傳出神經到效應器，興奮在神經纖維上的傳導是單向的，A錯誤。Na+濃度的大小與動作電位有關，一般不會影響靜息電位，即使考慮靜息電位，當細胞膜外Na+濃度增大，膜外正電荷增多，則神經元的靜息電位變大，B錯誤。突觸后神經興奮時Na+通過鈉離子通道順濃度梯度進入細胞，是被動運輸的過程，C正確。神經元釋放的乙酰膽堿從突觸前膜釋放到突觸間隙的組織液中，作用到突觸后膜上，不需要血液運輸，D錯誤。【點睛】易錯警示：興奮在神經纖維上的傳導具有雙向性，在神經纖維上的雙向傳導一般是指神經纖維離體情況下，在神經纖維的中間的某點刺激時會雙向傳導，但在體內的反射過程中，必須是單向的。3、B【解析】

1、體液免疫過程為：（1）感應階段：除少數抗原可以直接刺激B細胞外，大多數抗原被吞噬細胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細胞將抗原呈遞給T細胞，再由T細胞呈遞給B細胞；（2）反應階段：B細胞接受抗原刺激后，開始進行一系列的增殖、分化，形成記憶細胞和漿細胞；（3）效應階段：漿細胞分泌抗體與相應的抗原特異性結合，發揮免疫效應。2、人在恐懼、緊張時，腎上腺髓質釋放的腎上腺素增多，該激素通過體液運輸可作用于靶細胞心臟細胞，與心肌細胞膜上的受體特異性結合，促進心跳，作用后立刻被滅活。3、效應器是由神經末梢及其支配的肌肉和腺體組成。【詳解】A、T細胞分泌的淋巴因子，可作用于B細胞，促進B細胞的增殖分化，A正確；B、抗體無法和位于靶細胞內的病毒接觸，B錯誤；C、腎上腺分泌的腎上腺素可作用于心肌細胞，使機體表現出心率加速，C正確；D、在特定情況下，突觸前神經元釋放的神經遞質能作用于肌肉細胞，使肌肉收縮，D正確。故選B。【點睛】本題以概念圖的形式，考查免疫調節、激素調節、神經調節等相關知識，意在考查學生能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論。4、C【解析】

酶是活細胞產生的具有生物催化作用的有機物，大多數是蛋白質，少數是RNA；酶的催化具有高效性（酶的催化效率遠遠高于無機催化劑）、專一性（一種酶只能催化一種或一類化學反應的進行）、需要適宜的溫度和PH值。【詳解】A、有氧呼吸的第一階段包括一系列反應，需要多種酶的參與，A正確；B、酶的化學本質為蛋白質或RNA，蛋白質和RNA都可以被相應的酶水解，B正確；C、如果酶的數量有限，當底物的濃度增加到一定程度時，酶促反應的速率達到最大值，不會隨底物的增加而加快，C錯誤；D、驗證酶的專一性實驗中可以選擇同一底物和不同種酶，也可以選擇不同的底物和同種酶，若是前者，實驗的自變量為酶的種類，若是后者，實驗的自變量為底物的種類，D正確。故選C。【點睛】本題主要考查酶的概念以及酶的特性，意在考查學生對基礎知識的理解掌握。5、C【解析】

由圖可知，質子泵在泵出H+時需要消耗能量，為主動運輸，而同時利用膜兩側的質子濃度差為陰離子的跨膜運輸提供了驅動力，說明質子泵吸收H2PO4-和NO3-所需要的能量來自膜兩側的質子濃度差，為主動運輸的方式。【詳解】A、運輸H2PO4-和NO3-的載體蛋白種類不相同，所以二者的空間結構存在差異，A錯誤；B、質子泵在泵出H+時需要消耗ATP，而質子泵吸收H2PO4-和NO3-所需要的能量來自膜兩側的質子濃度差，所以抑制細胞呼吸會影響H+運輸，使膜兩側的質子濃度差變小，進而影響H2PO4-和NO3-的跨膜運輸，B錯誤；C、質子泵能夠水解ATP，具有ATP水解酶的功能，同時也可以運輸H+，具有載體蛋白的功能，C正確；D、題圖中離子的運輸方式為主動運輸，而水的運輸方式為自由擴散，兩種運輸方式不同，D錯誤。故選C。【點睛】本題主要考查物質的跨膜運輸，意在考查考生能理解題意，判斷不同物質的運輸方式。6、B【解析】

根據題意可知，當有稻瘟病菌入侵水稻時，在有光條件下，水稻體內的LHCB5蛋白發生磷酸化，加速向葉綠體中積累，經過一系列的變化，會誘發活性氧的產生。在活性氧作用下，葉綠體內專門的抗稻瘟病基因表達后，水稻抗稻瘟病的能力會提高，說明水稻具有抗稻瘟病的能力。【詳解】A、LHCB5蛋白第24位的蘇氨酸發生磷酸化需要光照條件，陰雨連綿、光照不足的天氣LHCB5蛋白發生磷酸化受阻，活性氧產生的少，抗稻瘟病基因表達量少，所以水稻更易暴發稻瘟病，A正確；B、LHCB5蛋白不屬于抗稻瘟病基因的產物，抗稻瘟病基因經轉錄、翻譯形成抗稻瘟病的蛋白，B錯誤；C、葉綠體是半自主復制的細胞器，葉綠體內的蛋白質不都由葉綠體基因控制合成，也有受細胞核基因控制形成的，C正確；D、蛋白質的結構決定功能，故LHCB5蛋白的功能變化與它的結構變化有關，D正確。故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、細胞質基質、線粒體（線粒體基質、線粒體內膜）①②①呈黃白色（不呈藍色），②呈藍色②③②呈藍色，③呈黃白色（不呈藍色）③部位的細胞結構與①、②部位的不同，材料存在差異【解析】

植物進行光合作用形成有機物，而有機物的積累可使葉片單位面積的干物重增加，采用適當的方法殺死韌皮部細胞阻斷有機物轉移，將待測葉片的一半遮黑，測量相同時間內葉片被遮黑的一側單位面積干重的減少值，作為呼吸消耗量的估測值。這就是經典的“半葉法”測定光合速率的基本原理，測定時須選擇對稱性良好、厚薄均勻一致的兩組葉片，一組葉片用于測量干重的積累，另一組（半葉遮黑的）葉片用于測定干重的消耗。【詳解】（1）葉圓片①處于遮光條件下，不能進行光合作用，只能進行呼吸作用，故葉肉細胞中能產生ATP的場所是細胞質基質、線粒體，即呼吸作用進行的場所。（2）要驗證“光是光合作用必要條件”，則實驗設計中的自變量為是否照光，因變量是是否有淀粉生成，可以通過檢測葉圓片是否變藍來得出結論，據此可知，①②對照就可以達到上述目的，該實驗結果是①呈黃白色（不呈藍色），②呈藍色；要驗證“光合作用場所是葉綠體”應該設置有、無葉綠體的對照，然后檢測葉圓片是否變藍即可，符合條件的組別是②③，應該得到的實驗結果是②呈藍色，③呈黃白色（不呈藍色）。（3）若將葉圓片①②③烘干稱重，來計算該植物葉片總光合速率，根據總光合速率=凈光合速率+呼吸速率來分析，假設①②實驗前的干重為a，則實驗一段時間之后，①的減少表示呼吸速率，即a-①的干重，②的增加表示凈光合速率，即②的干重-a，故葉圓片總光合速率=②的干重-a+a-①的干重=②的干重-①的干重，這時不用②③干重的理由是③部位的細胞結構與①、②部位的不同，材料存在差異，正因如此③的減少不能代表正常葉肉細胞的呼吸速率，故不能選用。【點睛】學會分析實驗目的中包含的自變量、因變量和無關變量是解答本題的關鍵！掌握半葉法測光合速率的方法是解答本題的另一關鍵，另注意關注半葉法測光合速率的適用條件。8、RNA的特異性、堿基互補配對原則、熒光標記法只有黏膜細胞膜表面才有與新型冠狀病毒特異性結合的受體效應T細胞體液抗體9600共同進化【解析】

1.2019新型冠狀病毒具有生物的特征，因此是生物，它沒有細胞結構，包括蛋白質外殼和遺傳物質內核兩部分，病毒只能寄生在活細胞里，因此它的生活方式是寄生；預防2019新型冠狀病毒感染肺炎的具體做法有：開窗通風，保持室內空氣的流通；咳嗽和打噴嚏時使用紙巾或屈肘遮掩口鼻，防止飛沫傳播等。2.不同物種之間，生物與無機環境之間，在相互影響中不斷進化和發展，最終形成了生機勃勃的生物圈，這就是共同進化。【詳解】（1）診斷新冠患者所用試劑盒是根據RNA的特異性、堿基互補配對原則或熒光標記法等能夠顯示病毒特異性的原理進行檢測的。（2）因為只有黏膜細胞膜表面有與新型冠狀病毒特異性結合的受體，而皮膚細胞表面沒有與新型冠狀病毒發生特異性結合的受體，所以新冠病毒不是通過皮膚細胞感染，而是通過黏膜細胞感染。（3）新型冠狀病毒侵入人體后寄生在宿主細胞中，由于新冠病毒的侵染而使細胞免疫過程產生了效應T細胞，效應T細胞能識別并與相應的靶細胞（被新冠病毒感染的細胞）密切接觸，使其裂解死亡；新型冠狀病毒被釋放出來，而后會被體液免疫過程產生的相應抗體所凝集，使之失去侵染能力，最后被吞噬細胞吞噬消化。（4）以病毒基因組+RNA為模板合成一條子代+RNA的過程實際上是要復制兩條RNA單鏈（包含正、負個一條鏈），而且這兩條單鏈之間是互補的，根據有互補關系的單鏈中互補堿基之和恒等的原理分析如下：假定病毒基因組+RNA含有8000個堿基，其中A和U占堿基總數的40%。則G和C占堿基總數為8000×（1-40%）=4800，故此以病毒基因組+RNA為模板合成一條子代+RNA的過程共需要堿基G和C的數量為4800×2=9600個。（5）病毒寄生在蝙蝠體內，但不會引起蝙蝠大量死亡，這是病毒和蝙蝠之間經過長期相互選擇而實現了兩種生物的共同進化，即二者關系的形成是共同進化的結果。【點睛】熟知病毒的生理特性是解答本題的關鍵！掌握RNA的復制過程以及具有從DNA到RNA的相關堿基計算的遷移能力是解答本題的另一關鍵！9、干旱，高鹽（逆境）實驗組（逆境）植株OsPHDl基因的表達量高于對照（適宜條件）組（需要一段已知OsPHDl基因的核苷酸序列以便）合成引物作為標記基因（檢測目的基因是否導人受體細胞）農桿菌轉化不能，有可能導入了不含OsPHDl基因的GFP載體植物組織培養植物體細胞具有全能性【解析】

1、基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

2、利用PCR技術擴增目的基因（適用于目的基因的核苷酸序列已知的情況）

①概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

②原理：DNA復制

③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）。【詳解】（l）通過個體水平上驗證OsPHDI基因的表達是否受逆境誘導，實驗組需要給兩葉期水稻設置干旱，高鹽（逆境）條件，如果實驗組（逆境）植株OsPHDl基因的表達量高于對照（適宜條件）組，說明OsPHDI基因的表達受逆境誘導。（2）①利用PCR技術擴增獲得大量目的基因，需要加入相應的引物，故利用PCR技術擴增獲得大量OsPHDI基因，該操作的前提是合成引物。②GFP（綠色熒光蛋白基因）的作用是作為標記基因，便于后期的篩選。③表達載體導入植物細胞，常用農桿菌轉化法；若受體細胞中出現綠色熒光，不能說明OsPHDI基因已成功導入受體細胞，因為有可能導入了不含OsPHDl基因的GFP載體。④植物組織培養的生物學原理是植物體細胞具有全能性。故可通過植物組織培養技術培育出完整的抗逆性植株。【點睛】本題考查基因工程的相關知識，只要考生識記基因工程的操作步驟，明確基因表達載體的構建是其核心步驟，注意從題干中獲取有效信息。10、載體（或質粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態相同（或經同期發情處理）生殖細胞【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）分析題圖可知，將目的基因和與細胞內靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質粒）上，構建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術導入胚胎干細胞，這樣打靶載體與細胞內靶基因同源的區段就有幾率發生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達可以使無毒的