種豬常溫精液-編輯說明_第1頁
種豬常溫精液-編輯說明_第2頁
種豬常溫精液-編輯說明_第3頁
種豬常溫精液-編輯說明_第4頁
種豬常溫精液-編輯說明_第5頁
已閱讀5頁,還剩39頁未讀 繼續免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

一、工作簡介

1.標準的修訂背景與任務來源

《種豬常溫精液》(GB23238-2009)自2009年5月實施至今已十余年,為促進我

國種豬常溫精液生產經營行為的標準化、規范化發揮了積極的推動作用,為種豬常溫精

液產品質量抽檢、生豬良種補貼項目實施以及生豬人工授精技術的推廣普及提供了有力

的技術支撐,我國豬的人工授精覆蓋率大幅提高,很大程度上節省了公豬飼養量和減少

了疾病傳播風險。隨著技術和產業發展,該標準的技術要求、檢測方法與行業的發展和

計劃存在不協調的現象,如《全國生豬遺傳改良計劃(2009-2020)》、《全國生豬生

產發展規劃(2016-2020)》等,特別是前向運動精子數、輸精方式和檢測方法有待改

進,其修訂意義主要表現有以下三個方面:

1)標準的技術要求嚴重滯后,亟待改進。部分大型公豬站已經大膽嘗試了深部輸

精、低密度前向運動精子數等新技術在生產中的應用,效果顯著,對原標準技術要求的

適用性提出了挑戰。標準的修訂對進一步減少公豬飼養量,提高良種覆蓋率具有重要意

義,初步測算,我國約有50萬頭種公豬,如修改標準將減少我國種公豬飼養量約10萬

頭和30%的稀釋劑使用量,新標準的推廣應用每年將節約糧食約10萬噸(種公豬頭均

年消耗飼料量為1噸),并相應減少了場地、環保和人工水電的開支,預計直接節約10

億元,如果因提升種豬質量影響商品豬出欄天數按減少1天增效來計算,全國年生豬產

量約7億頭,則可創社會增效價值約70億元;

2)檢測方法相對滯后,亟待改進。由于科技的發展,精子質量分析儀(CASA系

統)已經為多數中大型公豬站所接受,具有快速、準確、重復性好的特點,特別是活力

的檢測,原標準方法采用的是人工目測讀取精子活力的數值,檢驗員需要經過多年訓練

才具備這個能力,而在實際生產中標準使用人員變動頻繁,判定標準各異,人為誤差較

大,進而嚴重影響前向運動精子數的準確性,對標準的先進性和科學性提出了挑戰,亟

待改進。原標準對精子畸形率采用的是姬姆薩染色法,特別是需要使用中性福爾馬林固

定,該試劑屬于管制試劑,對人體健康和環境有害,而且該檢測方法操作時間長,影響

檢測效率。研究表明精子畸形率嚴重影響產仔數和受胎率,其方法亟待改進,特別是快

速檢測方法需要補充更新。

3)編制格式與文字表述不嚴謹,亟待修訂。例如,原標準的技術要求中包括了對

種公豬及其原精液的質量要求,不符合GB/T20001.10-2014對產品質量要求證實性原則

的規定,其抽樣方法也與種豬常溫精液的生產實際不符,此類及其文字描述不嚴謹的地

方多處出現,且與現行的標準及其法律法規也存在不符的問題,亟需調整修訂。

該標準是我國生豬行業最重要的、影響力最廣泛的國家強制性標準,其修訂意義重

大,時間緊迫。為此,2017年全國畜牧總站聯合華中農業大學等單位申請了國家標準《種

豬常溫精液GB23238-2009》的修訂任務,并同時開展了有關預研工作。2018年12月,

國家標準委員會以國標委發[2018]82號文件批復立項,項目編號20183388-Q-326。

2.起草人員、單位及分工

2.1起草小組成員

標準修訂任務下達后成立了以楊紅杰為首席專家的標準修訂小組,主要成員包括:

劉望宏、邱小田、倪德斌、張守全、劉小紅、孫志華、張振。

2.2起草單位與分工

序號單位名稱分工

負責組織和編寫標準文本,協調參數驗證單位和征

1全國畜牧總站

求意見,組織預審會及專家論證等

華中農業大學、農業農村部種豬質負責標準技術資料的收集,技術參數的修訂和驗證,

2

量監督檢驗測試中心(武漢)征求意見的收集整理,標準文本及編制說明的起草

負責標準的修改和編寫討論,組織或參與部分單位

3中山大學

征求意見

負責標準的修改和編寫討論,組織或參與部分單位

4華南農業大學

征求意見

3.主要工作(起草)過程

3.1預研階段

2017年12月~2018年1月,農業農村部種豬質量監督檢驗測試中心(武漢)(以

下簡稱“武漢種豬質檢中心”)受全國畜牧總站立項委托,針對我國常規輸精、深部輸

精的劑量和前向運動精子數制定了詳細的試驗方案,分別在廣西揚翔股份有限公司、上

海祥欣畜禽有限公司和湖北金林原種畜牧有限公司開展了相關生產試驗。試驗結果表明,

常溫輸精劑量應該保持不變,而前向運動精子數可以下調而不影響產仔數。隨后武漢種

豬質檢中心、南京牛凍精質檢中心等實驗室開展了精液密度、精子活力關系的研究,確

定了種豬常溫精液的精液密度范圍。

2018年3月~2018年5月,在前期試驗的基礎上,為進一步了解不同精液密度對精

液的保存時間、活力的影響,同時使用了法國IMV與德國minitube兩臺設備進行精子

活力檢測。

2018年6月~2018年12月,全國畜牧總站組織了人工授精調研工作。在調研和收

集各場生產試驗數據后進行了分析,確定了“劑量”和“前向運動精子數”的技術要求,認

為常規輸精的劑量為80mL,最低要求18億的前向運動精子數是可行的,深部輸精條件

下60mL和12億的前向運動精子數是可行的,地方豬種作為受體,其輸精量和前向運

動精子數保持不變。

3.2起草階段

2019年1月~3月,自2018年12月項目立項以后,在全國畜牧總站的組織下,起

草單位積極開展了前期準備工作。在查詢有關國內外技術資料的基礎上,根據當前的技

術發展和市場情況,形成標準修訂方案和設置任務分工,重點確定標準修訂技術內容,

比如輸精量,深部輸精,檢測精子活力和前向運動精子數的方法問題(包括參數的變化

所開展的工作,針對指標開展的批次試驗,會議論證等),以及畸形率的染色方法等。

2019年4月,在北京全國畜牧總站5樓會議室啟動標準編寫工作,會議重點討論編

寫方案內容、重要技術內容和修訂原則,進一步明確了修訂格式要求、內容和注意事項。

2019年5月,針對劑量檢測方法,武漢種豬質檢中心開展了量筒測量精液劑量和電

子臺秤稱量精液質量的比對試驗。試驗結果表明,使用量筒在操作過程中對精子損傷較

大,不利于其他項目的檢測,精液產品的包裝中還有一定殘留,使檢測結果偏小,且量

筒測量是人工讀數,也存在一定誤差。采用電子臺秤稱取精液的質量,測量結果誤差小

且十分穩定。因此,使用稱量的方法代替量筒檢測的方法檢測精液產品劑量是科學可行

的。對精子活力檢測方法開展比對試驗,試驗結果表明,參與比對的多名人員人工目測

結果誤差很大,而精子質量分析儀可快速獲得穩定的檢測結果,且每個平行樣多個視野

的讀數重復性好,經與質檢中心檢驗員目測活力數值的比對,差異不顯著;通過設置統

一的儀器參數,儀器之間的精子活力檢測結果差異不顯著。

2019年6月,開展“精子畸形率”姬姆薩染色法的染色時間梯度試驗,比較染色效果,

結果顯示染色15-30min精子形態的觀察效果最佳,并可長期保存;開展用姬姆薩、考

馬斯亮藍、伊紅、伊紅苯胺黑與精液混合等4種方法直接抹片進行染色效果比對試驗,

結果表明,伊紅苯胺黑直接抹片染色后,呈現雙色,可識別活死精子,精子尾部直,精

子形態的觀察效果最佳,因此,伊紅苯胺黑快速染色法可用于精子畸形率的檢測。

2019年7月,原標準中除了規定取樣劑量外,對如何取樣、預熱時間等均未作出明

確的規定,實際操作中千差萬別。為此,起草單位制定試驗方案,對樣品搖勻時間、取

樣液面高度、預熱時間等開展了系列改進試驗。試驗結果表明,樣品搖勻時間應為“2min

~3min”,取樣深度應為“伸入液面下1.5cm~2.0cm處”,樣品點樣后的預熱時間應為“1

min~3min”,并在此基礎上統一制定了儀器比對的取樣方法,減少了人為誤差對檢測

結果的影響。

2019年8月,武漢種豬質檢中心參加了由全國畜牧標委會組織的標準制修訂培訓班,

學習文本格式和表述,再次規范和修改了標準內容,并提交給其他起草單位進行修改。

2019年7月~10月,武漢種豬質檢中心收集有關驗證單位的資料進行統計分析,確

定輸精的精液劑量和前向運動精子總數,并修改標準草案,制定并優化了儀器法比對的

試驗方案。

2019年11月,起草小組組織了由國內外5家公司組成的儀器比對人員和設備,在

武漢中心實驗室開展了精子活力和前向運動精子數的儀器法比對和人員比對,其中前向

運動精子數儀器法檢測快速,準確、高效,儀器重復性好,分析數據,討論增加了“前

向運動精子數”精子質量分析儀檢測法。

2020年1月~6月,起草小組進一步修改并完善“精子畸形率”中“考馬斯亮藍染色”

試驗,試驗證明考馬斯亮藍染色劑背景顏色較深,不利于畸形率的檢測。

2020年6月,全國畜牧總站召開“種豬常溫精液檢測方法研討會”視頻會議,匯報

標準修訂進展并聽取相關專家修改意見,整理了各專家意見并做了相應處理。

2020年7月,起草單位及時按照專家意見補充開展了“精子畸形率”中“迪夫快速染

色”實驗,實驗結果證明其染色方法比較復雜,有兩次風干時間,周期相對較長,而且

在豬常溫精液的條件下背景色較淺,精子著色效果不佳,不利于精子畸形率的觀察。

2020年8月,全國畜牧總站組織起草單位在武漢種豬質檢中心召開了征求意見稿的

定稿工作會議,對標準文本內容逐項修改,并按照全國畜牧總站質量標準與認證處專家

的指導意見對強制性國家標準的編制說明進行了修訂。

二、編制原則,強制性國家標準主要技術要求的依據(驗證報告、統計數據等)及

理由:

1.修訂原則:

1.1規范性原則

以2020年1月6日頒布的《強制性國家標準管理辦法》為要求開展標準的編制工

作。起草單位嚴格按照GB/T1.1-2020給出的規則,以及GB/T20001.10-2014、GB/T

20001.4-2015、GB/T20001.1-2001的規定,對標準的結構、要素和文字描述進行修訂。

1.2科學性、適用性和可操作性原則

在標準修訂過程中,以“行業發展計劃、法律法規”為依據,“行業發展需求和科技

發展”為導向,“行業調研與驗證試驗”為基礎,根據標準的可操作性,刪除了原精液和

種公豬的要求,重點梳理修訂種豬常溫精液的質量要求。在強化“常溫精液”產品質量的

基礎上,檢測方法由主觀評定提升到“客觀評判”的儀器檢測方法,力爭使本標準給出的

產品質量限定值及其檢測方法具有科學性、適用性和可操作性。

1.3行業通用性原則

標準的制修訂必須滿足生豬產業的“通用性原則”。標準適用于常溫精液生產經營、

依法監管和行業發展的需要,符合生豬產業“通用性原則”,不僅利于豬人工授精技術的

推廣應用,還能引導行業不斷提升種豬性能水平,提高種豬常溫精液產品的質量。

2.主要技術內容修訂依據及理由

2.1新增了“種豬”、“精液密度”、“批次”、“保質期”和“混合精液”的定義

理由:

為便于要求公豬質量的可靠性,在3術語和定義中,增加了“種豬”的定義,為了規

范種豬常溫精液的檢測過程,確保種豬常溫精液質量符合技術要求,增加了“精液密

度”“批次”、“保質期”和“混合精液”的定義。

增加依據:

批次:根據《食品質量安全市場準入審查通則(2010版)》對食品批次的定義:比

較正規、嚴格的生產批次的確定:同一次投料、同一條生產線、同一班次生產的同種產

品。本標準引用并結合種豬常溫精液生產的特點修改為“同一生產線、同一時間稀釋分

裝生產的一批常溫精液產品。”

保質期:根據《食品保質期通用指南》對食品保質期的定義:食品在既定的溫度、

濕度、光照等貯存環境參數下保持品質的期限。本標準引用并結合常溫精液修改為“自

產品生產之時起,在滿足種豬常溫精液產品規定的保存和運輸條件下,其產品符合質量

要求的最長期限。”

種豬(種公豬):根據《種豬術語》對種公豬定義:用于配種繁殖后代的公豬。本標

準引用并結合種用的要求修改為“體型外貌和性能質量符合本品種標準要求且具有種用

價值的公豬”。

混合精液:根據劉志平等(2003)對豬的混合精液進行了描述,其定義為“混合精

液是由不同雄性個體的精子組成的精液”。本標準結合當前生產混合精液的生產方式將

其定義為“同一品種兩頭及以上種豬的常溫精液混合產品”。

2.2刪除了2009版標準中關于種豬及其原精液質量要求

原標準內容:

4.1原精液

4.1.1來源

來源于具有種用價值,體型外貌和生產性能符合種用要求,三代系譜資料齊全,體

質健康的種豬。

4.1.2外觀

乳白色,無濃性分泌物,無皮毛等異物。

4.1.3采精量

≥100mL。

4.1.4精液密度

≥1億/mL。

4.1.5精子活力

≥70%。

4.1.6精子畸形率

≤20%。

理由:

本標準是針對種豬常溫精液產品標準,實際工作中,除生產單位以外,其他應用單

位均無法對種公豬和原精液的質量要求進行檢測,因此予以刪除。

修訂(刪除)依據:

依據GBT20001.10-2014產品標準編寫要求中的4.2.6規定,產品類型的標準應該

滿足產品證實性原則而進行編寫,顯然本標準采用過程中,除生產型企業外多數應用單

位對種公豬和原精液的技術要求進行檢測是無法滿足的。

2.3修訂了劑量與每劑量中前向運動精子數的質量要求

原標準內容:

4.2.2劑量

地方品種40mL~50mL,其他80mL~100mL。

4.2.4每劑量中直線前進運動精子數

地方品種≥10億,其他≥25億。

修訂后標準內容:

本標準修訂的劑量及每劑量中前向運動精子數的技術要求如下表1。并將“每劑量中

直線前進運動精子數”的術語名稱做了修改,定義為“前向運動精子數”(見3.4)。

表1種豬常溫精液質量要求

受體為引入品種、培育品種

項目受體為地方品種

常規輸精深部輸精

劑量,mL≥80.060.040.0

前向運動精子數,108個/劑≥18.012.010.0

理由:

根據當前國內外養豬技術的發展要求,原標準對種豬常溫精液的質量要求已經不能

滿足當前生產的需要,故而需對不同的受體、人工受精方式與輸精劑量進行細化。

修訂依據:

養豬發達國家確定常溫精液產品劑量的唯一原則,就是保持產品劑量與一次性輸精

量的一致,以避免外界溫度變化給常溫精液產品帶來的不利影響。世界各國進行母豬常

規輸精時每次輸入發情母豬體內的輸精量和總精子數各異,見表2。

表2世界各國每次輸入發情母豬的總精子和輸精量

國家稀釋液種類輸精量(mL)總精子數(億/劑)

巴西KIEV、BTS80-10025-35

加拿大BLI、BTS、Modena7025-30

丹麥KIEV8520

法國BTS10030

荷蘭BTS80-10030-40

挪威BTS10020

西班牙MR-A10023-60

瑞典KIEV10030

英國BTS、Reading、SCK-7、ZORPVA7510-30

德國BTS、KIEV80-10025

美國KIEV、BTS、Modena80-10030-35

芬蘭KIEV、MR-A10020-50

由表2可知,不同國家母豬常規輸精時的輸精量和總精子數存在較大差異,輸精量

小的70mL,大的100mL,總精子數多的50億,少的僅10億。若按精子活力60%計

算,加拿大的輸精量為70mL、總精子數25億/劑~30億/劑、前向運動精子數為15億~18

億,丹麥為85mL、總精子數20億/劑、前向運動精子數為12億,英國為75mL、總精

子數10億/劑~30億/劑、前向運動精子數為6億~18億,美國80mL~100mL、總精子數

30億/劑~35億/劑、前向運動精子數18億~21億。

針對輸精受體的問題,現行標準中的產品劑量、每劑量中直線前進運動精子數都分

為地方品種和其他2種。按標準規定,如果用其他品種公豬的精液產品來改良地方品種

或雜交生產,就應按“其他80mL~100mL”的劑量進行輸精;如果用地方品種公豬的精

液產品來生產土雜豬,就應“地方品種40mL~50mL”的劑量進行輸精,但實際情況是,

如果按“其他80mL~100mL”給地方品種母豬輸精,就可能出現精液倒流的現象;如按

“地方品種40mL~50mL”的劑量給其他品種母豬輸精,則可能導致情期受胎率和窩產

仔數降低的現象。因此,輸精劑量應該對受體進行明確的規定。隨著深部輸精技術的不

斷推行,亟待對其技術要求作出規定。

為此,全國畜牧總站在調研標準執行情況、種豬常溫精液質量抽檢項目執行情況的

基礎上,于2017年至2018年組織開展了種豬常溫精液常規輸精的試驗驗證工作,不同

濃度梯度對受胎率、產仔數影響驗證試驗設計見表3,生產試驗結果見表4、表5、表6。

表3不同劑量和總精子數輸精試驗設計(活力要求大于60%)

試驗因素試驗要求

試驗前向運動

劑總精子數密度

組號精子數精液生產要求輸精

量(億/劑)(億/mL)

(億/劑)

中效稀釋劑,80mL裝,常規,適時,隨機,

18040240.50

至少20頭種公豬。復配一次。

中效稀釋劑,80mL裝,常規,適時,隨機,

28033200.41

至少20頭種公豬。復配一次。

中效稀釋劑,80mL裝,常規,適時,隨機,

38030180.38

至少20頭種公豬。復配一次。

中效稀釋劑,80mL裝,常規,適時,隨機,

48024150.30

至少20頭種公豬。復配一次。

中效稀釋劑,80mL裝,常規,適時,隨機,

58020120.25

至少20頭種公豬。復配一次。

中效稀釋劑,80mL裝,常規,適時,隨機,

66030200.50

至少20頭種公豬。復配一次。

中效稀釋劑,80mL裝,常規,適時,隨機,

76020120.30

至少20頭種公豬。復配一次。

中效稀釋劑,80mL裝,常規,適時,隨機,

84020100.50

至少20頭種公豬。復配一次。

注:1)總精子數=前向運動精子數÷精子活力(60%);

2)原標準中,地方品種前向運動精子數最小值為10億/劑,換算為總精子數為16.7億/劑;其他品種前向運動精

子數最小值為25億/劑,換算為總精子數為41.7億/劑。

表4上海祥欣畜禽有限公司常規輸精試驗結果

試驗組號145263

母豬品種大白大白大白大白大白大白

胎次3.47±1.583.49±1.653.88±1.763.52±1.933.66±1.783.45±1.23

配種數量(頭)202020202020

劑量()

設mL808080606040

前向運動精子數

計403020302020

(億/劑)

精液密度(億/mL)0.50.380.250.50.330.5

試受胎率(%)95%80%75%95%90%80%

驗分娩率(%)95%80%75%95%90%80%

結產總仔數(頭/窩)9.94±2.84b10.25±3.70ab11.29±1.83a11.06±1.78a9.76±2.94b11.07±1.73a

果產活仔數(頭/窩)9.05±3.46b9.19±2.88b10.36±1.63a10.67±1.89a9.44±2.03ab10.60±1.50a

注:1.常規輸精,配種2次。

2.同一項同行肩標字母不同表示差異顯著(P<0.05),含有相同字母表示差異不顯著(P>0.05),下同。

表5湖北金林原種畜牧有限公司常規輸精試驗結果

試驗組號123456

母豬品種長大長大長大長大長大長大

試驗胎次3.22±1.833.35±1.353.88±1.283.60±1.723.65±1.563.65±1.68

設計配種數量(頭)404040404040

劑量(mL)808080606040

總精子數(億/劑)403020302020

前向運動精子數

241812181212

(億/劑)

精液密度

0.500.380.250.500.330.50

(億/mL)

受胎率(%)90.092.592.590.087.590.0

試驗

總產仔數(頭/窩)12.56±1.27a12.08±1.32ab11.19±2.04c11.31±2.15bc10.69±1.53cd10.33±1.88d

結果

產活仔數(頭/窩)12.14±1.27a11.78±1.18a10.81±1.85bc11.00±2.00b10.57±1.48bc10.06±1.94c

表6廣西揚翔股份有限公司常規輸精試驗結果

試驗組號1234

母豬品種長大長大長大長大

配種數量(頭)4091228804284

試驗

胎次3.41±1.963.35±2.183.08±2.033.24±1.78

設計

劑量(mL)80808080

前向運動精子數(億/劑)30201512

受胎數量(頭)3771133745261

受胎率(%)92.292.392.791.9

試驗

分娩數量(頭)3631083719251

結果

分娩率(%)88.888.289.483.4

產活仔數(頭/窩)12.19±3.2412.12±3.2912.02±3.3112.26±3.53

表7海口農工貿(羅牛山)股份有限公司常規輸精試驗結果

試驗組號123

母豬品種杜洛克長白大白

配種數量(頭)4091228804

試驗

胎次2.47±1.273.39±2.303.48±2.29

設計

劑量(mL)808080

前向運動精子數(億/劑)242424

試驗總產仔數(頭/窩)8.50±2.9013.28±4.3714.51±4.48

結果產活仔數(頭/窩)6.00±3.0211.27±4.6412.02±4.51

生產試驗與調研數據結果表明:

1)常規輸精條件下輸精劑量對產仔數存在影響

a)上海祥欣畜禽有限公司試驗結果表明(表4):在精子活力(大于60%)合格的

情況下,劑量與直線前進運動精子數對情期受胎率有顯著影響。采用劑量60mL、總精

子數30億/劑、前向運動精子數20億/劑(密度為0.5億/mL)產品輸精,情期受胎率約

為95%;采用劑量80mL、總精子數40億/劑、前向運動精子數25億/劑(密度0.5億/mL)

的產品輸精,情期受胎率約為95%;采用劑量40mL、總精子數12億/劑、前向運動精

子數7億/劑(密度0.3億/mL)的產品輸精,情期受胎率約為80%,顯著下降。數據表

明,常規輸精在80mL的輸精量,每劑20億前向運動精子數情況下產仔數最高,低劑

量容易導致受胎率下降。

b)湖北金林原種畜牧有限公司試驗結果表明(表5):80mL的輸精量、前向運動

精子數24億/劑的總產仔數、產活仔數最佳,受胎率不受影響,且前向運動精子數24

億/劑與18億/劑的總產仔數、產活仔數差異不顯著(p>0.05),而與12億/劑相比差異

顯著(p<0.05),60mL與40mL的輸精量無論精液密度高低,其產仔數都有顯著下降

的趨勢,且與輸精量80mL相比總產仔數、產活仔數差異顯著(p<0.05)。

c)廣西揚翔股份有限公司試驗結果表明(表6):80mL的情況下,12~30億的前

向運動精子數量組間分娩率和產活仔數差異不顯著,進一步說明在精液量有保障的情況

下前向運動精子數的下降風險較低。

d)海口農工貿(羅牛山)股份有限公司的數據顯示(表7):在常規輸精劑量為

80mL,采用每劑量中前向運動精子數在12億的情況下,杜長大三個純種的產仔數均不

受影響。

綜上所述,常規輸精的輸精量80mL、前向運動精子數15億以上是滿足生產需求的。

常規輸精的輸精量十分重要,可能與子宮的容積大小有關,這與瘦肉型豬長期朝著大體

型的選育而導致子宮和產道容量變大的方向是一致的,其充滿量對卵子的授精具有影響。

2)深部輸精條件下輸精劑量對產仔數存在影響

廣西揚翔股份有限公司數據顯示(表8):在深部輸精劑量60mL,采用每劑量中

前向運動精子數在12億的情況下,其產仔數和產活仔數也不受影響。其結果與歐洲養

豬發達國家的深部輸精量一致,其中德國的前向運動精子數為12億,西班牙深部輸精

有效精子數為15億以上。Gonzalez等(2015)、姚德彪等(2011)也證明采用60mL

的劑量深部輸精滿足產仔數要求。楊玲等(2016)采用80mL、前向運動精子數30億/

劑和40mL、15億/劑的劑量進行深部輸精,結果表明,采用80mL的輸精量進行深部輸

精的受胎率、分娩率、產仔數均高于40mL輸精量的試驗組,說明深部輸精40mL存在

產仔數下降的風險,結合以上試驗結果,基本確定深部輸精量為60mL是合適的。

表8廣西揚翔股份有限公司深部輸精試驗結果

試驗組號12

母豬品種長白大白

配種數量(頭)86213

試驗

胎次2.88±2.136.01±2.17

設計

劑量(mL)6060

前向運動精子數(億/劑)1212

試驗

總產仔數(頭/窩)14.67±2.7415.23±3.16

結果

3)中國地方豬母豬作為受體技術要求不變

經檢索,未識別到地方豬輸精量的文獻,部分文獻對地方豬數據量過大,故保留原

標準中對地方豬的技術要求,因其為明確地方豬母豬作為受體的描述,本次修訂進行了

說明,進一步明確為地方豬母豬作為受體時輸精量為40mL,前向運動精子數為10億。

表9我國不同地方品種常規輸精試驗結果

試驗組號1234

母豬品種二花臉嘉興黑豬梅山豬榮昌豬

配種數量(頭)151421115

試驗設計胎次5.60±2.446.14±1.755.67±1.804.68±2.76

劑量(mL)--8060

前向運動精子數(億/劑)--4030

總產仔數(頭/窩)14.60±1.3514.64±2.3415.00±1.7310.55±2.43

試驗結果

產活仔數(頭/窩)13.80±1.1513.64±2.3113.86±1.909.32±2.35

綜上所述,本標準對產品劑量和前向運動精子數的技術要求修改為以上表1的規定

與國際接軌,且符合國內實際生產情況,具有科學性和可行性。

2.4修改了抽樣方法

原標準內容:

篇幅較大,略。詳見2009版的5.1和5.2。

修改后標準內容:

5抽樣

5.1抽樣方法

5.1.1出廠檢驗

以每批次生產量隨機抽取,每個批次的取樣量不少于10%,樣品份數取整數。

5.1.2型式檢驗

以每批次生產量隨機抽取,每個批次的取樣量不少于15%,樣品份數取整數。

5.2抽樣時間

產品分裝后2h至保質期截止前24h。

理由:

原標準對抽樣方法的規定過于繁瑣,與種豬常溫精液的批次化生產實際不符,不便

于抽樣操作,新修訂的抽樣方法條理清晰,代表性和可操作性強。

修訂依據:

原標準采用GB/T2828.1計數抽樣檢驗程序第1部分:按接收質量限(AQL)檢

索的逐批檢驗抽樣計劃、GB/T2828.1計數抽樣檢驗程序第2部分:按接收質量(LQ)

檢索的孤立批檢驗抽樣方案和GB/T2828.11計數抽樣檢驗程序第11部分:小總體聲

稱質量水平的評定程序,而在原標準5.1.1生產方抽樣提及的是按照GB/T2828.2采用

極限質量(LQ)=8,孤立批模式A抽樣,見2009版的附錄A。5.1.2監督抽樣提及的

是按照GB/T2828.11,監督總體為生產單位的種豬常溫精液產品,采用監督質量水平(D0)

=10,選用第二檢驗等級進行抽樣,抽樣程序見2009版的附錄B。經查,GB/T2828.2

計數抽樣檢驗程序第2部分:按極限質量(LQ)檢索的孤立批檢驗抽樣方案的1范圍

中,a)模式A規定“當生產方和使用方都把批作為孤立批檢驗時應使用本程序。也就是

說,批的唯一性在于僅按其類型生產一個批”。GB/T2828.11計數抽樣檢驗程序第11

部分:小總體聲稱質量水平的評定程序的1范圍中規定“本部分規定了為評定某一總體

(批或過程)的質量水平是否不符合某一聲稱質量水平的計數抽樣方案和評定程序。適

用于能從核查總體中抽取由一些單位產品組成的隨機樣本,以不合格品數為質量指標的

小總體計數一次抽樣檢驗,可用于各種形式的質量核查,不可用于批的驗收抽樣”。據

此,本標準在修訂過程中,擬刪除2009版標準的2、5.1、附錄A.1和附錄B,將原標

準中本部分的內容按照農業農村部近十年在抽樣方法上的規定,結合我國種豬常溫精液

批次化生產方式,修改了抽樣量、抽樣時間、抽樣方法。

2.5修改了檢驗規則

原標準內容:

篇幅較大,略。詳見2009版的6.2、7。

修改后的標準內容:

7檢驗規則

7.1檢驗類別

7.1.1出廠檢驗

出廠檢驗項目為產品劑量、精子活力和前向運動精子數。

7.1.2型式檢驗

型式檢驗項目為第4章規定的全部檢驗項目。產品正常生產時,至少每半年進行一

次型式檢驗,但有下列情況之一時,應進行型式檢驗:

生產工藝及設備有重大變更時;

所用生產原料有重大變化時;

種豬發生疾病或統一注射疫苗時;

停產3個月以上恢復生產時;

出廠檢測結果與上次型式檢測結果有較大差異時;

監督管理部門提出要求時。

7.2判定規則

7.2.1樣品判定規則

所檢項目全部符合本標準規定時,則判定該抽檢樣品合格。

檢驗結果中有任何項目不符合本標準規定時,則判定該抽檢樣品不合格。若

該抽檢樣品在其保質期內可進行復檢,復檢結果全部符合本標準規定時,則判定該抽檢

樣品合格,復檢結果有任何項目不符合本標準規定時,則判定該抽檢樣品不合格;若該

抽檢樣品已不在其保質期內,則不得復檢。

各項目檢測結果的極限數值判定按GB/T8170中修約值比較法執行。

7.2.2批次判定規則

每個批次中所有抽檢樣品合格,則判定該批次合格;其中有任一抽檢樣品不合格,

則判定該批次不合格。

理由:

本標準在修訂過程中,根據新修訂的標準技術要求中對常溫精液的質量要求,重新

對其檢驗與判定規則進行細化,確保與新標準要求的一致性。

修訂依據:

依據《中華人民共和國標準化法》對檢驗規則進行修訂。

2.6增加了標簽和隨行文件的內容

內容是:

8標簽和隨行文件

8.1標簽

標簽應符合如下要求:

a)標簽應易于識別,不易脫落或損壞;

b)標簽應使用規范的漢字對產品信息進行說明;

c)標簽應標識但不限于如下信息:產品通用名、來源的品種名稱、種公豬個體編號、

生產企業名稱及聯系方式、生產時間、適用受體、授精方式、保存條件、保質期,以及

第4章規定的產品質量參數最低保證值。非生產企業經營常溫精液產品時,其標簽信息

還應包括經營企業的名稱和聯系方式等。若是混合精液則應注明。使用電子標簽(如二

維碼標簽)的標簽信息至少應包括本條款規定的信息,還可包括生產企業商標或徽標,

以及可追溯的其他信息。

8.2隨行文件

生產企業的隨行文件至少應包括種畜禽生產經營許可證、動物防疫合格證復印件,

以及種公豬系譜檔案等原件或復印件。經營常溫精液產品的非生產企業的隨行文件至少

應包括種畜禽生產經營許可證,以及種公豬系譜檔案等原件或復印件。

理由:

原標準對標簽的規定較為單一,隨著電子信息技術的發展,二維碼等電子標簽逐步

普及,因此,需要對標簽的規定進行修訂。原標準沒有隨性文件的相關規定,需要新標

準增加隨性文件的相關內容。

修訂依據:

參照GB10648-2013和GB∕T30396-2013結合本標準的要求進行對標簽和隨性文件

進行了細化,確保標準內容的一致性。

2.7修改了包裝、貯存、運輸和保質期的內容

原標準內容:

篇幅較大,略。詳見2009版8.2、8.3和8.4。

修改后的內容:

9包裝、貯存、運輸和保質期

9.1包裝

內包裝應為對精子無毒副作用的一次性塑料制品,可選用袋裝、瓶裝或管裝。內包

裝的容量應大于第4章表1中規定的對應產品的最低劑量的110%。

9.2貯存

種豬常溫精液應置于恒溫箱中保存,恒溫箱內溫度應控制在16℃~18℃。保質期

內每間隔8h~12h應搖勻一次。

9.3運輸

種豬常溫精液應置于16℃~18℃避光密封的容器中運輸。運輸過程避免強烈震動

和碰撞。

9.4保質期

生產企業應給出常溫精液產品的保質期。保質期應不少于72h。

理由:

原標準對包裝的容量要求沒有嚴格的規定,不便于生產上的操作,修訂后的內容更

加符合標準中對包裝的定義與要求,且便于生產原材料的選用。

產品的運輸應存放在密封裝置中,新標準根據新的要求對其進行了細化。

將原標準的保質期72小時的指標修訂為產品標識的保質期的最低保證值,某一具

體產品可以高于此標準。標準檢測時可依據產品標識的保質期進行檢測與判斷,有利于

差異化市場產品的活躍和標準的應用范圍。

修訂依據:

按照GB/T20001.10中附錄B《保包裝、運輸貯存要求的編寫規則》對產品的包裝、

貯存、運輸條件和保質期進行修訂,運輸要求應滿足GB/T25172中關于精液運輸的規

定。

2.8增加了不合格產品的處置內容

新增內容:

10不合格產品的處置

不應出售和使用檢驗不合格的產品。不合格產品應按有關規定進行無害化處理。

理由:

原標準中對不合格產品的處置沒有規定,導致對不合格產品的處置缺乏參考依據,

因此,新標準中加入對不合格產品的處置,生產、銷售和使用者可以參考該內容對不合

格的產品進行有效的處置。

增加依據:

依據《產品質量法》對于不合格產品的處置進行修訂,且常溫精液存在生物安全的

風險,因此需要進行無害化處理。

2.9檢測方法的修訂

本標準的檢測方法為規范性附錄A。在檢測方法上四個技術要求的指標均作了修訂。

其修訂內容與依據按照附錄編號分述如下:

A.1修改了劑量的檢測方法

原標準內容:

A.2劑量檢查

A.2.1主要器材量筒。

A.2.2檢查方法

取兩個劑量全部倒入量筒內,準確檢測其精液量。

修訂內容:

用天平稱量精液質量,根據精液密度(1.0038±0.0025g/mL)約等于水的密度,將

精液質量數值直接等同于體積數值。

理由:

原標準采用的量筒檢測精液量,誤差較大,操作不便,修訂標準采用電子臺秤稱取

精液的質量,測量結果誤差小且十分穩定。因此,使用稱量的方法代替量筒檢測的方法

檢測精液產品劑量是科學可行的。

修訂依據:

試驗分別檢測精液質量、體積和密度,以及純水密度,結果見表10。精液密度與水

的密度相接近(差值<0.01g/mL),故可以用水的密度代替精液的密度,即精液質量數

值等同于體積的數值。而天平測量的質量數值與量筒測量的體積數值差值大于0.5,說

明大于其質量誤差。且在操作過程中,用量筒測量體積對精子損傷較大。從生產的角度

看,本標準執行后,只要生產的產品劑量≥80mL即可滿足標準要求,低于79.7mL則

有不合格的風險。

表10精液質量、體積及密度檢測結果

測量指標測量工具樣品數平均值差值

天平

精液質量(g)3683.7764±1.8429

(感量0.0001g)

(0.5964±0.0894)>0.5

量筒

精液體積(mL)3683.18±1.8959

(In100ml)

精液密度

密度儀361.0038±0.0025

(g/mL)

()<

純水密度0.0036±0.00240.01

密度儀361.0002±0.0001

(g/mL)

A.2修改了精子活力的檢測方法

原標準內容:

A.3精子活力檢查

A.3.1主要儀器和器材

顯微鏡、恒溫水浩鍋、試管、載玻片、蓋玻片、恒溫裝置、滴管等。

A.3.2檢查方法

取兩個劑量的常溫精液輕輕搖動均勻,分別用滴管取精液約25μL置于載玻片上

并加蓋玻片,在37條件下,用顯微鏡(℃200倍~400倍)觀察精子活力。每樣片觀

察3個視野,并觀察不同液層內的精子運動狀態,進行全面評定。

修訂內容:

由人工觀察評價精子活力(精子為運動狀態)的檢測方法改進為精子質量分析儀讀

取的方法。(見A.2)

理由:

原標準方法采用的是在顯微鏡條件下人工目測觀察評價精子活力的方法,無法統一

判定標準,各應用單位或個人均為經驗值,活力分值通常以5分為一檔,人員之間差別

很大。而精子質量分析儀經過多年的發展進步,在質量與價格上均得到多數人工授精站

點的認可。在儀器比對試驗中,5臺國內外的CASA系統對參數進行了統一地設置。結

果表明,儀器可自動完成多個視野的快速讀數,數據穩定,重復性好;與起草單位具備

多年檢測經驗的檢驗員進行比對,儀器法無顯著差異,5臺設備之間亦無顯著差異。應

用CASA系統進行豬常溫精液精子活力的檢測具備科學性和準確性。

修訂依據:

本試驗將5臺國內外精子質量分析儀(以下簡稱CASA系統)設置為統一參數:

VCL(曲線運動速度)≥5μm/s、VSL(直線運動速度)≥5μm/s,STR=VSL(直線運

動速度)/VAP(平均運動速度)≥25%,分別比較了CASA系統間、CASA系統與工

作人員、CASA系統與質檢中心檢驗員檢測活力的結果,結論如下:

1)人員比對目測精子活力的結果不可靠

采用ZB分數統計,結果顯示,五位操作CASA系統的工程師觀看CASA系統上的

活力視頻,并目測活力,2人滿意(包括理想)(∣ZB∣<3),3人不滿意(∣ZB∣

>3),見圖1。

10

8

6

4

Z2

B0

數-2

-4

-6

-8

-10

五位工程師在五臺CASA系統上目測活力

圖1操作CASA系統的工程師目測活力數值的ZB分數

2)CASA系統對精子活力的檢測結果可靠

5臺CASA系統對精子活力檢測結果采用單因素方差分析差異不顯著(P>0.05),

見表11。不同CASA系統、采用不同品牌的專用定容玻片(20μm±2μm)對精子活力檢

測結果無影響,見表12。采用ZB分數方法比對,結果顯示,4臺儀器滿意(包括理想)

(∣ZB∣<3),1臺儀器不滿意,見圖2(∣ZB∣>3),即CASA系統檢測精子活力

結果穩定可靠。

表115臺CASA檢測活力的單因素方差分析

儀器編號均值字母自由度誤均方誤T值LSD

Ins0355.250A

Ins0148.994A

Ins0246.155A6452.757291.997734.8368

Ins0445.150A

Ins0544.336A

備注:同一字母表示同一水平上無顯著性差異。

表125臺CASA系統與玻片雙因素對活力影響的方差分析

因素N個數自由度均方F值

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論